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皮肤溃疡伤口中Bax和Bcl-2蛋白含量的变化及其与溃疡发生的关系 被引量：24
1
作者 陈伟 付小兵 +3 位作者 孙同柱 赵志力 盛志勇 王振辉 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 2001年第24期54-55,共2页
目的观察Bax和Bcl-2蛋白在溃疡、溃疡边缘和正常皮肤组织中的表达特征及其对溃疡形成的影响。方法24例被测标本中包括不同类型的溃疡组织8例,其对应的溃疡边缘和正常皮肤组织各8例。用常规病理技术和免疫组化方法确定这两种蛋白在溃疡... 目的观察Bax和Bcl-2蛋白在溃疡、溃疡边缘和正常皮肤组织中的表达特征及其对溃疡形成的影响。方法24例被测标本中包括不同类型的溃疡组织8例,其对应的溃疡边缘和正常皮肤组织各8例。用常规病理技术和免疫组化方法确定这两种蛋白在溃疡组织和正常皮肤中的定位和表达量的变化规律。结果在正常皮肤组织中,Bax蛋白的阳性颗粒较少,在表皮细胞内稍有表达,而Bcl-2蛋白则主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞中。在溃疡组织中,Bax蛋白存在于表皮基底层细胞和部分成纤维细胞的胞浆中,而Bcl-2蛋白在表皮基底层细胞内有表达。从正常皮肤到溃疡组织,Bcl-2含量逐渐下降,而Bax的蛋白表达呈升高趋势。结论在正常皮肤和溃疡组织中,Bax和Bcl-2蛋白不同分布和表达变化规律显示,Bcl-2和Bax两种蛋白可能与溃疡创面处细胞凋亡增加相关,从而导致伤口愈合迟缓和溃疡的发生。 展开更多
关键词 BAX蛋白 Bcl- 2蛋白 溃疡组织 细胞凋亡
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Annexin A2的结构和功能及其与疾病的关系 被引量：9
2
作者 陆秋涯 黄立东 陆佩华 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期174-176,180,共4页
Annexins是一类钙依赖性膜磷脂结合蛋白。Annexin A2是Annexins家族中的一个重要成员,存在于细胞膜、胞质和胞外。Annexin A2蛋白在细胞膜构架的形成、膜聚合、内吞和胞吐中均扮演重要角色。Annexin A2还参与某些病理过程,与心血管疾病... Annexins是一类钙依赖性膜磷脂结合蛋白。Annexin A2是Annexins家族中的一个重要成员,存在于细胞膜、胞质和胞外。Annexin A2蛋白在细胞膜构架的形成、膜聚合、内吞和胞吐中均扮演重要角色。Annexin A2还参与某些病理过程,与心血管疾病、血液病、肿瘤等多种疾病相关。文章简要综述了Annexin A2分子的结构、生化特征、生物学功能及其与疾病的关系。 展开更多
关键词 ANNEXIN A2蛋白 P36 钙结合蛋白
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禽流感病毒M2蛋白跨膜区基因的缺失 被引量：9
3
作者 李永清 姚四新 +1 位作者 韦莉 杨汉春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期6-9,共4页
根据禽流感病毒 (AIV ) A/ Chicken/ Korea/ MS96 / 96 (H9N2 )株的核苷酸序列 ,设计并合成引物 ,通过 RT- PCR,从AIV H9N1株感染的 MDCK细胞总 RNA中扩增出 2 94 bp的 AIV全长的 M2基因。通过软件分析其序列中的跨膜区后 ,将其与p GEM-... 根据禽流感病毒 (AIV ) A/ Chicken/ Korea/ MS96 / 96 (H9N2 )株的核苷酸序列 ,设计并合成引物 ,通过 RT- PCR,从AIV H9N1株感染的 MDCK细胞总 RNA中扩增出 2 94 bp的 AIV全长的 M2基因。通过软件分析其序列中的跨膜区后 ,将其与p GEM- T easy载体连接产物 p GEM- T/ M2为模板 ,通过 PCR扩增出约 90 bp左右 M2的膜外区编码序列和约 16 0 bp左右 M2的胞内区编码序列。将两个扩增产物同时作为模板 ,以 OE- PCR(overlap extension- PCR)扩增出约 2 5 0 bp的缺失跨膜区的 M2基因M2 d。测序结果表明 ,M2 d的序列除在跨膜区以 4个甘氨酸序列替代外 ,其余部分与 M2完全一致 ,由此说明 OE- PCR扩增法成功地将禽流感病毒 展开更多
关键词 禽流感病毒 M2蛋白 跨膜区 基因缺失 OE—PCR
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甲3型流感病毒M2基因在痘苗病毒天坛株中的表达 被引量：10
4
作者 王文玲 黄保英 +3 位作者 邓瑶 王秀平 谭文杰 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期377-383,共7页
为获得表达甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重组天坛株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法扩增流感病毒全长M2基因,将其克隆到天坛株痘苗病毒同源重组质粒pJSC1175中,获得重组质粒pJSC1175M2,通过与痘苗病毒载体同源重组,构建了含流感病毒M2基... 为获得表达甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重组天坛株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法扩增流感病毒全长M2基因,将其克隆到天坛株痘苗病毒同源重组质粒pJSC1175中,获得重组质粒pJSC1175M2,通过与痘苗病毒载体同源重组,构建了含流感病毒M2基因的重组痘苗病毒株RVJ1175M2。PCR检测结果证明,流感病毒(H3N2)M2蛋白基因准确插入到天坛株痘苗病毒TK区;Western blot、免疫荧光和流式细胞计数表明重组病毒RVJ1175M2可以有效地表达M2蛋白,表达的M2蛋白有两条带,分别为15kD和13kD,与相关文献报道一致;M2蛋白可有效分布在感染细胞的细胞膜上。这些结果表明重组痘苗病毒株RVJ1175M2可以有效地表达流感病毒M2蛋白,为使用表达M2蛋白的不同类型疫苗进行广谱流感疫苗效果的比较研究奠定了基础。 展开更多
关键词 流感病毒A3型 M2蛋白 重组痘苗病毒 基因表达
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基于猪流行性腹泻病毒变异毒株重组全长S2蛋白IgA抗体ELISA检测方法的建立及应用 被引量：4
5
作者 牟一娇 于瑞明 +1 位作者 张莉萍 王永录 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1185-1194,共10页
【目的】建立一种猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的IgA抗体ELISA检测方法。【方法】以PEDV流行株CH/HNPJ/2017(MF152604.1)为生物材料,通过RT-PCR扩增出S 2基因(2368—4170 bp),并将其插入到原核表达载体pET-... 【目的】建立一种猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的IgA抗体ELISA检测方法。【方法】以PEDV流行株CH/HNPJ/2017(MF152604.1)为生物材料,通过RT-PCR扩增出S 2基因(2368—4170 bp),并将其插入到原核表达载体pET-24a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,经镍柱纯化。Western blotting验证重组蛋白S2与PEDV阳性血清的反应原性和特异性。将其作为包被抗原,建立一种基于PEDV变异毒株重组全长S2蛋白的IgA抗体ELISA方法,用棋盘法确定该方法的最优检测条件,对其敏感性、特异性和重复性进行测定,并初步应用于130份猪血清和40份猪口腔黏液的检测。【结果】通过RT-PCR方法扩增出S 2基因,成功构建重组表达载体pET-24a-S2,转化大肠杆菌经诱导表达纯化后获得重组S2蛋白。SDS-PAGE结果显示,纯化的S2蛋白条带特异且无杂带;Western blotting试验表明该蛋白与PEDV阳性猪血清具有良好的反应性。ELISA方法反应条件优化结果显示,重组S2蛋白的最佳包被条件为每孔0.5μg、4℃过夜包被;血清最佳反应条件为1∶160稀释,37℃孵育60 min;酶标二抗最佳反应条件为1∶5000稀释,37℃反应30 min;TMB最佳显色时间为室温下10 min。待检样品S/P值≥0.04时为阳性,S/P值≤0.02时为阴性,S/P值介于0.02~0.04之间为可疑。利用本试验建立的ELISA方法检测猪瘟病毒、猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪德尔塔冠状病毒标准阳性血清,S/P值均<0.02,显示为阴性,说明该方法具有良好的特异性;将PEDV阳性血清进行640倍稀释时利用该方法检测仍为阳性,说明该方法具有良好的敏感性;利用该方法进行批间批内试验,变异系数均小于8%(在10%以内),表明该方法具有良好的重复性。利用该方法检测保存的130份猪血清,结果与IDEXX IgA抗体检测试剂盒的符合率为90.77%;该方法对40份猪口腔黏液的� 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 S2蛋白 IGA抗体 ELISA
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抗禽流感病毒M2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：8
6
作者 李永清 杨敬 +1 位作者 张莉 韦莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期475-478,共4页
目的:制备抗禽流感病毒M2蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:利用纯化的融合蛋白GST-M2免疫BALB/c小鼠,然后以GST-M2和GST分别作为ELISA抗原进行筛选,选择GST-M2抗原检测强阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆,建立能... 目的:制备抗禽流感病毒M2蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:利用纯化的融合蛋白GST-M2免疫BALB/c小鼠,然后以GST-M2和GST分别作为ELISA抗原进行筛选,选择GST-M2抗原检测强阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆,建立能稳定分泌抗AIV M2 mAb的杂交瘤细胞株。mAb的效价采用间接ELISA和琼脂扩散试验(AGP)测定,用夹心ELISA测定Ig亚类,Western blot、抗原捕获ELISA、间接免疫荧光及免疫组化染色法检测mAb的特性。结果:得到4株分泌抗禽流感病毒M2蛋白的mAb的杂交瘤细胞株1E1、2F8、4E3和5D6,小鼠腹水中抗体的ELISA效价大于210×100、AGP效价大于1∶4。抗体亚类鉴定1E1和4E3为IgG2a,2F8和5G6为IgG2b。抗原捕获ELISA表明,2F8 mAb能与H5、H9亚型AIV发生特异性反应,而不能与鸡新城疫病毒(NDV)和鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)反应。IFA和免疫组化试验表明,2F8 mAb能够与感染了禽流感病毒的MDCK细胞以及鸡体组织细胞发生特异性结合。结论:本研究获得4株抗禽流感病毒M2蛋白的mAb,其中2F8 mAb的效价高、特异性强,可作为检测AIV方法的核心试剂。 展开更多
关键词 禽流感病毒 M2蛋白 单克隆抗体
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刺五加有效部位干预MPP^+诱导PC12细胞损伤中LRRK 2的表达 被引量：7
7
作者 潘思文 白云 +1 位作者 阎超 孙环宇 《中国药师》 CAS 2017年第4期612-616,共5页
目的:观察刺五加有效部位对MPP^+诱导损伤的PC12细胞LRRK 2蛋白表达的影响,探讨其神经保护的作用机制。方法:采用MPP^+作用于PC12细胞构建帕金森病的细胞模型,以刺五加有效部位进行给药干预;采用MTT法测细胞存活率;荧光定量PCR法检测细... 目的:观察刺五加有效部位对MPP^+诱导损伤的PC12细胞LRRK 2蛋白表达的影响,探讨其神经保护的作用机制。方法:采用MPP^+作用于PC12细胞构建帕金森病的细胞模型,以刺五加有效部位进行给药干预;采用MTT法测细胞存活率;荧光定量PCR法检测细胞LRRK 2 mRNA的表达水平,Western blot法和免疫细胞化学法检测细胞LRRK 2蛋白的表达。结果:给药组与模型组比较,细胞存活率明显提高,差异有统计学意义(P<0.01);给药组与模型组比较,细胞中LRRK 2的蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:刺五加有效部位对PD细胞模型具有保护作用,刺五加有效部位下调LRRK2蛋白的表达水平可能是其起到保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 帕金森病 刺五加 PC12细胞 LRRK 2蛋白
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慢性应激对大鼠结肠粘蛋白muc2表达的影响 被引量：6
8
作者 仝巧云 罗和生 +2 位作者 朱宗耀 周纳新 盛崇明 《中国医师杂志》 CAS 2005年第5期629-631,共3页
目的了解慢性应激对大鼠结肠杯状细胞粘液及粘蛋白含量的影响。方法健康成年Wistar大鼠24只,随机分为实验组和对照组,对照组大鼠自由活动,实验组每天置于束缚笼内限制活动2h,持续14d后处死,粘液组化AB/PAS法观察结肠黏膜含粘液杯状细胞... 目的了解慢性应激对大鼠结肠杯状细胞粘液及粘蛋白含量的影响。方法健康成年Wistar大鼠24只,随机分为实验组和对照组,对照组大鼠自由活动,实验组每天置于束缚笼内限制活动2h,持续14d后处死,粘液组化AB/PAS法观察结肠黏膜含粘液杯状细胞的数目、免疫组化方法测定粘蛋白muc2的蛋白表达情况。结果重复应激引起大鼠结肠含粘液杯状细胞数目减少(33.00±6.31vs47.42±8.06)(t=4.878,P<0.01),杯状细胞内粘蛋白muc2蛋白表达减少(0.22±0.03vs0.26±0.02)(t=4.537,P<0.01)。结论慢性应激影响肠黏膜粘液分泌细胞的功能,损伤肠粘液保护屏障。 展开更多
关键词 慢性应激 MUC2 粘蛋白 成年WISTAR大鼠 免疫组化方法 粘液分泌细胞 杯状细胞 蛋白含量 限制活动 结肠黏膜 粘液组化 表达情况 细胞数目 重复应激 表达减少 对照组 实验组 PAS 2蛋白 细胞内 肠粘液 vs
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食管癌组织中EphA2蛋白的表达及其与E-钙粘蛋白的关系 被引量：2
9
作者 卢创新 李珊珊 +2 位作者 阎爱华 王新华 郭艳萍 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期409-410,共2页
最近研究发现,EphA2的高表达与许多肿瘤的组织学分级、淋巴结转移及预后有关.E-钙粘蛋白（E-cadherin）的表达减少或缺失也已被证实与多种人类肿瘤的恶性表型相关联.有研究表明,在上皮细胞中,E钙粘蛋白调控EphA2的配体结合及后续降解,... 最近研究发现,EphA2的高表达与许多肿瘤的组织学分级、淋巴结转移及预后有关.E-钙粘蛋白（E-cadherin）的表达减少或缺失也已被证实与多种人类肿瘤的恶性表型相关联.有研究表明,在上皮细胞中,E钙粘蛋白调控EphA2的配体结合及后续降解,从而调控EphA2的功能转化及表达.我们采用免疫组化方法,研究EphA2及E-钙粘蛋白在食管癌中的表达及相关性,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系及意义. 展开更多
关键词 E-钙粘蛋白 食管癌组织 2蛋白 EPHA2 免疫组化方法 临床病理特征 人类肿瘤 组织学分级 淋巴结转移 E钙粘蛋白
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ERK在NGF诱导PC12细胞分化中的作用 被引量：6
10
作者 张雯 彭芳芳 +3 位作者 张百芳 沈晗 吴少波 武栋成 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第3期227-231,共5页
目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1/2蛋白和磷酸化ERK1/2蛋白水平的影响,并观察MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂U012... 目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1/2蛋白和磷酸化ERK1/2蛋白水平的影响,并观察MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对NGF诱导的细胞形态学改变的影响。结果ERK1/2蛋白的磷酸化呈现NGF剂量和时间依赖性。NGF作用细胞5min即可观察到明显的ERK1/2蛋白磷酸化,持续1h左右,2h时降低到初始水平,而细胞形态的改变出现在NGF作用12h以后。倒置相差显微镜观察可见PC12细胞分化的程度与ERK1/2活化持续的时间正相关,U0126可完全即时抑制ERK1/2的活化,而ERK1/2活化的抑制可完全阻断NGF诱导的PC12细胞分化。结论ERK1/2的活化是PC12细胞发生分化的必需事件,其活化时间的长短对分化具有决定作用。 展开更多
关键词 细胞分化 NGF ERK1/2 细胞外信号调节激酶 细胞形态学改变 PC12细胞 免疫印迹检测 ERK激酶 时间依赖性 蛋白磷酸化 作用机制 分化模型 蛋白水平 作用时间 不同浓度 MAPK 微镜观察 细胞发生 决定作用 2蛋白 活化 抑制剂 NCF 正相关
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血清Sesn1、Sesn2与老年稳定期慢性阻塞性肺疾病并发肌少症的关系研究
11
作者 郝温温 李振生 +3 位作者 刘月桥 史晶晶 杜东琴 王国卫 《临床肺科杂志》 2024年第8期1172-1178,共7页
目的 探讨血清Sestrin 1蛋白(Sesn1)、Sestrin 2蛋白(Sesn2)与老年稳定期慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)并发肌少症的关系。方法 选择2020年3月至2023年3月于河北省胸科医院呼吸科门诊复诊的192例老年稳定期慢阻肺患者,根据是否并发肌少症将... 目的 探讨血清Sestrin 1蛋白(Sesn1)、Sestrin 2蛋白(Sesn2)与老年稳定期慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)并发肌少症的关系。方法 选择2020年3月至2023年3月于河北省胸科医院呼吸科门诊复诊的192例老年稳定期慢阻肺患者,根据是否并发肌少症将患者分为肌少症组(56例)和非肌少症组(136例)。检测两组患者血清Sesn1、Sesn2水平、肺功能指标以及体脂成分。Pearson检验分析肌少症组血清Sesn1、Sesn2水平与肺功能指标、体脂成分的相关性。收集患者的临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析老年稳定期慢阻肺患者并发肌少症的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Sesn1、Sesn2对老年稳定期慢阻肺患者并发肌少症的诊断价值。结果 肌少症组血清Sesn1、Sesn2水平、FEV1、FEV1/FVC、SM、AM、FFM低于非肌少症组(P<0.05)。肌少症组血清Sesn1、Sesn2水平与FEV1、FEV1/FVC、SM、AM、FFM呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄偏大是老年稳定期慢阻肺并发肌少症的危险因素(P<0.05),高体质量指数、高Sesn1水平、高Sesn2水平、高FEV1/FVC则是保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Sesn1、Sesn2单独检测诊断老年稳定期慢阻肺患者并发肌少症的曲线下面积(AUC)(95%CI)为0.810(95%CI:0.747~0.863)、0.827(95%CI:0.766~0.878),联合检测诊断的AUC为0.903(95%CI:0.852~0.941),高于各指标单独诊断(Z=3.265、3.012,P<0.05)。结论 老年稳定期慢阻肺并发肌少症患者的血清Sesn1、Sesn2水平降低,且与肺功能降低、肌肉质量减少有关,二者水平升高是老年稳定期慢阻肺患者并发肌少症的保护因素,二者联合检测对老年稳定期慢阻肺患者并发肌少症具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 老年 肌少症 Sestrin 1蛋白 Sestrin 2蛋白
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H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析 被引量：5
12
作者 王晓杜 陈培君 +7 位作者 沈阳 邱亚峰 邓绪芳 史子学 彭丽娜 罗金燕 刘超 马志永 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期16-21,共6页
流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系... 流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于NS1、NP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 H3N2 猪流感病毒 M2蛋白 多克隆抗体
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A型流感病毒M2蛋白研究进展 被引量：4
13
作者 万春和 刘明 《动物医学进展》 CSCD 2007年第7期56-60,共5页
M2蛋白是A型流感病毒所特有的一种结构保守的非糖基化的跨膜蛋白,主要在病毒脱壳时酸化病毒粒子的内部环境,在表面血凝素糖蛋白合成过程中作为质子通道调节高尔基体跨膜转移通道的pH。其核苷酸序列高度保守,几乎不发生变异。其25位~43... M2蛋白是A型流感病毒所特有的一种结构保守的非糖基化的跨膜蛋白,主要在病毒脱壳时酸化病毒粒子的内部环境,在表面血凝素糖蛋白合成过程中作为质子通道调节高尔基体跨膜转移通道的pH。其核苷酸序列高度保守,几乎不发生变异。其25位~43位氨基酸多肽是金刚烷胺类抗流感病毒药物的作用靶位,氨基酸极小变异都可能导致流感病毒抗药性的产生。M2蛋白胞外区域的氨基酸残基多肽（M2e）的特异性抗体可以在感染流感病毒的动物血清中检测出来,将M2e与相关佐剂联合使用可极大的提高机体对流感病毒的免疫力,在病毒感染中起重要作用,是一种潜在的交叉保护性抗原,常被用来探索具有广谱性和持久性的流感＂通用疫苗＂。 展开更多
关键词 A型流感病毒 M2蛋白 疫苗
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流行性感冒病毒M2蛋白可溶性表达及其免疫原性的研究 被引量：2
14
作者 张立国 曾革非 +4 位作者 董婕 陈爱君 姚立红 郭元吉 张智清 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期318-321,共4页
流行性感冒 (流感 )病毒的M2蛋白是其保护性抗原之一 ,在几乎所有甲型流感病毒中高度保守 ,因此可以用来研究具有交叉保护能力的流感疫苗。然而M2分子在病毒颗粒中含量非常少 ,用从病毒中纯化的方法很难获得足够的免疫原。在原核表达时... 流行性感冒 (流感 )病毒的M2蛋白是其保护性抗原之一 ,在几乎所有甲型流感病毒中高度保守 ,因此可以用来研究具有交叉保护能力的流感疫苗。然而M2分子在病毒颗粒中含量非常少 ,用从病毒中纯化的方法很难获得足够的免疫原。在原核表达时发现 ,M2蛋白对宿主菌具有很强的毒性作用 ,导致其死亡 ,因此很难获得高表达。在本研究中 ,采用RT PCR方法从病毒感染的MDCK细胞中克隆了A1/PR/ 8/ 34毒株的M 2基因 ,然后通过基因工程手段缺失了M 2蛋白的跨膜区 2 6～ 5 5位氨基酸的编码序列 ,将其克隆到 pET 32a中 ,与硫氧还蛋白融合 ,在大肠杆菌中获得了高效表达 ,并且表达产物以可溶形式存在 ,不形成包涵体。利用硫酸铵盐析结合金属离子鏊和柱亲和层析的方法纯化了表达的融合蛋白。免疫荧光实验表明 ,融合蛋白免疫小鼠后产生的抗血清能够与流感病毒感染的细胞发生特异性的结合 ,证明表达产物具有流感病毒M2蛋白的抗原性。 展开更多
关键词 流行性感冒病毒 M2蛋白 可溶性表达 免疫原性
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FDA批准用于预防和治疗甲型流感的药物——盐酸金刚乙胺 被引量：6
15
作者 刘君澜 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1748-1749,共2页
关键词 抗流感病毒药物 盐酸金刚乙胺 甲型流感 FDA批准 治疗 预防 抑制病毒复制 美国食品药品管理局 M2蛋白 神经氨酸酶
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禽流感病毒M2蛋白研究进展 被引量：4
16
作者 管洁 周育森 《微生物学免疫学进展》 2007年第2期84-86,共3页
禽流感病毒M2蛋白是由97个氨基酸残基组成的同源四聚体,大量表达于感染细胞的表面,具有对病毒脱壳和出芽起重要作用的离子通道活性。M2蛋白不仅可诱导机体产生抗体,而且是CTL的靶抗原,因此可作为研究流感亚单位疫苗的靶蛋白。
关键词 禽流感 M2蛋白 四聚体 离子通道 流感亚单位疫苗
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2008-2011年监测季儿童甲型H3N2流感病毒金刚烷胺类药物耐药分析 被引量：5
17
作者 卢桂兰 刘医萌 +6 位作者 彭晓旻 梁慧洁 张代涛 张莉 吴双胜 杨鹏 王全意 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第8期595-598,共4页
目的分析2008-2011年连续3个流感监测季80株儿童甲型H3N2病毒流行株金刚烷胺类耐药情况以及M基因进化特点,对流感治疗的临床用药和流感的防控提供依据。方法收集儿童甲型H3N2流感病例信息以及病毒毒株,提取病毒核酸、扩增M基因和测序。... 目的分析2008-2011年连续3个流感监测季80株儿童甲型H3N2病毒流行株金刚烷胺类耐药情况以及M基因进化特点,对流感治疗的临床用药和流感的防控提供依据。方法收集儿童甲型H3N2流感病例信息以及病毒毒株,提取病毒核酸、扩增M基因和测序。对M2蛋白的金刚烷胺耐药性位点进行分析;并对M基因序列构建进化树分析。结果 80株毒株中,79株出现耐药位点氨基酸的变异,耐药率为98.75%。79株耐药株中,75株发生了S31N替换,占耐药株的构成比94.94%;还有3株同时发生了V27I和S31N位点变异,占3.80%;1株同时发生了V27F和S31N氨基酸位点变异,占1.26%。2008-2011连续3个监测季甲型H3N2流感毒株耐药率分别为87.50%、100.00%和100.00%。M基因遗传进化分析显示呈现出3个进化分支。结论自2009-2010年监测季以来,北京及周边地区儿童甲型H3N2流行株的金刚烷胺类药物耐药率已达100%,提示临床不应再继续使用金刚烷胺类药物进行甲型H3N2流感的治疗。 展开更多
关键词 流感病毒 儿童 M2蛋白 金刚烷胺 耐药性
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流感病毒M1蛋白与M2蛋白相互作用以及其在病毒出芽中的作用 被引量：4
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作者 侯天龙 包旦奇 +2 位作者 李泽君 刘芹防 刘焕奇 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第6期1-5,共5页
流感病毒为囊膜病毒,以出芽的方式释放病毒。M1蛋白是流感病毒的基质蛋白,在维持病毒颗粒形态与病毒的致病性中发挥重要作用。M2蛋白是离子通道蛋白,在病毒出芽过程中发挥重要作用。研究显示M1蛋白与M2蛋白存在相互作用,但是这种互作在... 流感病毒为囊膜病毒,以出芽的方式释放病毒。M1蛋白是流感病毒的基质蛋白,在维持病毒颗粒形态与病毒的致病性中发挥重要作用。M2蛋白是离子通道蛋白,在病毒出芽过程中发挥重要作用。研究显示M1蛋白与M2蛋白存在相互作用,但是这种互作在病毒出芽中的功能尚不清楚。根据M1蛋白的结构,M1蛋白分成N端、C端和中间区域3个区域,与M2蛋白相互作用的区域也不清楚。本文利用双分子荧光互补实验与病毒出芽实验方法研究了M1蛋白与M2蛋白互作的区域及这种互作在病毒出芽中的作用。研究结果显示,M2蛋白通过与M1蛋白的N端1～160个氨基酸相互作用,从而帮助M1蛋白出芽;M1蛋白的1～20氨基酸与140～160氨基酸在决定M1蛋白的稳定性与功能发挥中具有重要作用,缺失这2个氨基酸序列可导致M1蛋白N端1～160个氨基酸蛋白不稳定,并不能与M2蛋白互作。本研究揭示了3H1N1流感病毒M1蛋白与M2蛋白互作功能区域、以及他们之间相互作用在流感病毒出芽中发挥的重要作用。 展开更多
关键词 流感病毒 M1蛋白 M2蛋白 出芽
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不同剂量姜黄素对急性脊髓损伤模型小鼠神经功能的保护作用 被引量：4
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作者 马鹏程 黄芳芳 +1 位作者 付立新 田雨 《中医学报》 CAS 2018年第8期1472-1475,共4页
目的:探讨不同剂量姜黄素预处理对急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型小鼠神经功能保护作用,研究其作用机制,为临床合理用药提供参考。方法:将50只成年ASCI模型小鼠随机分为姜黄素高剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂... 目的:探讨不同剂量姜黄素预处理对急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型小鼠神经功能保护作用,研究其作用机制,为临床合理用药提供参考。方法:将50只成年ASCI模型小鼠随机分为姜黄素高剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂量组、甲强龙组和模型组,分别给予姜黄素200 mg·kg^(-1)、100 mg·kg^(-1)、50 mg·kg^(-1),甲强龙50 mg·kg^(-1)以及生理盐水腹腔注射。采用BBB分级法和改良Rivlin斜板实验检测后肢功能,采用酶免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达;采用免疫印迹法(Western blot)检测Nrf 2蛋白的表达。结果:姜黄素高剂量组BBB评分与Rivilin斜板评分均高于其他组,与甲强龙组、模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);姜黄素中剂量组、低剂量组及甲强龙组BBB评分与Rivilin斜板评分显著高于模型组(P<0.05);姜黄素中剂量组、低剂量组及甲强龙组BBB评分与Rivilin斜板评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组有少量Nrf 2蛋白表达,姜黄素中剂量组、低剂量组及甲强龙组表达均明显,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中姜黄素高剂量组表达最为明显。姜黄素高剂量组IL-6、TNF-α表达水平分别为(0.92±0.06)μg·L^(-1)和(42.54±12.41)μg·L^(-1),明显低于其他组(P<0.05);姜黄素中剂量组、低剂量组及甲强龙组IL-6、TNF-α比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于模型组(P<0.05)。结论:姜黄素能够上调ASCI模型小鼠Nrf 2蛋白表达,降低IL-6、TNF-α水平,保护神经功能,促进运动功能的恢复,其中给予200 g姜黄素效果最佳。 展开更多
关键词 姜黄素 急性脊髓损伤 神经功能 运动功能 炎症因子 Nrf 2蛋白 小鼠
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JAG2、INHBA、PD-L1蛋白在老年大肠癌组织中表达及与预后的关系
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作者 江少锋 李蓉蓉 贺滢 《中国医药导报》 CAS 2023年第35期31-36,共6页
目的 探讨老年大肠癌患者肿瘤组织中Jagged 2蛋白(JAG2)、抑制素βA(INHBA)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)表达与预后的关系。方法 选择2017年5月至2019年5月在湖南省肿瘤医院接受手术治疗的112例老年大肠癌患者为研究对象,采用免疫组... 目的 探讨老年大肠癌患者肿瘤组织中Jagged 2蛋白(JAG2)、抑制素βA(INHBA)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)表达与预后的关系。方法 选择2017年5月至2019年5月在湖南省肿瘤医院接受手术治疗的112例老年大肠癌患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中JAG2、INHBA、PD-L1表达。随访患者的生存时间,Cox回归模型分析JAG2、INHBA、PD-L1表达与老年大肠癌患者预后的关系。结果 患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化患者JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于中高分化患者,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。Cox回归模型显示,肿瘤低分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、JAG2、INHBA、PD-L1表达阳性为影响老年大肠癌患者无进展生存时间的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阴性患者总生存率高于JAG2、INHBA、PD-L1阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阴性患者无进展生存率高于JAG2阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 老年大肠癌患者癌组织中JAG2、INHBA、PD-L1阳性表达率较高,且对预后评估具有重要意义。 展开更多
关键词 老年大肠癌 肿瘤组织 Jagged 2蛋白 抑制素βA 细胞程序性死亡-配体1
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