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RAPD应用于遗传多样性和系统学研究中的问题 被引量:317
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作者 汪小全 邹喻苹 +2 位作者 张大明 张志宪 洪德元 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第12期954-962,共9页
在研究银杉(Cathaya argyrophylla)的遗传多样性时,对RAPD 产物的影响因素进行了大量的实验探索,结果表明:逐级纯化的DNA 模板的RAPD结果一致, 因而模板制备过程中的很多纯化步骤是不必要的; RN... 在研究银杉(Cathaya argyrophylla)的遗传多样性时,对RAPD 产物的影响因素进行了大量的实验探索,结果表明:逐级纯化的DNA 模板的RAPD结果一致, 因而模板制备过程中的很多纯化步骤是不必要的; RNA 对扩增产物无影响; 模板浓度在一个相当大的范围内不影响扩增结果; 从干叶和鲜叶中提取的DNA 可获得一致的扩增产物; 从而证明RAPD 产物具有很好的重复性。进而讨论了RAPD产物分析及数据分析中的一些问题。通过对升麻属(Cim icifuga) 5 种、类叶升麻(Actaea asiatica)及松潘乌头(Aconitum sungpanense)的RAPD 结果分析,认为RAPD 方法可用于种间乃至近缘属间的系统学研究, 展开更多
关键词 植物 随机扩增多态 dna 遗传多样性 系统学
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慢性乙型肝炎防治指南 被引量:466
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作者 中华医学会肝病学分会 中华医学会感染病学分会 《传染病信息》 2005年第z1期1-12,共12页
  慢性乙型肝炎是我国常见的慢性传染病之一,严重危害人民健康.为进一步规范慢性乙型肝炎的预防、诊断和治疗,中华医学会肝病学分会和中华医学会感染病学分会组织国内有关专家,在参考国内外最新研究成果的基础上,按照循证医学的原则,...   慢性乙型肝炎是我国常见的慢性传染病之一,严重危害人民健康.为进一步规范慢性乙型肝炎的预防、诊断和治疗,中华医学会肝病学分会和中华医学会感染病学分会组织国内有关专家,在参考国内外最新研究成果的基础上,按照循证医学的原则,制订了<慢性乙型肝炎防治指南>(以下简称<指南>).其中推荐意见所依据的证据共分为3个级别5个等次[1],文中以括号内斜体罗马数字表示.…… 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎防治指南 HBSAG dna HBEAG 拉米夫定耐药 乙型肝炎病毒 戴恩颗粒 HBV 慢性乙型肝炎患者
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利用氯化苄提取适于分子生物学分析的真菌 DNA 被引量:306
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作者 朱衡 瞿峰 朱立煌 《真菌学报》 CSCD 北大核心 1994年第1期34-40,共7页
随着生物技术的飞速发展,更加需要简便、快速地提取高质量的DNA。以往报导的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破坏细胞壁和膜的方式,从而导致繁琐、复杂和费时的提取过程。根据氯化苄在弱碱条件下与多糖上的羟基反应形成醚从而... 随着生物技术的飞速发展,更加需要简便、快速地提取高质量的DNA。以往报导的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破坏细胞壁和膜的方式,从而导致繁琐、复杂和费时的提取过程。根据氯化苄在弱碱条件下与多糖上的羟基反应形成醚从而使多糖长链断裂的事实,我们发展了一种全新的真菌DNA提取方法,该方法使氯化苄在pH9.0时与细胞壁多糖作用,破坏细胞壁,基因组DNA因而得以从细胞中释放出来。新方法具有简便、快速、价廉的优点,得到的DNA蛋白质污染少、质量较高、产量稳定。对该法提取的DNA作进一步的分子生物学分析,如限制性内切酶酶解、RFLP分析、RAPD扩增,都取得了令人满意的结果。利用氯化苄提取真菌DNA的研究,迄今在国际、国内均尚未见报道。 展开更多
关键词 dna 提取 细胞壁 氯化苄 真菌
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抗乙型病毒性肝炎新药——阿德福韦酯 被引量:266
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作者 茅益民 曾民德 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2004年第1期61-63,共3页
阿德福韦酯是由美国Gilead Science公司开发的新型核苷类抗乙型病毒性肝炎药物,已在国外进行了Ⅱ、Ⅲ期临床试验.国外的临床研究资料表明,阿德福韦能有效地抑制HBV DNA的复制,使HBV DNA滴度迅速降低,而且在出现拉米夫定耐药的患者中阿... 阿德福韦酯是由美国Gilead Science公司开发的新型核苷类抗乙型病毒性肝炎药物,已在国外进行了Ⅱ、Ⅲ期临床试验.国外的临床研究资料表明,阿德福韦能有效地抑制HBV DNA的复制,使HBV DNA滴度迅速降低,而且在出现拉米夫定耐药的患者中阿德福韦能继续有效地抑制变异株.我国药品监督管理局于2000年12月批准该药在中国进行临床试验,目前,Ⅰ期临床试验已结束,Ⅱ期临床试验也已在2002年12月正式启动. 展开更多
关键词 乙型病毒性肝炎 阿德福韦酯 药物 HBV dna 动力学
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银杉遗传多样性的RAPD分析 被引量:129
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作者 汪小全 邹喻苹 +2 位作者 张大明 洪德元 刘正宇 《中国科学(C辑)》 CSCD 1996年第5期436-441,共6页
用随机扩增多态 DNA(RAPD)标记方法对银杉(Chthaya argyrophylla)75个个体(采自湖南和四川)进行了遗传多样性检测. 21个 10 mer -的寡核苷酸引物共检测106个位点,其中多态位点34个,占32%.相对于其它裸子植物,银杉的遗传变异水平偏低.... 用随机扩增多态 DNA(RAPD)标记方法对银杉(Chthaya argyrophylla)75个个体(采自湖南和四川)进行了遗传多样性检测. 21个 10 mer -的寡核苷酸引物共检测106个位点,其中多态位点34个,占32%.相对于其它裸子植物,银杉的遗传变异水平偏低.湖南居群和四川居群的多态位点百分率分别为 18%和 25%,两居群间的遗传变异量占总变异量的 7. 99%,这一数值高于裸子植物居群间遗传差异的平均值(6.8%).同时,发现遗传变异水平的高低与生境的复杂程度有一定的相关性.由于点突变和随机遗传漂变,银杉的部分亚居群间有较强烈的分化,亚居群间的遗传差异最高可达 16. 23%.此外,提出了度量遗传多样性水平的分化指数概念及其计算方法,并指出低水平的遗传多样性可能是银杉濒危的原因之一. 展开更多
关键词 银杉 随机扩增多态 dna 遗传多样性 RAPD
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慢性乙型肝炎诊断标准(2015年版) 被引量:232
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作者 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2015年第6期384-384,I0001,I0002,共3页
1.临床诊断 既往有乙型肝炎病史或HBs Ag阳性超过6个月,现HBs Ag和(或)HBV DNA仍为阳性者,可诊断为慢性HBV感染。根据HBV感染者的血清学、病毒学、生物化学试验及其他临床和辅助检查结果,可将慢性HBV感染分为:
关键词 乙型肝炎 肝组织学检查 免疫耐受期 携带者 肝纤维化 dna 炎症坏死 纤维间隔 肝细胞癌 辅助检查结果
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慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版) 被引量:231
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作者 侯金林 魏来 《肝脏》 2015年第12期915-932,共18页
本指南为规范慢性乙型肝炎(CHB)的预防、诊断和抗病毒治疗而制订,涉及CHB其他治疗方法和策略请参阅相关的指南和共识。中华医学会肝病学分会和感染病学分会于2005年组织国内有关专家制订了《慢性乙型肝炎防治指南》(第1版),并于201... 本指南为规范慢性乙型肝炎(CHB)的预防、诊断和抗病毒治疗而制订,涉及CHB其他治疗方法和策略请参阅相关的指南和共识。中华医学会肝病学分会和感染病学分会于2005年组织国内有关专家制订了《慢性乙型肝炎防治指南》(第1版),并于2010年第1次修订。近5年来,国内外有关CHB的基础和临床研究取得很大进展,为此我们对本指南再次修订。 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 感染病学分会 血清学转换 治疗应用 抗病毒药物 病毒学应答 dna 肝纤维化 病毒治疗 其他治疗方法
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AFLP──一种DNA分子标记新技术 被引量:98
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作者 翁跃进 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期29-31,共3页
关键词 dna 分子标记 AFLP
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改良CTAB法用于多年生植物组织基因组DNA的大量提取 被引量:183
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作者 陈昆松 李方 +2 位作者 徐昌杰 张上隆 傅承新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期529-531,共3页
根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中β 巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点:(1)获得的... 根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中β 巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点:(1)获得的DNA质量良好,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰;(2)用获得的DNA进行Southern杂交,可得到理想的杂交信号,可满足相关的分子研究要求;(3)操作简便。 展开更多
关键词 猕猴桃 dna 提取 SOUTHERN杂交
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高危型人乳头状瘤病毒DNA检测与细胞学联合检查对子宫颈癌前病变筛查的研究 被引量:168
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作者 钱德英 岑坚敏 +5 位作者 王丁 曾仁海 林爱华 舒焰红 洪淡华 黄志宏 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期34-37,共4页
目的评价高危型人乳头状瘤病毒(HPV)DNA检测联合宫颈细胞学检查对宫颈癌前病变筛查的效果。方法2003年1月至2004年6月,对广东省人民医院妇科门诊5210名妇女进行宫颈癌前病变筛查,采用第二代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)检测高危型HPV DNA联合细... 目的评价高危型人乳头状瘤病毒(HPV)DNA检测联合宫颈细胞学检查对宫颈癌前病变筛查的效果。方法2003年1月至2004年6月,对广东省人民医院妇科门诊5210名妇女进行宫颈癌前病变筛查,采用第二代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)检测高危型HPV DNA联合细胞学检查,同时进行阴道镜检查,并以宫颈活检的组织病理学结果为确诊标准。结果受检者平均年龄(34±9)岁,筛查并最后经病理诊断为HPV感染890例,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级83例,CINⅡ73例,CINⅢ80例,宫颈浸润癌54例,子宫内膜癌5例,阴道上皮内瘤样病变1例,宫颈结核1例。以组织病理学为确诊标准,高危型HPV DNA检测CINⅡ、Ⅲ的敏感度是92·22%,特异度是74·71%,阳性预测值5·19%,阴性预测值99·84%。宫颈细胞学筛查CINⅡ、Ⅲ,以未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)为分界点的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是90·00%、80·34%、11·94%和99·63%;以低度鳞状上皮内病变(LSIL)为分界点的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是70·13%、91·58%、11·11%和99·51%;以高度鳞状上皮内病变(HSIL)为分界点的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是48·05%、98·46%、31·90%和99·21%。高危型HPV DNA检测联合细胞学检查筛查CINⅡ、Ⅲ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是98·70%、73·08%、5·21%和100·00%。高危型HPV DNA在不同宫颈病变中的阳性率分别是:宫颈癌85·2%(46/54),CINⅢ92·5%(74/80),CINⅡ86·3%(63/73)和CINⅠ45·8%(38/83)。结论高危型HPV DNA检测在宫颈癌前病变的筛查中有很高的敏感度和阴性预测值,高危型HPV DNA检测联合细胞学检查可使敏感度和阴性预测值有提高,但特异度未能提高。 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 dna 病毒 活组织检查 阴道镜检查 宫颈肿瘤 宫颈 上皮内瘤变
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随机扩增多态DNA影响因素的研究 被引量:101
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作者 陈永久 张亚平 《Zoological Research》 CAS CSCD 1997年第2期221-227,共7页
随机扩增多态DNA(RAPD)分析受诸多因素的影响,我们发现不同厂家制造的PCR扩增仪,不同厂家出品的TaqDNA聚合酶和PCR缓冲液,RAPD反应体系中的引物浓度,Mg2+浓度,dNTP浓度,BSA(牛血清白蛋白)... 随机扩增多态DNA(RAPD)分析受诸多因素的影响,我们发现不同厂家制造的PCR扩增仪,不同厂家出品的TaqDNA聚合酶和PCR缓冲液,RAPD反应体系中的引物浓度,Mg2+浓度,dNTP浓度,BSA(牛血清白蛋白)和明胶,以及模板DNA的量等均可能对RAPD结果有不同程度的影响。为了使RAPD结果在不同实验室间具有重复性和可比性,提高RAPD数据的科学价值,我们建议在RAPD分析过程和文章写作中应规范化。方法部分,除一般写明的引物浓度、TaqDNA聚合酶单位数、dNTP浓度、每一次PCR反应的循环条件和循环数等外,还应注明PCR仪的制造厂家及型号、TaqDNA聚合酶生产厂家、PCR缓冲液的成分、Mg2+浓度。 展开更多
关键词 dna 检测 RAPD 影响因素
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DNA与其靶向分子相互作用研究进展 被引量:94
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作者 张蓉颖 庞代文 蔡汝秀 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第8期1210-1217,共8页
DNA与其靶向分子相互作用的研究不仅对阐述一些抗肿瘤、抗病毒药物及致癌物的作用机理 ,而且对进一步指导人工核酸酶的合成及 DNA高级结构研究等方面的工作都具有重要意义 .本文着重评述了近年来不同结构类型的 DNA靶向分子与 DNA相互... DNA与其靶向分子相互作用的研究不仅对阐述一些抗肿瘤、抗病毒药物及致癌物的作用机理 ,而且对进一步指导人工核酸酶的合成及 DNA高级结构研究等方面的工作都具有重要意义 .本文着重评述了近年来不同结构类型的 DNA靶向分子与 DNA相互作用研究方面的进展 . 展开更多
关键词 dna dna靶向分子 相互作用 抗生素
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植被对土壤微生物群落结构的影响 被引量:116
13
作者 夏北成 《应用生态学报》 CAS CSCD 1998年第3期296-300,共5页
研究了不同土壤及覆盖其上的植被与土壤微生物群落结构和多样性的关系.植被使土壤中的微生物种类更丰富,群落多样性更高.表层土壤微生物群落中没有明显的优势种群,种间竞争作用较弱.并介绍了研究土壤微生物群落的分子生物学方法.
关键词 土壤微生物群落 群落多样性 dna 提取 克隆
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实时荧光定量PCR技术的原理及其应用研究进展 被引量:134
14
作者 赵焕英 包金风 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期492-497,共6页
关键词 实时荧光定量PCR 荧光标记探针 dna 结合染料
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一种改进的动物线粒体DNA提取方法 被引量:118
15
作者 王文 施立明 《Zoological Research》 CAS CSCD 1993年第2期197-198,共2页
线粒体DNA(mtDNA)已被广泛用于动物群体遗传学和进化生物学的研究,并取得了许多有意义的结果。有效的mtDNA提取方法无疑是开展这方面研究的前提。关于动物mtDNA的提取方法,国内外已有不少报导。概括起来,可分为:1)氯化铯超速离心法,2)... 线粒体DNA(mtDNA)已被广泛用于动物群体遗传学和进化生物学的研究,并取得了许多有意义的结果。有效的mtDNA提取方法无疑是开展这方面研究的前提。关于动物mtDNA的提取方法,国内外已有不少报导。概括起来,可分为:1)氯化铯超速离心法,2)柱层析法,3)DNase法,4)碱变性法。本文报道了一种改进的碱变性提取法,与其它方法相比,具有应用范围广、简便、经济等优点。 展开更多
关键词 MTdna 碱变性提取法 线粒体 dna
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血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系 被引量:143
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作者 徐蓓 姚光弼 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期117-120,共4页
用抗S和抗前S1单抗的双抗体夹心ELISA法检测150例慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)携带者和健康人血清中的HBV前S1抗原,其结果和HBVDNA聚合酶链反应(PCR)、乙型肝炎血清标志的检测结... 用抗S和抗前S1单抗的双抗体夹心ELISA法检测150例慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)携带者和健康人血清中的HBV前S1抗原,其结果和HBVDNA聚合酶链反应(PCR)、乙型肝炎血清标志的检测结果进行比较。结果表明:前S1抗原在乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性组中的检出率和相对滴度显著高于HBeAg阴性组(P<0.01);在HBeAg阴性组中,抗-HBe阴性人群前S1抗原的检出率和相对滴度也显著高于抗-HBe阳性人群(P<0.01)。前S1抗原和HBVDNA检测结果的符合率达80%,两者检出率的相关系数r=0.9826(P<0.01)。结论:血清前S1抗原和乙型肝炎病毒的存在关系密切。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 dna 病毒 病毒复制 病毒抗原
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长江中下游鲢鳙草青四大家鱼线粒体DNA多样性分析 被引量:111
17
作者 李思发 吕国庆 L.贝纳切兹 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期82-93,共12页
对长江中、下游湖北石首、江西九江、安徽芜湖三江段鲢、鳙、草鱼、青鱼天然群体共365尾鱼的线粒体DNA(mtDNA)的ND5/6、Cytb基因和DLoop区片段进行了限制性内切酶酶切片段长度多态(RFLP)分析。结果表... 对长江中、下游湖北石首、江西九江、安徽芜湖三江段鲢、鳙、草鱼、青鱼天然群体共365尾鱼的线粒体DNA(mtDNA)的ND5/6、Cytb基因和DLoop区片段进行了限制性内切酶酶切片段长度多态(RFLP)分析。结果表明:(1)长江中、下游鲢、鳙和青鱼的遗传多样性丰富,草鱼不甚丰富。发现鲢、鳙和青鱼的mtDNA基因型分别有28、19、27种,草鱼mtDNA基因型仅见7种;鲢、鳙和青鱼的基因型多样性指数为0681、0583、0890,草鱼的基因型多样性指数为0231。(2)鲢群体存在显著的遗传差异和基因型分布有明显的地域性;鳙群体也有显著差异,但基因型分布无区域性;青鱼群体有一些遗传差异,但基因型未见有区域分布;草鱼群体无显著差异,基因型分布亦无区域性。 展开更多
关键词 长江 草鱼 青鱼 dna 多样性 线粒体
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Construction of a genetic linkage map for cotton based on SRAP 被引量:111
18
作者 LIN Zhongxu, ZHANG Xianlong, NIE Yichun, HE Daohua & WU Maoqing National Key Laboratory of Crop Genetic Improvement, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第19期2063-2067,共5页
A genetic linkage map of cotton was constructed with a newly developed molecular marker-SRAP (sequence-related amplified polymorphism) using a population consisting of 129 F2 individuals derived from the interspecific... A genetic linkage map of cotton was constructed with a newly developed molecular marker-SRAP (sequence-related amplified polymorphism) using a population consisting of 129 F2 individuals derived from the interspecific cross of Handan208 Pima90. A total of 136 primer pairs were used to detect polymorphisms between the two parents and 76 primer pairs with better polymorphisms were picked out to analyze the F2 population. 285 polymorphic bands were generated in total with an average of 3.75 polymorphic bands per pair of primers. The primer pair showing most polymorphic bands was the combination of me3 and em2, which produced 13 polymorphic bands. The 285 loci were used to construct linkage map with MAPMAKER/EXP3.0 and 237 loci were mapped at a LOD≥3.0 on 39 linkage groups. The total length of the map is 3030.7 cM, covering 65.4% of the whole cotton genome, and the average distance between adjacent markers is 12.79 cM. All the markers are distributed evenly among the linkage groups without clustering of loci. This is the first linkage map of cotton comprised of SRAP markers. 展开更多
关键词 SRAP 棉花 遗传连锁图 序列相关扩大多态性 分子标记 dna
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几种木本果树DNA的有效提取 被引量:113
19
作者 程运江 伊华林 +2 位作者 庞晓明 郭文武 邓秀新 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期481-483,共3页
关键词 dna 提取 水饱和乙醚 多糖 木本果树
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定量聚合酶链反应检测血清中HBV DNA及其临床应用 被引量:130
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作者 张复春 吴婉芬 +3 位作者 董惠卿 蔡晓莉 魏绍静 冼超 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期24-27,共4页
为探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因含量与干扰素治疗效果的关系,采用信号引物能量转移定量PCR方法,检测了25例慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者干扰素治疗前后的血清HBVDNA含量。结量显示,慢乙肝血清HBV基因含量范围在10... 为探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因含量与干扰素治疗效果的关系,采用信号引物能量转移定量PCR方法,检测了25例慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者干扰素治疗前后的血清HBVDNA含量。结量显示,慢乙肝血清HBV基因含量范围在104至1011拷贝/毫升之间;干扰素完全反应组治疗前血清HBVDNA含量(106.13±2.4)显著低于(P<0.01)部分反应(107.84±3.3)和无反应组(106.68±4.8),表明血清HBVDNA含量与干扰素治疗效果有关,而与ALT水平关系不明8显。研究结果提示定量检测HBVDNA是预测和评价干扰素治疗效果的重要指标之一。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 dna 乙型肝炎 干扰素 PCR
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