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Hydrogen sulfide-linked persulfidation of ABI4 controls ABA responses through the transactivation of MAPKKK18 in Arabidopsis 被引量:9
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作者 Mingjian Zhou Jing Zhang +10 位作者 Jie Shen Heng Zhou Didi Zhao Cecilia Gotor Luis CRomero Ling Fu Zongmin Li Jing Yang Wenbiao Shen Xingxing Yuan Yanjie Xie 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期921-936,共16页
Hydrogen sulfide(H2S)is a signaling molecule that regulates plant hormone and stress responses.The phytohormone abscisic acid(ABA)plays an important role in plant adaptation to unfavorable environmental conditions and... Hydrogen sulfide(H2S)is a signaling molecule that regulates plant hormone and stress responses.The phytohormone abscisic acid(ABA)plays an important role in plant adaptation to unfavorable environmental conditions and induces the persulfidation of L-CYSTEINE DESULFHYDRASE1(DES1)and the production of H2S in guard cells.However,it remains largely unclear how H2S and protein persulfidation participate in the relay of ABA signals.In this study,we discovered that ABSCISIC ACID INSENSITIVE 4(ABI4)acts downstream of DES1 in the control of ABA responses in Arabidopsis.ABI4 undergoes persulfidation at Cys250 that is triggered in a time-dependent manner by ABA,and loss of DES1 function impairs this process.Cys250 and its persulfidation are essential for ABI4 function in the regulation of plant responses to ABA and the H2S donor NaHS during germination,seedling establishment,and stomatal closure,which are abolished in the ABI4Cys250Ala mutated variant.Introduction of the ABI4Cys250Ala variant into the abi4 des1 mutant did not rescue its hyposensitivity to ABA.Cys250 is critical for the binding of ABI4 to its cognate motif in the promoter of Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase 18(MAPKKK18),which propagates the MAPK signaling cascade induced by ABA.Furthermore,the DES1-mediated persulfidation of ABI4 enhances the transactivation activity of ABI4 toward MAPKKK18,and ABI4 can bind the DES1 promoter,forming a regulatory loop.Taken together,these findings advance our understanding of a post-translational regulatory mechanism and suggest that ABI4 functions as an integrator of ABA and MAPK signals through a process in which DES1-produced H2S persulfidates ABI4 at Cys250. 展开更多
关键词 hydrogen sulfide persulfidation des1 ABI4 MAPKXK18 transactivation ABA response
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己烯雌酚特异性抗体的制备 被引量:4
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作者 岳磊 单国强 +2 位作者 刘雅红 贺利民 张琴 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1524-1529,共6页
【目的】制备抗己烯雌酚(DES)的高亲和力特异性抗体,建立检测DES的间接竞争ELISA标准曲线,为进一步研究DES快速检测试剂盒打下基础。【方法】应用DES人工免疫抗原免疫新西兰大白兔,采集抗DES的特异性抗血清,用KCjunior软件进行4参数非... 【目的】制备抗己烯雌酚(DES)的高亲和力特异性抗体,建立检测DES的间接竞争ELISA标准曲线,为进一步研究DES快速检测试剂盒打下基础。【方法】应用DES人工免疫抗原免疫新西兰大白兔,采集抗DES的特异性抗血清,用KCjunior软件进行4参数非线性回归,建立检测DES的间接竞争ELISA标准曲线,各药物浓度在同一批次酶标板中做4次重复,共做4个批次对标准曲线进行评价,用己烷雌酚(HEX)、双烯雌酚(DIEN)、雌二醇(E2)、乙炔雌二醇(EE2)和L-酪氨酸(Tyr)来评价抗体的特异性。【结果】5只家兔免疫产生了抗DES的特异性抗血清,其中4号家兔抗血清效价达到了1﹕4096000竞争抑制效果最好,工作稀释浓度为1﹕1024000时,线性范围在0.01~50μg·L-1,标准曲线的IC50在0.71~1.0μg·L-1,R2在0.9952~0.9978。获得各标准浓度下B/B0的批内变异系数在0.52%~22.48%,批间变异系数在2.64%~19.51%。交叉反应试验表明,4号家兔抗血清对与DES结构相似的人工合成二苯乙烯类雌激素药物己烷雌酚(HEX)和双烯雌酚(DIEN)的交叉反应率分别为8.5%和38.5%,与天然雌激素类药物雌二醇(E2)和乙炔雌二醇(EE2)以及L-酪氨酸(Tyr)的交叉反应均小于0.001%。【结论】本文报道的抗体特异性好、亲和力高,可满足目前中国动物性食品安全评价检测的需要,为研究组织中DES残留检测的ELISA方法及其开发DES快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 己烯雌酚 抗血清 间接竞争ELISA
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高频干扰对PCB电磁兼容性影响的仿真分析与PCB优化设计 被引量:6
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作者 刘捷 漆兰芬 《电子质量》 2006年第4期74-76,共3页
本文采用AnsoftDesigner软件,仿真分析了PCB(PrintedCircuitBoard)中高频谐波干扰对PCB电磁兼容性产生的影响,得出PCB的电流图及近场分布图。根据电流图及近场分布图,分析PCB的电磁兼容性,并加以改进,优化版图设计。
关键词 PCB 高频千扰 电磁兼容仿真 ANSOFT des1gher
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基于质谱成像可视化表征甘草饮片主要化学成分组织分布 被引量:1
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作者 熊田田 罗世英 +1 位作者 裴照卿 唐策 《亚太传统医药》 2023年第5期54-58,共5页
目的:通过解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)对甘草饮片的主要化学成分进行可视化表征。方法:DESI与Q-TOF/MS相结合,以获得质荷比和空间的高分辨率成像,在负离子模式下以100μm的空间分辨率对饮片进行成像,并根据其精确质量对其化学成... 目的:通过解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)对甘草饮片的主要化学成分进行可视化表征。方法:DESI与Q-TOF/MS相结合,以获得质荷比和空间的高分辨率成像,在负离子模式下以100μm的空间分辨率对饮片进行成像,并根据其精确质量对其化学成分进行定位和鉴定。结果:在误差小于5 ppm下,共鉴定出28种化学成分,其中包含黄酮类22种,三萜类5种,其他类1种,并对其分布进行了成像分析。结论:采用DESI-MSI对甘草饮片进行分析,提供了甘草黄酮类和皂苷类化合物的生物合成途径重要信息,将空间分辨的化学信息与微观层面的形态细节相结合。该技术提供了一种能够对植物组织中的代谢物进行高通量分析并表征的方案。 展开更多
关键词 甘草 desI-MSI 化学成分 组织分布
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基于UPLC-Q-TOF-MS、DESI-MSI法实时监测附子生长过程中不同部位多效唑变化
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作者 侯寓森 裴照卿 +1 位作者 徐彬杰 唐策 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2603-2608,共6页
目的建立UPLC-Q-TOF-MS、DESI-MSI法实时监测附子生长过程中不同部位多效唑的变化,考察DESI-MSI法在分析多效唑过程中的优势。方法不同生长期、不同部位48批附子经QuEChERS提取后,采用UPLC-Q-TOF-MS和DESI-MSI法进行多效唑检测。DESI-MS... 目的建立UPLC-Q-TOF-MS、DESI-MSI法实时监测附子生长过程中不同部位多效唑的变化,考察DESI-MSI法在分析多效唑过程中的优势。方法不同生长期、不同部位48批附子经QuEChERS提取后,采用UPLC-Q-TOF-MS和DESI-MSI法进行多效唑检测。DESI-MSI法技术参数为以90%甲醇-甲酸(1000∶0.5)为喷雾溶剂,体积流量2μL/min;扫描范围100~600 Da;空间分辨率120μm;锥孔电压80 V;喷雾器(N_(2))压力0.45 MPa;毛细管电压4.5 kV;离子源温度150℃;正离子扫描样本。结果种植附子的土壤中均含有多效唑,地上、地下部分分别发现有6、9批附子含有多效唑,DESI-MSI和UPLC-Q-TOF-MS法均能对其进行半定量分析,分析结果基本一致。同时,DESI-MSI法所用流动相体积和测试时间要明显少于UPLC-Q-TOF-MS法,并能对相对含量进行直观呈现。结论附子在种植过程中存在喷施多效唑的可能。本研究开发了一种结合DESI-MSI和UPLC-Q-TOF-MS技术快速检测附子不同部位多效唑的方法,为附子生长过程中多效唑的快速检测提供了参考。 展开更多
关键词 附子 多效唑 实时监测 desI-MSI UPLC-Q-TOF-MS
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PBIB设计的约化
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作者 徐钷镛 魏万迪 《数学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期375-386,共12页
设是一个具有m个结合类的PBIB设计,且它的多数λ_1,λ_2,...,λ_m中至少有两个是相等的。第二节中,给出了PBIB设计可以用遂次合并结合类来约化的充分必要条件。第三节给出了PBIB设计可以用同时合并结合类来... 设是一个具有m个结合类的PBIB设计,且它的多数λ_1,λ_2,...,λ_m中至少有两个是相等的。第二节中,给出了PBIB设计可以用遂次合并结合类来约化的充分必要条件。第三节给出了PBIB设计可以用同时合并结合类来约化的充分必要条件。最后,在第四节里我们研究了上述两种方法之间的关系。 展开更多
关键词 结合类 PBIB设计 约化 BIB设计
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截短型人胰岛素样生长因子-Ⅰ 在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 被引量:4
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作者 刘晓辉 梁述文 +2 位作者 王伟 申泉 郭焱 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期738-741,共4页
利用PCR、删除突变和基因重组技术构建了N端缺失3个氨基酸的人胰岛素样生长因子-[des(1-3)IGF-]的表达载体pExSec/IGF,在大肠杆菌蛋白酶缺陷株BL21(DE3)中,通过用IPTG于超常规的12℃低温诱导16h,des(1-3)IGF-获得了可溶性表达。表达水... 利用PCR、删除突变和基因重组技术构建了N端缺失3个氨基酸的人胰岛素样生长因子-[des(1-3)IGF-]的表达载体pExSec/IGF,在大肠杆菌蛋白酶缺陷株BL21(DE3)中,通过用IPTG于超常规的12℃低温诱导16h,des(1-3)IGF-获得了可溶性表达。表达水平达到可溶性细菌总蛋白约15%。经超滤和SephadexG-50凝胶过滤,des(1-3)IGF-纯度分别达到49%和82%,且表现出明显的免疫学活性和刺激Balb3T3细胞增殖的生物学活性。 展开更多
关键词 截短型 胰岛素样 生长因子 非融合表达 纯化
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重组des-pGlu1-Brazzein基因植物表达载体的构建及对人参果的遗传转化 被引量:4
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作者 王克婧 张金文 +3 位作者 张菲菲 乔岩 王志伟 卢晶 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1470-1481,共12页
本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析,发现E8基因的非编码区包含ERE,茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性,表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异... 本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析,发现E8基因的非编码区包含ERE,茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性,表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异性;利用密码子偏爱性优化设计甜蛋白Brazzein,采用亚克隆技术成功获得甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因和E8启动子基因,经Blast对比均与GenBank中已报道的序列高度同源,并利用2KGQ模型分析des-pGlu1-Brazzein基因的空间结构特性;以中间载体pHANNIBAL及植物表达载体pCEPSP为基础,分别构建由E8启动子及35S启动子驱动的兼具重组甜蛋白及除草剂抗性的植物表达载体,并通过农杆菌介导法进行人参果的遗传转化,获得转化再生植株54株,经检测从中筛选出15株阳性植株,初步确定已经完成目的基因整合到人参果基因组中。 展开更多
关键词 人参果 des-pGlu1-Brazzein E8启动子 CaMV 35S启动子 植物表达载体 遗传转化
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重组人截短型胰岛素样生长因子1在大肠杆菌中的高效表达 被引量:2
9
作者 李莹 邓鸿业 +3 位作者 狄春辉 施群 韩文玲 马大龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期57-60,共4页
目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统。方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1〔Des(13)IGF1〕的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫... 目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统。方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1〔Des(13)IGF1〕的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫检测、N末端前16位氨基酸序列测定及生物活性检测等方法对所获蛋白进行了鉴定。结果:获得含人Des(13)IGF1基因的重组质粒,在大肠杆菌中高效表达出含凝血酶识别序列的MS2Des(13)IGF1融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化后纯化可获得与天然型一致的人Des(13)IGF1。结论:该方法是获得人重组Des(13)IGF1的有效途径,对进一步研究Des(13)IGF1有重要意义。 展开更多
关键词 大肠杆菌 IGF1 融合蛋白 des(1-3)IGF1
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植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的密码子优化及其在毕氏酵母中的表达 被引量:2
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作者 李春丽 韩露 +1 位作者 郑振宇 赵卫东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1158-1163,共6页
根据甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照酵母密码子的偏好优化其编码序列,合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接、PCR扩增后得到了179 bp的des-pGlu1-Brazzein编码序列,插入到pPIC9K载体中,构建了重组表达载体... 根据甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照酵母密码子的偏好优化其编码序列,合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接、PCR扩增后得到了179 bp的des-pGlu1-Brazzein编码序列,插入到pPIC9K载体中,构建了重组表达载体pPIC9K-Bra。经酶切、电击转化到毕赤酵母菌GS115中。酵母工程菌株经筛选鉴定后诱导表达,目的蛋白的表达量约占上清总蛋白的51.6%,分离纯化后的des-pGlu1-Brazzein具有一定的甜度。 展开更多
关键词 甜蛋白 毕氏酵母 表达 活性检测
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