九香虫抗菌肽CcAMP1的分离纯化和抗菌活性检测 被引量：21

1

作者 李尚伟 赵柏松 杜娟 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期610-616,共7页

【目的】从药用昆虫九香虫Coridius chinensis中分离纯化抗菌肽,为进一步开发九香虫抗菌肽资源及深入挖掘九香虫的药用功能奠定基础。【方法】用大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus混合物作诱导源刺激九香... 【目的】从药用昆虫九香虫Coridius chinensis中分离纯化抗菌肽,为进一步开发九香虫抗菌肽资源及深入挖掘九香虫的药用功能奠定基础。【方法】用大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus混合物作诱导源刺激九香虫产生抗菌肽,对血淋巴进行提取、凝胶过滤层析、固相萃取及反相色谱纯化,活性组分经质谱测定。对分离得到的这种抗菌肽进行人工合成,并进行抗菌活性检测。【结果】本研究获得一种九香虫抗菌肽Cc AMP1,由17个氨基酸残基组成,分子量为1 997.37 u,带1个正电荷,表面有5个疏水氨基酸。对人工合成的Cc AMP1进行抗菌活性检测表明,该抗菌肽与九香虫血淋巴一样对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等革兰氏阴性菌都有较好的抗菌活性,且对革兰氏阴性菌的抗菌活性更强。【结论】从九香虫中分离得到具有较强抗菌活性的阳离子抗菌肽Cc AMP1,有较大的开发利用价值。 展开更多

关键词 九香虫 抗菌肽 抗菌活性 分离 纯化

下载PDF 职称材料

基于DNA条形编码技术的九香虫与黑腹兜蝽的分子鉴定 被引量：3

2

作者 郭建军 谢家楠 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第11期124-125,128,共3页

为了对九香虫(Coridius chinensis)和黑腹兜蝽(Coridius nigriventris)的分类提供依据,采用DNA条形编码技术,从分子层面研究了九香虫与黑腹兜蝽的线粒体COI部分基因。结果表明:平均碱基组成为A,31.8%;T,33.8%;G,15.9%;C,18.6%。A+T的含... 为了对九香虫(Coridius chinensis)和黑腹兜蝽(Coridius nigriventris)的分类提供依据,采用DNA条形编码技术,从分子层面研究了九香虫与黑腹兜蝽的线粒体COI部分基因。结果表明:平均碱基组成为A,31.8%;T,33.8%;G,15.9%;C,18.6%。A+T的含量明显高于G+C的含量,共有24个位点的碱基存在变异;2个种间存在遗传差异,种间遗传距离为0.043。结论:试验结果支持了传统形态分类学中九香虫和黑腹兜蝽为独立2个种的观点。 展开更多

关键词 九香虫 黑腹兜蝽 DNA BARCODING COI 分子鉴定

下载PDF 职称材料

九香虫溶菌酶基因CcLys的克隆与特征分析 被引量：3

3

作者 张振娟 齐小浪 +2 位作者 李尚伟 喻廷君 杜娟 《山地农业生物学报》 2019年第4期1-7,共7页

九香虫Coridius chinensis是我国一种重要的药食两用昆虫,溶菌酶是一种具有抗菌作用的糖苷水解酶。该研究从九香虫中克隆了一种溶菌酶基因CcLys,其cDNA长883 bp,包含一个669 bp的开放阅读框,编码222个氨基酸。九香虫溶菌酶CcLys的N-端... 九香虫Coridius chinensis是我国一种重要的药食两用昆虫,溶菌酶是一种具有抗菌作用的糖苷水解酶。该研究从九香虫中克隆了一种溶菌酶基因CcLys,其cDNA长883 bp,包含一个669 bp的开放阅读框,编码222个氨基酸。九香虫溶菌酶CcLys的N-端包含一段由18个氨基酸组成的信号肽,成熟CcLys形成7个α-螺旋,8个β-折叠片的三维结构。同源性和聚类分析显示CcLys与茶翅蝽Halyomorpha halys溶菌酶的亲缘关系最近。基因表达谱分析表明,CcLys在九香虫的整个发育阶段都有表达,在3龄若虫中表达水平最高;该基因在所检测的成虫组织中都有表达,在脂肪体中表达水平最高。成虫被细菌诱导后,CcLys的表达水平在12 h达到峰值。该研究为进一步明确CcLys基因的功能及开发新型抗菌药物奠定基础。 展开更多

关键词 九香虫 溶菌酶 糖苷水解酶 基因表达模式

下载PDF 职称材料

九香虫形态及生物学特征研究 被引量：1

4

作者 纪文香 陈祯 +4 位作者 李红梅 娄灯吉 刘宪斌 代晰慧 施皓译 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期194-203,共10页

通过建立网室近自然实验种群,结合野生个体观察记述了云南玉溪九香虫Coridius chinensis(Dallas)种群的各虫期形态特征、在云南玉溪红塔区的年生活史、寄主范围、取食偏好、成虫及若虫的行为习性,为该虫的保育和规模化养殖提供依据。结... 通过建立网室近自然实验种群,结合野生个体观察记述了云南玉溪九香虫Coridius chinensis(Dallas)种群的各虫期形态特征、在云南玉溪红塔区的年生活史、寄主范围、取食偏好、成虫及若虫的行为习性,为该虫的保育和规模化养殖提供依据。结果显示,九香虫卵有绿色和粉色两种生态型,若虫有5个龄期;在云南玉溪红塔区1年仅发生1代,仅以成虫态越冬;红塔区九香虫野生个体主要以佛手瓜和南瓜等葫芦科植物为食;取食偏好选择试验表明该虫最喜取食葫芦,冬瓜和南瓜次之;雌雄成虫可多次交配多次产卵,单雌单次平均产卵量为16.3±6.0粒。研究表明,云南玉溪红塔区的九香虫种群为典型的一化性昆虫,休眠期可达8个月;该虫食性较广,可取食多科植物,但以葫芦科瓜类为主;羽化成虫每年9月中旬至10月上旬陆续从佛手瓜、南瓜等寄主植物上迁至枯树皮下、柴堆等隐蔽场所越冬,翌年4月下旬陆续解除休眠,迁至佛手瓜、南瓜等作物上取食繁殖。 展开更多

关键词 九香虫 形态 寄主范围 生活史 习性

下载PDF 职称材料

九香虫防卫素基因CcDef1的克隆及特征分析 被引量：2

5

作者 喻廷君 杜娟 李尚伟 《山地农业生物学报》 2019年第3期6-11,共6页

九香虫 Coridius chinensis是一种重要的资源昆虫,防卫素是抗菌肽家族中一个重要的成员。本文从九香虫中克隆了一种防卫素基因 CcDef1 ,其cDNA的长度为395 bp,包含一个300 bp的开放阅读框,编码99个氨基酸。CcDef1的前体由信号肽、前体... 九香虫 Coridius chinensis是一种重要的资源昆虫,防卫素是抗菌肽家族中一个重要的成员。本文从九香虫中克隆了一种防卫素基因 CcDef1 ,其cDNA的长度为395 bp,包含一个300 bp的开放阅读框,编码99个氨基酸。CcDef1的前体由信号肽、前体肽和成熟肽组成,成熟CcDef1形成包含1个α-螺旋、2个β-折叠片和3个二硫键的三维结构。CcDef1蛋白的相对分子量为4589.37Da,总净电荷量为+1,理论等电点为7.84。同源性和聚类分析显示,CcDef1与红尾碧蝽 Palomena prasina 防卫素的亲缘关系最近。该研究为进一步明确 CcDef1 基因的功能及开发新型抗菌药物奠定基础。 展开更多

关键词 九香虫 抗菌肽 昆虫防卫素 基因克隆

下载PDF 职称材料

九香虫i型溶菌酶基因的克隆与细菌诱导表达分析

6

作者 黄海 杜娟 +2 位作者 李尚伟 龚涛 齐小浪 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期17-28,共12页

溶菌酶是一组进化上保守的酶,在昆虫中主要分为c型和i型两类。为明确i型溶菌酶在九香虫Coridius chinensis体内的表达模式与功能,我们对九香虫的两个i型溶菌酶基因CcLys-i1和CcLys-i2进行了克隆,这两个基因的编码区分别为504 bp和432 bp... 溶菌酶是一组进化上保守的酶,在昆虫中主要分为c型和i型两类。为明确i型溶菌酶在九香虫Coridius chinensis体内的表达模式与功能,我们对九香虫的两个i型溶菌酶基因CcLys-i1和CcLys-i2进行了克隆,这两个基因的编码区分别为504 bp和432 bp,分别编码167和143个氨基酸。序列分析显示,CcLys-i1和CcLys-i2缺乏与催化活性相关的谷氨酸(E)和丝氨酸(S)。同源性和聚类分析显示,CcLys-i1和CcLys-i2与斯氏珀蝽Plautia stali的i型溶菌酶相似性最高,分别为80.36%和48.95%。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)解析CcLys-i1和CcLys-i2基因的时空表达谱,结果表明它们在九香虫不同发育阶段都有表达,CcLys-i1在成虫中表达水平最高,而CcLys-i2在5龄若虫中表达水平最高;它们在所检测的成虫不同组织中都有表达,都在脂肪体中表达水平最高。九香虫被注射细菌后24 h,CcLys-i1和CcLys-i2的表达显著上调;九香虫被饲喂细菌后,这两种基因的表达水平没有显著变化。九香虫的这两种i型溶菌酶基因的表达受到自身免疫机制的调控,可以被诱导而参与免疫应答,但不具有参与消化的功能。该研究为进一步明确九香虫i型溶菌酶基因的功能奠定基础。 展开更多

关键词 九香虫 i型溶菌酶 时空表达 先天免疫 细菌诱导

下载PDF 职称材料

九香虫溶菌酶CcLys2的基因克隆与生物信息学分析 被引量：1

7

作者 齐小浪 杜娟 李尚伟 《山地农业生物学报》 2020年第3期11-16,共6页

九香虫Coridius chinensis是一种药食两用的资源昆虫,溶菌酶是一种能水解细菌中黏多糖的胞壁质酶。本研究克隆了一种九香虫溶菌酶基因CcLys2,其cDNA长1096 bp,包含一个长672 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸(aa)。九香虫溶菌酶蛋白CcLys... 九香虫Coridius chinensis是一种药食两用的资源昆虫,溶菌酶是一种能水解细菌中黏多糖的胞壁质酶。本研究克隆了一种九香虫溶菌酶基因CcLys2,其cDNA长1096 bp,包含一个长672 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸(aa)。九香虫溶菌酶蛋白CcLys2的N端包含一段由13 aa组成的信号肽,成熟CcLys2是一种分子量为23.34 kDa的分泌型亲水蛋白。成熟CcLys2形成7个α-螺旋和2个β-折叠片的三维分子结构,并由4个二硫键稳定其构象。同源性和聚类分析表明,CcLys2与来自斯氏珀蝽Plautia stali的C-型溶菌酶的亲缘关系最近。生物信息学分析结显示,CcLys2很可能属于具有消化作用的C-型溶菌酶。本研究为今后进一步阐明CcLys2基因的功能及开发新型抗菌药物奠定基础。 展开更多

关键词 九香虫 溶菌酶 基因克隆 特征分析

下载PDF 职称材料

九香虫防卫素CcDef3基因的克隆与表达分析

8

作者 齐小浪 杜娟 李尚伟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第11期2539-2546,共8页

【目的】探明九香虫防卫素基因CcDef 3的生物信息学特征及其在九香虫体内的表达模式,揭示CcDef 3基因的调控规律,为进一步研究该基因的功能及开发新型药物奠定基础。【方法】采用反转录PCR克隆CcDef 3基因并使用生物信息学软件和方法对... 【目的】探明九香虫防卫素基因CcDef 3的生物信息学特征及其在九香虫体内的表达模式,揭示CcDef 3基因的调控规律,为进一步研究该基因的功能及开发新型药物奠定基础。【方法】采用反转录PCR克隆CcDef 3基因并使用生物信息学软件和方法对其进行序列分析,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测其时空表达模式及细菌诱导后的表达模式。【结果】九香虫防卫素基因CcDef 3的cDNA长度为522 bp,包含一个长351 bp的开放阅读框,编码116个氨基酸残基;CcDef3多肽由1个信号肽、2个前肽及1个成熟肽组成,成熟肽形成1个α-螺旋,2个β-折叠片和3个二硫键的三维分子结构;九香虫防卫素CcDef 3与红尾碧蝽防卫素的亲缘关系最近;CcDef 3在九香虫不同发育时期均表达,其中在5龄若虫中表达水平最高,在所检测的组织中皆表达,在脂肪体中表达水平最高;用细菌诱导九香虫成虫后CcDef 3的表达水平上调,在12 h时达到峰值,而后下调至48 h时趋向于诱导前表达水平。【结论】该研究克隆了九香虫防卫素CcDef 3基因,并进行了特征分析,解析其表达模式。CcDef 3基因的表达受到自身免疫的调控,还可以被诱导而参与免疫应答反应。 展开更多

关键词 九香虫 昆虫防卫素 基因克隆 表达分析

下载PDF 职称材料

MAPKs通路在九香虫提取液对锰致大鼠睾丸损伤中的作用 被引量：2

9

作者 熊可艺 吴文慧 +4 位作者 邓源林 范晓莉 梁程敏 王凤月 侯晓晖 《遵义医科大学学报》 2023年第1期58-64,共7页

目的探究MAPK信号通路在九香虫石油醚提取液保护染锰大鼠睾丸损伤中的作用。方法将60只雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、九香虫提取液低、中、高剂量干预组和阳性组,每组10只。按照15 mg/kg BW腹腔注射MnCl_(2)溶液制备损伤模型(... 目的探究MAPK信号通路在九香虫石油醚提取液保护染锰大鼠睾丸损伤中的作用。方法将60只雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、九香虫提取液低、中、高剂量干预组和阳性组,每组10只。按照15 mg/kg BW腹腔注射MnCl_(2)溶液制备损伤模型(空白对照组给予生理盐水),干预组按照50、100、200 mg/kg BW灌胃九香虫提取液,阳性组按照1.25 g/kg灌胃金匮肾气丸水溶液,时间均为30 d。通过HE染色观察睾丸结构变化;qPCR检测睾丸组织中MAPK信号通路中相关mRNA的表达水平;Western blot检测睾丸中MAPK信号通路相关蛋白的表达情况。结果形态学结果显示,模型组大鼠生精小管结构遭到破坏,生精小管间隙增宽,各级生精细胞排列紊乱、层数明显减少,各干预组大鼠睾丸生精小管完整度、生精上皮排列情况均有明显改善。qPCR结果显示,与空白组相比,模型组的睾丸组织中JNK1、p38 mRNA的表达显著上调(P<0.05),ERK1 mRNA的表达则显著下调(P<0.05);九香虫提取液干预后,JNK1、p38 mRNA的表达显著下调(P<0.05),ERK1 mRNA则显著上调(P<0.05)。Western blot结果显示,各干预组p-JNK/JNK和p-p38/p38蛋白表达水平明显低于模型组(P<0.05),而p-ERK/ERK蛋白表达水平明显高于模型组(P<0.05)。结论九香虫提取液能改善锰暴露导致的生殖器官损伤,其机制可能与激活MAPK信号通路相关。 展开更多

关键词 九香虫提取液 锰暴露 生殖损伤 生殖保护 MAPK

下载PDF 职称材料

九香虫触角感器超微结构及触角电位反应 被引量：2

10

作者 丁韦程 李虹雨 +3 位作者 和秋菊 易传辉 李晨阳 施雯 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2020年第5期54-58,80,共6页

为了解九香虫触角及其对寄主植物挥发物的反应,揭示其与寄主植物化学通讯的机理,利用电镜扫描观察其触角感器,并采用触角电位技术测试其对寄主植物主要挥发物的电生理反应(EAG)。结果表明:九香虫的触角共5节,由柄节、梗节、鞭节3部分组... 为了解九香虫触角及其对寄主植物挥发物的反应,揭示其与寄主植物化学通讯的机理,利用电镜扫描观察其触角感器,并采用触角电位技术测试其对寄主植物主要挥发物的电生理反应(EAG)。结果表明:九香虫的触角共5节,由柄节、梗节、鞭节3部分组成,雌雄成虫各节长度存在差异;九香虫雄虫有3种感受器,分别为毛形感受器、刺形感受器和锥形感受器;雌虫有4种感受器,除了有雄虫的3种外,还有腔锥形感受器;九香虫雌虫和雄虫均对2-乙基呋喃反应强烈,其次为己醛,对其他植物挥发物反应相对较弱;对其它各挥发物的反应雌雄虫存在明显差异。研究结果有助于了解九香虫化学感受系统及其与搜寻寄主植物间的关系。 展开更多

关键词 九香虫 触角感器 超微结构 电镜扫描 触角电位

下载PDF 职称材料

九香虫水提液对锰中毒大鼠睾丸损伤的抗凋亡作用 被引量：2

11

作者 姜璘 付惠惠 +3 位作者 王凤月 邓源林 高飞 侯晓晖 《遵义医科大学学报》 2019年第5期517-521,共5页

目的通过九香虫水提液对染锰雄性SD大鼠进行干预,探究其对大鼠睾丸损伤的抗凋亡作用及其修复机制。方法将50只8周龄的雄性SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组和九香虫低、中、高剂量干预组。模型组和干预组大鼠按照30 mg/(kg d)腹腔注... 目的通过九香虫水提液对染锰雄性SD大鼠进行干预,探究其对大鼠睾丸损伤的抗凋亡作用及其修复机制。方法将50只8周龄的雄性SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组和九香虫低、中、高剂量干预组。模型组和干预组大鼠按照30 mg/(kg d)腹腔注射氯化锰溶液,连续2周建立生殖损伤模型,空白组腹腔注射生理盐水;造模同时,九香虫低、中、高剂量干预组大鼠分别按照50、100、200 mg/kg灌胃九香虫水提液,连续4周进行干预,空白组和模型组灌胃蒸馏水。利用Western blot和免疫组化技术检测大鼠睾丸凋亡相关基因Bcl-2、Bax、CytC和Cleaved Caspase-3(C-Cas3)的表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠睾丸的BCL-2表达明显减少(P<0.01),而BAX、CYTC、C-CAS3表达明显增多(P<0.01);与模型组相比,部分九香虫干预组大鼠睾丸的BCL-2表达明显增高(P<0.01),而BAX、CYTC和C-CAS3表达明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论九香虫水提液增加Bcl-2表达的同时可抑制Bax和CytC的表达,进而阻止线粒体凋亡信号的传递,且使其下游信号C-Cas3低表达,最终抑制睾丸生精细胞凋亡。 展开更多

关键词 九香虫提取液 锰 凋亡 Bcl-2 Bax CYTC C-Cas3

下载PDF 职称材料

九香虫提取物对锰中毒大鼠睾丸损伤的干预效果及Claudin1作用 被引量：1

12

作者 李芳 范晓莉 +3 位作者 雷镇华 戴宝全 王凤月 侯晓晖 《遵义医科大学学报》 2020年第3期282-286,共5页

目的探讨九香虫石油醚提取物(CcE)对锰中毒大鼠睾丸组织损伤的干预效果及Claudin1的作用。方法成年雄性SD大鼠50只,随机分为5个组:空白对照组、锰模型组、CcE低剂量干预组(50 mg/kg/d)、CcE中剂量干预组(100 mg/kg/d)、CcE高剂量干预组(... 目的探讨九香虫石油醚提取物(CcE)对锰中毒大鼠睾丸组织损伤的干预效果及Claudin1的作用。方法成年雄性SD大鼠50只,随机分为5个组:空白对照组、锰模型组、CcE低剂量干预组(50 mg/kg/d)、CcE中剂量干预组(100 mg/kg/d)、CcE高剂量干预组(200 mg/kg/d)。锰染毒建立大鼠生殖损伤模型,使用不同剂量的CcE进行干预,监测大鼠的行为学改变及生殖器官脏器系数和精子数目,并进行睾丸锰含量和形态学变化分析,检测Claudin1表达水平及分布,评价干预效果。结果锰模型组与空白对照组比较,大鼠的行为学指标即扑捉、骑跨、插入及射精的次数明显降低(P<0.05);CcE各剂量干预组与锰模型组比较,大鼠的上述行为学指标明显升高(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸、附睾脏器系数与精子数目明显减少(P<0.05);CcE各剂量干预组与锰模型组比较,上述指标均有所升高。锰模型组与空白对照组比较,大鼠锰含量明显增高(P<0.05);CcE低剂量干预组与锰模型组比较,大鼠锰含量明显降低(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸组织Claudin1蛋白的表达量明显降低(P<0.05);CcE中、高剂量干预组与锰模型组比较,Claudin1蛋白的表达量明显增加(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸组织结构破坏,Claudin1分布减少且仅基底膜处可见;CcE各剂量干预组与锰模型组比较,大鼠睾丸组织结构明显改善,Claundin1分布增多且可见于各级精母细胞与支持细胞之间。结论九香虫石油醚提取物可拮抗锰引起的大鼠生殖系统损伤,且与Claudin1相关。 展开更多

关键词 Claudin1 九香虫石油醚提取物 锰暴露 生殖保护 生殖损伤

下载PDF 职称材料