两种DNA断裂损伤检测方法敏感性的比较 被引量：25

1

作者 马爱国 韩秀霞 +2 位作者 刘四朝 Andrew R.Collins Susan J.Duthie 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期32-34,共3页

两种ＤＮＡ断裂损伤检测方法敏感性的比较马爱国韩秀霞刘四朝①（山东省青岛医学院营养学系，青岛２６６０２１）ＡｎｄｒｅｗＲ．ＣｏｌｉｎｓＳｕｓａｎＪ．Ｄｕｔｈｉｅ（英国Ｒｏｗｅｔ研究所）ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＴｗｏＭｅ... 两种ＤＮＡ断裂损伤检测方法敏感性的比较马爱国韩秀霞刘四朝①（山东省青岛医学院营养学系，青岛２６６０２１）ＡｎｄｒｅｗＲ．ＣｏｌｉｎｓＳｕｓａｎＪ．Ｄｕｔｈｉｅ（英国Ｒｏｗｅｔ研究所）ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＴｗｏＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅＡｎａｌｙｓ... 展开更多

关键词 dna断裂损伤 辐射损伤 检测方法 敏感性

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溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA的损伤作用 被引量：16

2

作者 陈贤均 李小燕 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第2期145-148,共4页

[目的]探讨农药溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA是否有损伤作用及3种器官对溴虫腈的敏感性差异。[方法]溴虫腈按4.9、9.8、19.6mg/kg体重3个剂量,一次性灌胃染毒雄性小鼠,2 4h后用彗星试验检测3种脏器的彗星细胞率和彗星尾长。[结果]各... [目的]探讨农药溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA是否有损伤作用及3种器官对溴虫腈的敏感性差异。[方法]溴虫腈按4.9、9.8、19.6mg/kg体重3个剂量,一次性灌胃染毒雄性小鼠,2 4h后用彗星试验检测3种脏器的彗星细胞率和彗星尾长。[结果]各剂量组的彗星细胞率和彗星尾长都显著增加(P <0 .0 5～P <0 .0 0 1) ;脾、肝、肾3种细胞的彗星细胞率及彗星尾长均具有剂量 反应或剂量 效应关系(前者r值依次为0 .9948,0 .9993 ,0 .9890 ,后者r值依次为0 .9999,0 .9999,0 .9898,P值均<0 .0 5 )。比较同剂量组不同器官之间的彗星细胞率,3个剂量组中均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P <0 .0 5～P <0 .0 1) ;比较同剂量组不同器官之间的彗星尾长,3个剂量组均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P<0 0 5 ) ,肝、脾细胞间差异无显著性。[结论]溴虫腈可诱发小鼠脾、肝、肾细胞DNA断裂损伤,肾细胞对溴虫腈致DNA断裂作用最为敏感。 展开更多

关键词 细胞dna 损伤作用 溴虫腈 剂量-效应关系 dna断裂损伤 0.05 敏感性差异 剂量-反应 细胞率 肾细胞 雄性小鼠 彗星试验 脾细胞 肝细胞 尾长 器官 一次性 24h 种细胞 显著性 细胞间 r值

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微量全血彗星实验法的建立及在生物监测中的初步应用 被引量：13

3

作者 孙树秋 姜树林 +1 位作者 姚洪菊 孙殿军 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期170-173,共4页

目的　建立一种简捷、实用的末梢血样直接用于彗星实验的新技术。方法　按随机、对照及重复的实验原则 ,于早、中、晚时段分别采集 6只昆明种雄性小鼠的尾血 ,每次取血样 3 μl/只进行彗星实验。电泳条件设置为电压 2 5V ,电流 13 0mA ,... 目的　建立一种简捷、实用的末梢血样直接用于彗星实验的新技术。方法　按随机、对照及重复的实验原则 ,于早、中、晚时段分别采集 6只昆明种雄性小鼠的尾血 ,每次取血样 3 μl/只进行彗星实验。电泳条件设置为电压 2 5V ,电流 13 0mA ,DNA碱性解旋与电泳各 3 0min。并以小样本人群对新建方法的有效性进行了初步验证。结果　①小鼠尾全血彗星图像清晰、对比度高 ,阳性与阴性对照组的拖尾率总体差异明显 ,重现性良好 ;②本方法可用于检测吸烟人群的DNA断裂损伤 ,并能在损伤程度上 (拖尾率与尾长 2项指标明显 )与非吸烟人群相鉴别。结论　基本建立了微量全血彗星实验法 。 展开更多

关键词 微量全血 实验法 初步应用 生物监测 dna断裂损伤 彗星实验 非吸烟人群 雄性小鼠 条件设置 图像清晰 损伤程度 取血样 昆明种 小样本 对照组 对比度 重现性 实用性 电泳 验证 拖尾

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反式二氢二醇环氧苯并芘诱发的细胞DNA断裂损伤 被引量：5

4

作者 黄勇 陈家堃 +3 位作者 吴中亮 吕嘉春 纪卫东 蒋义国 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2004年第4期15-17,共3页

目的　研究反式二氢二醇环氧苯并芘 [Anti 7,8 dihydrodiol 9,10 epoxidebenzo(a)pyrene ,BPDE]诱导的恶性转化的人支气管上皮细胞 (Humanbronchialepithelialcells ,HBE)及其裸鼠成瘤细胞中DNA断裂损伤情况。方法　单细胞凝胶电泳法 (... 目的　研究反式二氢二醇环氧苯并芘 [Anti 7,8 dihydrodiol 9,10 epoxidebenzo(a)pyrene ,BPDE]诱导的恶性转化的人支气管上皮细胞 (Humanbronchialepithelialcells ,HBE)及其裸鼠成瘤细胞中DNA断裂损伤情况。方法　单细胞凝胶电泳法 (Singlecellgelelectropheresis ,SCGE)。结果　反式BPDE诱导的恶性转化的HBE及其裸鼠成瘤细胞与对照组细胞相比各指标差异均有显著性 (P <0 0 1) ,各指标的高剂量与低剂量组之间差异也有显著性 (P <0 0 5 )。结论　反式BPDE可导致DNA断裂损伤 ,其损伤程度与剂量有一定关系。 展开更多

关键词 反式BPDE 人支气管上皮细胞 单细胞凝胶电泳 dna断裂损伤

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应用单细胞凝胶电泳技术测定巢湖水有机提取物致鱼红细胞DNA损伤 被引量：5

5

作者 赵影 《中国供水卫生》 2001年第4期21-24,共4页

关键词 单细胞凝胶电泳技术 测定 巢湖源水 有机物 污染物 金鲤鱼 红细胞 dna断裂损伤

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PARP抑制剂3-AB的辐射致敏作用及其机制 被引量：2

6

作者 杜翔 王志成 +2 位作者 王华 李艳博 龚守良 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期409-410,共2页

多聚（ADP-核糖）聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]是广泛存在于细胞内的一种具有蛋白修饰和核苷酸聚合作用的聚合酶，在多种有害因素造成细胞DNA断裂损伤修复过程中发挥重要作用。3-氨基苯甲酰胺（3-aminobenzamide，3-AB... 多聚（ADP-核糖）聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]是广泛存在于细胞内的一种具有蛋白修饰和核苷酸聚合作用的聚合酶，在多种有害因素造成细胞DNA断裂损伤修复过程中发挥重要作用。3-氨基苯甲酰胺（3-aminobenzamide，3-AB）是一种PARP特异性抑制剂，有报道证实，通过3-AB对PARP的抑制作用可以改变细胞对辐射引起的双链断裂的修复，引起一系列生理生化改变，而细胞对于电离辐射的敏感性也可由于PARP的活性而被改变。 展开更多

关键词 辐射致敏作用 特异性抑制剂 PARP 多聚(ADP-核糖)聚合酶 dna断裂损伤 氨基苯甲酰胺 修复过程 细胞内

原文传递

煤烟提取物致癌作用机制的研究

7

作者 李芸 沈文会 +6 位作者 赵维敏 邱琦 吴元德 仲伟鉴 张荣泉 郑方园 张国雄 《卫生毒理学杂志》 CSCD 2000年第2期80-82,共3页

目的　从煤烟对细胞膜理化特性的影响 ,对DNA的损伤 ,诱导原癌基因表达方面研究其致癌作用机制。方法　利用 1,6 二苯基 1,3,5 己三烯 (DPH)和N 3芘 马来酰亚胺 (N 3P M)分别标记NIH3T3细胞膜脂和膜蛋白 ,不同剂量的煤烟作用后 ,通... 目的　从煤烟对细胞膜理化特性的影响 ,对DNA的损伤 ,诱导原癌基因表达方面研究其致癌作用机制。方法　利用 1,6 二苯基 1,3,5 己三烯 (DPH)和N 3芘 马来酰亚胺 (N 3P M)分别标记NIH3T3细胞膜脂和膜蛋白 ,不同剂量的煤烟作用后 ,通过其荧光偏振度的改变确定膜理化特性的变化 ;利用溴化乙锭 (EB)作荧光探针 ,通过DNA EB结合物荧光强度的变化确定基因组DNA损伤程度 ;利用地高辛标记的c myc癌基因作探针 ,运用斑点杂交的方法 ,检测c myc基因的表达情况。结果　不同剂量的煤烟作用后 ,能够引起膜脂流动性升高 ,膜蛋白运动度无显著变化 ,能够引起DNA的断裂损伤及c myc基因的高表达 ,且上述变化皆与剂量密切相关。结论　煤烟的诱变性与其对细胞膜、DNA及原癌基因的表达的影响密切相关。 展开更多

关键词 煤烟提取物 NIH3T3细胞 dna断裂损伤 原癌基因

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一种快速测定抗癌药物诱导肿瘤细胞DNA断裂损伤的方法

8

作者 朱孝峰 苏秀容 +1 位作者 刘宗潮 潘启超 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第5期398-399,共2页

一种快速测定抗癌药物诱导肿瘤细胞ＤＮＡ断裂损伤的方法朱孝峰苏秀容刘宗潮潘启超关键词鼻咽癌细胞株抗癌药物ＤＮＡ断裂损伤中图号Ｒ９７９．１Ｒ７３０．５３抗癌药物通过直接（如烷化剂或ＤＤＰ）或间接如ＶＰ－１６通过抑制拓扑异... 一种快速测定抗癌药物诱导肿瘤细胞ＤＮＡ断裂损伤的方法朱孝峰苏秀容刘宗潮潘启超关键词鼻咽癌细胞株抗癌药物ＤＮＡ断裂损伤中图号Ｒ９７９．１Ｒ７３０．５３抗癌药物通过直接（如烷化剂或ＤＤＰ）或间接如ＶＰ－１６通过抑制拓扑异构酶）断裂肿瘤细胞ＤＮＡ，由ＤＮＡ... 展开更多

关键词 细胞株 抗癌药物 dna断裂损伤 鼻咽肿瘤

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其它

9

《中国妇幼卫生杂志》 2001年第2期129-130,共2页

关键词 绿色化学设计 色拉油烟冷凝物 油烟凝聚物 GSH—Px 冷暴露 dna断裂损伤 亚硒酸钠 核酸内切酶Ⅲ 大蒜油 低散热发动机

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姜黄素拮抗亚砷酸钠所致的DNA链断裂损伤 被引量：11

10

作者 魏雪涛 蒋建军 +1 位作者 吴涛 张宝旭 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期833-836,共4页

目的　观察姜黄素对亚砷酸钠诱发小鼠体内免疫器官细胞DNA链断裂损伤的拮抗作用。方法　用单细胞凝胶电泳法。结果　亚砷酸钠单独染毒后的DNA链断裂损伤的高峰期各器官不同 ,脾脏为染毒后 1h ,胸腺和骨髓在染毒后 3h。姜黄素拮抗亚砷酸... 目的　观察姜黄素对亚砷酸钠诱发小鼠体内免疫器官细胞DNA链断裂损伤的拮抗作用。方法　用单细胞凝胶电泳法。结果　亚砷酸钠单独染毒后的DNA链断裂损伤的高峰期各器官不同 ,脾脏为染毒后 1h ,胸腺和骨髓在染毒后 3h。姜黄素拮抗亚砷酸钠引起的各器官DNA链断裂损伤的作用在高峰期明显 ,表现为彗星细胞百分比降低 ,并有量效关系。结论　姜黄素可以预防亚砷酸钠诱发的小鼠脾脏、胸腺和骨髓细胞的DNA链断裂损伤。 展开更多

关键词 姜黄素 亚砷酸钠 dna链断裂损伤

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单细胞凝胶电泳图像分析软件的比较 被引量：11

11

作者 邢彩虹 李桂兰 +2 位作者 纪之莹 高耘 尹松年 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期141-143,共3页

关键词 分析软件 电泳图像 单细胞凝胶电泳技术 dna链断裂损伤 彗星试验 单细胞水平 dna含量 敏感方法 工作人员 出现

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硫酸铍对小鼠体外脾淋巴细胞DNA损伤的剂量效应 被引量：5

12

作者 骆蓉 刘志宏 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第9期809-811,共3页

目的:观察不同剂量硫酸铍(BeSO4)在不同时相处理后引发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤的剂量效应.方法:采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)分别测定BALB/c小鼠脾淋巴细胞体外染毒0.2,2,20,100和200μmol/L1h和2h后DNA链断裂损伤情况.结果:... 目的:观察不同剂量硫酸铍(BeSO4)在不同时相处理后引发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤的剂量效应.方法:采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)分别测定BALB/c小鼠脾淋巴细胞体外染毒0.2,2,20,100和200μmol/L1h和2h后DNA链断裂损伤情况.结果:在不同剂量硫酸铍染毒1h后,脾淋巴细胞出现DNA链断裂损伤的测定指标在各剂量组明显高于对照;染毒1h和2h后,细胞均出现明显的DNA链断裂损伤,但其相同剂量组之间差异无显著性.结论:硫酸铍可诱发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤. 展开更多

关键词 硫酸铍 脾 淋巴细胞 单细胞凝胶电泳 dna链断裂损伤

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Dicer1在卵巢癌间质成纤维细胞中调控DNA损伤修复相关基因 被引量：3

13

作者 靳平 杨宗元 +2 位作者 徐森 张陶然 高庆蕾 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2016年第3期161-165,共5页

目的:检测Dicer1在卵巢癌间质肿瘤相关成纤维细胞中的表达情况,探讨其对DNA双键断裂损伤(DSB)修复相关基因的影响。方法:应用基因集合富集分析(GSEA)方法分析卵巢癌间质和正常卵巢间质基因表达公共数据库GSE40595,探索Dicer1对DSB修复... 目的:检测Dicer1在卵巢癌间质肿瘤相关成纤维细胞中的表达情况,探讨其对DNA双键断裂损伤(DSB)修复相关基因的影响。方法:应用基因集合富集分析(GSEA)方法分析卵巢癌间质和正常卵巢间质基因表达公共数据库GSE40595,探索Dicer1对DSB修复相关通路及关键基因的调控作用,并筛选出相关差异基因。应用重组人转化生长因子β1(h TGFβ1)细胞因子诱导成纤维细胞系MRC5细胞活化成为肿瘤相关成纤维细胞(CAFs),即MRC5-CAFs。以靶向Dicer1基因的siRNA转染MRC5-CAFs,下调其Dicer1表达水平。qRT-PCR、Western blot法分别检测Dicer1及分析所得相关基因,如XRCC6、TP53BP1、H2AFX、BRCA1、ATR、RAD51 mRNA水平及Dicer1和DSB损伤修复关键基因γ-H2AX(磷酸化H2AX)、RAD51蛋白水平。荧光共聚焦检测细胞核蛋白γ-H2AX表达;采用CCK8试验检测细胞活性。结果:GSEA分析结果显示,Dicer1表达水平与DSB(NES=1.7942109,FDRq=0.0067545176)及DNA损伤修复(NES=2.4433048,FDRq=0)显著正相关,进一步通过相关分析筛选出在上述通路中与Dicer1表达正相关的显著基因集。沉默MRC5-CAFs细胞中Dicer1表达后,DSB相关基因,如XRCC6、TP53BP1、H2AFX及损伤修复相关基因BRCA1、ATR、RAD51均较对照组显著下降,与GSEA分析结果一致。荧光共聚焦显微镜检测到沉默Dicer1 MRC5-CAFs细胞内聚集较少的DSB。CCK8试验结果显示,MRC5-CAFs细胞在20μmol/L顺铂作用下,Dicer1-si组不同时间梯度的细胞活性率均低于NC-si组。结论:Dicer1在卵巢癌间质成纤维细胞中正向调控DNA损伤修复相关基因,抑制Dicer1表达后其对顺铂敏感性显著增加。 展开更多

关键词 卵巢癌 成纤维细胞 Dicer1 顺铂 dna损伤应答 dna双键断裂损伤 同源重组修复

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修复DNA双键断裂损伤的NHEJ分子机制研究进展 被引量：1

14

作者 王慧 张凤梅 凤志慧 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期468-472,共5页

DNA损伤有碱基损伤和单链断裂、双链断裂（Double strand breaks,DSBs）等多种形式,其中以DSBs损伤最为严重。电离辐射（ionizing radiation,IR）、抗癌药物等都能诱发DNA发生DSBs[1]。损伤的DSBs若不能被及时修复,会引起染色体断裂、... DNA损伤有碱基损伤和单链断裂、双链断裂（Double strand breaks,DSBs）等多种形式,其中以DSBs损伤最为严重。电离辐射（ionizing radiation,IR）、抗癌药物等都能诱发DNA发生DSBs[1]。损伤的DSBs若不能被及时修复,会引起染色体断裂、缺失、重排或倒置等现象。 展开更多

关键词 非同源末端连接 dna损伤修复 dna双键断裂损伤

原文传递

劳动卫生

15

《中国妇幼卫生杂志》 2004年第4期193-198,共6页

关键词 艇员 过劳性损伤 水面舰艇 dna链断裂损伤 睡眠剥夺 大鼠 对照组 劳动卫生 NaAsO2 烹调油烟

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大鼠大脑中动脉阻塞后DNA单链断裂损伤的实验研究 被引量：9

16

作者 万琪 张巍 刘勇红 《中国临床康复》 CSCD 2003年第7期1062-1063,T001,共3页

目的观察大鼠永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)后,相应区域DNA断裂损伤情况,探讨DNA单链损伤在pMCAO所致脑组织损伤中的意义。方法采用常规HE组织染色明确大鼠pMCAO模型成功与否及其损伤范围,采用DNA聚合酶-1Klenow片段原位杂交方法检测pMCA... 目的观察大鼠永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)后,相应区域DNA断裂损伤情况,探讨DNA单链损伤在pMCAO所致脑组织损伤中的意义。方法采用常规HE组织染色明确大鼠pMCAO模型成功与否及其损伤范围,采用DNA聚合酶-1Klenow片段原位杂交方法检测pMCAO不同时间点DNA单链断裂损伤情况。结果损伤区域单链DNA断裂的Klenow阳性细胞在pMCAO后6h即有表达(P<0.01),在24h时达到高峰(P<0.01),72h时有所下降(P<0.01)。结论单链DNA断裂损伤在pMCAO后6h即可出现,并逐渐积累,成为缺血半暗带内细胞损伤发展过程的重要环节,并可能预示半暗带损伤范围的不断扩大。 展开更多

关键词 大鼠 大脑动脉阻塞 dna单链断裂损伤 实验 脑缺血损伤

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基于DNA双链断裂损伤簇的相对生物效能模拟计算 被引量：1

17

作者 唐菁 马骥祥 +2 位作者 李志媛 李杰 张鹏程 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期489-498,共10页

目的从追溯辐射引起的DNA损伤机制出发,根据基本的生物物理原理获取DNA双链断裂(DSB)损伤簇表示的相对生物效能(RBE)值,探讨DNA损伤与染色体畸变、生殖细胞死亡生物效能的相似性。方法以低能电子、质子、α粒子作为研究对象,通过辐射物... 目的从追溯辐射引起的DNA损伤机制出发,根据基本的生物物理原理获取DNA双链断裂(DSB)损伤簇表示的相对生物效能(RBE)值,探讨DNA损伤与染色体畸变、生殖细胞死亡生物效能的相似性。方法以低能电子、质子、α粒子作为研究对象,通过辐射物理化学模型,模拟细胞核受粒子辐射的过程。在基于损伤点密度的含噪声密度聚类(DBSCAN)算法的基础上,改进DSB损伤簇分类方法,以减弱模拟过程中损伤点与能量沉积随机分布假设的联系,使得DSB损伤簇更接近于非随机分布。计算获得DSB损伤簇的产额,提出以DSB损伤簇计算RBE值的方法。结果2 MeVα粒子的DSB损伤簇RBE值(12.29)与生物实验中染色体片段(15.3±5.9)、细胞存活(14.7±5.1)表示的RBE相近。结论高传能线密度(LET)电离辐射后,不同于简单DSB,DSB损伤簇的RBE与染色体畸变、细胞存活生物效能存在一定的相似性。 展开更多

关键词 dna双链断裂损伤簇 相对生物效能 含噪声密度聚类算法

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石英对人胚肺成纤维细胞DNA损伤作用 被引量：3

18

作者 刘海峰 李晖 +3 位作者 张庆娟 刘秉慈 高学杰 刘晓霞 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期993-995,共3页

目的探讨石英粉尘对DNA及染色体的损伤作用,为尘肺病防治提供理论依据。方法标准α石英刺激人胚肺成纤维细胞(HELF),采用免疫荧光技术检测H2AX磷酸化(γH2AX)水平以及分析中性彗星实验Olive矩,作为DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的指标,微... 目的探讨石英粉尘对DNA及染色体的损伤作用,为尘肺病防治提供理论依据。方法标准α石英刺激人胚肺成纤维细胞(HELF),采用免疫荧光技术检测H2AX磷酸化(γH2AX)水平以及分析中性彗星实验Olive矩,作为DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的指标,微核实验观察染色体损伤情况。结果依次用0、100、200、400μg/mL石英刺激HELF细胞,γH2AX水平呈增高趋势,半定量结果分别为(521.9±233.1)、(823.3±201.5)、(1 375.5±311.5)、(1 545.6±145.7);Olive矩亦呈增高趋势,分别为(1.74±0.24)%、(2.67±0.36)%、(9.23±0.72)%、(14.16±1.05)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。相同剂量的石英刺激下,微核率增加,但差异无统计学意义。结论石英粉尘可引起DNA双链断裂,且存在剂量-效应关系。 展开更多

关键词 尘肺病 石英 dna双链断裂损伤 微核

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荧光探针氨氯吡咪对DNA双链中单链断裂损伤的识别研究

19

作者 胡亮亮 张文艳 +1 位作者 刘蓓 高强 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期49-52,共4页

将氨氯吡咪选择性地嵌入ds-DNA中单链断裂损伤所形成的缺口位点,并通过氢键与缺口位点处的碱基结合从而导致氨氯吡咪荧光猝灭,据此建立了荧光检测DNA单链断裂损伤的新方法.氨氯吡咪荧光的猝灭程度与缺口位点处碱基类型相关,当缺口位点... 将氨氯吡咪选择性地嵌入ds-DNA中单链断裂损伤所形成的缺口位点,并通过氢键与缺口位点处的碱基结合从而导致氨氯吡咪荧光猝灭,据此建立了荧光检测DNA单链断裂损伤的新方法.氨氯吡咪荧光的猝灭程度与缺口位点处碱基类型相关,当缺口位点处的碱基为T碱基时,荧光猝灭程度最大.荧光滴定实验表明氨氯吡咪和存在缺口位点的ds-DNA是1∶1结合,结合常数为105mol/L数量级.在正常ds-DNA和存在单链断裂损伤的ds-DNA的溶液中加入氨氯吡咪,在紫外灯照射下通过目视法即可分辨出二者荧光强度的不同. 展开更多

关键词 荧光 dna单链断裂损伤 氨氯吡咪 氢键 识别

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BIX-01294通过诱导DNA损伤和激活线粒体凋亡途径抑制食管鳞癌细胞增殖

20

作者 吴中杰 张雁飞 +4 位作者 吕望 盛宏旭 朱林海 胡奕 胡坚 《中国胸心血管外科临床杂志》 CSCD 北大核心 2021年第5期571-577,共7页

目的探讨组蛋白甲基化酶G9a抑制剂BIX-01294诱导食管鳞癌细胞凋亡的作用效应和分子机制。方法 MTT和集落形成实验分析BIX-01294对食管鳞癌细胞EC109和KYSE150生长、增殖的影响;流式细胞术分析BIX-01294作用后细胞的凋亡情况;免疫印迹实... 目的探讨组蛋白甲基化酶G9a抑制剂BIX-01294诱导食管鳞癌细胞凋亡的作用效应和分子机制。方法 MTT和集落形成实验分析BIX-01294对食管鳞癌细胞EC109和KYSE150生长、增殖的影响;流式细胞术分析BIX-01294作用后细胞的凋亡情况;免疫印迹实验检测BIX-01294作用后G9a催化产物H3K9me2、DNA双链断裂标记和细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 BIX-01294呈剂量依赖关系抑制EC109和KYSE150细胞的生长(P<0.05),半数抑制率(IC50)剂量作用细胞显著抑制集落克隆的形成(P<0.05)。BIX-01294(IC50)作用24 h,EC109细胞凋亡率由11.5%±2.1%上升至42.5%±5.4%,KYSE150细胞凋亡率由7.5%±0.9%上升至49.2%±5.2%,差异有统计学意义(P<0.05);G9a催化产物H3K9me2表达下降(P<0.05);DNA双链断裂标记蛋白γH2AX的表达显著上调(P<0.05);线粒体凋亡途径被激活,cleaved caspase3和cleaved PARP的表达显著上调(P<0.05)。结论组蛋白甲基化酶G9a抑制剂BIX-01294通过诱导DNA双链断裂损伤和激活线粒体凋亡途径诱导食管鳞癌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 食管鳞癌 组蛋白甲基化酶G9a BIX-01294 dna双链断裂损伤 线粒体凋亡途径

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