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基于microRNA-21响应的Zn^(2+)/DNA自组装体用于肿瘤的检测和氧化应激治疗
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作者 徐昕 李烨 +3 位作者 王敏 傅章程 齐国敏 卢春华 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期164-174,共11页
DNA材料具有的特异性、可编程性和生物相容性,使得其在生物检测和药物递送方面具有很大的应用优势。为了进一步拓展DNA材料的应用和合成方法,本文报道了利用DNA与金属离子之间的配合作用,简单高效地制备具有肿瘤标志物micro RNA-21(mi R... DNA材料具有的特异性、可编程性和生物相容性,使得其在生物检测和药物递送方面具有很大的应用优势。为了进一步拓展DNA材料的应用和合成方法,本文报道了利用DNA与金属离子之间的配合作用,简单高效地制备具有肿瘤标志物micro RNA-21(mi R-21)响应性的Zn^(2+)/DNA自组装纳米粒子(ZDNPs)。通过粒子中DNA发卡结构与mi R-21的特异性互补,激活荧光信号并释放Zn^(2+),导致细胞内产生大量活性氧,从而用于肿瘤的荧光成像和氧化应激治疗。合成的ZDNPs为形状均匀的球形粒子,能有效对Zn^(2+)进行装载。通过ZDNPs对mi R-21的响应性实验,验证了ZDNPs与miR-21浓度之间具有良好的线性响应荧光信号,线性响应范围在5~160 nmol/L,检测限为5 nmol/L,且具备特异性。此外,本文对ZDNPs在细胞内的作用效果也进行了研究,结果表明其能在肿瘤细胞内进行响应性的荧光成像,并能通过氧化应激途径介导肿瘤细胞凋亡。在活体的荧光成像和肿瘤治疗中,ZDNPs在肿瘤病灶部位体现出特异性和持续性的示踪能力,并且对肿瘤产生了明显的生长抑制效果。 展开更多
关键词 dna发卡 锌离子 MICRORNA-21 肿瘤成像 氧化应激治疗
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磁镊结合DNA发夹的方法在RecA蛋白介导的同源重组机制研究中的潜在应用 被引量:2
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作者 张宇微 颜燕 +2 位作者 农大官 徐春华 李明 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第21期326-333,共8页
同源序列识别与链交换过程是同源重组领域的重要研究方向.RecA蛋白作为重组酶家族的重要成员而一直被广泛研究.利用smFRET以及传统磁镊、光镊等技术,人们对同源重组过程的分子机制有了较深入的了解,然而,这些技术无法同时兼顾大量程与... 同源序列识别与链交换过程是同源重组领域的重要研究方向.RecA蛋白作为重组酶家族的重要成员而一直被广泛研究.利用smFRET以及传统磁镊、光镊等技术,人们对同源重组过程的分子机制有了较深入的了解,然而,这些技术无法同时兼顾大量程与高精度的需求.本文提出一种传统磁镊结合DNA发夹结构的研究方案,并以大肠杆菌中的RecA介导的同源重组过程为例来阐述该方法的优点.使用本实验方案,我们实时观察到以下过程:1)RecA介导的链交换平均速度与已有结果一致,但并非匀速,而是以台阶式的跳变进行;2)直接观察到RecA第二结合位点与被置换链的动态相互作用过程,测量到第二结合位点与被置换链之间的结合力为3.0 pN,与光镊结合磁镊测量出的结果相符;3)能够区分链交换的方向性并观察到按照不同方向进行链交换的反应细节.本文提供了一个可以兼顾精度和测量范围的实验方法,并以RecA蛋白为例设计实验验证了其可靠性.磁镊结合DNA发夹结构的方法具备用于研究RecA或其他同源重组蛋白工作机理的潜质.因此,本文的工作有望成为单分子生物学领域研究同源重组过程的一个重要方法. 展开更多
关键词 同源重组 RECA 磁镊 dna发夹
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Improved data analysis method of single-molecule experiments based on probability optimization
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作者 翟伟利 袁国华 +1 位作者 刘超 陈虎 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第1期182-187,共6页
To extract the dynamic parameters from single molecule manipulation experiments, usually lots of data at different forces need to be recorded. But the measuring time of a single molecule is limited due to breakage of ... To extract the dynamic parameters from single molecule manipulation experiments, usually lots of data at different forces need to be recorded. But the measuring time of a single molecule is limited due to breakage of the tether or degradation of the molecule. Here we propose a data analysis method based on probability maximizalion of the recorded time trace to extract the dynamic parameters from a single measurement. The feasibility of this method was verified by dealing with the simulation data of a two-state system. We also applied this method to estimate the parameters of DNA hairpin folding and unfolding dynamics measured by a magnetic tweezers experiment. 展开更多
关键词 probability optimization Bell's model dna hairpin single molecule manipulation
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全内反射瞬逝场照明高精度磁镊及其在DNA解旋酶研究中的应用 被引量:1
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作者 王爽 郑海子 +2 位作者 赵振业 陆越 徐春华 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期465-472,共8页
传统磁镊的测量精度受限于磁球的布朗涨落,当磁力小于约10pN时,磁球的布朗涨落明显增大,对应磁镊的空间分辨率显著下降.为了提高传统磁镊在小力条件下的测量精度,本文将全内反射荧光技术引入到磁镊技术中,并建立相适应的"磁球-手柄... 传统磁镊的测量精度受限于磁球的布朗涨落,当磁力小于约10pN时,磁球的布朗涨落明显增大,对应磁镊的空间分辨率显著下降.为了提高传统磁镊在小力条件下的测量精度,本文将全内反射荧光技术引入到磁镊技术中,并建立相适应的"磁球-手柄-荧光微球-待测生物分子"单分子连接系统,在小力条件下(小于10pN)获得纳米量级的测量精度.应用改进的磁镊对DNA发卡的折叠-去折叠态的转变过程进行了研究,依据DNA发卡的折叠-去折叠态转变的性质对全内反射场的穿透深度进行了校正,并结合实验结果对改进后的磁镊的测量精度进行分析.观察了Bloom解旋酶的解旋动力学过程,获得初步实验结果,证实了改进的磁镊在单分子研究中的实用性. 展开更多
关键词 磁镊 全内反射荧光 dna发卡 解旋酶
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DNA发夹在拉力作用下的热力学性质(英文)
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作者 张冬华 王佳军 +1 位作者 夏佰成 昱万程 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期996-1001,1028,共7页
利用二维朗之万动力学模拟方法研究了DNA发夹在拉力作用下的相转变行为.研究发现DNA发夹处于展开状态的概率与所施加的拉力大小存在定量关系,并且可以通过统计力学的角度进行解释.通过选取不同的参数组合,并进行大量的模拟实验,分别得到... 利用二维朗之万动力学模拟方法研究了DNA发夹在拉力作用下的相转变行为.研究发现DNA发夹处于展开状态的概率与所施加的拉力大小存在定量关系,并且可以通过统计力学的角度进行解释.通过选取不同的参数组合,并进行大量的模拟实验,分别得到了DNA发夹的拉力-碱基配对强度和拉力-温度相图.所得相图表明碱基配对强度增强或温度降低都有利于DNA发夹处于折叠状态.这些相图非常有益于加深人们对DNA发夹在拉力作用下的热力学性质的理解. 展开更多
关键词 dna发夹 拉力 相图 朗之万动力学模拟
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基于发卡型DNA循环杂交放大技术检测海产品中的Hg^(2+)含量
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作者 杜平 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第9期238-242,共5页
利用发卡型DNA的循环杂交放大作用和碱基T与Hg^(2+)之间的稳定结构,设计了一种高灵敏性的表面增强拉曼生物传感器用于海产品中痕量汞的检测。首先制备了携带有大量拉曼信号分子的纳米金生物条码作为拉曼信号探针。然后通过酰胺键将捕获... 利用发卡型DNA的循环杂交放大作用和碱基T与Hg^(2+)之间的稳定结构,设计了一种高灵敏性的表面增强拉曼生物传感器用于海产品中痕量汞的检测。首先制备了携带有大量拉曼信号分子的纳米金生物条码作为拉曼信号探针。然后通过酰胺键将捕获DNA固载在磁珠表面上,利用T-Hg^(2+)-T形成的稳定结构和链式循环杂交反应放大技术,将含有大量拉曼信号DNA分子的纳米金颗粒通过生物素和链霉亲和素的特异性结合到磁珠上,最后通过SERS技术实现了溶液中Hg^(2+)的检测。最佳实验条件下,当固定磁珠捕获DNA浓度为1.0×10^(-7) mol/L,Tris-HCl缓冲溶液为p H 7.4,37℃下杂交反应3 h后,Hg^(2+)的浓度与拉曼信号强度呈良好的线性关系,测定线性范围为1.0×10^(-7)~1.0×10^(-13) mol/L,检测限1.0×10^(-13) mol/L(S/N=3)。该传感器用于海产品中Hg^(2+)的测定,测定值与ICP-AES的测定值基本一致。 展开更多
关键词 发卡dna 循环杂交放大 表面增强拉曼技术 HG^2+
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