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转染白喉毒素基因对人肺腺癌细胞的影响 被引量：1
1
作者 李玉光 赵立军 +1 位作者 高东田 张庆芝 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第22期86-88,共3页
目的　探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞 (A5 4 9)的影响。方法　对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA) ,转空载体的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA-)野生型A5 4 9细胞 ,采用MTT法测定四环素作用 72h后的细胞存活率。动物实验 :1... 目的　探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞 (A5 4 9)的影响。方法　对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA) ,转空载体的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA-)野生型A5 4 9细胞 ,采用MTT法测定四环素作用 72h后的细胞存活率。动物实验 :12只裸鼠随机分为转基因组、空载体组和对照组 ,每组 4只 ,将 1.2× 10 7A5 4 9/DTA细胞 ,A5 4 9/DTA-细胞及野生型A5 4 9细胞分别接种于相应的裸鼠皮下 ,给裸鼠饮含四环素(1μg/ml)的水 ,成瘤后 ,每周 2次测量瘤体大小 ,计算瘤体重量。 结果　A5 4 9/DTA细胞存活率较A5 4 9/DTA-细胞 ,A5 4 9细胞存活率明显下降 (P <0 .0 1) ,而A5 4 9/DTA-细胞与A5 4 9细胞存活率无差别 (P >0 .0 5 )。空载体组与对照组的裸鼠全部长出肿瘤 ,且肿瘤生长迅速 ,而转基因组有 1只裸鼠未长出肿瘤 ,肿瘤生长缓慢 ,前者瘤体的重量是后者的 3倍。结论　体外转染白喉毒素A基因可杀伤人肺腺癌细胞并降低人肺腺癌细胞的致瘤性。 展开更多
关键词 四环素 转染 白喉毒素A基因 人肺腺癌细胞 致瘤性
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PGL3-DF3-DTA特异性杀伤移植瘤裸鼠人乳腺癌细胞的实验研究 被引量：3
2
作者 蔡明 黄文广 潘晟 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2007年第1期73-77,共5页
目的研究新构建的含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体PGL3-DF3-DTA对裸鼠人乳腺癌移植瘤的特异性杀伤作用。方法建立人乳腺癌移植瘤裸鼠动物模型,将4周龄裸鼠36只随机分为实验组、空载体组、空白对照组、阴性对照组4组,... 目的研究新构建的含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体PGL3-DF3-DTA对裸鼠人乳腺癌移植瘤的特异性杀伤作用。方法建立人乳腺癌移植瘤裸鼠动物模型,将4周龄裸鼠36只随机分为实验组、空载体组、空白对照组、阴性对照组4组,每组9只。将DF3阳性和阴性的人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231分别接种于相应的裸鼠皮下。待成瘤后,将重组表达载体PGL3-DF3-DTA和PGL3-DF3多次、多位点注射入相应裸鼠移植瘤内。连续测量瘤体大小,计算瘤体体积。在不同时间点分批处死部分动物,行形态学观察、检测肿瘤细胞的凋亡,检测Ki-67,Bax及Bcl-2蛋白的表达。结果裸鼠人乳腺癌动物模型建立成功,经重组表达载体PGL3-DF3-DTA作用后的人乳腺癌细胞出现明显的凋亡现象,Ki-67及Bcl-2基因表达水平降低,Bax基因表达水平升高。结论重组表达载体PGL3-DF3-DTA能对DF3阳性的乳腺癌细胞产生特异性杀伤作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理学 重组蛋白质类 PGL3-DF3-dta/治疗应用 疾病模型 动物 基因表达
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携带尤文肉瘤EWS-FLI-1结合序列的DTA表达载体构建及其对尤文肉瘤细胞杀伤作用的研究 被引量：2
3
作者 冯岗 赵忠全 王东林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期382-385,共4页
目的　研究尤文氏肉瘤EWS FLI 1融合蛋白的特异结合序列与DTA基因融合后的表达及对尤文肉瘤细胞的杀伤作用 ,为肿瘤基因治疗探索新的治疗方法。方法　构建含有EWS FLI 1特异结合序列和白喉毒素A链基因的表达载体pS2 DTA。转染尤文肉瘤... 目的　研究尤文氏肉瘤EWS FLI 1融合蛋白的特异结合序列与DTA基因融合后的表达及对尤文肉瘤细胞的杀伤作用 ,为肿瘤基因治疗探索新的治疗方法。方法　构建含有EWS FLI 1特异结合序列和白喉毒素A链基因的表达载体pS2 DTA。转染尤文肉瘤细胞以及对照细胞后检测DTA表达及其对细胞的杀伤作用。结果　表达载体pS2 DTA在尤文肉瘤细胞系中高表达并产生强烈的杀伤作用。结论　pS2 DTA可以对尤文肉瘤细胞产生选择性杀伤作用 ,抑制其生长 。 展开更多
关键词 尤文肉瘤 融合基因 白喉毒素A链(dta) 基因治疗
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PGL3-DF3-DTA在DF3阳性人乳腺癌细胞移植瘤中的表达和作用
4
作者 张杨 黄文广 +1 位作者 黄汉菊 杨琰 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第5期454-457,共4页
目的探讨含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列的DTA重组表达载体PGL3-DF3-DTA对乳腺癌DF3阳性癌细胞的选择性表达和杀伤作用。方法将乳腺癌的两种细胞株MCF-7和MDA-MB-231分别接种于裸鼠背侧皮下,7 d后开始用重组的质粒进行活体内瘤注... 目的探讨含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列的DTA重组表达载体PGL3-DF3-DTA对乳腺癌DF3阳性癌细胞的选择性表达和杀伤作用。方法将乳腺癌的两种细胞株MCF-7和MDA-MB-231分别接种于裸鼠背侧皮下,7 d后开始用重组的质粒进行活体内瘤注射治疗。肿瘤接种后第29天脱颈椎处死裸鼠,测量移植瘤的体积和质量;并采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测裸鼠移植瘤内DTA的表达情况。结果重组表达载体PGL3-DF3-DTA在MCF-7细胞株移植瘤中表达,明显抑制肿瘤生长。结论重组表达载体PGL3-DF3-DTA对乳腺癌DF3阳性的癌细胞起到了选择性表达和杀伤作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 DF3/MUCI 重组质粒 dta 基因治疗
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EWS-FLI1介导DTA基因在尤文肉瘤移植瘤裸鼠模型体内特异表达研究
5
作者 赵忠全 冯岗 王东林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期53-55,共3页
目的观察EW S-FLI1介导的白喉毒素A链基因(d iphtheria toxin A cha in gene,DTA)在尤文肉瘤裸鼠移植瘤模型体内特异表达情况。方法采用尾静脉注射给药,将含有EW S-FLI1特异结合序列ACCGGAAGT和白喉毒素A链基因的真核表达载体pS2-DTA导... 目的观察EW S-FLI1介导的白喉毒素A链基因(d iphtheria toxin A cha in gene,DTA)在尤文肉瘤裸鼠移植瘤模型体内特异表达情况。方法采用尾静脉注射给药,将含有EW S-FLI1特异结合序列ACCGGAAGT和白喉毒素A链基因的真核表达载体pS2-DTA导入尤文肉瘤裸鼠移植瘤模型体内,通过免疫组化及RT-PCR检测DTA的表达情况。结果DTA在肿瘤组织中有高表达,肝组织中有弱表达,心肌组织中表达结果为阴性。结论EW S-FLI1介导的DTA可在尤文肉瘤裸鼠移植瘤内特异表达。 展开更多
关键词 尤文肉瘤 白喉毒素A链(dta) 裸鼠 基因治疗
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