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北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌 被引量:38
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作者 王辉 刘颖梅 +2 位作者 王清涛 孙宏莉 陈民钧 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期419-422,共4页
目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦... 目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性,并用碱裂解法提取质粒;采用多重聚合酶链式反应(multiplexpolymerasechainreaction ,MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsedfieldgelelectro phoresis,PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果 北京两家医院ESBL中质粒型AmpC酶的发生率,大肠埃希菌分别为0和2 % ,肺炎克雷伯菌则分别为9.7%和17.1%。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA -1型质粒AmpC酶,同时也产CTX -3型(6株)或CTX- M- 14 (1株)或SHV -12 (3株)型ESBL。10株中,3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33~36kb的大质粒,未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论 北京地区发现同时产DHA -1质粒AmpC型及CTX- M型ESBL的肺炎克雷伯菌,它们来自不同的克隆。 展开更多
关键词 北京 dha-1 质粒AmpC型 CTX—M型 超广谱Β-内酰胺酶 肺炎克雷伯菌
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肺炎克雷伯菌DHA-1型质粒AmpC酶全编码基因克隆、表达及序列分析 被引量:4
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作者 多丽波 刘晶 +2 位作者 杨东晓 王孟滨 周虹 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期683-686,共4页
目的以我院临床分离的肺炎克雷伯菌KP1为研究对象,对其所产生的质粒AmpC酶编码基因的序列进行研究。方法采用聚合酶链反应(PCR),用DHA1型AmpC酶引物扩增KP1接合子中AmpC酶全编码基因,并克隆到pUC118载体中进行表达,对PCR产物进行测序,... 目的以我院临床分离的肺炎克雷伯菌KP1为研究对象,对其所产生的质粒AmpC酶编码基因的序列进行研究。方法采用聚合酶链反应(PCR),用DHA1型AmpC酶引物扩增KP1接合子中AmpC酶全编码基因,并克隆到pUC118载体中进行表达,对PCR产物进行测序,分析其基因型别。结果肺炎克雷伯菌KP1菌株的转移接合子所含有的质粒AmpC酶为DHA型,编码基因序列与GenBank中DHA1编码基因序列的同源性为100%。结论哈尔滨地区临床分离肺炎克雷伯菌有可转移性DHA1型AmpC酶的存在。 展开更多
关键词 质粒 dha-1 AMPC酶 序列分析 肺炎克雷伯菌 质粒AMPC酶 编码基因 基因克隆 1 聚合酶链反应(PCR)
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大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布 被引量:4
3
作者 李轶 周绪华 冯羡菊 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第8期595-597,共3页
目的了解河南地区大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因特征。方法对380株大肠埃希菌进行AmpC酶表型筛选,对筛选阳性株进行多重聚合酶链反应(PCR)及型特异PCR、克隆、测序;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点;接合实验验证质... 目的了解河南地区大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因特征。方法对380株大肠埃希菌进行AmpC酶表型筛选,对筛选阳性株进行多重聚合酶链反应(PCR)及型特异PCR、克隆、测序;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点;接合实验验证质粒传递性;肠杆菌科基因组内重复一致序列(ERIC-2)PCR检测同源性。结果380株大肠埃希菌中2.1%(8株)的细菌产AmpC酶,经测序证实均为DHA-1型质粒AmpC酶基因,ERIC-2 PCR结果显示质粒AmpC酶主要以非克隆传播为主。结论河南地区发现DHA-1型质粒AmpC酶以非克隆传播为主。 展开更多
关键词 dha-1 质粒 AMPC酶 大肠埃希菌
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DHA-1型质粒AmpC酶临床回顾研究 被引量:2
4
作者 李卿 蒋燕群 +3 位作者 李轶 汤瑾 王坚镪 庄亦辉 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第3期212-215,共4页
目的调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学。方法收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)... 目的调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学。方法收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)扩增DHA结构基因,用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析同源性,测定其对药物的敏感性。结果高龄、使用免疫抑制剂、外伤手术史等均为风险因素;三代头孢治疗失败率为86.9%(头孢他啶88.9%,头孢噻肟60%和头孢哌酮100%);复方制剂(β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂)为71.4%;碳氢酶烯类为10%;喹诺酮类为70%。DHA群测序确定为DHA-1型;RAPD显示科室内及科室间存在克隆传播。结论我院DHA-1型质粒AmpC酶菌株感染患者抗生素治疗失败率较高;不同科室分离的菌株存在一定的同源性。 展开更多
关键词 质粒头孢菌素 Β-内酰胺酶 dha-1 临床回顾研究
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肺炎克雷伯菌中DHA-1型质粒AmpC酶的流行分布 被引量:1
5
作者 杨天平 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第2期128-130,共3页
目的了解我院肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的流行分布及其基因型和耐药特征。方法用纸片扩散法对2003至2005年连续不重复的487株肺炎克雷伯菌进行产11pCp AmpC酶的筛选,对筛选阳性的细菌分别进行三维试验、多重聚合... 目的了解我院肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的流行分布及其基因型和耐药特征。方法用纸片扩散法对2003至2005年连续不重复的487株肺炎克雷伯菌进行产11pCp AmpC酶的筛选,对筛选阳性的细菌分别进行三维试验、多重聚合酶链反应(PCR)、型特异引物PCR及测序,以确定质粒AmpC酶的基因型,并对产质粒AmpC酶细菌进行药物敏感性实验和美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认检测。结果487株肺炎克雷伯菌中,70株(14.4%)AmpC酶纸片筛选试验阳性(头孢西丁抑菌圈直径≤18 mm);22株(4.5%)三维试验阳性;21株(4.3%)细菌多重PCR阳性,经测序均为DHA-1型质粒AmpC酶,其中12株确认产ESBLs。2003年的质粒AmpC酶阳性率仅为1.3%,而2005年为6.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论我院肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶为DHA-1型,发生率为4.3%,且有逐年上升趋势。 展开更多
关键词 质粒 头孢菌素β-内酰胺酶 dha-1 肺炎克雷伯菌
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Escherichia coli Producing CTX-M and DHA-1 Beta-lactamases in Farm Animals in Chongqing City of China
6
作者 WU Jun-wei ZHANG Zhen-zhen WANG Kai-yu 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期97-101,共5页
Aim of this study was to investigate the genotypic distribution of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) and AmpC enzymes among Escherichia coli isolated from farm animals in Chongqing City. 326 E.coli isolates were... Aim of this study was to investigate the genotypic distribution of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) and AmpC enzymes among Escherichia coli isolated from farm animals in Chongqing City. 326 E.coli isolates were obtained from piglets,cattle and chickens.In these isolates,19 ESBLs and 6 AmpC-producing E.coli isolates were detected by preliminary screening and phenotypic identification, and polymerase chain reaction and sequence analysis methods were used to detect ESBLs and AmpCβ-lactamases genes.The results showed that the frequencies of TEM,CTX-M,DHA-1 and CMY-2 genes were 2.15%,5.21%,0.61%and 0.61%,respectively,in E.coli of animal origin in the Chongqing area,and 5 E.coli isolates were found to carry two kinds of genotype.The DHA-1 gene was detected for the first time in a veterinary clinic in China;its GenBank accession number is FJ386455.This study indicated that TEM and CTX-M genes were the predominant genotypes in Chongqing,and the majority of ESBLs and AmpC-producing E.coli isolates were multi-resistant to antibiotics,so they deserve particular attention in veterinary clinics. 展开更多
关键词 Escherichia coli farm animals CTX-M dha-1 China
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全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究 被引量:31
7
作者 孙宏莉 宁永忠 +2 位作者 廖康 王辉 朱任媛 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第5期323-329,共7页
目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61... 目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。 展开更多
关键词 超广谱Β内酰胺酶 质粒型AMPC酶 CTX-M-9组酶 dha-1型酶
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铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶的检测及耐药性分析 被引量:9
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作者 金保富 林平 陈佳玉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期510-513,共4页
目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁... 目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产阳性菌株,再经三维试验确诊;PCR扩增DHA结构基因。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%;26株三维试验阳性菌株PCR扩增出23株DHA-1型酶基因;药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产酶株和非产酶株对亚胺培南均有较高的敏感性。结论临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高;AmpC酶基因型以DHA-1型为主要流行株;产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 AMPC酶 dha-1 ESBLS 耐药性
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两株阴沟肠杆菌的DHA-1型耐药基因的转移方式探讨 被引量:3
9
作者 蒋燕群 韩立中 +3 位作者 奚伟 汤瑾 王坚强 倪语星 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第6期490-492,共3页
目的 通过确定编码AmpC酶DHA 1型基因是存在于整合子还是质粒上 ,来探讨此类AmpC酶的播散方式。方法 分别提取细菌的染色体DNA和质粒DNA通过斑点杂交的方式 ,并将整合子聚合酶链反应(PCR)产物测序 ,来确定编码AmpC酶DHA 1型基因存在... 目的 通过确定编码AmpC酶DHA 1型基因是存在于整合子还是质粒上 ,来探讨此类AmpC酶的播散方式。方法 分别提取细菌的染色体DNA和质粒DNA通过斑点杂交的方式 ,并将整合子聚合酶链反应(PCR)产物测序 ,来确定编码AmpC酶DHA 1型基因存在的位置。 结果  2株阴沟肠杆菌的斑点杂交试验均在质粒DNA中发现AmpC酶DHA 1型基因 ,而染色体DNA和整合子片断中未找到相关基因。 结论 这 2株阴沟肠杆菌的AmpC酶DHA 1型的基因均存在于质粒上 ,说明他们的AmpC酶是通过质粒的转移而散播的。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 dha-1 耐药基因 转移 斑点杂交 整合子 质粒
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一株产DHA-1型质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药基因鉴定及药物敏感性测定
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作者 李轶 周绪华 冯羡菊 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第11期66-67,共2页
目的对一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌进行耐药基因鉴定及药物敏感性测定。方法对临床分离的一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌,采用PCR扩增及测序,检测细菌的耐药基因特性,接合实验验证质粒的传递性,等电聚焦电泳(IEF)测定细菌β-内酰胺酶... 目的对一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌进行耐药基因鉴定及药物敏感性测定。方法对临床分离的一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌,采用PCR扩增及测序,检测细菌的耐药基因特性,接合实验验证质粒的传递性,等电聚焦电泳(IEF)测定细菌β-内酰胺酶的等电点。结果该株肺炎克雷伯菌产生TEM-1、DHA-1和SHV-12三种β-内酰胺酶,其耐药基因blaDHA-1可通过质粒传递。结论我院已发现同时携带DHA-1型质粒AmpC酶及SHV-12型ESBL的肺炎克雷伯菌;临床应及时准确进行鉴定及药敏实验,为合理使用抗菌药物提供依据。 展开更多
关键词 头孢西丁 肺炎克雷伯菌 内酰胺酶 质粒 dha-1
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B7-1和新型隐球菌DHA1基因嵌合重组质粒的构建
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作者 沈纪川 谢奇峰 +2 位作者 翁锦生 顾琳 姚集鲁 《广东医学》 CAS CSCD 2003年第6期585-587,共3页
目的 构建包含新型隐球菌细胞免疫主要相关基因———迟发超敏反应抗原基因 (delayed -typehypersen tivityantigen 1,DHA1)与小鼠共刺激分子B 7-1的嵌合重组质粒。方法 设计合成两对寡核苷酸引物 ,用PCR法分别从pUCmB 7-1TM和新型隐... 目的 构建包含新型隐球菌细胞免疫主要相关基因———迟发超敏反应抗原基因 (delayed -typehypersen tivityantigen 1,DHA1)与小鼠共刺激分子B 7-1的嵌合重组质粒。方法 设计合成两对寡核苷酸引物 ,用PCR法分别从pUCmB 7-1TM和新型隐球菌重组质粒pcDNA3 -DHA1中特异扩增出编码B 7-1和DHA1的基因片段 ( 92 1bp和 984bp) ,分别用HindⅢ ,EcoRⅠ ,XbaⅠ酶切后 ,逐个定向连接到质粒pcDNA3中 ,转化宿主菌DH -5α ,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果 酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符 ,测序结果与文献报道序列及预计结果一致 ,证实符合表达框架。结论 该研究成功构建了新型隐球菌嵌合重组质粒pcDNA3 -B 7-1-DHA1。 展开更多
关键词 B7-1 dha1基因 嵌合重组质粒 DNA疫苗 新型隐球菌病
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