脐血输注合并血浆置换治疗慢性重型肝炎的疗效初探 被引量：9

1

作者 唐晓鹏 郑宣鹤 杨旭 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期323-325,共3页

目的 :探讨脐血输注 (UCBT)合并血浆置换 (PE)治疗重型病毒性肝炎的效果。方法 :将 117例慢性重肝病人分为 4组 ,分别应用成人鲜血或冰冻新鲜血浆 (对照组 ) ,UCBT ,PE和UCBT +PE治疗 ,观察病人治疗前后部分肝功能指标及免疫功能指标的... 目的 :探讨脐血输注 (UCBT)合并血浆置换 (PE)治疗重型病毒性肝炎的效果。方法 :将 117例慢性重肝病人分为 4组 ,分别应用成人鲜血或冰冻新鲜血浆 (对照组 ) ,UCBT ,PE和UCBT +PE治疗 ,观察病人治疗前后部分肝功能指标及免疫功能指标的变化。结果 :各治疗组病人降低血胆红素、升高白蛋白、凝血酶原活动度、活性T淋巴细胞、CD4细胞、白细胞介素 2及膜白细胞介素 2受体的效果均优于对照组 ,其中UCBT +PE组的效果又优于其它各组。结论 :UCBT合并PE治疗能提高重型肝炎的治疗效果。 展开更多

关键词 脐血输注 血浆置换 治疗 慢性重型肝炎 疗效

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脐血血浆对K562细胞增殖抑制作用研究 被引量：3

2

作者 王利 唐宗山 +2 位作者 詹廷西 罗诗樵 黄宗干 《重庆医学》 CAS CSCD 2003年第8期1028-1030,共3页

目的　研究脐血血浆 (CBP)对人红白血病细胞株K5 6 2增殖影响及可能机制。方法　台盼蓝拒染法绘制生长曲线 ;MTT法检测CBP对K5 6 2细胞的抑制作用 ;流式细胞术分析细胞周期变化 ;免疫细胞化学方法检测增殖相关核抗原 (PCNA ,Ki 6 7)表... 目的　研究脐血血浆 (CBP)对人红白血病细胞株K5 6 2增殖影响及可能机制。方法　台盼蓝拒染法绘制生长曲线 ;MTT法检测CBP对K5 6 2细胞的抑制作用 ;流式细胞术分析细胞周期变化 ;免疫细胞化学方法检测增殖相关核抗原 (PCNA ,Ki 6 7)表达。结果　细胞生长曲线可见CBP作用 2 4h即观察到抑制作用 ,随时间增加 ,抑制作用更加明显 ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1 )。MTT法结果与生长曲线结果相符。CBP作用 3d后 ,S期细胞数减少 ,G0 /G1 期细胞增多 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,并出现G0 /G1 期凋亡细胞。CBP作用后 ,K5 6 2细胞增殖相关核抗原PCNA、Ki 6 7表达阳性程度降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　CBP对K5 6 2细胞增殖有明显抑制作用 ,与浓度、时间正相关 ;其机制可能与诱导凋亡、下调PCNA、Ki 6 7表达 。 展开更多

关键词 脐血血浆 细胞系 增殖抑制 细胞周期 PCNA

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胎盘间充质干细胞脐血血浆培养体系的建立 被引量：1

3

作者 陆琰 吴洁莹 +3 位作者 陈劲松 汤雪薇 吴韶清 李焱 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第15期2312-2315,共4页

目的建立并优化适用于临床级胎盘源间充质干细胞的脐血血浆体外培养体系。方法采用酶消化法分离胎盘间充质干细胞,分为胎牛血清组(10%胎牛血清+DMEM/F12)、脐血血浆组(10%脐血血浆+DMEM/F12+1 000 IU/L肝素)和无血清组(Stem ProMSC SF... 目的建立并优化适用于临床级胎盘源间充质干细胞的脐血血浆体外培养体系。方法采用酶消化法分离胎盘间充质干细胞,分为胎牛血清组(10%胎牛血清+DMEM/F12)、脐血血浆组(10%脐血血浆+DMEM/F12+1 000 IU/L肝素)和无血清组(Stem ProMSC SFM CTSTM);经培养扩增后,采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标志,并诱导细胞向成脂肪、成骨分化,比较3组培养扩增所得间充质干细胞的差异。结果 3组细胞的增殖速度并无明显差异;脐血血浆组、胎牛血清组及无血清组培养扩增所得的细胞均表达CD90、CD29、CD44、CD49e、CD105、CD73,不表达CD34、HLA-DR、CD45;而且均具有向成脂、成骨分化的能力。结论脐血血浆可取代胎牛血清或无血清培养基用于胎盘间充质干细胞的培养扩增,以此获取可供临床应用的胎盘间充质干细胞。 展开更多

关键词 间充质干细胞 脐血血浆 细胞培养

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脐带血富血小板血浆促进糖尿病大鼠难愈合创口修复作用研究 被引量：1

4

作者 杜为 张莉 +3 位作者 张凯悦 赵晶磊 李宗金 韩俊领 《药物评价研究》 CAS 2021年第4期715-720,共6页

目的探讨脐带血富血小板血浆(CB-PRP)对糖尿病性难愈合创口修复的促进作用。方法ELISA试剂盒法检测CB-PRP和外周血PRP(PB-PRP)的血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的含量;SD大鼠随机分为对照组、模型组、PB-PRP组... 目的探讨脐带血富血小板血浆(CB-PRP)对糖尿病性难愈合创口修复的促进作用。方法ELISA试剂盒法检测CB-PRP和外周血PRP(PB-PRP)的血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的含量;SD大鼠随机分为对照组、模型组、PB-PRP组和CB-PRP组,除对照组外,按65 mg/kg剂量1次性ip链脲佐菌素(STZ)溶液诱发糖尿病模型;所有大鼠均建立全层皮肤缺损创伤模型。测定创伤再上皮化速率;术后10 d,采集组织学标本,进行苏木精伊红(HE)染色、天狼星红染色和CD31免疫荧光染色。结果CB-PRP中VEGF、PDGF-BB含量高于PB-PRP,其中VEGF差异显著(P<0.05)。术后10、14、21 d,PB-PRP和CB-PRP组创口再上皮化速率显著快于模型组(P<0.05),术后21 d时,CB-PRP组的再上皮化率(92.8%)显著快于PB-PRP组(84.6%)(P<0.05)。HE染色结果显示,与模型组比较,PB-PRP和CB-PRP组肉芽组织生长更为旺盛,可见胶原纤维存在较多,新生的毛细血管较多。天狼猩红染色结果显示,PB-PRP和CB-PRP组创面增生区胶原纤维丰富,以Ⅰ型胶原为主,其间见Ⅲ型胶原。CD31免疫荧光染色结果显示,与模型组比较,CB-PRP和PB-PRP组毛细血管数量显著增加(P<0.05);与PB-PRP组比较,CB-PRP组的毛细血管数量显著增加(P<0.05)。结论CB-PRP具有促进糖尿病性难愈合皮肤创口修复的作用,有望成为组织工程治疗的新方法。 展开更多

关键词 脐带血 富血小板血浆 生长因子 糖尿病 难愈合创口 修复 再上皮化

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脐血浆对正常骨髓造血刺激活性的研究

5

作者 魏彩霞 李玛琳 +3 位作者 汤正华 肖敏 贺金文 杨绵本 《昆明医学院学报》 1999年第4期27-29,共3页

为探讨脐血浆中造血活性物质的作用,用半固体培养法对混合脐血浆、重组人造血生长因子及正常成人混合血清在体外对正常骨髓造血祖细胞集落形成的情况进行了比较.结果显示,成人混合血清对粒单祖细胞及红系祖细胞的集落形成无明显的刺激活... 为探讨脐血浆中造血活性物质的作用,用半固体培养法对混合脐血浆、重组人造血生长因子及正常成人混合血清在体外对正常骨髓造血祖细胞集落形成的情况进行了比较.结果显示,成人混合血清对粒单祖细胞及红系祖细胞的集落形成无明显的刺激活性,而混合脐血浆对粒单祖细胞及红系祖细胞的集落形成具有较高水平的刺激活性,其作用与小牛血清加人重组GM-CSF相当(P>005,差异无显著性). 展开更多

关键词 脐血 血浆 造血因子 骨髓 造血细胞

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新鲜脐血及其不同温度保存下凝血因子活性的动态测定

6

作者 王芝琪 周志健 +5 位作者 杨英姿 董玫 李璐璐 苏雁华 崔淑杰 孟德润 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2000年第3期177-178,共2页

目的了解输注脐血凝血因子的活性。方法采集 １０份新鲜脐血，对保存前及其在４℃、－２０℃保存２４ｈ、４８ｈ后各凝血因子活性进行了动态检测。结果①脐血处于相对低凝状态；②脐血在４℃、－２０℃保存２４ｈ、４８ｈ后其纤维蛋白... 目的了解输注脐血凝血因子的活性。方法采集 １０份新鲜脐血，对保存前及其在４℃、－２０℃保存２４ｈ、４８ｈ后各凝血因子活性进行了动态检测。结果①脐血处于相对低凝状态；②脐血在４℃、－２０℃保存２４ｈ、４８ｈ后其纤维蛋白原、因子Ⅴ、Ⅷ都呈现不同程度的衰减，且４℃和－２０℃保存效果无显著差异，而其余因子则储存稳定。结论新鲜脐血中各凝血因子含量较低，且随保存时间的延长活性下降。 展开更多

关键词 脐带血血浆 凝血因子 活性 温度 保存

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混合脐血血浆对植物血凝集素诱导的脐血源性T淋巴细胞增殖、分化的影响

7

作者 耿微 张福琴 +2 位作者 张圣明 张云 周英凡 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期515-518,共4页

目的:探讨混合脐血血浆(CBP)在植物血凝集素(PHA)诱导脐血源性T淋巴细胞中的作用。方法:收集脐血血浆和脐血单个核细胞;将脐血单个核细胞分为CBP+PHA和PHA两组,检测两组细胞增殖率及免疫表型。结果:CBP+PHA组细胞增殖指数低于PHA组,但... 目的:探讨混合脐血血浆(CBP)在植物血凝集素(PHA)诱导脐血源性T淋巴细胞中的作用。方法:收集脐血血浆和脐血单个核细胞;将脐血单个核细胞分为CBP+PHA和PHA两组,检测两组细胞增殖率及免疫表型。结果:CBP+PHA组细胞增殖指数低于PHA组,但无统计学意义;两组细胞表型都以CD3+、CD4+为主,两组差异无统计学意义。结论:混合脐血血浆对脐血源性T淋巴细胞增殖、分化影响不明显,可能与RPMI1640培养体系具有相似的效果。 展开更多

关键词 脐血血浆 T淋巴细胞 增殖 分化

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脐血血浆化疗增敏作用的实验研究

8

作者 姚一芸 程毅敏 +3 位作者 朱琦 叶为德 唐勇 胡钧培 《诊断学理论与实践》 2004年第6期435-437,共3页

目的:研究脐血血浆(CBP)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞的体外化疗增敏作用。方法:以AML细胞株HL鄄60细胞为实验对象,培养体系中分别加入CBP或人重组粒鄄巨噬细胞集落刺激因子(rhGM鄄CSF)作为实验组或阳性对照组,不加CBP和rhGM鄄CSF的HL... 目的:研究脐血血浆(CBP)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞的体外化疗增敏作用。方法:以AML细胞株HL鄄60细胞为实验对象,培养体系中分别加入CBP或人重组粒鄄巨噬细胞集落刺激因子(rhGM鄄CSF)作为实验组或阳性对照组,不加CBP和rhGM鄄CSF的HL鄄60细胞作为阴性对照组。培养48h后进行细胞周期动力学检测;各组细胞再加入阿糖胞苷(Ara鄄C)培养,24h后进行细胞增殖测定。结果:经过48h孵育,CBP组S期细胞比例明显增高,再与Ara鄄C作用,细胞的生长较阴性对照组明显受抑。实验组和阳性对照组之间无明显差异。结论:CBP与rhGM鄄CSF相似,可通过促进HL鄄60细胞进入S期增强对Ara鄄C的敏感性。 展开更多

关键词 脐血血浆 化疗 阿糖胞苷 重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子 增敏作用 实验 急性髓细胞性白血病

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脐血血浆、rhGM-CSF增强急性髓性白血病细胞对Ara-C敏感性的研究

9

作者 张学忠 夏薇 朱广荣 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 1997年第4期354-357,共4页

研究了脐血血浆（ＣＢＰ）、基因重组人粒－单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对２０例急性髓性白血病（ＡＭＬ）细胞体外对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）敏感性的影响。采用ＭＴＴ法测定Ａｒａ－Ｃ的细胞毒作用，发现，ＣＢＰ及ｒｈＧ... 研究了脐血血浆（ＣＢＰ）、基因重组人粒－单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对２０例急性髓性白血病（ＡＭＬ）细胞体外对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）敏感性的影响。采用ＭＴＴ法测定Ａｒａ－Ｃ的细胞毒作用，发现，ＣＢＰ及ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可显著增强Ａｒａ－Ｃ对耐药ＡＭＬ细胞的毒性作用，与对照组相比，Ｐ＜０．０５；另采用台盼蓝拒染法测定细胞的存活能力，发现：ＣＢＰ虽然可增加耐药ＡＭＬ细胞的存活能力，但当Ａｒａ－Ｃ与ＣＢＰ或ｒｈＧＭ－ＣＳＦ合用时，ＡＭＬ活细胞总数反而下降，与对照组相比，Ｐ＜０．０５。由此认为：ＣＢＰ及ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可通过促进耐药ＡＭＬ细胞进入增殖周期，从而增强耐药ＡＭＬ细胞对Ａｒａ－Ｃ的敏感性，预示着ＣＢＰ、ｒｈＧＭ－ＣＳＦ与Ａｒａ－Ｃ联合应用治疗耐药ＡＭＬ的潜在价值。 展开更多

关键词 白血病 CBP AML RHGM-CSF 药物疗法

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脐血血浆体外对造血祖细胞增殖的影响 被引量：15

10

作者 伍钢 应大明 +3 位作者 林梓 王耀平 周昕 黄未未 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期237-239,共3页

目的：探讨脐血血浆对造血细胞增殖的刺激作用。方法：用细胞培养的方法以集落形成单位（ＣＦＵ）为指标，观察了脐血血浆体外对脐血和骨髓造血祖细胞增殖的影响。结果：①脐血血浆使脐血ＣＦＵ总和增加了２．２３±０．５２倍，在... 目的：探讨脐血血浆对造血细胞增殖的刺激作用。方法：用细胞培养的方法以集落形成单位（ＣＦＵ）为指标，观察了脐血血浆体外对脐血和骨髓造血祖细胞增殖的影响。结果：①脐血血浆使脐血ＣＦＵ总和增加了２．２３±０．５２倍，在一定范围内，ＣＦＵ总和增加幅度与培养体系中脐血血浆含量呈剂量依赖关系，并发现脐血细胞和脐血血浆ＡＢＯ血型不同时刺激作用更为明显。②脐血血浆对骨髓造血祖细胞集落形成的刺激作用与ＡＢＯ血型有关，血型相同者，无刺激作用，血型不同者ＣＦＵ总和增加了１．５５±０．４３倍。③细胞因子可使脐血ＣＦＵ总和增加，联合应用细胞因子与脐血血浆，ＣＦＵ总和增加更为明显。④成人外周血血浆对脐血和骨髓造血细胞增殖的影响与胎牛血清相比无差异。结论：脐血血浆中含有刺激造血细胞增殖的因子，这种（些）因子对造血细胞的刺激作用具有一定的选择性；并提示脐血干细胞移植时同时输注脐血血浆可能更为有利。 展开更多

关键词 脐血 血浆 造血祖细胞 细胞增殖

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脐血血浆支持造血祖细胞体外集落培养的研究 被引量：9

11

作者 张林生 王逸兰 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期87-91,共5页

10份去血小板的脐血血浆混合后用于研究其对造血细胞培养的支持作用。发现按10％的终浓度加入粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)琼脂培养体系时,集落产率稍高于用GM-CSF作刺激因子组。当按30％终浓度加入含EPO的甲基纤维素培养体系时,可支持CFU-G... 10份去血小板的脐血血浆混合后用于研究其对造血细胞培养的支持作用。发现按10％的终浓度加入粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)琼脂培养体系时,集落产率稍高于用GM-CSF作刺激因子组。当按30％终浓度加入含EPO的甲基纤维素培养体系时,可支持CFU-GM、爆式红系集落(BFU-E)、巨核细胞集落(CFU-Meg),粗-巨噬细胞与红系细胞混合的集落(CFU-GEM),粒-巨噬细胞与红细胞、巨核细胞混合的集落(CFU-GEMM)生长,而混合成人血浆则无此作用。植物血凝素刺激的单个核细胞条件液(PHA-MNCCM)对大部分集落有促进作用,但均无统计学意义。国产IL-3可提高CFU-GEM产率,但似乎不利于含巨核细胞的集落生长。研究结果提示,脐血血浆含有丰富的造血刺激活性,利用脐血血浆进行造血祖细胞体外集落培养可能为简化并推广体外造血细胞培养提供新的途径。 展开更多

关键词 脐血血浆 造血刺激因子 造血祖细胞

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脐带血血浆分离培养脐带间充质干细胞及体外扩增人脐血CD34^+细胞的研究 被引量：5

12

作者 吴洁莹 陆琰 +3 位作者 陈劲松 吴韶清 汤雪薇 李焱 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1112-1119,共8页

目的:探讨以脐带血血浆替代胎牛血清体外分离培养脐带间充质干细胞(UCMSC)的可行性,并观察其作为滋养层细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用。方法:收集符合广州脐血库供者合格筛选标准的脐带血,在脐带血干细胞制备过程中去除的血浆... 目的:探讨以脐带血血浆替代胎牛血清体外分离培养脐带间充质干细胞(UCMSC)的可行性,并观察其作为滋养层细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用。方法:收集符合广州脐血库供者合格筛选标准的脐带血,在脐带血干细胞制备过程中去除的血浆,经病原学及微生物检测合格,多份混合用于细胞培养。采用酶消化法从健康足月分娩新生儿的脐带组织分离获得UCMSC,将其分为3组。培养第1和第2组以DMEM/F12为基础培养液,分别添加胎牛血清(FBS)和混合脐带血血浆(UCP),第3组为商品化无血清培养液(Stem ProM SC SFM CTSTM)。经培养扩增后,采用流式细胞仪检测细胞免疫表型,并进行MSC成骨、成脂分化鉴定。取冻存复苏后的3组细胞,标记为UCM SCFBS、UCMSCUCP及UCMSCSFM,分别建立滋养层。应用免疫磁珠分选系统(MACS)分选人脐带血CD34+细胞,在添加造血因子组合(Stem SpanCC100)的CD34+无血清培养液(Stem Pro-34SFM)中培养,并根据滋养层的不同,分为4组:A组CD34+细胞(CD34+cells)为空白对照组;B组为FBS滋养层组(UCM SCFBS+CD34+cells),C组为UCP滋养层组(UCM SCUCP+CD34+cells),D组为SF滋养层组(UCM SCSFM+CD34+cells)。于培养第0天和第7天计数各组的有核细胞数(NC)、流式细胞仪检测CD34+比例,并进行造血祖细胞集落培养,评估扩增效率。结果:在3种培养体系下的UCMSC均呈现典型的梭形漩涡状生长,MSC表面标记的表达谱系基本无差异,均具有向成脂、成骨分化的能力,但在UCP培养条件下细胞的扩增能力显著高于其他2组(P<0.05)。经过7 d与脐带血CD34+细胞的共培养,虽然4组的CD34+细胞比例均下降,但NC及CD34+细胞数均得到显著扩增,其中UCMSCUCP滋养层组和UCMSCSFM滋养层组均大于UCMSCFBS滋养层组和空白对照组(P<0.05)。与第0天的集落形成能力比较,UCM SCUCP滋养层组与UCMSCSFM滋养层组的集落扩增倍数无差异,但前者的扩增倍数高于UCMSCFBS及空白� 展开更多

关键词 脐带间充质干细胞 脐带血血浆 CD34+细胞 体外扩增

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非血缘脐血移植后兼有温冷双抗体Evans综合征1例并文献复习

13

作者 时月 孙艳花 +3 位作者 李乾鹏 徐曼 刘昊东 冉学红 《临床血液学杂志》 CAS 2024年第3期210-213,共4页

Evans综合征国内外报道较为少见,兼有温冷双抗体Evans综合征更为罕见。文章报道了1例重型再生障碍性贫血患者行首次非血缘脐血移植后发生植入失败,再次输入非血缘脐血植入后病毒感染下引发兼有温冷双抗体Evans综合征,给予利妥昔单抗联... Evans综合征国内外报道较为少见,兼有温冷双抗体Evans综合征更为罕见。文章报道了1例重型再生障碍性贫血患者行首次非血缘脐血移植后发生植入失败,再次输入非血缘脐血植入后病毒感染下引发兼有温冷双抗体Evans综合征,给予利妥昔单抗联合血浆置换治疗后患者各项指标均明显好转。笔者建议对于移植后早期并发Evans综合征的患者在给予传统方案治疗效果差时,应尽早考虑血浆置换和利妥昔单抗的联合和序贯应用。 展开更多

关键词 非血缘脐血移植 EVANS综合征 重型再生障碍性贫血 血浆置换 利妥昔单抗

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脐血来源富血小板血浆对脐血间充质干细胞增殖的影响 被引量：3

14

作者 胡资兵 孙杰聪 刘田丰 《吉林医学》 CAS 2016年第5期1035-1037,共3页

目的：初步探讨脐血来源富血小板血浆促进脐血间充质干细胞增殖及增殖最佳浓度。方法：收集足月健康剖宫产新生儿脐带血,采用组织块培养法进行脐血间充质干细胞的分离培养;采用二次离心法提取脐血富血小板血浆。用ELISA方法检测富血小... 目的：初步探讨脐血来源富血小板血浆促进脐血间充质干细胞增殖及增殖最佳浓度。方法：收集足月健康剖宫产新生儿脐带血,采用组织块培养法进行脐血间充质干细胞的分离培养;采用二次离心法提取脐血富血小板血浆。用ELISA方法检测富血小板血浆中转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β1。富血小板血浆联合10%胎牛血清培养脐血间充质干细胞,根据富血小板血浆中的TGF-β1浓度将实验分为6组：2 000 pg/ml组、1 000pg/ml组、750 pg/ml组、500 pg/ml组、250 pg/ml组、10%胎牛血清组。脐血间充质干细胞接种在96孔板,连续培养7d,分别在1、3、5、7 d用CCK8试剂盒测定不同浓度富血小板血浆对脐血间充质干细胞的增殖影响,统计分析,选出最佳浓度。结果：不同浓度富血小板血浆联合10%胎牛血清培养脐血间充质干细胞呈现不同的增殖速度,500~1 000pg/ml组明显优于其他浓度组,第5天开始差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：富血小板血浆可提高脐血间充质干细胞的增殖活性,且呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 脐血间充质干细胞 富含血小板血浆 细胞增殖 剂量依赖

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人脐血血浆外泌体提取方法的比较 被引量：2

15

作者 叶俊杰 孙晓东 +5 位作者 袁乐永 冯胜蓝 覃冰清 许倩倩 谢丽霞 桑明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期2342-2351,共10页

为探寻高效且稳定的提取人脐血血浆外泌体的方法,利用超高速离心法、蔗糖垫密度梯度离心法、改良超速离心法和聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)沉淀法提取人脐血血浆外泌体,并比较4种方法的优劣。利用透射电镜、动态光散射技术观察... 为探寻高效且稳定的提取人脐血血浆外泌体的方法,利用超高速离心法、蔗糖垫密度梯度离心法、改良超速离心法和聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)沉淀法提取人脐血血浆外泌体,并比较4种方法的优劣。利用透射电镜、动态光散射技术观察外泌体的形态、结构及大小;聚氰基丙烯酸正丁酯(bicinchoninic acid, BCA)法测定外泌体蛋白总量;Western blotting检测外泌体表面标志蛋白CD63、HSP70以及外泌体阴性蛋白GM130 (高尔基标志蛋白)的表达。结果表明,与提取外泌体的“金标准”,即超高速离心法相比,蔗糖垫密度梯度离心法稳定性好,获取的外泌体粒径较均一,但操作较复杂,耗时长;改良超速离心法操作较简单,纯度较高;PEG沉淀法提取的外泌体蛋白量最高,操作时间最短,但杂质较多。结果表明,4种方法均能从人脐血血浆中获取外泌体,但在操作时间、纯度、提取量等方面存在一定差异。因此,应根据实验目的和具体要求选择合适的提取人脐血血浆外泌体的方法。 展开更多

关键词 外泌体 超高速离心法 蔗糖垫密度梯度离心法 改良超速离心法 聚乙二醇沉淀法 脐血血浆

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混合脐血血浆用于CD3AK细胞培养的研究 被引量：1

16

作者 彭晓 张宏文 张文 《临床血液学杂志》 2000年第3期131-132,共2页

目的 :观察比较混合脐血血浆和成人 AB血清在 CD3AK细胞培养中的作用效果。方法 :分别用混合脐血血浆和成人 AB血清培养 CD3AK细胞 ,检测两组细胞的增殖特性、杀伤活性及免疫表型。结果 :混合脐血血浆组的增殖倍数略低于血清组 ,对 K5 ... 目的 :观察比较混合脐血血浆和成人 AB血清在 CD3AK细胞培养中的作用效果。方法 :分别用混合脐血血浆和成人 AB血清培养 CD3AK细胞 ,检测两组细胞的增殖特性、杀伤活性及免疫表型。结果 :混合脐血血浆组的增殖倍数略低于血清组 ,对 K5 6 2、HL - 6 0的杀伤活性则稍高于血清组 ,但差异均无显著性意义 (均为 P >0 .0 5 ) ;两组的免疫表型都以 CD3+、CD8+为主 ,亦无显著性差异 ( P >0 .0 5 )。结论 :混合脐血血浆在 CD3AK等免疫效应细胞的培养中可能和成人 展开更多

关键词 脐血 血浆 血清 CD3抗原 细胞培养

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脐血浆造血活性的研究 被引量：1

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作者 陈运贤 钟雪云 林旭滨 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第2期125-127,共3页

目的　研究脐血浆刺激造血细胞体外生长的作用及脐血浆造血因子的水平。方法　以ELISA法检测 33例脐血浆GM -CSF ,IL - 3和IL - 6水平 ,RIA法检测EPO水平 ,液体培养和甲基纤维素半固体培养方法检测脐血浆对外周造血干细胞 (PBSC)造血刺... 目的　研究脐血浆刺激造血细胞体外生长的作用及脐血浆造血因子的水平。方法　以ELISA法检测 33例脐血浆GM -CSF ,IL - 3和IL - 6水平 ,RIA法检测EPO水平 ,液体培养和甲基纤维素半固体培养方法检测脐血浆对外周造血干细胞 (PBSC)造血刺激活性 ,并分析二者的相关性。结果　①脐血浆造血因子中位数和全距水平分别为 :GM-CSF为 0ng/L和 0～44ng/L ,IL - 3为 3ng/L和 0～ 35ng/L,IL - 6为 3ng/L和 0～ 2 1ng/L ,EPO为 1 6U/L和 5～ 72U/L ;②脐血浆刺激下PBSC半固体培养造血祖细胞集落数为 (1 3± 1 1 ) / 1× 1 0 5细胞 ,胎牛血清刺激下的集落数为 0 ,二者差异有显著性 (P <0 .0 1 )。脐血浆或胎牛血清刺激下PBSC液体培养有核细胞数分别为 (1 .0 8± 0 .2 0 )× 1 0 6 /ml与 (0 .72±0 .0 5)×1 0 6 /ml,二者差异有显著性 (P <0 .0 5) ;③脐血浆刺激下PBSC体外培养集落数和有核细胞数均与脐血浆IL -3水平成正相关 ,相关系数分别为 0 .660和 0 .397,与IL - 6和EPO则不相关。结论　脐血浆含有多种造血因子 ,在体外具有刺激造血细胞生长的作用。脐血浆刺激造血活性与其所含有的造血因子有关 ,造血活性的高低与IL - 3浓度成正相关。IL - 6和EPO所起的作用则相对较小。 展开更多

关键词 脐血血浆 外周造血干细胞 造血因子 相关性 造血活性 CBP

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人脐静脉血衍生的富血小板血浆增强脂肪间充质干细胞改善大鼠卵巢自体移植效果的作用 被引量：1

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作者 邢彦彦 付毓 徐立敏 《中国优生与遗传杂志》 2022年第6期923-928,共6页

目的 研究人脐静脉血衍生的富血小板血浆(ucPRP)对脂肪间充质干细胞改善大鼠卵巢自体移植效果作用的影响。方法 8周龄SD大鼠分为3组:自体移植组、自体移植+ADSCs组(ADSC组)及自体移植+ADSCs+ucPRP组(ADSC+ucPRP组),移植术后4周,H-E染色... 目的 研究人脐静脉血衍生的富血小板血浆(ucPRP)对脂肪间充质干细胞改善大鼠卵巢自体移植效果作用的影响。方法 8周龄SD大鼠分为3组:自体移植组、自体移植+ADSCs组(ADSC组)及自体移植+ADSCs+ucPRP组(ADSC+ucPRP组),移植术后4周,H-E染色卵泡分类计数,免疫组化检测新生血管数量,Masson染色检测其纤维化面积,同时检测大鼠性激素水平。结果 ADSCs+ucPRP组原始卵泡和生长卵泡数量均高于ADSC组;ADSC+ucPRP组大鼠血清激素水平较ADSC组理想。ADSC+ucPRP组移植卵巢组织新生血管数量高于ADSC组,卵巢纤维化程度低于ADSC组(P<0.05)。结论 ucPRP增强ADSCs改善大鼠卵巢自体移植效果的作用,从而提高移植效率。 展开更多

关键词 脂肪间充质干细胞 人脐静脉血衍生的富血小板血浆 卵巢移植 卵泡计数 凋亡

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含人脐血来源富血小板血浆的三维生物打印墨水在裸鼠全层皮肤缺损治疗中的应用 被引量：1

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作者 宋薇 李曌 +7 位作者 朱世钧 张超 姚斌 孔毅 梁莉婷 恩和吉日嘎拉 付小兵 黄沙 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期905-913,共9页

目的探讨含人脐血来源富血小板血浆(HUCB-PRP)的海藻酸钠-明胶(AG)生物墨水(称为HUCB-PRP-AG生物墨水)的可打印性能和细胞相容性,及该生物墨水的三维打印组织治疗裸鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法采用实验研究方法。制备含体积分数2.5%... 目的探讨含人脐血来源富血小板血浆(HUCB-PRP)的海藻酸钠-明胶(AG)生物墨水(称为HUCB-PRP-AG生物墨水)的可打印性能和细胞相容性,及该生物墨水的三维打印组织治疗裸鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法采用实验研究方法。制备含体积分数2.5%、5.0%、10.0%HUCB-PRP的HUCB-PRP-AG生物墨水,分别命名为1P-AG、2P-AG、4P-AG。取AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG,观察室温下外观,采用旋转流变仪检测黏度、储能模量和损耗模量。利用以上4种生物墨水分别进行三维生物打印并观察打印组织外观(后续使用交联后打印组织),将4种打印组织分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在Transwell小室内用HUVEC专用培养基共培养24 h,采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖水平(样本数为3);将4种打印组织分别用DMEM培养基培养12、24、48 h,进行干燥称重并计算降解率(样本数为3);将1P-AG、2P-AG、4P-AG打印组织分别用磷酸盐缓冲液培养0.5、24.0、48.0 h,采用酶联免疫吸附测定法检测培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达(样本数为5)。取16只6~8周龄雌性BALB/c-NU裸鼠建立背部全层皮肤缺损创面模型,分为创面仅覆盖医用水胶体敷料的常规对照组和另予HUCB-PRP滴加的HUCB-PRP组、AG打印组织覆盖的AG组、4P-AG打印组织覆盖的4P-AG组(每组4只),观察每组3只裸鼠伤后4、8、14 d创面愈合情况并计算创面愈合率;取每组剩余裸鼠伤后8 d创面组织,行苏木精-伊红染色后观察组织病理学改变,行免疫组织化学染色后观察CD31阳性新生血管情况。对数据行重复测量方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果在室温下,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG均呈半透明液态;AG为淡黄色,1P-AG、2P-AG、4P-AG均为淡红色但颜色依次逐渐加深。在温度10℃和剪切率0.1~10.0 s-1范围内,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG的黏度均随着剪切率的增加而减小;在温度10℃和角频率1~100 rad/s范围内,4种生物墨水 展开更多

关键词 生物相容性材料 打印 三维 新生血管化 生理性 生物墨水 人脐血来源富血小板血浆 创面修复

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