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红花转录因子CtMYB1基因的克隆及原核表达
被引量：
10
1
作者
官丽莉
张雪
+6 位作者
韩怡来
朱栋
杨晶
杜林娜
王法微
李海燕
李校堃
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第17期2603-2609,共7页
目的从红花Carthamus tinctorius花瓣中克隆转录因子基因Ct MYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到Ct MYB1基因的全长c DN...
目的从红花Carthamus tinctorius花瓣中克隆转录因子基因Ct MYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到Ct MYB1基因的全长c DNA序列,并进行生物信息学分析;以Ct MYB1基因的全长c DNA序列为模板,PCR扩增得到Ct MYB1基因的开放阅读框(ORF)序列,构建原核表达载体p EASY-E1-Ct MYB1。转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果成功从红花中克隆1个MYB基因,命名为Ct MYB1,Gen Bank登录号为KJ524853。Ct MYB1基因全长893 bp,ORF为750 bp,编码249个氨基酸。同时,成功构建了该基因的原核表达载体。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约30 000,与预测的蛋白相对分子质量一致。结论成功克隆了Ct MYB1基因,构建了原核表达载体,初步证明该基因在大肠杆菌中成功表达。
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关键词
红花
MYB
ctmyb
1
原核表达
红花黄色素
RT-PCR
RACE
原文传递
红花CtMYB-TF1基因的克隆与表达分析
被引量：
1
2
作者
王丹丹
刘华栋
宋林
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期278-286,共9页
为了探索R2R3-MYB转录因子与植物类黄酮的次生代谢调控之关系,及对植物花青素合成代谢的作用,以红花花瓣为试验材料,采用RT-PCR结合RACE技术,从红花(Carthamus tinctorius)中克隆获得1个全长1260 bp的调控花青素代谢的CtMYB-TF1基因。...
为了探索R2R3-MYB转录因子与植物类黄酮的次生代谢调控之关系,及对植物花青素合成代谢的作用,以红花花瓣为试验材料,采用RT-PCR结合RACE技术,从红花(Carthamus tinctorius)中克隆获得1个全长1260 bp的调控花青素代谢的CtMYB-TF1基因。结果表明,该基因序列可编码249个氨基酸,其蛋白质分子质量为28.08 ku;红花CtMYB-TF1蛋白分子式为C_(1220)H_(1930)N_(358)O_(378)S_(13),是一种不稳定的碱性亲水蛋白;由系统进化树分析可知,红花CtMYB-TF1与葡萄VvMYBPA1亲缘关系较近;通过RT-qPCR技术对表达体系进行基因表达量的检测分析,红花CtMYB-TF1基因在花期的各个时期相对表达量均高于红花CtANS基因,并且随着花期的延长红花CtMYB-TF1基因和CtANS基因的相对表达量也有增高,其中在花期的第5天红花CtMYB-TF1基因的相对表达量出现峰值,说明CtMYB-TF1基因对CtANS基因具明显的上调作用,可为构建高产、稳定的红花基因工程改良细胞株提供参考。
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关键词
红花
花青素
ctmyb
-TF
1
RACE
表达分析
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职称材料
题名
红花转录因子CtMYB1基因的克隆及原核表达
被引量：
10
1
作者
官丽莉
张雪
韩怡来
朱栋
杨晶
杜林娜
王法微
李海燕
李校堃
机构
吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心
吉林农业大学生命科学学院
出处
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第17期2603-2609,共7页
基金
国家高技术研究发展计划("863")项目(2011AA100606)
国家自然科学基金资助项目(31201237
+3 种基金
31101172)
吉林省科技厅中青年领军人才及优秀创新团队项目(20111815)
教育部博士点基金-青年教师基金项目(20122223120002)
大学生创新创业项目(201410193045)
文摘
目的从红花Carthamus tinctorius花瓣中克隆转录因子基因Ct MYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到Ct MYB1基因的全长c DNA序列,并进行生物信息学分析;以Ct MYB1基因的全长c DNA序列为模板,PCR扩增得到Ct MYB1基因的开放阅读框(ORF)序列,构建原核表达载体p EASY-E1-Ct MYB1。转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果成功从红花中克隆1个MYB基因,命名为Ct MYB1,Gen Bank登录号为KJ524853。Ct MYB1基因全长893 bp,ORF为750 bp,编码249个氨基酸。同时,成功构建了该基因的原核表达载体。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约30 000,与预测的蛋白相对分子质量一致。结论成功克隆了Ct MYB1基因,构建了原核表达载体,初步证明该基因在大肠杆菌中成功表达。
关键词
红花
MYB
ctmyb
1
原核表达
红花黄色素
RT-PCR
RACE
Keywords
Carthamus tinctorius L.
MYB
Ct MYB
1
prokaryotic expression
safflor yellow
RT-PCR
RACE
分类号
R282.12 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
红花CtMYB-TF1基因的克隆与表达分析
被引量：
1
2
作者
王丹丹
刘华栋
宋林
机构
辽东学院农学院
渭南市农业技术推广中心
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期278-286,共9页
基金
中央财政专项:生物产业技术研发平台—满族道地药材种植基地建设(851800501)
丹东市2016科技攻关(2016KJ001)
辽东学院青年基金(2017QN050)。
文摘
为了探索R2R3-MYB转录因子与植物类黄酮的次生代谢调控之关系,及对植物花青素合成代谢的作用,以红花花瓣为试验材料,采用RT-PCR结合RACE技术,从红花(Carthamus tinctorius)中克隆获得1个全长1260 bp的调控花青素代谢的CtMYB-TF1基因。结果表明,该基因序列可编码249个氨基酸,其蛋白质分子质量为28.08 ku;红花CtMYB-TF1蛋白分子式为C_(1220)H_(1930)N_(358)O_(378)S_(13),是一种不稳定的碱性亲水蛋白;由系统进化树分析可知,红花CtMYB-TF1与葡萄VvMYBPA1亲缘关系较近;通过RT-qPCR技术对表达体系进行基因表达量的检测分析,红花CtMYB-TF1基因在花期的各个时期相对表达量均高于红花CtANS基因,并且随着花期的延长红花CtMYB-TF1基因和CtANS基因的相对表达量也有增高,其中在花期的第5天红花CtMYB-TF1基因的相对表达量出现峰值,说明CtMYB-TF1基因对CtANS基因具明显的上调作用,可为构建高产、稳定的红花基因工程改良细胞株提供参考。
关键词
红花
花青素
ctmyb
-TF
1
RACE
表达分析
Keywords
Carthamus tinctorius
Anthocyanin
ctmyb
-TF
1
RACE
Expression analysis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
红花转录因子CtMYB1基因的克隆及原核表达
官丽莉
张雪
韩怡来
朱栋
杨晶
杜林娜
王法微
李海燕
李校堃
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2015
10
原文传递
2
红花CtMYB-TF1基因的克隆与表达分析
王丹丹
刘华栋
宋林
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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