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肺炎支原体基因组DNA一步法提取在可视化环介导等温扩增体系中的应用研究 被引量：2
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作者 严春霞 闻人庆 +1 位作者 陆伟宏 何国产 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第2期82-85,共4页
目的探究建立肺炎支原体(Mp)基因组DNA一步提取方法,应用于显色肺炎支原体环介导等温扩增(LAMP)体系,以期研制出高灵敏度和高特异度肺炎支原体的检测方法。方法分别用5种方法提取肺炎支原体培养液基因组DNA,并分别从Mp DNA的纯度、产量... 目的探究建立肺炎支原体(Mp)基因组DNA一步提取方法,应用于显色肺炎支原体环介导等温扩增(LAMP)体系,以期研制出高灵敏度和高特异度肺炎支原体的检测方法。方法分别用5种方法提取肺炎支原体培养液基因组DNA,并分别从Mp DNA的纯度、产量、操作步骤、仪器设备和提取时间方面进行比较;最后将5种方法提取的基因组DNA同时应用于已建立的可视化LAMP体系检验提取效果;选取2016年1月~3月20例支原体肺炎住院患儿的咽拭子标本,并用改良后的ROSE法提取咽拭子标本,并鉴定提取效果。结果提取纯度上,ROSE法和其他四种方法进行两两比较,差异均具有统计学意义(P均<0.05),即ROSE法略好于碱裂解法和煮沸法,但低于CTAB法和试剂盒法;产量上,ROSE法和其他四种方法进行两两比较的结果是:和煮沸法比差异无统计学意义(q=0.95,P>0.05),和其他三种方法比差异有统计学意义(P均<0.05),因此ROSE法提取的产量要高于碱裂解法、CTAB法和试剂盒法;在仪器设备、操作步骤和提取时间上ROSE法、碱裂解法和煮沸法优于CTAB法和试剂盒法;5种方法提取的DNA均能应用于LAMP反应,除煮沸法外,其余四种方法结果无明显差异。结论该研究建立了肺炎支原体一步法基因组DNA提取方法,成功应用于显色Mp LAMP体系中,真正实现不需要任何贵重仪器即可检测肺炎支原体。 展开更多
关键词 一步法 dna提取 肺炎支原体
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