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艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB信号通路的影响 被引量:60
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作者 袁娟 胡玲 +4 位作者 宋小鸽 唐照亮 张传英 余爽 尤元梅 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期199-204,共6页
目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每... 目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制RA模型。艾灸组以艾条悬灸大鼠"足三里""肾俞"穴,每天1次,连续治疗15d。药物组以雷公藤溶液灌胃(8.75mL/kg),每天1次,共15d。观察关节滑膜组织病理形态学变化,放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)含量,实时荧光定量PCR方法检测滑膜组织TLR 4、MyD 88、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达,免疫组化方法检测NF-κB p 65的表达。结果:与正常组比较,模型组滑膜组织有明显的病理改变,大量单核细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润,滑膜表面不整齐,滑膜增生变厚;与模型组比较,艾灸组和药物组均能明显缓解炎性细胞对滑膜的浸润,改善滑膜细胞增生反应。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-1含量升高(P<0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和药物组血清中TNF-α、IL-1含量降低(P<0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均降低(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸具有调节细胞因子的作用,其机制可能与艾灸抑制滑膜组织TLR 4-MyD 88-NF-κB信号通路的异常激活有关。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿性关节炎 滑膜组织 TLR 4-MyD 88-nf-κb通路
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银翘柴桂Ⅱ号方抗甲型流感病毒的免疫调节机制研究 被引量:2
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作者 李红娟 黄浩明 左俊岭 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期449-453,共5页
目的观察银翘柴桂Ⅱ号方对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,探讨其对TLR7/My D88/NF-κB信号通路的影响。方法制备流感病毒性肺炎小鼠模型,观察银翘柴桂Ⅱ号方对模型小鼠的死亡保护作用;ELISA法测定小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平... 目的观察银翘柴桂Ⅱ号方对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,探讨其对TLR7/My D88/NF-κB信号通路的影响。方法制备流感病毒性肺炎小鼠模型,观察银翘柴桂Ⅱ号方对模型小鼠的死亡保护作用;ELISA法测定小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平;荧光定量PCR和WB法检测小鼠肺组织TLR7、My D88、NF-κB m RNA和蛋白水平的表达量。结果银翘柴桂Ⅱ号方低、中、高剂量组均能提高模型小鼠的死亡保护率,降低模型小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,下调模型小鼠肺组织中TLR7、My D88、NF-κB m RNA和蛋白水平的表达(P<0.05,P<0.01)。结论银翘柴桂Ⅱ号方可以提高流感病毒性肺炎小鼠的死亡保护率,表现出抗流感病毒作用,该作用通过抑制由病毒激活的TLR7/My D88/NF-κB信号通路实现。 展开更多
关键词 银翘柴桂Ⅱ号方 甲型流感病毒 TLR7/My D88/nf-κb通路
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葛根素通过TLR4/Myd88/NF-κB抑制NLRP3炎症小体抗大鼠心肌缺血再灌注损伤 被引量:34
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作者 王丹姝 燕柳艳 +5 位作者 孙姝婵 姜瑜 阴苏月 王守宝 方莲花 杜冠华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1343-1351,共9页
本研究旨在探究葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion, MI/R)损伤的治疗作用及其机制。采用冠状动脉左前降支结扎60 min再灌注24 h制备大鼠MI/R损伤模型,于再灌注前20 min灌胃给予葛根素(10、30及100 mg·k... 本研究旨在探究葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion, MI/R)损伤的治疗作用及其机制。采用冠状动脉左前降支结扎60 min再灌注24 h制备大鼠MI/R损伤模型,于再灌注前20 min灌胃给予葛根素(10、30及100 mg·kg~(-1))。考察葛根素对心功能、心肌梗死范围、心肌损伤标志物、炎症因子及细胞凋亡的影响,并应用Western blot法检测Nod样受体蛋白3 (Nod-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体和Toll样受体4/髓样分化因子88/激活核转录因子-κB (TLR4/Myd88/NF-κB)通路相关蛋白。所有动物实验均遵循中国医学科学院药物研究所伦理委员会的规定。结果显示,葛根素能够显著改善MI/R损伤大鼠的心功能,减小心肌梗死范围,降低血清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase, AST)、肌酸激酶MB同工酶(creatine kinase-MB, CK-MB)和心肌肌钙蛋白T (cardiac troponin T, cTnT)的含量,抑制心肌细胞凋亡。此外,葛根素可以显著降低心肌炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的水平。Western blot分析结果显示,葛根素能够明显下调MI/R损伤大鼠心肌TLR4、Myd88及NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 (cleaved-caspase 1)、切割型gasdermin-D (cleaved-GSDMD)、IL-1β、IL-18蛋白水平,同时减少NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα, IκBα)、IκB激酶β(IκB kinaseβ, IKKβ)和NF-κB蛋白磷酸化。上述研究结果表明,葛根素对大鼠MI/R损伤具有明显的改善作用,其机制可能为通过下调TLR4/Myd88/NF-κB通路抑制NLRP3炎症小体激活,从而减轻炎症反应。 展开更多
关键词 葛根素 心肌缺血再灌注损伤 Nod样受体蛋白3炎症小体 TLR4/Myd88/nf-κb通路 炎症反应
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丹参酮ⅡA通过抑制信号通路延缓膝骨关节炎大鼠软骨退变及抑制局部炎症的研究 被引量:19
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作者 张金锋 徐志龙 +3 位作者 吴梦 董志伟 王伍军 修晓光 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期1918-1926,共9页
目的探究丹参酮ⅡA(TanⅡA)通过抑制相关信号通路延缓膝骨关节炎(KOA)大鼠模型软骨退变和抑制局部炎症的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、KOA组、阳性药物塞来昔布20 mg·kg^(-1)组、TanⅡA不同剂量处理组(TanⅡA10、2... 目的探究丹参酮ⅡA(TanⅡA)通过抑制相关信号通路延缓膝骨关节炎(KOA)大鼠模型软骨退变和抑制局部炎症的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、KOA组、阳性药物塞来昔布20 mg·kg^(-1)组、TanⅡA不同剂量处理组(TanⅡA10、20、50 mg·kg^(-1)),每组各12只。采用前交叉韧带切断术(ACLT)建立KOA大鼠模型,造模成功次日,各实验组腹腔注射不同剂量TanⅡA,假手术组和KOA组给予等体积生理盐水,共给药28 d。通过步态行为分析、机械刺激缩足反应阈值(PWMT)和热刺激缩足反应潜伏期(PWTL)来评价大鼠疼痛行为;改良的Mankin's评分和OARSI评分评价软骨病理损伤程度;酶联免疫吸附测定法检测关节组织和血清中炎症因子、骨代谢生化指标水平;免疫组化法检测软骨组织中核因子κB p65(NF-κB p65)和Ⅱ型胶原(COL2A1)蛋白表达;Western blot法检测TLR4/Myd88/NF-κB信号通路相关蛋白Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白(Myd88)及NF-κB p65表达水平;分离胞核和胞浆蛋白,检测NF-κB p65核转位。结果实验结束时,与假手术组相比,KOA组和各实验组大鼠步态行为评分、PWTL、软骨组织COL2A1蛋白表达MOD值降低,同时PWMT、Mankin's评分和OARSI评分、关节组织和外周血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅱ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅱ)水平升高,软骨组织中TLR4、Myd88和NF-κB p65蛋白表达上调,同时NF-κB p65核转位明显(均P<0.05)。此外,与KOA组相比,塞来昔布组和TanⅡA不同剂量处理组大鼠步态行为评分、PWTL、软骨组织COL2A1蛋白表达MOD值升高,同时PWMT、Mankin's评分和OARSI评分、关节组织和外周血清IL-1β、IL-6、TNF-α、CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ水平降低,软骨组织中TLR4、Myd88和NF-κB p65蛋白表达下调,同时NF-κB p65核转位被抑制(均P<0.05)。尤其是TanⅡA 50 mg·kg^(-1)组上述指标改善更显著。结论TanⅡA通过抑 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 膝骨关节炎 TLR4/Myd88/nf-κb通路 软骨退变 炎症反应
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苜蓿素对哮喘小鼠肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88/NF-κB通路的抑制作用 被引量:17
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作者 殷玉婷 刘丽丽 刘利艳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期450-454,共5页
目的观察苜蓿素对低剂量脂多糖(LPS)诱导的哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。方法采用低剂量LPS+卵白蛋白(OVA)建立BALB/c小鼠哮喘气道炎症反应模型,随机分为哮喘模型组、苜蓿素组、地塞米松(阳性药)组,另设空白对照组。ELISA法对小鼠支气... 目的观察苜蓿素对低剂量脂多糖(LPS)诱导的哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。方法采用低剂量LPS+卵白蛋白(OVA)建立BALB/c小鼠哮喘气道炎症反应模型,随机分为哮喘模型组、苜蓿素组、地塞米松(阳性药)组,另设空白对照组。ELISA法对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症介质NO、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平进行检测;HE染色观察小鼠肺组织病理情况;RT-PCR法和Western blot法对小鼠肺泡巨噬细胞的Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核因子κB p65(NF-κB p65)mRNA及蛋白表达进行检测。结果苜蓿素可显著降低哮喘小鼠BALF液中NO、TNF-α、IL-1β水平,有效改善哮喘小鼠肺部炎症,显著下调肺泡巨噬细胞的TLR4、My D88、NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量。结论苜蓿素对哮喘小鼠气道炎症有抑制作用,其机制可能与干预TLR4/My D88/NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 苜蓿素 哮喘 气道炎症 抗炎 肺泡巨噬细胞 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路分子表达的影响 被引量:11
6
作者 程建超 张星星 +4 位作者 童佳兵 朱洁 高雅婷 陈杨 李泽庚 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期101-106,共6页
目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉... 目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉三龙汤80.5 g/kg+顺铂3.67 mg/kg组,每组20只移植瘤小鼠。灌胃相应药物或生理盐水,联合组灌胃及腹腔注射给予,连续治疗21天,剥离瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。HE常规染色,光镜下观察肿瘤组织病理形态学。RT-qPCR、Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因和蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤具有移植瘤抑制作用,量效关系明显,与顺铂联用具有明显协同作用。光镜下观察模型组肿瘤细胞排列紊乱,周围未见坏死肿瘤细胞,而芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg组可见不同程度的坏死肿瘤细胞,其中以80.5 g/kg组最为明显。同时该复方能够下调TLR4/MyD88/NF-κB通路中TLR4、MyD88、IRAK、TRAF6、NF-κB及IκB基因和蛋白的表达水平,量效关系明显,且与顺铂联用具有明显协同作用。结论:结合前期研究基础,芪玉三龙汤的抑瘤作用可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,改善免疫功能有关。 展开更多
关键词 芪玉三龙汤 肺癌移植瘤小鼠 免疫功能 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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西红花苷通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路改善糖尿病大鼠视网膜病变机制研究 被引量:6
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作者 孟宏 王桂青 杜竹君 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第5期531-535,540,共6页
目的:探讨西红花苷对糖尿病大鼠视网膜病变的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路探索其机制。方法:采用高糖高脂饲料喂养+腹腔注射(IP)链脲佐菌素的方法制备糖尿病视网膜病变(DR)大鼠模型... 目的:探讨西红花苷对糖尿病大鼠视网膜病变的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路探索其机制。方法:采用高糖高脂饲料喂养+腹腔注射(IP)链脲佐菌素的方法制备糖尿病视网膜病变(DR)大鼠模型,设模型组、西红花苷组、瑞沙托维(TLR4抑制剂)组和西红花苷+瑞沙托维组,每组20只。另取20只大鼠设为正常组。西红花苷组IP给药30 mg/kg,瑞沙托维组IP给药3 mg/kg,西红花苷+瑞沙托维组IP给药30 mg/kg+3 mg/kg, 1次/d。12周后,通过光学相干断层扫描检测视网膜厚度,伊文思蓝渗透实验检测视网膜血管通透性,HE染色行视网膜病理学检查,透射电子显微镜观察视网膜细胞超微结构改变,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测视网膜肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-8、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)含量,Western blot法检测TLR4、MyD88、总NF-κB p65、胞核NF-κB p65、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)蛋白表达。结果:与模型组比较,西红花苷组、瑞沙托维组和西红花苷+瑞沙托维组视网膜厚度升高、血管通透性降低(均P<0.05);视网膜组织病变明显减轻,视网膜感受器内外节层及内外核层细胞超微结构病变明显改善;视网膜TNF-α、IL-1β、IL-8、sICAM-1含量显著降低,TLR4、MyD88、胞核NF-κB p65、HMGB1相对表达量和胞核NF-κB p65/总NF-κB p65比值降低(均P<0.05)。西红花苷+瑞沙托维组对DR大鼠各指标的影响明显优于西红花苷组和瑞沙托维组(均P<0.05)。结论:西红花苷可降低DR大鼠视网膜血管通透性,减轻视网膜组织病变和细胞超微结构病变,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路和NF-κB核转位,减少促炎因子释放有关。 展开更多
关键词 西红花苷 糖尿病视网膜病变 视网膜厚度 血管通透性 TLR4/MyD88/nf-κb通路 炎症
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痛风雏鹅肠道菌群通过TLR4/MyD88/NF-κB通路促进肾损伤的研究 被引量:8
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作者 朱道仙 吴植 +2 位作者 陆江 黄涛 刘莉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期543-552,共10页
旨在研究痛风雏鹅的肠道菌群对肾损伤的影响及作用机制。本研究选取具有典型痛风特征的雏鹅15只,相同日龄及生长环境下的健康雏鹅15只,利用16S rDNA测序技术分析盲肠内容物中菌群的差异;用改良苦味酸法测定血清肌酐(Cr),用酶比色法测定... 旨在研究痛风雏鹅的肠道菌群对肾损伤的影响及作用机制。本研究选取具有典型痛风特征的雏鹅15只,相同日龄及生长环境下的健康雏鹅15只,利用16S rDNA测序技术分析盲肠内容物中菌群的差异;用改良苦味酸法测定血清肌酐(Cr),用酶比色法测定血清尿酸(UA),用脲酶-谷氨酸脱氢酶法测定血清尿素氮(BUN);用RT-qPCR和Western blot法测定肾组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素1β(IL^-1β)、肿瘤坏死因子ɑ(TNF-ɑ)及白细胞介素6(IL-6)的mRNA和蛋白表达量。并将肠道菌群移植给无菌小鼠进行验证。结果显示:1)与健康雏鹅比较,痛风雏鹅肠道菌群16S rDNA测序所得操作分类单元(OTUs)数量、Chao 1指数及Shannon指数均显著降低(P<0.01),变形菌门、埃希菌属、变形菌属及肠球菌属等细菌丰度显著增加,痛风雏鹅肠道菌群在免疫系统、细菌感染、膜传输及核苷酸代谢等代谢途径参与度较高;2)与健康雏鹅比较,痛风雏鹅肾组织中TLR4、MyD88、NF-κB、IL^-1β、TNF-ɑ及IL-6的mRNA表达及蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01),且这些分子表达量与Cr、BUN及UA呈正相关,与埃希菌属、变形菌属及肠球菌属等菌属丰度呈强正相关关系;3)移植痛风雏鹅肠道菌群小鼠的肾小管发生变性,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA表达量及血中Cr、BUN、肾损伤因子-1(KIM-1)等水平显著高于移植健康雏鹅菌群的小鼠;给予移植痛风雏鹅菌群小鼠TAK-242后,可回调这些变化。综上表明,痛风雏鹅肠道菌群发生了变化,并可激活LTR4/MyD88/NF-κB通路,诱发炎症反应,促进肾损伤的发生。 展开更多
关键词 痛风雏鹅 肠道菌群 16S rDNA测序 LTR4/MyD88/nf-κb通路 肾损伤
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虎杖苷调控TLR4/MyD88/NF-κB通路对宫颈癌上皮间质转化、迁移和侵袭的影响 被引量:4
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作者 王晓暖 吴颖 邱慧玲 《中国优生与遗传杂志》 2023年第7期1353-1359,共7页
目的探讨虎杖苷对宫颈癌上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法将人宫颈癌SiHa细胞作为研究对象,将对数生长期细胞分为正常组、50μmol/L虎杖苷组(虎杖苷50μmol/L)、100μmol/L虎杖苷组(虎杖苷100μmol/L)、200μmol/L... 目的探讨虎杖苷对宫颈癌上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法将人宫颈癌SiHa细胞作为研究对象,将对数生长期细胞分为正常组、50μmol/L虎杖苷组(虎杖苷50μmol/L)、100μmol/L虎杖苷组(虎杖苷100μmol/L)、200μmol/L虎杖苷组(虎杖苷200μmol/L)、pcDNA组、pcDNA-TLR4组、pcDNA组和pcDNA-TLR4组将pcDNA和pcDNA-TLR4转染于SiHa细胞中后,使用200μmol/L虎杖苷干预24 h。MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞划痕愈合;Transwell法检测细胞侵袭;ELISA法检测细胞上清IFN-γ、TNF-α和IL-1β的水平;Western blot检测细胞TLR4、MyD88、p-P65、P65、N-cadherin、Vimentin、E-cadherin蛋白表达。结果与正常组相比,50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L虎杖苷组细胞存活率、细胞划痕愈合率、细胞侵袭个数、LPS诱导的细胞上清IFN-γ、TNF-α和IL-1β水平、TLR4、MyD88、p-P65、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05);当SiHa细胞中TLR4过表达时,会减弱虎杖苷对细胞的增殖、EMT、迁移和侵袭以及炎症抑制作用,并抑制细胞凋亡。结论虎杖苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路,有效地抑制了宫颈癌增殖、EMT、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 虎杖苷 TLR4/MyD88/nf-κb通路 宫颈癌 上皮间质转化
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桔梗总皂苷对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用及对TLR/MyD88/NF-κB通路的影响 被引量:7
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作者 何晓丽 钟先锦 +1 位作者 龚菊梅 刘修树 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期931-935,共5页
目的:探讨桔梗总皂苷对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用及对Toll样受体4/髓样分子因子88/核因子-κB(TLR/MyD88/NF-κB)通路的影响,阐明桔梗总皂苷对类风湿性关节炎(RA)的治疗机制。方法:将70只大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组、桔梗... 目的:探讨桔梗总皂苷对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用及对Toll样受体4/髓样分子因子88/核因子-κB(TLR/MyD88/NF-κB)通路的影响,阐明桔梗总皂苷对类风湿性关节炎(RA)的治疗机制。方法:将70只大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组、桔梗总皂苷(CKS)低剂量组、CKS高剂量组、雷公藤多苷组,每组14只。采用Ⅱ型胶原建立胶原性关节炎大鼠模型。CKS低剂量组和高剂量组大鼠分别给予CKS 100 mg/kg和200 mg/kg灌胃,雷公藤多苷组大鼠给予雷公藤多苷12 mg/kg灌胃作为阳性对照组。记录给药28 d后关节炎指数。HE染色观察踝关节滑膜组织病理学变化。ELISA法测定滑膜组织IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot测定滑膜组织TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平。免疫组化法测定滑膜组织NF-κB蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),滑膜组织TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05),滑膜组织NF-κB蛋白IOD值升高(P<0.05);与模型组比较,CKS各剂量组大鼠关节炎指数降低(P<0.05),踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平降低,NF-κB蛋白IOD值降低(P<0.05)。HE染色:对照组大鼠踝关节未见异常;模型组大鼠踝关节出现增生性滑膜炎表现,CKS各剂量组大鼠踝关节增生性滑膜炎表现明显减轻。CKS对各指标的影响呈剂量依赖性。结论:桔梗总皂苷可抑制胶原性关节炎滑膜组织炎症反应及TLR/MyD88/NF-κB信号通路,发挥对胶原性关节炎的防治作用。 展开更多
关键词 桔梗总皂苷 类风湿性关节炎 炎症 TLR/MyD88/nf-κb通路
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熊果酸对妊娠期糖尿病期间高糖诱导的滋养层细胞损伤的改善作用及其机制探讨
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作者 吕桂雪 曹勋荣 +1 位作者 田君 续晓楠 《河北医药》 CAS 2024年第10期1458-1462,1467,共6页
目的研究熊果酸对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响,并初步探讨可能的潜在机制。方法将人HTR-8/SVneo滋养层细胞系分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、模型组(25 mmol/L葡萄糖)、低剂量组(25 mmol/L葡萄糖+1μmol/L熊果酸)、中剂量组(25 mmo... 目的研究熊果酸对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响,并初步探讨可能的潜在机制。方法将人HTR-8/SVneo滋养层细胞系分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、模型组(25 mmol/L葡萄糖)、低剂量组(25 mmol/L葡萄糖+1μmol/L熊果酸)、中剂量组(25 mmol/L葡萄糖+3μmol/L熊果酸)、高剂量组(25 mmol/L葡萄糖+5μmol/L熊果酸)。分别采用细胞计数试剂盒-8、乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测和流式细胞术检测细胞活力、细胞毒性和凋亡。采用酶联免疫吸附试验和相应试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、IL-1β、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。蛋白免疫印迹用于分析Toll-样受体4(TLR4)/髓系分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组细胞活力、Bcl-2蛋白表达,以及IL-10、SOD和CAT水平均显著降低,而LDH释放量、细胞凋亡率、Bax、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达及TNF-α、IL-1β和MDA水平均显著升高(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞活力、Bcl-2蛋白表达,以及IL-10、SOD和CAT水平均显著升高,而LDH释放量、细胞凋亡率、Bax、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达及TNF-α、IL-1β和MDA水平均显著降低(P<0.05)。结论熊果酸对能够通过抑制炎症、氧化应激和细胞凋亡来防止GDM期间高糖诱导的滋养层细胞损伤,这可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路激活来实现。 展开更多
关键词 熊果酸 滋养层细胞 妊娠期糖尿病 炎症 氧化应激 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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益糖康调控2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路实验研究 被引量:2
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作者 姜楠 于嘉祥 +4 位作者 马贤德 杨宇峰 冀天威 张文顺 石岩 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2023年第3期14-18,共5页
目的观察益糖康对2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨益糖康对2型糖尿病的抗炎作用机制。方法将SPF级SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组(不做处理),模型组(蒸馏水,5 mL/kg),益糖康组(益糖康汤剂,5 g/kg)和... 目的观察益糖康对2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨益糖康对2型糖尿病的抗炎作用机制。方法将SPF级SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组(不做处理),模型组(蒸馏水,5 mL/kg),益糖康组(益糖康汤剂,5 g/kg)和二甲双胍组(150 mg/kg),每组10只。所有大鼠给药途径均为经口灌胃,每日1次,连续4周。干预4周后,称量各组大鼠的体质量,快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG),手工法测定各组大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,称量白色脂肪(WAT)和棕色脂肪(BAT)总质量,并计算脂肪指数。酶联免疫吸附法检测肠黏膜组织中脂多糖(LPS)含量,脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western-blot法检测脂肪组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,其余3组大鼠的体质量,FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量,TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著升高(P<0.01);HDL-C、BAT的水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,益糖康组大鼠体质量显著升高(P<0.01),二甲双胍组没有显著差异(P>0.05),益糖康组和二甲双胍组大鼠FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量以及脂肪组织中TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著降低(P<0.01),HDL-C、BAT的水平显著升高(P<0.01)。益糖康组大鼠体质量显著高于二甲双胍组(P<0.01)外,其余指标益糖康组和二甲双胍组之间比较均没有显著差异(P>0.05)。结论益糖康可能通过降低肠黏膜中LPS的含量进而抑制脂肪组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的过度活化,发挥抗炎作用,最终实现调控糖脂代谢的作用。 展开更多
关键词 益糖康 脂多糖 TLR4/MyD88/nf-κb通路 脂肪组织炎症 2型糖尿病
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桂郁金醇提物对脂多糖致小鼠肺损伤的保护作用研究
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作者 胡明霞 邓艳萍 +4 位作者 何永芸 姚玥 莫晓丹 黄安 杨秀芬 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3652-3661,共10页
[目的]研究桂郁金醇提物对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。[方法]将54只雄性昆明小鼠随机分成6组:空白组、模型组、地塞米松阳性对照组及桂郁金醇提物低(2 g/kg)、中(4 g/kg)、高(40 g/kg)剂量组,每组9只。给药组小鼠分... [目的]研究桂郁金醇提物对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。[方法]将54只雄性昆明小鼠随机分成6组:空白组、模型组、地塞米松阳性对照组及桂郁金醇提物低(2 g/kg)、中(4 g/kg)、高(40 g/kg)剂量组,每组9只。给药组小鼠分别灌胃给予地塞米松(5 mg/kg)或相应浓度桂郁金醇提物混悬液(0.2 mL/10 g),空白组和模型组小鼠灌胃给予相应体积的0.5%羧甲基维生素钠(CMC-Na),连续灌胃5 d。末次给药1 h后,除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS,12 h后麻醉并处死小鼠,剖取肺脏组织。试验中观察造模前后小鼠一般情况变化,统计小鼠体重变化、肺脏指数,测定肺脏重湿/干比。通过HE染色观察小鼠肺脏组织病理学变化并进行肺损伤评分;利用实时荧光定量PCR检测肺脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、髓样分化因子88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)mRNA表达水平。[结果]与空白组相比,模型组小鼠体重增长率极显著下降(P<0.01),肺脏指数、肺脏重湿/干比和肺损伤总评分均极显著升高(P<0.01),肺脏组织相关炎症因子mRNA相对表达量均显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01),成功构建ALI小鼠模型。与模型组相比,桂郁金醇提物各剂量组小鼠体重增长率显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);桂郁金醇提物中、高剂量组小鼠肺脏指数、肺脏重湿/干比均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);桂郁金醇提物高剂量组小鼠肺损伤总评分和肺脏组织中TNF-α、IL-6基因mRNA表达量显著降低(P<0.05);桂郁金醇提物中剂量组小鼠肺脏组织中NF-κB基因mRNA表达量显著降低(P<0.05)。[结论]桂郁金醇提物对LPS诱导的小鼠ALI具有保护作用,其作用机制可能与桂郁金醇提物减轻TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导的炎症损伤有关。 展开更多
关键词 桂郁金醇提物 脂多糖 小鼠 急性肺损伤 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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镰形棘豆总黄酮对胃癌细胞凋亡及TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响 被引量:6
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作者 哈红萍 安旭光 《山东医药》 CAS 2019年第2期14-17,共4页
目的观察镰形棘豆总黄酮(FOF)对胃癌细胞凋亡及Toll样受体4(TLR4)/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 MTT法检测不同浓度FOF作用下胃癌细胞株SGC7901、MKN-49P、AGS、MKN45、KATOⅢ的增殖情况,确定以IC50最小的SGC7901细胞作为受试细胞,FOF... 目的观察镰形棘豆总黄酮(FOF)对胃癌细胞凋亡及Toll样受体4(TLR4)/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 MTT法检测不同浓度FOF作用下胃癌细胞株SGC7901、MKN-49P、AGS、MKN45、KATOⅢ的增殖情况,确定以IC50最小的SGC7901细胞作为受试细胞,FOF作用浓度为10~40μg/m L、作用时间为48 h。将对数生长期的SGC7901细胞分为6组,脂多糖(LPS)组加入2μg/m L的TLR4激活剂LPS,ER+LPS组先加入100 nmol/L TLR4抑制剂Eritoran处理2 h后再加入2μg/m L LPS,LFOF、MFOF、HFOF+LPS组先分别加入10、20、40μg/m L FOF处理2 h后再加入2μg/m L LPS,空白组加入等量溶媒。处理48 h后,用流式细胞仪测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中的细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Survivin)、TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白(TLR4、p-TLR4、MyD88、p-MyD88、p65、p-p65),细胞免疫荧光法观察细胞p65蛋白进核情况。结果与空白组比较,LPS组SGC7901细胞凋亡率下降,Bax蛋白表达降低,Bcl-2、Survivin、p-TLR4、p-MyD88及p-p65蛋白表达上升,p65进核量增加(P均<0. 05);与LPS组比较,ER+LPS组、LFOF+LPS组、MFOF+LPS组和HFOF+LPS组SGC7901细胞凋亡率上升,Bax蛋白表达升高,Bcl-2、Survivin、p-TLR4、p-MyD88及p-p65蛋白表达降低,p65进核量减少(P均<0. 05)。结论 FOF可诱导胃癌SGC7901细胞凋亡,该作用与其抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路活性有关。 展开更多
关键词 镰形棘豆总黄酮 胃癌细胞 TLR4/MyD88/nf-κb通路 细胞凋亡
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基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究参苓白术散对IBS-D大鼠的干预机制 被引量:2
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作者 朱卫 曾婷婷 《湖南中医杂志》 2023年第12期128-134,共7页
目的:基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠的干预机制。方法:将48只大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组[20 mg/(kg·d)]、参苓白术散组[SLBZ组,1.44 g/(kg·d)]、TLR4抑制剂组[TA... 目的:基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠的干预机制。方法:将48只大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组[20 mg/(kg·d)]、参苓白术散组[SLBZ组,1.44 g/(kg·d)]、TLR4抑制剂组[TAK-242组,1 mg/(kg·d)]、TLR4抑制剂+参苓白术散组(TAK-242+SLBZ组),每组各8只。除空白组外,其余各组均采用4%乙酸构建IBS-D大鼠模型。造模成功后,各给药组给予相应的药物灌胃,连续7 d。观察大鼠一般情况,体质量及粪便Bristol评分,结肠组织病理学变化,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,结肠组织闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白(Occludin)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:成功造模38只。与空白组比较,模型组大鼠体质量下降,粪便Bristol评分升高,HE染色可见炎症细胞浸润,血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平升高,结肠组织ZO-1与Occludin蛋白水平降低,TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05)。与模型组比较,匹维溴铵组、SLBZ组、TAK-242组、TAK-242+SLBZ组大鼠体质量增加,粪便Bristol评分降低,HE染色炎症细胞浸润减少,血清IL-6、IL-1β及TNF-α水平均显著下降,ZO-1和Occludin蛋白表达水平升高,TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白表达水平下降(均P<0.05)。与匹维溴铵组、SLBZ组、TAK-242组比较,TAK-242+SLBZ组大鼠结肠组织ZO-1与Occludin蛋白表达水平升高,TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平下降(均P<0.05)。结论:参苓白术散可改善IBS-D大鼠腹泻症状,降低血清炎症因子水平,修复肠黏膜,其机制可能是通过调控TLR4/MyD88/NF-kB信号通路来达到减轻肠道炎症反应的目的。 展开更多
关键词 腹泻型肠易激综合征 参苓白术散 TLR4/MyD88/nf-κb通路 实验研究
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柑橘皮活性成分橙皮苷结合有氧间歇运动对PM2.5致大鼠肺部损伤影响的研究
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作者 刘勇 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第14期4767-4775,共9页
橙皮苷(hesperidin,HES)是一种广泛存在于柑橘皮中的类黄酮物质,具有明显的抗炎、抗氧化以及器官保护作用,并且长期服用橙皮苷对人体健康有促进作用。本研究旨在探讨橙皮苷结合有氧间歇运动对PM_(2.5)致大鼠肺部损伤的治疗效果,及其在调... 橙皮苷(hesperidin,HES)是一种广泛存在于柑橘皮中的类黄酮物质,具有明显的抗炎、抗氧化以及器官保护作用,并且长期服用橙皮苷对人体健康有促进作用。本研究旨在探讨橙皮苷结合有氧间歇运动对PM_(2.5)致大鼠肺部损伤的治疗效果,及其在调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路方面的潜在机制。研究采用PM_(2.5)颗粒暴露大鼠模型,通过对比不同实验组大鼠肺组织中TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白的表达水平,评估橙皮苷和有氧间歇运动的治疗效果。研究结果显示,与单独PM_(2.5)暴露组相比,橙皮苷治疗组和有氧间歇运动组均能显著降低TLR4、My D88、p-NF-κB p65的表达,减轻肺部炎症。其中,橙皮苷结合有氧间歇运动的联合干预效果最为显著。这些发现提示,橙皮苷结合有氧间歇运动能有效减轻PM_(2.5)引起的肺部损伤,其作用机制可能与其对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节有关。本研究为PM_(2.5)相关肺部疾病的预防和治疗提供了新的策略和理论依据。 展开更多
关键词 橙皮苷 有氧间歇运动 PM2.5 肺部损伤 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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miR-223-3p调节TLR4/MyD88/NF-κB通路影响脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应
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作者 王现生 于红艳 +1 位作者 郭小燕 侯峰岩 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第3期437-442,共6页
目的:探讨miR-223-3p对脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应的影响。方法:实验分成2部分,每个部分分为2组,共4组:miRNA阴性对照(mimic NC)+LPS组,miR-223-3p模拟物(miR-223-3p mimic)+LPS组;miR-223-3p mimic+BAY11-7082+LPS组,miR-223-3p... 目的:探讨miR-223-3p对脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应的影响。方法:实验分成2部分,每个部分分为2组,共4组:miRNA阴性对照(mimic NC)+LPS组,miR-223-3p模拟物(miR-223-3p mimic)+LPS组;miR-223-3p mimic+BAY11-7082+LPS组,miR-223-3p mimic+等量溶剂(vehicle)+LPS组。随后利用Western blot实验检测每组TLR4/MyD88/NF-κB表达水平,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测促炎细胞因子水平,CCK-8法检测细胞活力。结果:与mimic NC+LPS组相比,miR-223-3p mimic+LPS组的TLR4/MyD88/NF-κB蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。与miR-223-3p mimic+BAY11-7082+LPS组相比,miR-223-3p mimic+vehicle+LPS组的TLR4/MyD88/NF-κB蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。结论:miR-223-3p可以通过抑制TLR4/My D88/NF-κB促进A549细胞增殖、抑制促炎细胞因子的分泌,从而抑制肺癌中炎症的发生,本研究为今后临床上肺癌的治疗及药物开发提供了新策略。 展开更多
关键词 肺癌 脂多糖 miR-223-3p TLR4/MyD88/nf-κb通路
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基于TLR-4/MyD88/NF-κB对健脾化滞丸治疗溃疡性结肠炎的机制进行拆方研究
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作者 景姗 顾玮 +1 位作者 刘小丽 顾庆华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1075-1081,共7页
目的:通过建立脾虚湿蕴型溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,探讨健脾化滞丸及其不同拆方对TLR-4/MyD88/NF-κB通路的影响。方法:64只Wistar大鼠随机分为正常对照组8只、模型组56只,采用中医证候联合乙醇-2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法复制UC大鼠模... 目的:通过建立脾虚湿蕴型溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,探讨健脾化滞丸及其不同拆方对TLR-4/MyD88/NF-κB通路的影响。方法:64只Wistar大鼠随机分为正常对照组8只、模型组56只,采用中医证候联合乙醇-2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法复制UC大鼠模型,造模成功后,将模型大鼠随机分为模型组(M)、美沙拉嗪组(A)、健脾化滞丸全方组(B)、健脾清化方组(C)、健脾清化活血方组(D)、健脾清化导滞方组(E)、清化导滞活血方组(F),每组8只,给予相应药物灌胃4周,疗程结束后处死所有大鼠并取材,观察大鼠体质量变化、疾病活动度及结肠病理改变,ELISA及免疫组化检测大鼠结肠组织TNF-α表达;RT-PCR及Western blot检测大鼠结肠组织TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达。结果:健脾化滞丸全方、健脾清化方、健脾清化活血方组及健脾清化导滞方组大鼠体质量明显高于模型组(P<0.01),各治疗组均能明显改善UC模型大鼠结肠组织病理损伤及疾病活动指数,其中健脾化滞丸全方组及健脾清化活血方组作用最好。各治疗组均可抑制结肠组织TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达(P<0.001),其中美沙拉嗪组、健脾化滞丸全方组、健脾清化导滞方组及清化导滞活血方组在降低NF-κB mRNA及蛋白表达上明显优于健脾清化方组及健脾清化活血方组(P<0.05)。各组均能降低结肠组织TNF-α表达(P<0.001),组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾化滞丸及各拆方均可能通过TLR-4/MyD88/NF-κB通路发挥作用,其中黄连、煨木香、凤尾草、炮姜可能为本方核心药物,对临床具有一定指导意义。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 健脾化滞丸 TLR-4/MyD88/nf-κb通路 Tnf
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桉柠蒎肠溶软胶囊基于AQP5-TLR4/MyD88/NF-κB通路缓解小鼠分泌性中耳炎研究
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作者 何碧瑶 杨俊杰 +3 位作者 党龙姣 孙萌萌 刘佳宇 辛文妤 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第8期1820-1826,共7页
目的基于水通道蛋白5(AQP5)-Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)通路探讨桉柠蒎肠溶软胶囊对小鼠分泌性中耳炎(OME)模型的治疗作用及机制。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和桉柠蒎肠溶软... 目的基于水通道蛋白5(AQP5)-Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)通路探讨桉柠蒎肠溶软胶囊对小鼠分泌性中耳炎(OME)模型的治疗作用及机制。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和桉柠蒎肠溶软胶囊低、中、高剂量(55、110、220 mg·kg^(-1))组。采用经鼓膜注入脂多糖(LPS)的方法建立小鼠OME模型,显微镜观察各组小鼠鼓膜结构变化,苏木精-伊红(HE)染色法评估中耳组织病理学改变,ELISA法检测中耳灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blotting检测中耳黏膜组织AQP5及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠鼓室积脓,鼓室黏膜增厚,有明显的炎症细胞浸润,中耳灌洗液中IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.01),AQP5蛋白表达显著降低(P<0.01),TLR4、MyD88、p-IκBα、p-p65蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,桉柠蒎肠溶软胶囊各剂量可以减轻鼓室积脓,减少炎症细胞浸润,明显降低中耳灌洗液中IL-6、TNF-α水平(P<0.01),显著升高AQP5蛋白表达(P<0.01),明显降低TLR4、MyD88、p-IκBα、p-p65蛋白表达(P<0.01)。结论桉柠蒎肠溶软胶囊通过提高AQP5蛋白的表达,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活,减轻LPS诱导的OME。 展开更多
关键词 桉柠蒎肠溶软胶囊 分泌性中耳炎 脂多糖 水通道蛋白5 TLR4/MyD88/nf-κb通路
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田蓟苷下调TLR4/Myd88/NF-κB信号通路抑制NLRP3炎症小体和炎症反应
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作者 张兴宇 徐磊 +3 位作者 卡德尔业·卡德尔 王守宝 邢建国 郑瑞芳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2012-2019,共8页
本研究通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞建立炎症反应模型,探讨田蓟苷(tilianin)对炎症反应的影响及其作用机制。通过CCK-8(cell counting kit-8)实验检测细胞活力,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent a... 本研究通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞建立炎症反应模型,探讨田蓟苷(tilianin)对炎症反应的影响及其作用机制。通过CCK-8(cell counting kit-8)实验检测细胞活力,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin6,IL-6)含量;Griess试剂法检测一氧化氮(nitricoxide,NO)含量;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen radical,ROS)水平;Western blot检测Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,Myd88)、核转录因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、磷酸化核转录因子-κB(phospho-nuclear factor-κB,p-NF-κB)、NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)和磷酸化NF-κB抑制蛋白α(phospho-inhibitor of NF-κBα,p-IκBα)的蛋白表达水平;qRT-PCR法和Western blot检测Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、IL-1β前体(pro-IL-1β)、IL-18前体(pro-IL-18)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)的mRNA和蛋白水平。免疫荧光染色检测NF-κB p65核转位;使用TLR4抑制剂resatorvid(TAK242)进一步验证田蓟苷对TLR4/Myd88/NF-κB信号通路的影响。结果显示,田蓟苷显著降低了RAW264.7细胞上清中TNF-α、IL-6和NO水平以及细胞内ROS含量。田蓟苷降低了TLR4、Myd88、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达水平,抑制了NF-κB p65的核转位,同时显著降低了NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18和pro-caspase-1的蛋白表达水平以及NLRP3和pro-IL-1β的mRNA水平。上述研究结果表明,田蓟苷能明显减轻LPS诱导RAW264.7细胞产生的炎症反应,其机制可能与下调TLR4/Myd88/NF-κB信号通路从而抑制NLRP3炎症小体有关。 展开更多
关键词 田蓟苷 脂多糖 RAW264.7细胞 TLR4/Myd88/nf-κb通路 NLRP3炎症小体
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