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miR-5188在肝癌细胞中的作用及网络调控机制研究
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作者 全养雅 黎慧娟 +1 位作者 陈仕 周艳 《国际消化病杂志》 CAS 2023年第6期394-400,共7页
目的探究miR-5188在肝癌细胞中的作用及网络调控机制。方法过表达或敲低miR-5188表达后,检测肝癌细胞HepG2的增殖能力。利用miRNA靶基因预测数据库miRDB获取miR-5188潜在的靶基因,使用小干扰RNA(siRNA)敲低HepG2细胞中的上述靶基因后检... 目的探究miR-5188在肝癌细胞中的作用及网络调控机制。方法过表达或敲低miR-5188表达后,检测肝癌细胞HepG2的增殖能力。利用miRNA靶基因预测数据库miRDB获取miR-5188潜在的靶基因,使用小干扰RNA(siRNA)敲低HepG2细胞中的上述靶基因后检测细胞增殖能力。采用实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞LO2和HepG2细胞中miR-5188、pre-miR-5188和pri-miR-5188的表达水平,并分析长链非编码RNA NEAT1(下文简称NEAT1)、NONO/PSF复合体对pri-miR-5188的影响。结果过表达miR-5188后,HepG2细胞的增殖能力增强;敲低miR-5188表达后,HepG2细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均<0.05)。敲低DIDO1表达后,HepG2细胞的增殖能力增强;过表达DIDO1后,HepG2细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均<0.05)。过表达miR-5188后,HepG2细胞中DIDO1的表达水平降低;敲低miR-5188表达后,HepG2细胞中DIDO1的表达水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-5188靶向DIDO1 mRNA的3'非翻译区(3'-UTR)。与LO2细胞相比,HepG2细胞中miR-5188和pre-miR-5188的表达水平均显著升高,而pri-miR-5188的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与LO2细胞相比,HepG2细胞中NEAT1的表达水平显著升高(P<0.05),而NONO和PSF的表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。敲低NEAT1、NONO或PSF表达后,HepG2细胞中pri-miR-5188的表达水平均显著升高(P均<0.05)。敲除NEAT1后,HepG2细胞中pri-miR-5188的表达水平升高,NONO与PSF的相互作用减弱,并且NONO/PSF与pri-miR-5188的结合减少。结论HepG2细胞中NEAT1的表达水平升高,提高了NONO/PSF复合体对pri-miR-5188的加工水平,增强了miR-5188/DIDO1轴对HepG2细胞增殖能力的正向作用。 展开更多
关键词 miR-5188 肝细胞癌 dido1 NEAT1 pri-miRNA
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