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百合无症病毒的RT-PCR和IC-RT-PCR检测 被引量:43
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作者 王继华 瞿素萍 +2 位作者 孔宝华 陆琳 余朝秀 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期148-150,173,共4页
应用DAS-ELISA,RT-PCR和IC-RT-PCR技术检测百合无症病毒(LSV)。结果表明:RT-PCR和IC-RT-PCR分别可从2ng和200ng百合叶片组织中检测出LSV,分别是DAS-ELISA敏感度的1000倍和10倍。百合鳞茎的不同取样部位对PCR检测结果的影响较大,RT-PCR... 应用DAS-ELISA,RT-PCR和IC-RT-PCR技术检测百合无症病毒(LSV)。结果表明:RT-PCR和IC-RT-PCR分别可从2ng和200ng百合叶片组织中检测出LSV,分别是DAS-ELISA敏感度的1000倍和10倍。百合鳞茎的不同取样部位对PCR检测结果的影响较大,RT-PCR难以从鳞片和根部检测出病毒,但IC-RT-PCR可以检测出病毒。 展开更多
关键词 百合 无症病毒 RT-PCR IC-RT-PCR daselisa 检测技术 切花
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应用DAS-ELISA法同时检测多种马铃薯病毒 被引量:27
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作者 白艳菊 李学湛 +3 位作者 吕典秋 何云霞 张儒喜 朱财 《中国马铃薯》 2000年第3期143-144,共2页
报道了使用多价血清同时检测多种马铃薯病毒的快速DAS ELISA法。实验分别用快速DAS ELISA法和常规DAS ELISA法检测PVX、PVY、PVS、PVM、PLRV5种主要马铃薯病毒进行比较 ,二者阳性率和灵敏度基本相同 ,但快速法比常规法操作简便、节省时... 报道了使用多价血清同时检测多种马铃薯病毒的快速DAS ELISA法。实验分别用快速DAS ELISA法和常规DAS ELISA法检测PVX、PVY、PVS、PVM、PLRV5种主要马铃薯病毒进行比较 ,二者阳性率和灵敏度基本相同 ,但快速法比常规法操作简便、节省时间、节省材料 ,且快速法重复性好 ,结果可靠 ,表明快速DAS ELISA法是一种直观、实用、快速、准确可靠的检测方法 ,适合种薯生产中大量样品的多种主要马铃薯病毒的快速检测。 展开更多
关键词 das-elisa 马铃薯 病毒检测
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Feeding of Riptortus pedestris on soybean plants, the primary cause of soybean staygreen syndrome in the Huang-Huai-Hai river basin 被引量:35
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作者 Kai Li Xinxin Zhang +7 位作者 Jianqiu Guo Hannah Penn Tingting Wu Lin Li Hong Jiang Lidan Chang Cunxiang Wu Tianfu Han 《The Crop Journal》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期360-367,共8页
Staygreen syndrome or Zhengqing in soybean has recently become a major issue for Chinese growers in the Huang-Huai-Hai river basin.Although previous studies revealed that staygreen can be induced when pods/seeds are d... Staygreen syndrome or Zhengqing in soybean has recently become a major issue for Chinese growers in the Huang-Huai-Hai river basin.Although previous studies revealed that staygreen can be induced when pods/seeds are damaged, it is unknown whether virus infection or insect infestation causes staygreen.To determine whether viral infection causes staygreen, a survey of soybean staygreen incidence in the Huang-Huai-Hai river basin was conducted in 2016 and 2017.Diseased samples were collected and analyzed using DAS-ELISA for Soybean mosaic virus, Watermelon mosaic virus, Bean pod mottle virus, Cucumber mosaic virus, and Bean common mosaic virus.The survey showed that the severity of soybean staygreen syndrome was most prevalent in Beijing, Henan, Shaanxi, and some parts of Shandong provinces, with yield losses from 0 to nearly 100%, but only a small fraction of samples were positive for the tested viruses.A field cage experiment and an insecticide treatment field trial were conducted to determine the contribution of the bean bug, Riptortus pedestris, to staygreen incidence.The field cage experiment showed that R.pedestris treatment resulted in shorter plants, more empty pods, increased numbers of abnormal seeds, and decreased yields.The field experiment showed that there were fewer R.pedestris and less soybean staygreen incidence in fields treated with insecticide than in untreated control fields.Together, these results suggest that R.pedestris infestation rather than virus infection induces staygreen syndrome and that growers in this region can mitigate staygreen syndrome via bean bug control. 展开更多
关键词 SOYBEAN Staygreen SYNDROME Zhengqing das-elisa VIRAL infection BEAN BUG (R. pedestris)
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中国马铃薯主要病毒病发生情况调查与分析 被引量:30
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作者 范国权 白艳菊 +5 位作者 高艳玲 张威 张抒 申宇 刘凯 喻江 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期74-79,共6页
马铃薯病毒病是造成马铃薯减产的主要因素,为了解中国马铃薯种薯质量及生产中病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、河北等地采集具有典型病毒病症状的样品、疑似病毒样品和随机无症样品,包括试管苗样品248个,原原种样... 马铃薯病毒病是造成马铃薯减产的主要因素,为了解中国马铃薯种薯质量及生产中病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、河北等地采集具有典型病毒病症状的样品、疑似病毒样品和随机无症样品,包括试管苗样品248个,原原种样品93个,大田种薯样品621个,共计962个。应用DAS-ELISA方法检测6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。结果表明,219份样品病毒检测结果呈阳性,PVS检出率最高,PVY次之。有10个样品是由多种病毒复合侵染造成。不同级别种薯质量情况为试管苗PVS病毒发生较多,原原种质量较好,大田种薯PVY病毒发生比例最高。 展开更多
关键词 马铃薯病毒病 调查 发生率 das-elisa
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我国辣椒病毒病发生情况及发展趋势--基于2018年和2019年辣椒主产区的调查 被引量:23
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作者 于海龙 靳远 +4 位作者 刘婧 张宝玺 张正海 曹亚从 王立浩 《中国蔬菜》 北大核心 2020年第9期25-30,共6页
为明确我国辣椒病毒病的种类和发展趋势,2018年和2019年在我国16个省(市、自治区)辣椒主产区采集具有病毒病疑似症状的样品105份,利用双抗体夹心酶联免疫吸附反应(DAS-ELISA)对12种辣椒主要病毒进行检测。结果表明,有70份样品为病毒病... 为明确我国辣椒病毒病的种类和发展趋势,2018年和2019年在我国16个省(市、自治区)辣椒主产区采集具有病毒病疑似症状的样品105份,利用双抗体夹心酶联免疫吸附反应(DAS-ELISA)对12种辣椒主要病毒进行检测。结果表明,有70份样品为病毒病感染样品,病毒检出率为66.67%。检出病毒种类共10种,其中辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)检出率最高,为24.76%,其次为黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus,TEV)和番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV),检出率分别为19.05%、12.38%、12.38%和10.48%。我国辣椒主产区多种病毒复合侵染发生较为普遍,病毒复合侵染率为40%,其中以2种病毒复合侵染比例最高,为28.57%。通过对两年辣椒病毒病检测结果进行比较,12种病毒中有7种检出率有上升趋势。总体而言,PMMoV和CMV为近两年危害我国辣椒生产较为严重的病毒病;此外,PMMoV、BBWV-1,2、TEV、TSWV具有流行风险,需要严加防范。 展开更多
关键词 辣椒 病毒病 das-elisa 病害调查 复合侵染
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DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究 被引量:16
6
作者 陈建军 2刘崇怀 +2 位作者 古勤生 潘兴 曹孜义 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页
在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA... 在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA的检出率明显低于RT-PCR和IC-RT-PCR方法。RT-PCR可以检测出RNA提取液为1:10-4的GLRaV-3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT-PCR和IC-RT-PCR比DAS-ELISA灵敏;并且,IC-RT-PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。 展开更多
关键词 das-elisa RT-PCR IC-RT-PCR 葡萄 卷叶病毒Ⅲ 比较研究 检测 检出率
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黄瓜绿斑驳花叶病毒的鉴定及分子检测 被引量:19
7
作者 黄静 廖富荣 +2 位作者 林石明 陈青 王宗华 《中国农学通报》 CSCD 2007年第4期318-322,共5页
【研究目的】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的快速鉴定检测是控制该潜在危险性有害生物蔓延的有效途径。【方法】通过汁液摩擦接种、透射电镜观察、双抗夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和RT-PCR方... 【研究目的】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的快速鉴定检测是控制该潜在危险性有害生物蔓延的有效途径。【方法】通过汁液摩擦接种、透射电镜观察、双抗夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和RT-PCR方法对该病毒进行鉴定;同时对RT-PCR反应体系及扩增程序进行优化,建立CGMMV免疫捕获RT-PCR(IC-RT-PCR)检测方法。【结果】血清学、生物学、电镜观察和分子生物学方法证明供试样本为黄瓜绿斑驳花叶病毒引致。IC-RT-PCR方法可以简化RNA的提取,降低对试验材料要求。【结论】IC-RT-PCR的建立为CGMMV的检测提供了操作更为简便、特异性更强的快速、准确的检测方法。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 摩擦接种 das-MSA 免疫捕获RT-CR
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北方地区小西葫芦黄花叶病毒的酶联检测和西瓜品种抗病性鉴定 被引量:16
8
作者 古勤生 P.Roggero +3 位作者 R.Lenzi 范在丰 李怀方 俞正旺 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期184-187,共4页
应用DAS-ELISA对分别于1998年在河南、陕西和1999年在河南、陕西、河北和山西采集的葫芦科病毒病样本84份、186份进行小西葫芦黄花叶病毒的检测,表明该病毒在这些地区广泛发生,ZYMV阳性检出率分别为79.8%和57.5%熏在北京和河南临颖县ZYM... 应用DAS-ELISA对分别于1998年在河南、陕西和1999年在河南、陕西、河北和山西采集的葫芦科病毒病样本84份、186份进行小西葫芦黄花叶病毒的检测,表明该病毒在这些地区广泛发生,ZYMV阳性检出率分别为79.8%和57.5%熏在北京和河南临颖县ZYMV发生率较低熏≤23.1%,在其余地区即河北石家庄,河南郑州、开封、孟津,山西运城,陕西西安其阳性检出率在40.0%~92.9%之间。除冬瓜样本没有ZYMV外,西瓜、甜瓜、南瓜、丝瓜、小西葫芦、苦瓜、黄瓜和瓠子均受到ZYMV的侵染。不同地区、年份和作物之间ZYMV阳性检出率存在差异。对18份西瓜品种的抗ZYMV温室人工接种鉴定的试验表明,目前推广的一些品种对ZYMV缺乏抗病性。 展开更多
关键词 小西葫芦黄花叶病毒 das-elisa 抗病性 北方地区 酶联检测 西瓜 鉴定分析 样本采集
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我国马铃薯主产区病毒病发生情况调查 被引量:20
9
作者 范国权 白艳菊 +6 位作者 高艳玲 张威 张抒 申宇 李学湛 刘凯 喻江 《黑龙江农业科学》 2014年第3期68-72,87,共6页
为了解我国马铃薯病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、云南等马铃薯田采集了具有典型病毒病症状的样品、疑似样品和随机无症样品,试管苗和原原种为随机样品,共649份。应用DASELISA方法筛查6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY... 为了解我国马铃薯病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、云南等马铃薯田采集了具有典型病毒病症状的样品、疑似样品和随机无症样品,试管苗和原原种为随机样品,共649份。应用DASELISA方法筛查6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。结果表明:129份样品为阳性,PVY的检出率最高,为9.86%,PVS次之,为6.47%;试管苗PVS检出最多,为32份,原原种PVX检出最多,为10份,大田样品PVY病毒发生比例最高,为54份;有38份样品是由多种病毒复合侵染造成的,大田PVY+PVS复合侵染率最高,为2.93%,PVS+PVY+PLRV次之,为0.98%,试管苗PVS+PVM复合侵染率最高,为4.85%。通过历年的检测结果比较,试管苗中PVS病毒检出率最高,原原种中PVX和PLRV病毒成为危害最为严重的病害,大田样品中PVY检出率一直居高不下。 展开更多
关键词 马铃薯病毒病 普查 侵染率 das-elisa
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利用ELISA检测两种兰花病毒的研究 被引量:16
10
作者 柳爱春 刘超 +1 位作者 赵芸 徐晓丹 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期91-95,共5页
建立了三抗夹心酶联免疫吸附法(TAS-ELISA)检测建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)和双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)检测齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)的方法。共检测了浙江省内139个兰科样品和8个百... 建立了三抗夹心酶联免疫吸附法(TAS-ELISA)检测建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)和双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)检测齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)的方法。共检测了浙江省内139个兰科样品和8个百合科样品,结果表明有31.7%的兰花检出CymMV,有28.8%的兰花检出ORSV。根据病毒外壳蛋白基因上下游保守序列设计了检测ORSV的引物,参照周国辉报道设计了检测CymMV的引物并对人工接种两种病毒的兰花进行了逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测,结果表明,RT-PCR检测结果与ELISA结果相一致,进一步证实本研究建立的TAS-ELISA,DAS-ELISA方法稳定可靠,重复性好,可应用于兰花上CymMV和ORSV两种病毒的早期诊断和检测。 展开更多
关键词 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 TAS-elisa das-elisa 一步法RT-PCR
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引进种质西瓜中黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测 被引量:17
11
作者 赵世恒 李明福 +4 位作者 张永江 王进忠 李桂芬 孙淑玲 张涛 《北京农学院学报》 2007年第2期32-34,共3页
从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;... 从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;双抗体夹心酶联试验结果均为阳性;RT-PCR反应后进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果出现预期的715 bp特异性扩增产物。3种方法均表明此次从日本引进的西瓜种质已经受到黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染,须做销毁处理。试验结果表明,采用3种方法中的2种对样品进行检测,即可以根据检测结果确诊被检对象是否带有CGMMV病毒。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 生物学检测 双抗体夹心酶联 反转录PCR技术
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利用DAS-ELISA进行番茄花叶病毒的田间检测 被引量:13
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作者 薛朝阳 周雪平 +3 位作者 青玲 李德葆 石银鹿 张琦 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期157-162,共6页
从制备的番茄花叶病毒(ToMV- S1) 抗血清中提纯IgG,并用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP) 标记,建立了检测ToMV 的DAS- ELISA 系统。利用此检测系统并结合生物学方法,对浙江及山西等地的田间病样进... 从制备的番茄花叶病毒(ToMV- S1) 抗血清中提纯IgG,并用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP) 标记,建立了检测ToMV 的DAS- ELISA 系统。利用此检测系统并结合生物学方法,对浙江及山西等地的田间病样进行测定,结果发现茄子、番茄等茄科作物中均有ToMV 的侵染,其中茄子中有50 % 左右的发生率,番茄中ToMV 发生率南北差异较大, 在浙江发生率仅为10 % 左右,而在山西有60 .7 % 的发生率,辣椒中未测到ToMV。这是在我国首次进行ToMV 展开更多
关键词 番茄花叶病毒 das-elisa 田间检测
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甘蔗黄叶病毒病早期快速RT-PCR诊断和鉴定 被引量:16
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作者 王中康 殷幼平 J.C.Comstock 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第4期301-303,共3页
甘蔗黄叶病毒病 (YLS)是一种由黄症病毒 (Luteovirus)引起 ,随种蔗传带的新病害。利用由黄症病毒组特征片段克隆测序设计的特异性引物对YLSR 4 62和YLSF 111开发出一种可以早期快速检测无症甘蔗繁殖材料带毒情况的反转录多聚酶链式反应... 甘蔗黄叶病毒病 (YLS)是一种由黄症病毒 (Luteovirus)引起 ,随种蔗传带的新病害。利用由黄症病毒组特征片段克隆测序设计的特异性引物对YLSR 4 62和YLSF 111开发出一种可以早期快速检测无症甘蔗繁殖材料带毒情况的反转录多聚酶链式反应技术 (RT -PCR)。对来自世界各地和美国甘蔗主产区的 14 0个甘蔗品种及育种材料进行了检测 ,黄症叶片样品RT -PCR阳性检出率为 10 0 % ,而无症样品带毒率为 5 5 .17%。与DAS -ELIS相比 ,显症和无症样品的检测符合度分别为 76.4 7%和 5 6.2 4 % ,表明分子诊断较血清学方法灵敏。而单纯采用叶片糖分锤度单一指标诊断YLS是不可靠的。美国的主栽甘蔗品种和大部分育种材料 (95 .0 % )对于YLS均表现感病或带毒。 展开更多
关键词 RT-PCR das-elisa 甘蔗 黄叶综合症
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马铃薯主产区病毒病发生情况调查分析 被引量:15
14
作者 高艳玲 张威 +4 位作者 白艳菊 申宇 范国权 耿宏伟 刘玮婷 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期149-151,共3页
在我国马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、贵州采集了752份具有典型病毒病症状的样品和疑似样品,应用DAS-ELISA方法进行检测。主要筛查6种病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM、PVA。结果显示:270份样品检测到病毒,总体上,PVY的检出率最高,... 在我国马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、贵州采集了752份具有典型病毒病症状的样品和疑似样品,应用DAS-ELISA方法进行检测。主要筛查6种病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM、PVA。结果显示:270份样品检测到病毒,总体上,PVY的检出率最高,PVS次之,33份样品是由多种病毒混合侵染造成的,田间PVY+PLRV混合侵染率最高,PVS+PVY次之。试管苗PVS病毒发生较多,原原种和大田种薯PVY病毒发生比例最高。 展开更多
关键词 马铃薯病毒 普查 das-elisa
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三叶半夏的2种病毒检测 被引量:13
15
作者 申屠苏苏 王海丽 +2 位作者 陈集双 何煜波 高必达 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期664-667,共4页
目的:研究我国主产地栽培及野生三叶半夏的2种病毒病害发生情况和病毒种类。方法:症状观察法,DAS-ELISA及RT-PCR。结果与结论:侵染我国半夏的病毒主要为黄瓜花叶病毒CMV(cucumber mosaic virus)的天南星科株系和大豆花叶病毒SMV(soybeen... 目的:研究我国主产地栽培及野生三叶半夏的2种病毒病害发生情况和病毒种类。方法:症状观察法,DAS-ELISA及RT-PCR。结果与结论:侵染我国半夏的病毒主要为黄瓜花叶病毒CMV(cucumber mosaic virus)的天南星科株系和大豆花叶病毒SMV(soybeen mosaic virus)的天南星科株系,后者与以前报道的芋花叶病毒D sMV(dasheen mosaic virus)和SMV都有血清学阳性反应。人工栽培的三叶半夏普遍受到这2种病毒的侵染。其中,在早春检测的浙江宁波栽培半夏21个样品中CMV与SMV的检出率分别为71.4%和14.3%,浙江萧山栽培半夏18个样品中的检出率分别为100%和44.4%;河北栽培半夏21个样品中的检出率分别为61.9%和33.3%;安徽栽培半夏12个样品中的检出率分别为50.0%和41.7%;四川栽培半夏12个样品中2种病毒的检出率均为16.7%;北京栽培半夏16个样品中SMV的检出率为31.3%,未检测到CMV。25个来自全国各地的野生三叶半夏样品中CMV和SMV的平均检出率为20.0%。 展开更多
关键词 三叶半夏 黄瓜花叶病毒 大豆花叶病 das-elisa RT-PCR
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应用改进的DAS-ELISA法快速检测马铃薯病毒 被引量:13
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作者 宋吉轩 范士杰 +3 位作者 董颖苹 颜谦 张敏 张德宇 《贵州农业科学》 CAS 2006年第5期69-70,共2页
试验分别用改进DAS-ELISA法和常规DAS-ELISA法对马铃薯4种主要病毒PVX、PVY、PVS、PLRV进行检测,其检测结果完全一致,且灵敏度也基本相同。改进法比常规法操作简便、节省时间,表明改进DAS-ELISA法是一种直观、实用、快速、准确可靠的检... 试验分别用改进DAS-ELISA法和常规DAS-ELISA法对马铃薯4种主要病毒PVX、PVY、PVS、PLRV进行检测,其检测结果完全一致,且灵敏度也基本相同。改进法比常规法操作简便、节省时间,表明改进DAS-ELISA法是一种直观、实用、快速、准确可靠的检测方法,适合种薯生产中大量样品的多种主要马铃薯病毒的快速检测。 展开更多
关键词 马铃薯病毒 das-elisa 快速检测 改进
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四川省马铃薯主产区最新病毒病普查及血清学鉴定 被引量:14
17
作者 钟婷婷 蒲志刚 +3 位作者 何俊蓉 吴洁 杨春林 阎文昭 《西南农业学报》 CSCD 2008年第1期96-99,共4页
应用血清学双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)对采自四川省21个马铃薯主产区的981份田间病株、试管苗及薯块进行了马铃薯病毒检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯A病毒(PVA)、... 应用血清学双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)对采自四川省21个马铃薯主产区的981份田间病株、试管苗及薯块进行了马铃薯病毒检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯M病毒(PVM)以及马铃薯卷叶病毒(PLRV)等6种病毒,其中PVS的检出率最高。同时对在安第斯山地区新发现的安斯山马铃薯潜隐病毒(APLV)、安第斯山马铃薯斑驳病毒(APMoV)2种病毒进行了检测,检测结果表明,四川还未发现这2种病毒。 展开更多
关键词 马铃薯病毒普查 das-elisa
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保定地区一种新辣椒病毒病的鉴定 被引量:15
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作者 夏惠娟 李志勇 +1 位作者 郭京泽 李兴红 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期65-67,86,共4页
从保定东郊温室大棚中典型花叶症状的甜椒病株上得到1个病毒分离物(BD),经枯斑二三生烟分离纯化3次后,并保存在茄门甜椒上。通过酶联免疫方法、鉴别寄主反应、电镜观察测定等,确定保定分离物是辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle ... 从保定东郊温室大棚中典型花叶症状的甜椒病株上得到1个病毒分离物(BD),经枯斑二三生烟分离纯化3次后,并保存在茄门甜椒上。通过酶联免疫方法、鉴别寄主反应、电镜观察测定等,确定保定分离物是辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)。用Trizol提取病叶总RNA,反转录为cDNA,通过2对特异性引物,分别扩增出病毒外壳蛋白基因片段和与病毒复制相关蛋白基因片段。保定分离物的病毒外壳蛋白基因,与5个PMMoV分离物核甘酸同源性为94.5%~100%,而与3个TMV分离物核苷酸同源性为65.4%~67.7%,从而进一步验证了保定分离物为PMMOV。 展开更多
关键词 辣椒轻斑驳病毒 双抗体夹心酶联免疫吸附反应 反转录PCR 辣椒
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侵染水鬼蕉和花朱顶红的番茄斑萎病毒属病毒的电镜和DAS-ELISA诊断 被引量:14
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作者 方琦 董家红 +6 位作者 丁铭 尹跃艳 张丽珍 李婷婷 苏晓霞 李展 张仲凯 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2005-2009,共5页
从昆明市郊区采集到呈同心圆褪绿环斑、褐色枯斑症状的水鬼蕉[Hymenocallis littoraris(Jacq.)Salisb.]和花朱顶红[Hippeastrum vittatum(L’Hér.)Herb.]植株,采用电子显微镜技术和DAS-ELISA进行检测,在水鬼蕉和花朱顶红病叶分离物... 从昆明市郊区采集到呈同心圆褪绿环斑、褐色枯斑症状的水鬼蕉[Hymenocallis littoraris(Jacq.)Salisb.]和花朱顶红[Hippeastrum vittatum(L’Hér.)Herb.]植株,采用电子显微镜技术和DAS-ELISA进行检测,在水鬼蕉和花朱顶红病叶分离物SGJ-KM和ZDH-KM的粗汁液和超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒粒体存在,该病毒粒子为球形,直径80~85nm;病叶汁液与Tospovirus中的西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)/花生芽坏死病毒(Groundnut bud necrosis virus,GBNV)的复合抗血清呈阳性反应。通过形态学及血清学方法检测表明,侵染水鬼蕉和花朱顶红的病毒分离物SGJ-KM和ZDH-KM为Tospovirus的病毒分离物。 展开更多
关键词 水鬼蕉 花朱顶红 粒子形态 番茄斑萎病毒属 das-elisa
原文传递
国产蝴蝶兰种苗携带建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)的调查及脱毒的初步研究 被引量:13
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作者 丁兰 郭艳 +3 位作者 董刚 杨玲 张丽 刘国安 《北方园艺》 CAS 北大核心 2012年第2期137-140,共4页
采用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)对国内不同蝴蝶兰种植场的17个蝴蝶兰分生苗品系种苗(22个样本)携带的2种主要病毒(CymMV和ORSV)的情况进行了检测调查,并采用茎尖培养和原球茎诱导的方式对携带病毒的4个蝴蝶兰品系进行了脱毒研... 采用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)对国内不同蝴蝶兰种植场的17个蝴蝶兰分生苗品系种苗(22个样本)携带的2种主要病毒(CymMV和ORSV)的情况进行了检测调查,并采用茎尖培养和原球茎诱导的方式对携带病毒的4个蝴蝶兰品系进行了脱毒研究。结果表明:22个样本中有20个样本复合感染2种病毒,仅有1个样本显示了阴性结果。采用茎尖培养的‘R-2-2’和‘Y-4-2’品系,其脱毒率分别为22.7%(CymMV)和19.1%(ORSV),30.3%(CymMV)和8.0%(ORSV);采用原球茎脱毒的‘R-1-2’和‘R-11-1’品系,其脱毒率分别为25.4%(CymMV)和1.4%(ORSV),25.2%(CymMV)和24.2%(ORSV)。茎尖培养和原球茎诱导方式均不能一次性彻底脱毒。 展开更多
关键词 das-elisa 蝴蝶兰 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 脱毒
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