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题名FLIP干扰性小RNA促进大肠癌细胞的凋亡
被引量：5
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作者
孙保存
臧凤琳
牛瑞芳
魏熙胤
赵秀兰
张诗武
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机构
天津医科大学肿瘤研究所
天津医科大学病理教研室
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出处
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2005年第13期1519-1523,共5页
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基金
天津市自然科学基金资助项目
No.013611511~~
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文摘
目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用. 方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR 法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化,分析RNA 干扰的特异性、时效性,并比较对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP的干扰效果.经凋亡诱导型抗体激活后,以Annexin V染色法及DNA降解片段检测分析干扰前后HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性的改变. 结果:特异性siRNA片段能有效降低FLIP mRNA水平,最大干扰效率达65.02%,明显高于作为对照的非相关片段;干扰作用于转染后24 h即可出现,48 h达高峰,72 h稍有降低;对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP均可产生干扰作用,彼此间差别不大.在诱导型抗体的刺激下,与未转染细胞相比,转染siRNA 的HT-29细胞中凋亡细胞所占比例明显增加. 结论:特异性siRNA片段可显著降低FLIP基因mRNA 的表达水平,并提高HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性.以FLIP为靶点的RNA干扰技术可望成为大肠癌基因治疗的新方法.
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关键词
FLIP
干扰性小RNA
大肠癌细胞株HT-29
HT-29细胞
半定量RT-PCR法
RNA片段
mRNA水平
FAS介导
Annexin
dna降解片段
RNA干扰技术
凋亡敏感性
基因mRNA
干扰作用
电穿孔技术
siRNA
癌基因治疗
特异性
体外培养
凋亡途径
抗体激活
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Keywords
Colorectal cancer
FADD-like IL-1β convert- ing enzyme inhibitory protein
Small interfering RNA
Apoptosis
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分类号
R735.34
[医药卫生—肿瘤]
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题名降解DNA的PCR分型-电洗脱回收大片断DNA法
被引量：1
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作者
倪星群
郭景元
陈丽娴
郭云荣
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机构
中山医科大学法医物证学教研室
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出处
《法医学杂志》
CAS
CSCD
1996年第4期211-212,共2页
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文摘
本文分析了降解ＤＮＡ作ＰＣＲ分型易失败的原因，提出了因小片断ＤＮＡ过多，阻碍引物与膜机的复性及阻断引物延伸的新现点。将降解的ＤＮＡ电泳，切除小片断ＤＮＡ，电洗脱回收较大片断ＤＮＡ，成功地对降解ＤＮＡ进行了ＰＣＲ分型．本方法简便、快速、有效。
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关键词
dna降解片段
电洗脱回收
聚合酶链反应
PCR分型
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Keywords
degradativc dna
electrophoretic elution
polymerase chain reaction
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分类号
R89
[医药卫生—法医学]
R394
[医药卫生—临床医学]
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