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重组P53基因复合物对DU145细胞致瘤性的抑制作用 被引量：4
1
作者 孔祥波 马庆杰 +1 位作者 谷欣权 刘群 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期369-370,共2页
目的　观察野生型 P53基因对前列腺癌细胞系 DU1 4 5致瘤性的抑制作用。方法　将野生型 P53真核表达载体用 lipofec-tamine导入 DU1 4 5细胞中。PCR法和抗 P53基因单抗免疫组化方法检测 P53基因的表达情况 ,MTT法检测细胞的生长程度 ,... 目的　观察野生型 P53基因对前列腺癌细胞系 DU1 4 5致瘤性的抑制作用。方法　将野生型 P53真核表达载体用 lipofec-tamine导入 DU1 4 5细胞中。PCR法和抗 P53基因单抗免疫组化方法检测 P53基因的表达情况 ,MTT法检测细胞的生长程度 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况 ,软琼脂生长试验检测细胞集落形成能力的变化。结果　 P53基因可转染入 DU1 4 5细胞中 ,且对其致瘤性有一定的抑制作用。结论　本实验从理论上证明了利用野生型 P53基因对前列腺癌进行基因治疗的可行性。 展开更多
关键词 P53基因 du145细胞株 基因治疗
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miR-3691-3p靶向调控E2F3/PRDM1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：4
2
作者 孙莉 牛涵波 +1 位作者 徐义英 孙茂民 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第1期22-27,共6页
目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-36... 目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-3691-3p mimic后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测候选靶基因E2F3和PRDM1 mRNA和蛋白表达的变化;人工合成候选靶基因的小干扰RNA(E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA)转染入DU145细胞中,采用实时荧光定量PCR检测siRNA在细胞中的转染率;DU145细胞株分别转染阴性对照siRNA、E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA后,采用MTT、Transwell、划痕实验检测DU145细胞株增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:随着miR-3691-3p mimic转染浓度增高,在DU145细胞株中E2F3和PRDM1 mRNA的表达量逐渐下降(P<0.01或P<0.05),两个蛋白的表达水平均明显降低(P<0.01)。与阴性对照组相比,转染E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA的DU145细胞株中,E2F3和PRDM1在mRNA水平上表达量显著减少(E2F3:t=31,P<0.01;PRDM1:t=10.44,P<0.01)。且转染E2F3 siRNA的DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均P<0.01);而转染PRDM1 siRNA的DU145细胞增殖和侵袭能力显著下降(均P<0.01),迁移能力没有明显变化(P>0.05)。结论:在DU145细胞中,低水平的miR-3691-3p通过靶向调控E2F3和PRDM1的增高来增强细胞的生物学特性。 展开更多
关键词 前列腺癌 du145细胞株 miR-3691-3p E2F3 PRDM1 生物学特性
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LINC00341通过靶向miR-187对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响
3
作者 王玮 吴锴 +1 位作者 刘洪宇 邢天俊 《解剖学研究》 CAS 2023年第6期547-554,共8页
目的 探讨LINC00341对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的靶向影响及机制。方法 将LINC00341过表达载体(pcDNA3.1-LINC00341)转染前列腺癌细胞DU145,检测细胞的增殖力、细胞凋亡及迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)法检... 目的 探讨LINC00341对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的靶向影响及机制。方法 将LINC00341过表达载体(pcDNA3.1-LINC00341)转染前列腺癌细胞DU145,检测细胞的增殖力、细胞凋亡及迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)法检测Cyclin D1、P21、Bcl-2、Bax、MMP-2和E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。双荧光素酶报告实验联合RT-qPCR验证LINC00341对miR-187的靶向调控关系。将miR-187模拟物(miR-187 mimics)和pcDNA3.1-LINC00341共转染DU145细胞,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化。结果 过表达LINC00341抑制DU145细胞Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的表达,促进P21、Bax和E-cadherin蛋白的表达水平,抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。miR-187是LINC00341的靶基因,LINC00341靶向负性调控miR-187表达。过表达miR-187可逆转LINC00341过表达对DU145细胞的增殖、迁移侵袭抑制作用和凋亡促进作用。结论 LINC00341通过靶向下调miR-187抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 LINC00341 miR-187 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 细胞侵袭 du145细胞株
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Survivin-siRNA真核重组质粒的构建及对前列腺癌DU145细胞增殖抑制作用 被引量：2
4
作者 刘艳波 耿艳 +1 位作者 葛贺 芦丽莉 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第2期129-133,共5页
目的应用RNA干扰技术（RNAi），构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA，并检测其对DU145细胞增殖抑制的影响．方法构建重组质粒shRNA-sur1和shRNA-sur2并分别转染DU145细胞株，通过MTT法和流式细胞术观察其对细胞的增殖抑制作用及凋亡... 目的应用RNA干扰技术（RNAi），构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA，并检测其对DU145细胞增殖抑制的影响．方法构建重组质粒shRNA-sur1和shRNA-sur2并分别转染DU145细胞株，通过MTT法和流式细胞术观察其对细胞的增殖抑制作用及凋亡的影响．结果成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒，转染72h后，两个实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的（37．2％±5．8％）（n=3）和（43．5％±7．2％）（n=3）．流式细胞术发现：实验组细胞的G1期细胞比例明显高于对照组，而G2期和S期细胞比例减少，细胞出现凋亡，与脂质体组比较，两实验组细胞的凋亡率分别为（21．70％±6．45％），（14．835±5．65％）．结论成功构建针对survivin siRNA的真核重组质粒，两种质粒体外均可抑制DU145增殖并诱导其凋亡，为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础． 展开更多
关键词 SIRNA du145细胞株 SURVIVIN基因 前列腺癌
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Survivin-siRNA真核重组质粒的构建和鉴定及其对前列腺癌DU145细胞的影响 被引量：2
5
作者 刘艳波 葛贺 +1 位作者 卢丽莉 赵雪俭 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期642-645,共4页
目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinm... 目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinmRNA转录水平和蛋白表达的变化。结果成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒;两种重组质粒shRNA-sur1和-sur2均能明显抑制内源性survivin基因表达,其抑制率分别为72%±8%和77%±5%;两种质粒均能明显抑制survivin蛋白的表达,其抑制率分别为75%±8%和80%±6%。结论重组质粒shRNA-sur1和-sur2均可明显抑制DU145细胞内源survivin蛋白表达和mRNA转录,为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础。 展开更多
关键词 SIRNA du145细胞株 SURVIVIN基因 质粒
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鱿鱼墨多肽制备及其诱导DU-145和PC-3细胞早期凋亡研究 被引量：7
6
作者 李丽 朱亚珠 +3 位作者 胡晓斐 黄芳芳 丁园芳 丁国芳 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期35-41,共7页
目的:研究鱿鱼墨多肽酸法提取工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:以料液比、加酸量、酸解时间和酸解温度为因素,以酸解液的氨基氮含量为指标,通过正交试验确定提取鱿鱼墨多肽的酸解条件。采用C... 目的:研究鱿鱼墨多肽酸法提取工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:以料液比、加酸量、酸解时间和酸解温度为因素,以酸解液的氨基氮含量为指标,通过正交试验确定提取鱿鱼墨多肽的酸解条件。采用CCK-8法检测其对DU-145和PC-3的生长抑制作用。采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测和AO/EB双染法,观察鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡情况。结果:酸法提取鱿鱼墨多肽最佳组合为0.02 mol/L盐酸、酸提料液比1∶1、酸解时间2 h、酸解温度35℃;鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞有增殖抑制作用,能诱导DU-145和PC-3细胞凋亡。结论:鱿鱼墨多肽能抑制DU-145和PC-3细胞增殖,并诱导其细胞凋亡。 展开更多
关键词 鱿鱼墨多肽 du-145细胞株 PC-3细胞株 细胞凋亡
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乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3、DU-145细胞作用机制研究 被引量：7
7
作者 郑玉寅 杨最素 +3 位作者 闫海强 黄芳芳 李荣 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期251-256,共6页
目的:研究乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3和DU-145细胞凋亡的影响,以及细胞凋亡的机制。方法:用HE染色观察肽聚糖作用后细胞形态变化,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,免疫组化检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2和VEGF蛋白阳性表达情况,原位杂... 目的:研究乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3和DU-145细胞凋亡的影响,以及细胞凋亡的机制。方法:用HE染色观察肽聚糖作用后细胞形态变化,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,免疫组化检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2和VEGF蛋白阳性表达情况,原位杂交检测肽聚糖作用前后细胞中Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA表达的变化。免疫印迹检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2、VEGF、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达情况。结果:肽聚糖作用后的细胞出现凋亡的形态学改变,流式细胞术检测后发现,早期凋亡细胞随着作用时间和药物质量浓度的增加而增加,两种细胞中的COX-2和VEGF蛋白表达量下降,Bcl-2 mRNA的表达量减少,而Caspase-3 mRNA表达量增加。免疫印迹结果显示,COX-2、VEGF和Bcl-2蛋白表达量下降,Caspase-3蛋白表达量增加。结论:乌贼墨肽聚糖可以诱导前列腺癌PC-3和DU-145细胞的凋亡,机制可能是下调COX-2、VEGF蛋白和Bcl-2 mRNA的表达;上调Caspase-3 mRNA的表达。 展开更多
关键词 乌贼墨肽聚糖 PC-3细胞株 du-145细胞株 细胞凋亡
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比卡鲁胺联合重组人瘦素拮抗剂对前列腺癌DU-145细胞增殖及凋亡的影响 被引量：4
8
作者 丁淑云 高伟兴 +3 位作者 李存燕 李再华 赵瑞振 王春强 《山东医药》 CAS 2013年第22期7-9,共3页
目的为比卡鲁胺联合重组人瘦素拮抗剂治疗对前列腺癌提供理论依据。方法重组人瘦素诱导体外培养DU-145细胞后,分别采用1、2、5、10μmol/L浓度的比卡鲁胺,5、10、20、50 ng/mL浓度的重组人瘦素拮抗剂及二者联合应用(浓度分别为5μmol/L... 目的为比卡鲁胺联合重组人瘦素拮抗剂治疗对前列腺癌提供理论依据。方法重组人瘦素诱导体外培养DU-145细胞后,分别采用1、2、5、10μmol/L浓度的比卡鲁胺,5、10、20、50 ng/mL浓度的重组人瘦素拮抗剂及二者联合应用(浓度分别为5μmol/L、20 ng/mL)干预24 h。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果各浓度比卡鲁胺、重组人瘦素拮抗剂及二者联合应用均能显著抑制DU-145细胞增殖,诱导其凋亡;二者联合应用的细胞增殖抑制率、细胞凋亡率均明显高于相同浓度的比卡鲁胺和重组人瘦素拮抗剂单用;P均<0.05。结论比卡鲁胺和重组人瘦素拮抗剂均可抑制DU-145细胞增殖,诱导其凋亡;二者联合应用有协同作用。 展开更多
关键词 比卡鲁胺 重组人瘦素拮抗剂 前列腺癌 du-145细胞株 细胞凋亡
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低剂量壬基酚促进DU-145细胞增殖及雌激素膜受体GPR30表达的研究 被引量：1
9
作者 甘卫东 周明 +2 位作者 胡杨 李冬梅 贾瑞鹏 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期405-409,共5页
目的:观察低剂量外源性雌激素壬基酚(NP)对人前列腺癌细胞株DU-145增殖和雌激素膜受体GPR30表达的影响。方法:DU-145细胞暴露于不同浓度的NP,通过细胞增殖实验测定DU-145细胞的半数抑制率(IC50),确定低剂量NP的暴露浓度范围;CCK-8实验... 目的:观察低剂量外源性雌激素壬基酚(NP)对人前列腺癌细胞株DU-145增殖和雌激素膜受体GPR30表达的影响。方法:DU-145细胞暴露于不同浓度的NP,通过细胞增殖实验测定DU-145细胞的半数抑制率(IC50),确定低剂量NP的暴露浓度范围;CCK-8实验测定低剂量NP对细胞增殖的影响;RT-PCR法观察DU-145细胞中3种雌激素受体(ER),ER-α、ER-β和雌激素膜受体GPR30的表达水平以及低剂量NP暴露后,雌激素膜受体GPR30表达的变化。结果:NP抑制细胞增殖的IC50为46μmol/l,确定本实验中使用的低剂量NP浓度分别为0.01、0.1、1μmol/l;CCK-8的结果发现,低剂量NP对DU-145细胞具有促增殖作用。RT-PCR的结果发现,DU-145细胞中有3种ER的表达,与前列腺上皮细胞表达类似,低剂量NP具有促GPR30表达的作用。结论:雌激素膜受体GPR30可能在介导低剂量NP促前列腺癌细胞DU-145增殖的过程中起到一定作用。 展开更多
关键词 壬基酚 前列腺癌 du-145细胞株 雌激素受体
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瘦素和瘦素拮抗剂对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株UD-145增殖凋亡的影响
10
作者 丁淑云 李凤芬 +4 位作者 刘彩虹 李艳玲 孙秉赋 张云鹤 高伟兴 《中国煤炭工业医学杂志》 2013年第4期587-589,共3页
目的观察瘦素和瘦素拮抗剂对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU-145增殖凋亡的影响。方法将100ng/ml重组人瘦素加入DU-145细胞体外培养24h后,分别加入不同浓度的(10、20、50、100、200ng/ml)重组人瘦素拮抗剂,继续培养24、48h。倒置显微... 目的观察瘦素和瘦素拮抗剂对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU-145增殖凋亡的影响。方法将100ng/ml重组人瘦素加入DU-145细胞体外培养24h后,分别加入不同浓度的(10、20、50、100、200ng/ml)重组人瘦素拮抗剂,继续培养24、48h。倒置显微镜观察细胞的形态变化,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果重组人瘦素作用下DU-145细胞贴壁生长旺盛,数目增多,染色质颗粒分布不均;重组人瘦素拮抗剂作用下DU-145细胞变小、变圆,细胞间隙明显,脱落漂浮。随着重组人瘦素拮抗剂药物浓度增加,DU-145细胞抑制率逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),无时间依赖性。24h后50ng/ml瘦素拮抗剂组与对照组细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在体外培养条件下,瘦素拮抗剂能够抑制瘦素对DU-145细胞促增殖和抗凋亡作用,为雄激素非依赖性前列腺癌的治疗提供一种新的方法。 展开更多
关键词 瘦素 瘦素拮抗剂 前列腺癌 du-145细胞株 细胞凋亡
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