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东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的克隆及表达分析 被引量：14
1
作者 李玉坤 王学敏 +3 位作者 高洪文 仁爱琴 王赞 孙桂枝 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期95-101,共7页
超氧化物歧化酶是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类,在植物的抗逆性中起到重要的作用。文章采用RACE方法,从东方山羊豆中克隆了Cu/ZnSOD基因,并对其进行了初步分析。该基因cDNA序列全长935 bp,开放阅读框600 bp,编码199个氨基酸,蛋... 超氧化物歧化酶是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类,在植物的抗逆性中起到重要的作用。文章采用RACE方法,从东方山羊豆中克隆了Cu/ZnSOD基因,并对其进行了初步分析。该基因cDNA序列全长935 bp,开放阅读框600 bp,编码199个氨基酸,蛋白质分子量为20.35 kDa。通过实时荧光定量PCR结果分析,该基因在东方山羊豆叶中表达量最多,茎中次之,根中最少。在NaCl和PEG诱导下,Cu/ZnSOD基因表达量先上调后下降。NaCl诱导24 h后,该基因的表达量显著低于对照。ABA胁迫抑制了该基因的表达。亚细胞定位结果表明,Cu/ZnSOD蛋白定位于叶绿体中。实验结果证明,Cu/ZnSOD基因主要在东方山羊豆的绿色组织中表达,在抵抗渗透性胁迫方面起到一定作用。 展开更多
关键词 东方山羊豆 cu/znsod基因 基因克隆 实时荧光定量PCR 亚细胞定位
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大鼠急性羰基镍中毒肺脏SOD活性及Cu-Zn SOD基因表达的实验观察 被引量：9
2
作者 王宁 王秋英 +4 位作者 张小培 吴喜江 闫铭峰 宣小强 程宁 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期180-183,共4页
目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒后肺组织SOD活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肺脏急性毒性作用机制。方法健康SD大鼠静态吸入染毒,染毒时间为30 min,羰基镍染毒浓度分别为20 mg/m3、135 mg/m3和250 mg/m3,氯气染毒250... 目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒后肺组织SOD活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肺脏急性毒性作用机制。方法健康SD大鼠静态吸入染毒,染毒时间为30 min,羰基镍染毒浓度分别为20 mg/m3、135 mg/m3和250 mg/m3,氯气染毒250 mg/m3为染毒对照组,健康大鼠为正常对照组,染毒后1 d、2 d、3 d和7 d分别取材,应用黄嘌呤氧化酶测定法和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别测定各组大鼠不同取材时间段下肺组织SOD活力并分析Cu-Zn SOD基因表达水平。结果在低、中、高剂量羰基镍染毒条件下,肺脏SOD活力均有下降,以中剂量组染毒7 d时和高剂量组染毒3 d时肺SOD降低最为显著(P<0.05);氯气染毒后也显著下降(P<0.05)。与正常对照组相比,羰基镍低、中、高剂量染毒组肺脏Cu-Zn SOD基因表达差异均无统计学意义,而氯气染毒组表达明显降低(P<0.05)。结论羰基镍可诱发肺组织氧化损伤,降低SOD活力。在不同染毒剂量下,以高剂量染毒组肺氧化损伤最为明显;在不同取材时间下,以中剂量染毒7 d时和高剂量染毒3 d时肺氧化损伤最为明显。 展开更多
关键词 羰基镍 急性中毒 SOD活力 cu-znsod基因
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大鼠急性羰基镍中毒肝脏SOD酶活力及其基因表达的观察 被引量：4
3
作者 王秋英 王宁 +4 位作者 宣小强 马海霞 吴喜江 罗琴 程宁 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期225-229,共5页
目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肝脏的急性毒性作用及其中毒机制。方法健康SD大鼠静态吸入方式染毒,羰基镍染毒浓度分别为20、135和250 mg/m3,设氯气染毒25... 目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肝脏的急性毒性作用及其中毒机制。方法健康SD大鼠静态吸入方式染毒,羰基镍染毒浓度分别为20、135和250 mg/m3,设氯气染毒250 mg/m3为染毒对照组,染毒时间均为30 min,并设正常对照组,染毒后第1、第2、第3和第7天取材,应用黄嘌呤氧化酶测定法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别测定不同组大鼠肝组织SOD活力并分析Cu-Zn SOD mRNA的表达水平。结果在低、中、高剂量羰基镍染毒条件下,肝脏SOD活力均明显下降(P<0.05),以染毒第3天时肝SOD降低最为明显(P<0.05);氯气染毒后肝脏SOD活力也明显下降(P<0.05)。在氯气染毒第2天和高剂量羰基镍染毒组染毒第3天,肝脏Cu-Zn SOD基因表达低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高、中、低剂量羰基镍均可诱发肝组织氧化损伤,降低SOD活力,以染毒第3天和第7天下降最明显。 展开更多
关键词 羰基镍 SOD酶活力 cu-znsod基因
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昆虫杆状病毒细胞凋亡相关基因的研究进展 被引量：2
4
作者 尚金燕 崔为正 《中国蚕业》 2003年第2期8-10,共3页
细胞凋亡(Apoptosis)或细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD),最早被Kerr(1972)定义为一种有秩序、受控制并按某种预定程序发展的细胞生理性自然死亡过程.
关键词 昆虫 杆状病毒 细胞凋亡 P35基因 iap基因 p49基因 gp64基因 p94基因 cu/znsod基因 iel基因
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Cu／ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗易于出现mtDNA缺失突变—FOS对组织损伤的特异性研究
5
作者 张欣欣 丁大连 等 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期258-263,共6页
目的：探讨ROS对各种组织mtDNA的损伤情况，耳蜗mtDNA是否为ROS损伤的标靶。方法：应用套式PCR及分子克隆测序技术对10只Sod1基因敲除小鼠及5只同系野生型小鼠耳蜗、脑、肝脏、肾脏、心脏及皮肤组织进行研究。结果：1.各组mtDNA可检测到... 目的：探讨ROS对各种组织mtDNA的损伤情况，耳蜗mtDNA是否为ROS损伤的标靶。方法：应用套式PCR及分子克隆测序技术对10只Sod1基因敲除小鼠及5只同系野生型小鼠耳蜗、脑、肝脏、肾脏、心脏及皮肤组织进行研究。结果：1.各组mtDNA可检测到3种缺失，常见的缺失为mtDNA3867bp和mtDNA3726bp缺失，mtDNA4236bp缺失不常见。2.mtDNA缺失在不同组织的含量有明显的不同，肝脏和肾脏组织含量最高，耳蜗、心脏和大脑组织其次，脾脏及皮肤组织含量最低。与野生型小鼠比较，Sod1基因敲除小鼠mtDNA在不同组织的缺失量是野生型小鼠的3-20倍，其中耳蜗组织mtDNA缺失量约是WT小鼠的15倍。结论：缺乏Sod1的保护，ROS可以攻击各种组织mtDNA，但具有明显的组织特异性，耳蜗mtDNA是其损害的敏感标靶。 展开更多
关键词 cu/znsod基因 基因敲除 耳蜗 基因突变 组织特异性 创伤
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东亚砂藓Cu/Zn SOD基因的克隆及序列分析
6
作者 于冰 沙伟 刘卓 《安徽农业科学》 CAS 2012年第23期11587-11590,共4页
[目的]对东亚砂藓(Rhacomitrunm japonicum)的Cu/Zn SOD基因进行克隆,并对其序列进行分析。[方法]利用RT-PCR技术获得东亚砂藓Cu/Zn SOD基因的cDNA,同时对该序列进行生物信息学分析。[结果]东亚砂藓Cu/Zn SOD基因cDNA长565 bp,包含一个... [目的]对东亚砂藓(Rhacomitrunm japonicum)的Cu/Zn SOD基因进行克隆,并对其序列进行分析。[方法]利用RT-PCR技术获得东亚砂藓Cu/Zn SOD基因的cDNA,同时对该序列进行生物信息学分析。[结果]东亚砂藓Cu/Zn SOD基因cDNA长565 bp,包含一个长为465 bp的ORF,编码154个氨基酸残基,预测的该蛋白的分子量为15.5 kD,理论等电点为5.77,负电荷残基(Asp+Glu)总数为18个,正电荷残基(Arg+Lys)总数为12个,不稳定系数是13.36;其编码的氨基酸序列包含了5个蛋白保守区,均为铜锌超氧化物歧化酶超家族所有;Blastn比对表明东亚砂藓Cu/Zn SOD基因与毛尖紫萼藓、小立碗藓相关基因的同源性高达99%和82%。[结论]该研究为进一步研究紫萼藓科植物的抗旱性及苔藓Cu/Zn-SOD在抗非生物胁迫方面的功能提供了理论依据与基础。 展开更多
关键词 东亚砂藓 cu/znsod基因 克隆 序列分析
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Cu/ZnSOD基因敲除小鼠——研究耳蜗氧化损伤的理想模型 被引量：1
7
作者 张欣欣 韩东一 +4 位作者 丁大连 戴朴 杨伟炎 姜泗长 Richard J.Salvi 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2001年第4期209-212,共4页
目的　确定一个理想的耳蜗氧化损伤模型。方法　对 5只Cu/ZnSOD基因敲除纯合突变 (Cu/ZnSOD无活性 ,Sod1- / - )小鼠和 10只Cu/ZnSOD杂合突变 (5 0 %Cu/ZnSOD失活 ,Sod1+/ - )小鼠及 5只野生小鼠 (Cu/Zn SOD活性正常 ,Sod1+/ +)进行ABR... 目的　确定一个理想的耳蜗氧化损伤模型。方法　对 5只Cu/ZnSOD基因敲除纯合突变 (Cu/ZnSOD无活性 ,Sod1- / - )小鼠和 10只Cu/ZnSOD杂合突变 (5 0 %Cu/ZnSOD失活 ,Sod1+/ - )小鼠及 5只野生小鼠 (Cu/Zn SOD活性正常 ,Sod1+/ +)进行ABR检测及内、外毛细胞计数。应用PCR技术检测Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗mtDNA缺失情况。结果　Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗内外毛细胞大量缺失 (P <0 .0 0 1) ,ABR检测 ,Sod1- / -小鼠ABR阈值在 8,16 ,32kHz及Sod1+/ -小鼠ABR阈值在 16 ,32kHz明显增大 (P <0 .0 0 1)。Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗mtDNA有三种缺失 ,分别为mtDNA 386 7bp、mtDNA 372 6bp及mtDNA 432 6bp缺失。结论　Cu/ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗在细胞及分子水平上均表现出受到ROS损伤的改变 ,是一个理想的耳蜗氧化损伤模型。 展开更多
关键词 cu/znsod基因敲除 活性氧 模型 耳蜗氧化损伤
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转逆境诱导型启动子SWPA2驱动Cu/ZnSOD和APX基因甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.)耐盐性 被引量：12
8
作者 王欣 过晓明 +3 位作者 李强 唐忠厚 郭尚洙 马代夫 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第6期754-759,共6页
本研究以盐胁迫下逆境诱导型启动子SWPA2驱动转Cu/Zn SOD和APX基因甘薯叶片一些生理指标的变化研究转基因甘薯耐盐性。结果表明:无胁迫时,转基因甘薯叶的生理指标与未转基因植株无明显差异。相同胁迫条件下,转基因甘薯叶的超氧化物歧化... 本研究以盐胁迫下逆境诱导型启动子SWPA2驱动转Cu/Zn SOD和APX基因甘薯叶片一些生理指标的变化研究转基因甘薯耐盐性。结果表明:无胁迫时,转基因甘薯叶的生理指标与未转基因植株无明显差异。相同胁迫条件下,转基因甘薯叶的超氧化物歧化酶(SOD),抗坏血酸过氧化物酶(APX),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)活性均高于未转基因甘薯叶,尤以100mmol/LNaCl胁迫下差异最显著;转基因植株的根长也大于未转基因植株;转基因植株的叶绿素下降幅度和MDA含量则低于未转基因植株。这说明转基因甘薯具有一定的耐盐性。因此开发种植转基因耐盐甘薯对有效利用盐渍化土地和缓解能源危机有重大的意义。 展开更多
关键词 逆境诱导型启动子SWPA2 cu/znsod-APX基因 转基因甘薯 耐盐性
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