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DNA双链断裂损伤修复系统研究进展 被引量:13
1
作者 黄敏 缪泽鸿 丁健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期295-300,共6页
多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非... 多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非同源末端连接(Non-homologous end joining)通路。这两条通路都是由多个修复元件参与、经过多步反应的复杂过程。两者各具特点、协同作用,共同维护细胞基因组的稳定性。对其分子机制的阐明为肿瘤放化疗的辅助治疗提供了潜在的作用靶点。 展开更多
关键词 dna双链断裂 修复通路 同源重组修复 非同源末端连接
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枯草芽孢杆菌耐辐射菌株对紫外线的耐受性及其机理初探 被引量:10
2
作者 周莉薇 陈晓明 +2 位作者 张建国 柳芳 张根发 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2009年第3期182-186,共5页
为探讨枯草芽孢杆菌对紫外线的耐受性,以枯草芽孢杆菌耐辐射菌株及其来源菌株枯草芽孢杆菌黑色变种为研究材料,以不同剂量紫外线辐照处理。采用平板计数法比较两种菌株的存活率,通过脉冲场凝胶电泳分析两种菌的DNA双链断裂(Double stran... 为探讨枯草芽孢杆菌对紫外线的耐受性,以枯草芽孢杆菌耐辐射菌株及其来源菌株枯草芽孢杆菌黑色变种为研究材料,以不同剂量紫外线辐照处理。采用平板计数法比较两种菌株的存活率,通过脉冲场凝胶电泳分析两种菌的DNA双链断裂(Double strand breaks,DSBs)。发现,对数期耐辐射菌株对紫外线的耐受性明显大于原菌株,耐辐射菌株DSBs水平小于对应的原菌样品。耐辐射菌株对紫外线的耐受性较强,其DNA双链断裂程度与辐照剂量及辐照样品密切相关。 展开更多
关键词 紫外线辐照 枯草芽孢杆菌 dna双链断裂 菌体存活率
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快中子辐照对枯草芽孢杆菌DNA损伤研究 被引量:7
3
作者 陈晓明 谭碧生 +4 位作者 郑春 张建国 王丹 楚士晋 任正隆 《高能物理与核物理》 CSCD 北大核心 2007年第10期972-977,共6页
采用脉冲场凝胶电泳技术检测并定量分析了CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆产生的快中子在不同剂量和剂量率条件下,对枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC 9372)DNA双链断裂的诱导.通过DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值、断裂DN A平均分子量和DNA片段分布... 采用脉冲场凝胶电泳技术检测并定量分析了CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆产生的快中子在不同剂量和剂量率条件下,对枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC 9372)DNA双链断裂的诱导.通过DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值、断裂DN A平均分子量和DNA片段分布等指标的分析,结果表明:在不同的辐射条件下,DNA片段均明显分布于两个区域,表明枯草芽孢杆菌黑色变种DNA分子上可能存在对中子辐射较为敏感的位点;并且随着中子辐射剂量和剂量率的变化,DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值和各片段区双链断裂的含量也会发生一定规律性的变化. 展开更多
关键词 dna双链断裂 脉冲场凝胶电泳 枯草芽孢杆菌黑色变种 CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆 辐照 热点
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HCV NS3/4A基因外来表达对Huh7细胞凋亡及DNA损伤应答的影响 被引量:8
4
作者 任来峰 唐子执 +4 位作者 吴惠文 许宁 刘刚 曾鸣 郭莲娣 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1110-1115,共6页
NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAP... NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAPI染色和MTT分析显示,外来表达NS3/4A显著诱导细胞的凋亡和增殖活力的下降。免疫荧光检测结果表明,NS3/4A可明显增加细胞内源性DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)损伤(γH2AX灶点升高);而进一步用X-ray诱导细胞外源性DSBs损伤后,外来表达NS3/4A的细胞显示出明显的DSBs损伤修复缺陷(减缓的γH2AX灶点消退)。免疫印迹法检测结果显示,NS3/4A可抑制喜树碱(Camptothecin,CPT)诱导的ATM第1 981位丝氨酸的磷酸化(pATM1 981)。以上结果提示,NS3/4A基因外来表达可引起细胞DNA损伤,抑制ATM介导的DSBs损伤修复信号,诱导细胞凋亡通路的活化。 展开更多
关键词 dna损伤 丙型肝炎病毒 dna双链断裂 非结构蛋白3 4A
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DNA损伤标志物γ-H2AX及其在毒性测试应用中的研究进展 被引量:8
5
作者 瞿敏敏 陈佳 +2 位作者 郭磊 徐华 谢剑炜 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期401-411,共11页
当DNA受到攻击尤其是发生DNA双链断裂(DSB)后,组蛋白H2AX的139位丝氨酸迅速磷酸化,生成磷酸化H2AX即γ-H2AX。γ-H2AX在DSB位点大量聚集并形成焦点,参与DNA的损伤修复,且γ-H2AX焦点数与DSB数量成正比。目前研究表明,γ-H2AX是表征DNA... 当DNA受到攻击尤其是发生DNA双链断裂(DSB)后,组蛋白H2AX的139位丝氨酸迅速磷酸化,生成磷酸化H2AX即γ-H2AX。γ-H2AX在DSB位点大量聚集并形成焦点,参与DNA的损伤修复,且γ-H2AX焦点数与DSB数量成正比。目前研究表明,γ-H2AX是表征DNA损伤的特异性生物标志物,可作为基因毒性的特异性效应指标。旨在检测γ-H2AX的试验(简称γ-H2AX试验)已被应用于众多与DNA损伤相关的基础研究和医学诊断中。本文介绍γ-H2AX的生成及生物学意义,论述基于免疫化学技术及质谱技术的γ-H2AX试验在体外基因毒性评价中的应用、γ-H2AX试验与其他基因毒性试验的性能对比及γ-H2AX与其他毒性终点标志物的互补性,并对γ-H2AX试验在基因毒性风险评估中的应用前景予以展望。 展开更多
关键词 dna双链断裂 组蛋白H2AX γ-H2AX试验 基因毒性
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γ-H2AX与DNA双链断裂关系的研究进展 被引量:7
6
作者 宾萍 郑玉新 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期520-522,共3页
H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金... H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金标准。目前,多种物理性、化学性和生物性的因素都能诱导形成γ-H2AX焦点。本文综述了不同因素诱导形成γ-H2AX的机制及其与DNA双链断裂之间的关系的研究进展。 展开更多
关键词 dna损伤 Γ-H2AX dna双链断裂
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沉默PeroxiredoxinⅠ基因对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响 被引量:7
7
作者 郭启帅 黄曦 李少林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1119-1123,共5页
目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-... 目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-PrxⅠ组、pGPU6-HK+照射(ionizing radiation,IR)组、pGPU6-PrxⅠ+IR组。用6MVX线照射裸鼠瘤组织,测量肿瘤体积,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化检测肿瘤组织中PrxⅠ和Caspase3蛋白表达;电镜观察肿瘤细胞超微结构,Western blot测定肿瘤组织中γ-H2AX和Rad51蛋白表达。结果成功构建了裸鼠移植瘤模型,pGPU6-PrxⅠ+IR组裸鼠移植瘤生长肿瘤明显迟缓,体积较小,抑瘤率为79.76%,与pGPU6-PrxⅠ(34.92%)和pGPU6-HK+IR(56.94%)比较差异具有显著性(P<0.05);给予pGPU6-PrxⅠ及IR处理后,肿瘤细胞凋亡和坏死增多,PrxⅠ和Rad51蛋白表达减少,而Caspase3和γ-H2AX蛋白表达增加,以pGPU6-PrxⅠ+IR组更为显著,其Rad51蛋白下降了84.8%,γ-H2AX蛋白表达升高5.6倍(P<0.05)。结论沉默PrxⅠ表达可提高乳腺癌移植瘤的放射敏感性,其作用机制与DNA双链断裂增加、DNA损伤后修复能力降低有关。PrxⅠ可能是一个理想的乳腺癌放射增敏分子靶点。 展开更多
关键词 PEROXIREDOXIN 放射敏感性 dna双链断裂 dna损伤修复 乳腺癌
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氧氟沙星对锦鲤抗氧化系统和DNA损伤的影响 被引量:7
8
作者 沈洪艳 王冰 +2 位作者 赵月 曹志会 武彤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期59-66,共8页
由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD... 由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD活性、MDA和GST含量呈现显著的诱导效应。当OFLX浓度200 mg/L,暴露13 d时,锦鲤肝脏各项抗氧化酶活性指标均出现显著降低,表明OFLX对锦鲤的抗氧化系统的累积毒性超出了鱼体的自身调节能力,导致鱼体的抗氧化系统的损伤。鱼鳃组蛋白H2AX(γ-H2AX)磷酸化结果表明,OFLX可造成鱼体DNA损伤,诱导鱼鳃γ-H2AX产生和簇集,且呈现明显的剂量-效应关系。OFLX浓度200 mg/L,暴露4 d时鱼鳃γ-H2AX浓度达到最大值(110.49 ng/L)。随着暴露时间继续增加,各浓度组γ-H2AX含量均有所下降,表明OFLX可能导致造成DNA双链的断裂,导致γ-H2AX浓度下降。该结果为评估OFLX对锦鲤的抗氧化系统和DNA毒性影响提供了较为可靠的依据。 展开更多
关键词 氧氟沙星 毒性效应 锦鲤鱼 氧化损伤 dna双键断裂 Γ-H2AX
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重离子辐射生物效应的实验研究 被引量:4
9
作者 雷苏文 《国外医学(放射医学核医学分册)》 2002年第6期275-277,共3页
重离子以其特有的生物物理特性近年来引起肿瘤放疗领域的普遍关注。哺乳动物细胞体外辐射生物效应研究为重离子肿瘤放疗最优化提供了科学依据。这方面研究主要包括克隆细胞存活、细胞染色体畸变和细胞DNA损伤等。
关键词 生物效应 重离子辐射 细胞存活 染色体损伤 dna双链断裂 肿瘤放疗
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电离辐射致DNA双链断裂研究方法及统计模型 被引量:3
10
作者 周莉薇 陈晓明 +1 位作者 张建国 柳芳 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期321-325,共5页
DNA既是生命物质中信息的载体,也是辐射生物效应最主要的靶分子。电离辐射通过射线的直接作用和间接作用引起DNA分子的多类型损伤,其中DNA双链断裂(Double-strandbreaks,DSB)是辐射引起的各种生物效应中最重要的原初损伤之一,成为辐射... DNA既是生命物质中信息的载体,也是辐射生物效应最主要的靶分子。电离辐射通过射线的直接作用和间接作用引起DNA分子的多类型损伤,其中DNA双链断裂(Double-strandbreaks,DSB)是辐射引起的各种生物效应中最重要的原初损伤之一,成为辐射生物学研究的重点。目前DSB研究的主要方法包括拉曼光谱技术、原子力显微镜、单细胞凝胶电泳、脉冲场凝胶电泳、γH2AX分析技术、早熟染色体凝集等,研究DSB的统计模型包括随机断裂模型、Moment法、Tsallis熵模型、平均分子量法,在此均得到总结,最后探讨了DSB辐照热点的研究前景。 展开更多
关键词 dna双链断裂 双链断裂研究方法 双链断裂统计模型 双链断裂辐照热点
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木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂及同源重组修复的影响 被引量:2
11
作者 李冲慧 米阳 +4 位作者 任飞飞 孙向东 周潇潇 王万聪 夏兴洲 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2023年第4期385-391,共7页
目的探讨木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)及同源重组(homologous recombination,HR)修复的影响。方法采用流式细胞仪检测作用木犀草素后各组细胞内ROS水平变化及GFP阳性率;彗星实验检测木犀草素对DSBs... 目的探讨木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)及同源重组(homologous recombination,HR)修复的影响。方法采用流式细胞仪检测作用木犀草素后各组细胞内ROS水平变化及GFP阳性率;彗星实验检测木犀草素对DSBs的影响;Western blotting检测DNA损伤标志性蛋白γH2AX和HR修复蛋白Rad51的表达;免疫荧光检测DNA损伤修复相关蛋白表达的募集情况。结果木犀草素以剂量依赖性方式增加胃癌细胞内ROS含量;用I-Scel质粒转染DR-GFP后木犀草素处理组GFP阳性细胞比例明显少于未加木犀草素组;但彗星实验表明,木犀草素处理后人胃癌AGS细胞后增加彗星尾炬;经木犀草素处理后,胃癌细胞中DNA的γH2AX上调,修复关键蛋白Rad51的表达下调;免疫荧光结果表明,在木犀草素处理人胃癌AGS细胞后HR修复蛋白Rad51在DNA损伤位点的募集减少。结论木犀草素能够促进人胃癌细胞DSBs,并抑制其HR修复。 展开更多
关键词 木犀草素 dna损伤 dna双链断裂 同源重组修复 胃癌细胞
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Role of ubiquitination in meiotic recombination repair 被引量:4
12
作者 CUI Li & LI Wei State Key Laboratory of Reproductive Biology, Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2010年第4期447-454,共8页
Programmed and unprogrammed double-strand breaks (DSBs) often arise from such physiological requirements as meiotic recombination, and exogenous insults, such as ionizing radiation (IR). Due to deleterious impacts on ... Programmed and unprogrammed double-strand breaks (DSBs) often arise from such physiological requirements as meiotic recombination, and exogenous insults, such as ionizing radiation (IR). Due to deleterious impacts on genome stability, DSBs must be appropriately processed and repaired in a regulatory manner. Recent investigations have indicated that ubiquitination is a critical factor in DNA damage response and meiotic recombination repair. This review summarizes the effects of proteins and complexes associated with ubiquitination with regard to homologous recombination (HR)-dependent DSB repair. 展开更多
关键词 UBIQUITIN MEIOSIS HOMOLOGOUS recombination dna double-strand breaks
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非同源末端连接修复相关因子对DNA损伤修复调控及肿瘤治疗作用的研究进展 被引量:3
13
作者 李蔚蔚 孔金昕 +1 位作者 漆永梅 黄德军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期607-613,共7页
细胞在内源性或外源性因子的胁迫作用下会产生各种损伤,包括遗传物质DNA的双链断裂(DSB)。非同源末端连接(NHEJ)是哺乳动物细胞中DSB损伤修复的一种主要机制。NHEJ过程中一些主要因子如DNA依赖性蛋白激酶、DNA交联修复蛋白1C、X射线修... 细胞在内源性或外源性因子的胁迫作用下会产生各种损伤,包括遗传物质DNA的双链断裂(DSB)。非同源末端连接(NHEJ)是哺乳动物细胞中DSB损伤修复的一种主要机制。NHEJ过程中一些主要因子如DNA依赖性蛋白激酶、DNA交联修复蛋白1C、X射线修复交叉互补蛋白4/DNA连接酶Ⅳ和X射线修复交叉互补蛋白4类似因子对DNA损伤修复(DDR)具有重要的调控作用,其中任何一种因子的改变都会影响DDR的效率。此外,NHEJ相关因子与肿瘤发生息息相关。本文针对NHEJ相关因子调控DSB修复方面的研究作一简要综述,并对NHEJ修复相关因子在肿瘤治疗中的研究进行总结。 展开更多
关键词 dna依赖性蛋白激酶 dna双链断裂 dna断端接合修复 dna损伤修复
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53BP1与DNA双链断裂损伤修复 被引量:4
14
作者 江越菁 臧奕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1279-1285,共7页
DNA的精确复制和遗传对维持基因组稳定性有重要作用。DNA双链断裂损伤可能诱导细胞凋亡和染色质重排,在肿瘤的发生发展过程中发挥作用。53BP1是DNA双链断裂修复中的重要调节蛋白质之一,对调控损伤修复平衡和维持基因组稳定性起着重要作... DNA的精确复制和遗传对维持基因组稳定性有重要作用。DNA双链断裂损伤可能诱导细胞凋亡和染色质重排,在肿瘤的发生发展过程中发挥作用。53BP1是DNA双链断裂修复中的重要调节蛋白质之一,对调控损伤修复平衡和维持基因组稳定性起着重要作用。本文主要对53BP1的结构、生物学功能、信号通路、分子机制和翻译后修饰做一浅显的总结和展望,希望能为53BP1的深入研究提供一些理论基础。 展开更多
关键词 肿瘤抑癌基因p53结合蛋白1 dna双链断链 dna损伤修复
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植物DNA双链断裂损伤修复机制研究进展 被引量:4
15
作者 朱彩霞 古佳玉 +2 位作者 邵群 王晶 刘录祥 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第5期17-23,共7页
DNA双链断裂(DSBs)是细胞最严重的损伤形式之一。高等动植物中主要通过非同源末端连接(NHEJ)途径进行DNA双链断裂修复。该途径不依赖DNA同源性,由一些修复因子如:Ku蛋白异二聚体、DNA-PKcs、XRCC4和ligaseⅣ等,将断裂末端直接连接进行... DNA双链断裂(DSBs)是细胞最严重的损伤形式之一。高等动植物中主要通过非同源末端连接(NHEJ)途径进行DNA双链断裂修复。该途径不依赖DNA同源性,由一些修复因子如:Ku蛋白异二聚体、DNA-PKcs、XRCC4和ligaseⅣ等,将断裂末端直接连接进行修复。综述了植物DNA双链断裂损伤修复的主要途径及其相关基因研究的进展,探讨了植物DNA损伤修复研究中存在的问题与发展方向。 展开更多
关键词 dna双链断裂 损伤修复 非同源末端连接 KU蛋白 XRCC4
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脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂的研究 被引量:4
16
作者 黄叶全 孟柳燕 +1 位作者 乔玮玮 边专 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第3期235-239,共5页
目的:探讨低剂量条件下脂多糖诱导牙髓细胞DNA损伤方法,为研究脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂及DNA修复提供实验模型。方法:10μg/L脂多糖连续刺激牙髓细胞1、3、6次后,采取MTT及TUNEL分别检测其对牙髓细胞增殖及凋亡的作用;采用q-PCR... 目的:探讨低剂量条件下脂多糖诱导牙髓细胞DNA损伤方法,为研究脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂及DNA修复提供实验模型。方法:10μg/L脂多糖连续刺激牙髓细胞1、3、6次后,采取MTT及TUNEL分别检测其对牙髓细胞增殖及凋亡的作用;采用q-PCR及免疫印迹检测γ-H2A.X的mRNA及蛋白水平的表达;使用免疫荧光及免疫组化法观测γ-H2A.X在体内、外牙髓细胞的表达。结果:与对照组相比,10μg/L脂多糖连续刺激对牙髓细胞增殖及凋亡均无显著性差异;脂多糖连续刺激6次后细胞免疫荧光显示在细胞核检测到γ-H2A.X的阳性表达,且蛋白及mRNA水平的表达较对照组有显著性增加(P<0.05);免疫组化结果表明在脂多糖诱导4、6、8d后,γ-H2A.X在大鼠牙髓组织较对照组表达水平显著升高(P<0.05)。结论:低剂量脂多糖连续刺激可诱导牙髓细胞产生DNA双链断裂。 展开更多
关键词 脂多糖 牙髓细胞 dna双链断裂 γ-H2A.X
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H_2O_2-Fe^(3+)所致人淋巴细胞DNA双链断裂损伤 被引量:3
17
作者 隋建丽 吕星 +1 位作者 周平坤 方允中 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期59-62,共4页
采用脉冲电场凝胶电泳法检测H2O2-Fe(3+)体系产生的OH对人淋巴细胞DNA的双链断裂损伤.H2O2-Fe(3+)浓度与DNA双链断裂呈明显量效关系;随OH作用时间延长,细胞DNA双链断裂加重;过氧化氢酶对OH损... 采用脉冲电场凝胶电泳法检测H2O2-Fe(3+)体系产生的OH对人淋巴细胞DNA的双链断裂损伤.H2O2-Fe(3+)浓度与DNA双链断裂呈明显量效关系;随OH作用时间延长,细胞DNA双链断裂加重;过氧化氢酶对OH损伤有明显抑制作用.脉冲电场凝胶电泳法可检测到的H2O2和FeCl3引起细胞DNA双链断裂的最低浓度为0.3mmol/L和6μmol/L. 展开更多
关键词 淋巴细胞 dna双链断裂 过氧化氢 铁离子
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γ-H2AX分析用于检测电离辐射致HepG2细胞DNA双链断裂的研究 被引量:4
18
作者 任精华 林菊生 +2 位作者 刘瑶 陈琼 董旭昇 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期450-454,共5页
目的 应用γ-H2AX分析检测电离辐射导致肝癌细胞株HepG2基因组DNA双链断裂的情况,并检测在不同细胞周期时相中的表达差异,从而了解不同时相HepG2细胞株的辐射敏感性。方法利用胸腺嘧啶核苷(TdR)阻断HepG2细胞于G1期末,于不同时间... 目的 应用γ-H2AX分析检测电离辐射导致肝癌细胞株HepG2基因组DNA双链断裂的情况,并检测在不同细胞周期时相中的表达差异,从而了解不同时相HepG2细胞株的辐射敏感性。方法利用胸腺嘧啶核苷(TdR)阻断HepG2细胞于G1期末,于不同时间点分别得到同步化的S期和G2/M期细胞,用60Coγ射线照射细胞,建立DNA双链断裂模型,采用免疫荧光法和Westemblotting检测γ-H2AX的表达。结果TdR阻断后继续培养至34和40h,分别得到了较高同步化程度的S期和G2/M期HepG2细胞;受照后的HepG2细胞中Y-H2AX表达较照射前显著增高,处于S期的细胞γ-H2AX表达增加更为突出。结论不同周期时相的HepG2细胞受照后均检测出不同程度的DNA双链断裂,其中S期细胞尤为敏感。γ-H2AX对DNA双链断裂快速敏感的反应使γ-H2AX分析在检测早期DNA双链损伤中具有广泛的廊用前景。 展开更多
关键词 Γ-H2AX dna双链断裂 电离辐射
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用脉冲电场凝胶电泳研究γ射线诱导的DNA双链断裂 被引量:4
19
作者 臧黎慧 魏志勇 +1 位作者 李明 童建 《中国血液流变学杂志》 CAS 2005年第2期193-196,共4页
用不同剂量的60Coγ射线照射GM0639细胞,利用脉冲电场电泳仪测量DNA双链断裂后的断裂片段分布.结果表明在20~100Gy的照射剂量下, γ射线引起的DNA断裂片段释放的比例(FAR)随照射剂量的增加而增加,在剂量比较大时释放的比例(FAR)趋于饱... 用不同剂量的60Coγ射线照射GM0639细胞,利用脉冲电场电泳仪测量DNA双链断裂后的断裂片段分布.结果表明在20~100Gy的照射剂量下, γ射线引起的DNA断裂片段释放的比例(FAR)随照射剂量的增加而增加,在剂量比较大时释放的比例(FAR)趋于饱和, DNA断裂片段的平均长度随照射剂量的增加而减小,60Coγ射线对GM0639细胞的断裂产额为(6.00±0.6)×10-9Dsb/Bp/Gy. 展开更多
关键词 dna双链断裂 初始损伤 DSB产额 脉冲电场凝胶电泳
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AGGF1在结直肠癌细胞DNA损伤修复及化疗敏感性中的作用 被引量:4
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作者 王楠 徐美兰 廖淑婷 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期861-866,共6页
目的研究血管生成因子AGGF1在人结直肠癌细胞DNA损伤修复及化疗抵抗中的作用及机制。方法顺铂诱导结直肠癌细胞株HCT116细胞DNA损伤模型,运用siAGGF1及siNC转染结直肠癌细胞干扰AFFF1的表达。Western blot实验检测AGGF1、γH2AX基因表... 目的研究血管生成因子AGGF1在人结直肠癌细胞DNA损伤修复及化疗抵抗中的作用及机制。方法顺铂诱导结直肠癌细胞株HCT116细胞DNA损伤模型,运用siAGGF1及siNC转染结直肠癌细胞干扰AFFF1的表达。Western blot实验检测AGGF1、γH2AX基因表达水平,免疫荧光法检测顺铂诱导HCT116细胞DNA损伤(双链断裂)后,γH2AX和AGGF1在损伤位点的募集情况;MTS法检测损伤细胞的增殖情况;免疫组织化学方法检测结直肠癌及癌旁正常组织中AGGF1的表达水平。结果Western blot结果显示顺铂处理HCT116细胞明显下调AGGF1表达,干扰AGGF1的表达抑制了γH2AX和NBS1;免疫荧光实验表明AGGF1和γH2AX共定位,细胞增殖实验表明结直肠癌细胞对化疗的敏感性增加(P<0.01);AGGF1在结直肠癌组织中表达高于相应癌旁组织(P<0.01),表明其可能与肿瘤的恶性表型相关。结论下调AGGF1基因可抑制结直肠癌细胞的DNA损伤修复,提高其对化疗的敏感性,机制上可能与NBS1磷酸化相关。 展开更多
关键词 AGGF1 结直肠癌 dna双链断裂 顺铂
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