目的筛选肺癌转移相关蛋白1(lung cancer metastasis related protein 1,LCMR1)的相互作用蛋白并进行验证。方法以人肺癌95D细胞RNA作为模板,构建95D细胞c DNA文库。将LCMR1质粒及人肺癌95D细胞c DNA文库共转化酵母菌AH109,初步筛选LCMR...目的筛选肺癌转移相关蛋白1(lung cancer metastasis related protein 1,LCMR1)的相互作用蛋白并进行验证。方法以人肺癌95D细胞RNA作为模板,构建95D细胞c DNA文库。将LCMR1质粒及人肺癌95D细胞c DNA文库共转化酵母菌AH109,初步筛选LCMR1相互作用蛋白。应用融合蛋白沉降技术和免疫共沉淀技术对酵母双杂交结果进行验证,确定蛋白质相互作用。结果成功构建了人肺癌95D细胞的c DNA文库。应用酵母双杂交技术筛选出6种LCMR1相互作用蛋白,选取其中DEK原癌基因进行验证。使用融合蛋白沉降技术及免疫共沉淀技术证实,LCMR1蛋白与DEK蛋白在体外及细胞内均可以特异结合,特异结合发生在DEK蛋白N端功能区。结论 LCMR1与DEK为相互作用蛋白,DEK蛋白N端功能区与细胞凋亡密切相关,为LCMR1基因功能研究提供线索和相应分子基础。展开更多
文摘目的筛选肺癌转移相关蛋白1(lung cancer metastasis related protein 1,LCMR1)的相互作用蛋白并进行验证。方法以人肺癌95D细胞RNA作为模板,构建95D细胞c DNA文库。将LCMR1质粒及人肺癌95D细胞c DNA文库共转化酵母菌AH109,初步筛选LCMR1相互作用蛋白。应用融合蛋白沉降技术和免疫共沉淀技术对酵母双杂交结果进行验证,确定蛋白质相互作用。结果成功构建了人肺癌95D细胞的c DNA文库。应用酵母双杂交技术筛选出6种LCMR1相互作用蛋白,选取其中DEK原癌基因进行验证。使用融合蛋白沉降技术及免疫共沉淀技术证实,LCMR1蛋白与DEK蛋白在体外及细胞内均可以特异结合,特异结合发生在DEK蛋白N端功能区。结论 LCMR1与DEK为相互作用蛋白,DEK蛋白N端功能区与细胞凋亡密切相关,为LCMR1基因功能研究提供线索和相应分子基础。
