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2011-2015年安阳地区手足口病相关人肠道病毒B种病原组成及柯萨奇病毒B2、B5 VP1基因特征分析 被引量：9
1
作者 李洋 张相萍 +2 位作者 翟明强 黄学勇 李懿 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期435-441,共7页
目的：调查2011—2015年安阳地区手足口病（ hand,foot and mouth disease, HFMD）相关人肠道病毒B种（HEV-B）病原组成,对柯萨奇病毒B2（CVB2）和柯萨奇病毒B5（CVB5）VP1基因特征进行研究。方法使用实时荧光逆转录 PCR 和半巢式逆转录... 目的：调查2011—2015年安阳地区手足口病（ hand,foot and mouth disease, HFMD）相关人肠道病毒B种（HEV-B）病原组成,对柯萨奇病毒B2（CVB2）和柯萨奇病毒B5（CVB5）VP1基因特征进行研究。方法使用实时荧光逆转录 PCR 和半巢式逆转录 PCR 法对柯萨奇病毒 A16（CVA16）、肠道病毒71（EV71）以及其他肠道病毒进行鉴定,以获得完整的手足口病病原组成,统计出HEV-B病原种类及阳性比例。针对HEV-B病原中阳性病例数较多的CVB2和CVB5病原,分别以其VP1基因为靶段设计引物 PCR扩增测序后获得 VP1基因核苷酸序列全长。使用 MEGA7.0和BioEdit7.2软件对本研究获得的CVB2、CVB5序列以及GenBank数据库已收录的全部相关VP1序列构建系统发育树并进行系统发育分析。使用DateMonkey在线分析程序对我国近年来流行的CVB2和CVB5毒株的VP1基因进行选择压力分析。结果2011—2015年安阳地区共鉴定出手足口病相关HEV-B病原14种,HEV-B阳性标本57份。 HEV-B病原占手足口病全部病原种类的比例为56%, HEV-B阳性标本占总肠道病毒阳性标本的比例为3.06%。绝大多数HEV-B病原引起的手足口病呈高度散发,个别病原如 CVB2、CVB5在特定时间内的病例较为聚集。经过测序获得安阳地区8条CVB2和9条CVB5 VP1序列。构建的系统发育树显示,CVB2毒株可分为A-D四个基因型,各基因型的组间平均进化距离介于0.191-0.208,核苷酸序列相似性介于79.7%-85.8%。 CVB5毒株可分为A-F六个基因型,各基因型的组间平均进化距离介于0.170-0.285,核苷酸序列相似性介于76.0%-86.8%。 CVB2 VP1基因氨基酸序列第157、263位,CVB5 VP1基因氨基酸序列第75、90、95位在不同基因型毒株中的残基有较大差异。安阳地区CVB2序列均属于D基因型,且集中于1个分支内；CVB5序列均属于F基因型,分布于其中2个分支内。中国大陆地区近年流行的CVB2（ D基因型）和CVB5（F基因亚型）毒株的进化� 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 柯萨奇病毒b2 柯萨奇病毒b5 系统发育树 正向选择压力
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2021年云南省两地区手足口病病原构成及柯萨奇病毒B2型VP1区基因特征分析
2
作者 寸建萍 李楠 +7 位作者 皮自林 周雪花 曹亿会 姜黎黎 周晓芳 杨溪 伏晓庆 田炳均 《中国病毒病杂志》 CAS 2024年第2期119-123,共5页
目的对2021年云南省曲靖市和文山州两地区手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)病原构成及检测到的6株柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CVB2)VP1区基因特征进行分析,为今后手足口病及CVB2感染的防控提供科学依据。方法对2021... 目的对2021年云南省曲靖市和文山州两地区手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)病原构成及检测到的6株柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CVB2)VP1区基因特征进行分析,为今后手足口病及CVB2感染的防控提供科学依据。方法对2021年1—12月云南省曲靖市和文山州收集到的手足口病病例粪便标本开展肠道病毒实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription PCR,real-time qRT-PCR)检测,并对结果为其他肠道病毒(非EV-A71及非CVA16)的标本进行VP1区核酸序列测定。按文献下载CVB2病毒VP1基因代表株参考序列,用Mega 5.2软件进行基因特征分析,用邻位相接法构建系统进化树,所用模式为Kimura二参数置换法(Kimura 2-parameter substitution model)。结果2021年云南省曲靖市和文山州共收集手足口病病例粪便标本1164份,经real-time qRT-PCR检测,检出肠道病毒阳性标本927份,阳性率为79.64%(927/1164),其中EV-A71型109份,占9.36%(109/1164);CV A16型343份,占29.47%(343/1164);其他肠道病毒475份,占51.24%(475/927)。对其他肠道病毒进行基因测序,鉴定出6株CVB2(曲靖市2株、文山州4株),占比为1.26%(6/475),基因特征分析结果表明6株CVB2病毒属于基因型D中的分支2。结论2021年云南省曲靖市和文山州的手足口病病例标本中其他肠道病毒阳性检出率最高,两地区均检出CVB2病毒,且同为D基因型中的分支2,提示在今后手足口病病原监测中应加强对其他肠道病毒的分型分析,以便全面了解手足口病的病原构成,为科学防控提供依据。 展开更多
关键词 手足口病 病原 柯萨奇病毒b2型 VP1区基因 基因特征分析
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柯萨奇B2病毒致低硒乳鼠心肌损伤的实验研究 被引量：4
3
作者 高彦辉 刘红 +5 位作者 周令望 刘阳 刘艺 迟月明 曾宪惠 钟学宽 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期165-167,共3页
目的　探讨柯萨奇 B2病毒 (CVB2 )在低硒足蛋白条件下对乳鼠心肌损伤作用。方法　应用低硒合成饲料 (硒含量 0 .0 16 mg/kg)喂养昆明鼠 5周后交配 ,取其子代 7日龄乳鼠经腹腔注入 CVB2 10 7TCID50 0 .1ml,9d后处死 ,取其心脏。常规石蜡... 目的　探讨柯萨奇 B2病毒 (CVB2 )在低硒足蛋白条件下对乳鼠心肌损伤作用。方法　应用低硒合成饲料 (硒含量 0 .0 16 mg/kg)喂养昆明鼠 5周后交配 ,取其子代 7日龄乳鼠经腹腔注入 CVB2 10 7TCID50 0 .1ml,9d后处死 ,取其心脏。常规石蜡包埋、切片、HE染色光镜检查 ;部分心肌做电镜观察。结果　低硒、补硒合成饲料感染病毒组鼠光镜下心肌病变检出率分别为 4 4 .1%和 15 .7% ,低硒和补硒对照组均未检出病变。结论　足蛋白条件下硒缺乏仍可增强 展开更多
关键词 柯萨奇b2病毒 低硒 心肌损伤 CVb2 克山病
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柯萨奇病毒B组2型(CVB2)病毒蛋白转染上皮细胞后诱导的免疫应答信号分子的特征分析
4
作者 牟唐维 吴化叶 +3 位作者 柳蕾 王建斌 张莹 李琦涵 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期321-326,共6页
目的分析柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CVB2)病毒蛋白转染上皮细胞后诱导的免疫应答信号分子特征。方法构建CVB2结构蛋白重组真核表达质粒转染16HBE细胞,收集转染后的16HBE细胞培养上清和裂解物。利用RT-Q-PCR技术检测转染后的16... 目的分析柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CVB2)病毒蛋白转染上皮细胞后诱导的免疫应答信号分子特征。方法构建CVB2结构蛋白重组真核表达质粒转染16HBE细胞,收集转染后的16HBE细胞培养上清和裂解物。利用RT-Q-PCR技术检测转染后的16HBE细胞中与固有免疫应答相关的信号分子的mRNA表达水平。利用ELISPOT检测转染后的16HBE细胞上清和裂解物与T细胞共培养后该T细胞的增殖效应。结果CVB2结构蛋白VP1~VP4转染16HBE细胞后与固有免疫相关的信号分子如TAK、NIK、IKKα、IFN-β等基因表达量均发生了不同程度的上调;CVB2 VP1~VP4转染后的16HBE细胞上清和裂解物与T细胞共培养发现,均能刺激T细胞增殖。结论CVB2结构蛋白VP1~VP4可以不同程度地激活与固有免疫相关信号分子的表达,并且对适应性免疫的激活具有促进作用。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b组2型 结构蛋白 免疫应答
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云南省柯萨奇病毒B2型VP1区3′端序列的基因特征分析
5
作者 周永明 徐闻 +5 位作者 付晓庆 向以斌 周晓芳 寸建萍 姜黎黎 田炳均 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期492-498,共7页
目的对云南省柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CV-B2)不同时间分离的15株病毒VP1区3′端编码序列基因特征进行分析。方法对云南省2005—2006年从急性迟缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例、2013年从健康儿童和2014年从手足... 目的对云南省柯萨奇病毒B组2型(coxsackievirus B2,CV-B2)不同时间分离的15株病毒VP1区3′端编码序列基因特征进行分析。方法对云南省2005—2006年从急性迟缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例、2013年从健康儿童和2014年从手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)病例中分离到的15株CV-B2的VP1区3′端进行基因扩增和测序;根据文献从GenBank下载CV-B2VP1编码序列作为参考序列,用MEGA5.2软件计算不同毒株间的核苷酸(nucleotide,nt)和氨基酸(amino acid,aa)差异率,并构建系统进化树,进行VP1区3′端编码序列基因特征和分子流行病学分析。结果2005年云南省从232例AFP病例中分离到1株CV-B2,2006年从240例AFP病例中分离到1株CV-B2,2013年从400名健康儿童中分离到12株CV-B2,2014年从500例HFMD病例中分离到1株CV-B2。对15株CV-B2基因特征分析表明,CV-B2可分为5个基因型。基因型1(genotype1)由原型株(prototype)Ohio-1和1988年中国台湾分离株01-1组成;基因型2由2006、2007和2010年法国株组成;基因型3由云南株、山东株、河南株、福建株和中国台湾株组成;基因型4由俄罗斯分离株、云南2005及2006年AFP分离株和印度株组成;基因型5由中国台湾分离株、山东株和澳大利亚新南威尔士株组成。CV-B2的基因型分布具有地理多样性的特点。结论云南省从健康儿童中分离的12株和从HFMD病例中分离到的1株CV-B2为基因型3,从AFP病例中分离到的2株CV-B2为基因型4。健康儿童分离株与HFMD分离株之间的nt差异率仅为0.76%,aa差异率仅为0.03%,它们具有同一进化来源。而健康儿童分离株、HFMD分离株(基因型3)与2005年、2006年两株AFP分离株(基因型4)的nt差异率为15.11%和15.25%,aa差异率为2.76%和2.72%。CV-B2与AFP和HFMD的致病关系值得深入研究。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b2型 VP1基因 基因特征分析
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一株柯萨奇病毒B2分离株的VP1基因序列特征分析 被引量：1
6
作者 苏婷 朱艳菊 +6 位作者 闫姗姗 陈俊英 杨舜乔 潘玥 陈伟 邵聪文 马绍辉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期49-53,共5页
目的分析一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）B2分离株（CVB2）全VP1基因序列特征。方法用RD细胞对10份HFMD疑似患儿的粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1基因,并测序,采用NCBI BLAST、Mega 6.1和Geneious等软件... 目的分析一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）B2分离株（CVB2）全VP1基因序列特征。方法用RD细胞对10份HFMD疑似患儿的粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1基因,并测序,采用NCBI BLAST、Mega 6.1和Geneious等软件进行序列分析,并构建系统进化树。结果从10份HFMD疑似患儿粪便中分离到一株CVB2,命名为509/YN/CHN/2010,其全长VP1基因的核苷酸长度与其他CVB2一致,均为846 bp。与中国其他分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为81.0%～95.3%和97.9%～98.9%,而与国外分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为81.1%～87.8%和97.9%～98.6%。在进化树上与其他中国分离株分属不同的两个分支,而与M10MG17亲缘关系较近。结论 509/YN/CHN/2010分离株为肠道病毒CVB2,为两个中国分支中的一支。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b2 VP1基因 序列分析
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柯萨奇B_2病毒VP_1基因疫苗诱导细胞免疫的初步研究
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作者 郭宏 田野 +7 位作者 曲秀芬 刘胜旺 吴晓羽 赵铁强 李呼伦 钟照华 童光志 孟繁超 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期652-654,共3页
目的　构建柯萨奇B2 病毒 (CVB2 )VP1侯选基因疫苗 ,评价其诱导细胞免疫的效果。方法　采用逆转录PCR技术扩增CVB2 的主要中和抗原VP1基因 ,通过分子克隆构建 pcDNA3 CVB2 VP1基因免疫质粒并免疫BALB/c小鼠 ,51Cr释放法测定CTL杀伤效... 目的　构建柯萨奇B2 病毒 (CVB2 )VP1侯选基因疫苗 ,评价其诱导细胞免疫的效果。方法　采用逆转录PCR技术扩增CVB2 的主要中和抗原VP1基因 ,通过分子克隆构建 pcDNA3 CVB2 VP1基因免疫质粒并免疫BALB/c小鼠 ,51Cr释放法测定CTL杀伤效应。结果　基因免疫质粒表达载体为 pcDNA3 ,亚克隆片段为CVB2 VP1,pcDNA3 CVB2 VP1接种组CTL特异性杀伤百分率均高于 pcDNA3 组 (P <0 0 1) ,E/T为 5 0∶1时特异性CTL杀伤百分率最高 ,为 (31 2± 6 8) % (P <0 0 5 )。结论　pcDNA3 -CVB2 VP1可诱导小鼠产生细胞免疫。 展开更多
关键词 柯萨奇b2病毒 VP1基因疫苗 诱导 细胞免疫
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