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巨尾桉胞质EuCuZnSOD基因的克隆与原核表达 被引量:3
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作者 赵艳玲 周利建 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第6期693-697,共5页
通过克隆巨尾桉的细胞质EuCuZnSOD基因,构建原核表达载体pET-CuZnSOD,并研究该基因的功能.测序结果表明:基因序列长度为459bp;152个编码氨基酸,蛋白相对分子质量为15.2ku.在28℃条件下,1mmol·L-1异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导4h,... 通过克隆巨尾桉的细胞质EuCuZnSOD基因,构建原核表达载体pET-CuZnSOD,并研究该基因的功能.测序结果表明:基因序列长度为459bp;152个编码氨基酸,蛋白相对分子质量为15.2ku.在28℃条件下,1mmol·L-1异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导4h,转化菌株的超氧化物歧化酶(SOD),总酶活比对照组平均高19.9%.结果表明:克隆获得的巨尾桉细胞质EuCuZnSOD的重组基因表达产物具有SOD酶活性,GenBank注册号为JX138573. 展开更多
关键词 巨尾桉 EuCuZnSOD基因 铜锌超氧化物歧化酶 克隆 原核表达
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过表达EuCuZnSOD提高巨尾桉的耐寒性研究 被引量:3
2
作者 赵艳玲 韩瑶 靳玉蕾 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期101-108,共8页
铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是一种清除超氧阴离子自由基的金属酶,与多种抗逆性相关。该研究利用CaMV35S启动子融合巨尾桉EuCuZnSOD1基因通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法导入巨尾桉中,经卡那霉素初步筛选和PCR鉴定,得到10株转基因阳性... 铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是一种清除超氧阴离子自由基的金属酶,与多种抗逆性相关。该研究利用CaMV35S启动子融合巨尾桉EuCuZnSOD1基因通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法导入巨尾桉中,经卡那霉素初步筛选和PCR鉴定,得到10株转基因阳性植株。结果表明:通过-13.1℃暗处理5 h的抗寒性实验,发现40和41号植株在低温下无叶片萎蔫现象,组培室培养100 d后全株存活无白化叶片,说明这两株转基因巨尾桉的抗低温和冻害后恢复能力较强。在4℃低温胁迫下跟踪监测转基因温室苗的SOD酶活性发现,与对照相比转基因植株的SOD酶比活力无规律性且变化不大,但是相同条件下实时定量PCR检测结果表明抗寒性较强的40和41号植株在常温下EuCuZnSOD1的表达量较对照增加了约9倍,4℃处理36 h后EuCuZnSOD1的表达量相比对照植株分别增加了16倍和36倍,说明EuCuZnSOD1在低温胁迫下的表达量增加提高了巨尾桉的耐寒性。分析转基因组培苗全株的硫酸木质素含量,表明EuCuZnSOD1高表达不影响甚至降低了巨尾桉的木质素含量,40号植株的木质素含量与对照相同,而41号整株植株的木质素含量相比对照降低了56%,其他检测转基因植株的木质素含量均有不同程度的降低。该研究结果表明巨尾桉中大量表达EuCuZnSOD1基因可以提高巨尾桉的抗寒能力以及寒害后的恢复能力,不影响甚至可能是负调控了转基因巨尾桉的木质素生物合成。 展开更多
关键词 巨尾桉 铜锌超氧化物歧化酶 转基因 抗寒性 硫酸木质素
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正义EuCuZnSOD和反义4CL1双基因对巨尾桉耐低温能力的影响 被引量:2
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作者 赵艳玲 王梅 +1 位作者 靳玉蕾 韩瑶 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2540-2545,共6页
本研究采用双向启动子载体同步将巨尾桉CuZnSOD1基因和反义4CL1基因导入巨尾桉,通过PCR鉴定得到8株转基因巨尾桉。综合分析转基因组培苗-13.1℃处理3.5 h的抗寒性实验结果和全株硫酸木质素测定数据,获得一株优质抗寒的转基因巨尾桉植株7... 本研究采用双向启动子载体同步将巨尾桉CuZnSOD1基因和反义4CL1基因导入巨尾桉,通过PCR鉴定得到8株转基因巨尾桉。综合分析转基因组培苗-13.1℃处理3.5 h的抗寒性实验结果和全株硫酸木质素测定数据,获得一株优质抗寒的转基因巨尾桉植株76号。跟踪监测盆栽转基因苗在4℃低温胁迫下的SOD酶活性、q PCR分析CuZnSOD1和CCS表达量变化,研究CuZnSOD的m RNA表达量以及成熟蛋白酶与桉树植株耐低温能力的关系。研究数据表明冻害处理3.5 h后76号植株叶片受温度影响出现萎蔫现象,在组培室培养72 h后植株完全恢复,100 d后叶片没有白化损伤全株存活。76号温室苗的SOD酶比活力随4℃低温胁迫时间的延长而增加,但是CuZnSOD1和CCS的表达量则是逐渐降低。76号组培苗全株硫酸木质素含量为8.6%,相比对照降低约40%。本研究利用双基因转化技术获得了兼具低木质素和抗寒能力强的转基因植株,为培育高产和环境友好型桉树的研究提供技术支持。 展开更多
关键词 巨尾桉 铜锌超氧化物歧化酶 4-香豆酸辅酶A连接酶 转基因植株 抗寒性
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水杨酸与烟草铜锌超氧化物歧化酶的相互作用 被引量:4
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作者 盛良全 刘少民 +3 位作者 贾莉莉 徐小龙 解永树 刘清亮 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期283-286,共4页
利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸 (SA)对超氧化物歧化酶 (SOD)活力的影响。通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制 ,求得两者结合的形成常数和配位数 ,使用F rster非辐射能量转移技术求出了两者... 利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸 (SA)对超氧化物歧化酶 (SOD)活力的影响。通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制 ,求得两者结合的形成常数和配位数 ,使用F rster非辐射能量转移技术求出了两者的结合位置距色氨酸残基间的距离为 2 .60nm。 展开更多
关键词 水杨酸 铜锌超氧化物歧化酶 酶活力 荧光光谱 烟草 相互作用 邻苯三酚自氧化法
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桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD的克隆与分析 被引量:10
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作者 吴军帅 李培环 +2 位作者 李鼎立 董晓颖 段艳欣 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期408-417,共10页
从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登... 从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登录号:JX217743)。该基因全长665bp,包含一个459bp的ORF(120bp-578bp),编码152个氨基酸,推测蛋白分子量为15.38kDa,理论等电点为5.60。该基因具有典型的高度保守的Cu2+和Zn2+活化中心及特征信号,其氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。生物信息学分析结果表明,该蛋白定位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白。二级结构分析结果表明,该蛋白主要由无规则卷曲和延伸链等蛋白质二级结构元件构成,三维结构预测结果显示,PpCuZnSOD有3个转角环和8个折叠构成桶状的活性中心。系统进化分析结果表明PpCuZnSOD与小金海棠(Malus xiaojinensis)sod2同源关系最近,而与荔枝(Lichichinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)和拟南芥(Arabidopsis trifoliate)等亲缘关系较远。QPCR结果表明,PpCuZnSOD在幼果中表达量最高,雌蕊和雄蕊次之,花瓣和叶片中表达量最少;果实成熟前后,PpCuZnSOD在硬肉芽变桃双久红果实中的表达量显著高于软肉桃川中岛白桃中的表达量,表明该基因可能在维持果实质地和硬度方面有一定作用。本研究结果为进一步研究该基因在桃果实成熟软化中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 PpCuZnSOD基因 克隆 生物信息学 基因表达
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银杏叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因GbCuZnSOD的克隆与表达 被引量:7
6
作者 李琳玲 程华 +3 位作者 许锋 王燕 姜德志 程水源 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期35-42,共8页
利用RACE技术首次从银杏中克隆得到铜锌型超氧化物歧化酶基因(GbCuZnSOD)的cDNA序列。GbCuZnSOD的cDNA全长为783bp。基因内部含有1个长度为642bp开放阅读框,编码长度为213个氨基酸残基的蛋白质,预测分子质量为21.95ku,等电点为6.82。三... 利用RACE技术首次从银杏中克隆得到铜锌型超氧化物歧化酶基因(GbCuZnSOD)的cDNA序列。GbCuZnSOD的cDNA全长为783bp。基因内部含有1个长度为642bp开放阅读框,编码长度为213个氨基酸残基的蛋白质,预测分子质量为21.95ku,等电点为6.82。三维结构预测结果显示,GbCuZnSOD含有3个转角环和8个β折叠构成桶状的活性中心。GbCuZnSOD氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。进化树分析结果表明GbCuZnSOD和其他物种的CuZnSOD源自于相同的祖先。信息学分析显示,得到的GbCuZnSOD属于叶绿体SOD。Southern杂交证实,GbCuZnSOD属于一个小的多基因家族。Northern杂交表明GbCuZnSOD在银杏的茎、叶和果中有表达,根中没有表达,在叶中的表达量最高。ABA和36℃高温能诱导GbCuZnSOD的转录表达,而低温和渗透压处理结果不明显。 展开更多
关键词 银杏 CuZnSOD基因 表达分析
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茶树CSD1基因及其启动子克隆与低温胁迫下的表达 被引量:4
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作者 郭玉琼 王仲 +7 位作者 朱晨 赵姗姗 张舒婷 常笑君 李小桢 傅海峰 林玉玲 赖钟雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1122-1131,共10页
低温寒害严重影响茶树的生长发育状况及成品茶品质,Copper/zinc-superoxide dismutase(CSD)基因在植物抗胁迫响应中起着关键作用.为了解茶树CSD基因(CsCSD)响应低温胁迫的作用机制,以铁观音茶树叶片为供试材料,采用同源克隆结合RAC... 低温寒害严重影响茶树的生长发育状况及成品茶品质,Copper/zinc-superoxide dismutase(CSD)基因在植物抗胁迫响应中起着关键作用.为了解茶树CSD基因(CsCSD)响应低温胁迫的作用机制,以铁观音茶树叶片为供试材料,采用同源克隆结合RACE方法及染色体步移法,获得茶树CSD1基因的cDNA序列(GenBank登录号:KR078346)、gDNA序列及其启动子序列,并对其进行生物信息学分析,同时对低温胁迫处理下CsCSD1基因的表达模式也进行分析.结果显示,茶树CsCSD1基因cDNA全长860 bp,完整的开放阅读框(ORF)长度为459 bp,共编码152个氨基酸;gDNA基因结构分析发现CsCSD1基因由6个外显子和5个内含子构成;CpG岛预测发现启动子区域内存在1个CpG岛,CpG长度为219bp,GC含量为50.3%;CsCSD1启动子上还存在大量的顺式作用元件,包括光响应元件、激素响应元件、胁迫响应元件和其他响应元件;在低温胁迫下CsCSD1基因的表达模式显示,在低温胁迫前期,CsCSD1基因表达上调;随后CsCSD1基因的表达量不断下降.本研究表明,CsCSD1基因能够响应低温胁迫并在胁迫的不同时期发挥不同的作用,推测与低温胁迫密切相关. 展开更多
关键词 茶树 CSD1基因 低温胁迫 表达分析
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补阳还五汤对球囊扩张主动脉后再狭窄其内皮PDGFR和SOD-1基因表达的探讨 被引量:67
8
作者 谢全锦 侯灿 +1 位作者 吴伟康 何勤 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第10期611-613,共3页
目的:探讨补阳还五汤防治经皮腔内冠脉成形术(PTCA)后再狭窄的消长机制。方法:仿PTCA术后再狭窄的新西兰兔模型28只,以原位引物标记法测动脉内皮钢-锌超氧化物歧化酶(SOD-1)及血小板行化生长因子受体(PDGF... 目的:探讨补阳还五汤防治经皮腔内冠脉成形术(PTCA)后再狭窄的消长机制。方法:仿PTCA术后再狭窄的新西兰兔模型28只,以原位引物标记法测动脉内皮钢-锌超氧化物歧化酶(SOD-1)及血小板行化生长因子受体(PDGFR)的基因表达,分析再狭窄消长机理。结果:主动脉球囊扩张术后7天,手术部位动脉内皮的SOD-1基因表达增强,与对照组有显著差异(P<0.05),而PDGFRmRNA的表达则减弱,与对照组也有显著性差异(P<0.05)。结论:补阳还五汤增强动脉内皮SOD-1的基因表达,改善缺血再灌注的供氧。同样情况下,补阳还五汤抑制PDGFRmRNA表达,以控制细胞的病理性增殖。 展开更多
关键词 补阳还五汤 生长因子 冠状动脉狭窄 血管成形术
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编码棉花胞质铜锌超氧物歧化酶基因的克隆与表达分析 被引量:19
9
作者 胡根海 喻树迅 +1 位作者 范术丽 宋美珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1602-1609,共8页
【目的】克隆编码棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因并分析其表达特性。【方法】采用RACE技术克隆基因,Northern blotting检测基因的表达谱;采用氮蓝四唑(NBT)光下还原法测定不同生育期的酶活性。【结果】获得了棉花胞质铜锌超氧化物岐化... 【目的】克隆编码棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因并分析其表达特性。【方法】采用RACE技术克隆基因,Northern blotting检测基因的表达谱;采用氮蓝四唑(NBT)光下还原法测定不同生育期的酶活性。【结果】获得了棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因cDNA全长序列(GenBank注册号:DQ445093);该基因cDNA全长共682bp,开放阅读框456bp,编码152个氨基酸。分子结构预测结果:酶蛋白理论分子量约为15.03kD,理论等电点为6.09,与其它植物的蛋白质氨基酸序列同源性在82%~87%之间。Southern blotting显示不同棉种该基因的拷贝数基本一致,均属于低拷贝基因。Northern blotting显示该基因在不同的组织、不同的生育期表达量不同;酶活性测定显示盛花期最高。【结论】棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因在陆地棉中属于低拷贝数基因;在整个生育期中mRNA的含量呈规律性动态变化,前期较低,后期较高,在盛花期达到顶峰;变化曲线与不同时期的酶活性变化一致;不同器官的基因表达检测结果显示:基因在根中表达量最高,叶片次之,花中的表达最低。 展开更多
关键词 棉花 铜锌超氧物歧化酶 基因 克隆
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赤子爱胜蚓超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究 被引量:16
10
作者 刘堰 李清漪 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期605-610,共6页
采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从赤子爱胜蚓整体细胞抽提液内分离得到纯的铜锌超氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)。每100g蚯蚓得到的SOD制品,总活力为11150U,比活力为5138U/mg蛋白,回收率为20%。... 采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从赤子爱胜蚓整体细胞抽提液内分离得到纯的铜锌超氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)。每100g蚯蚓得到的SOD制品,总活力为11150U,比活力为5138U/mg蛋白,回收率为20%。铜锌超氧化物岐化酶呈淡蓝绿色,最大紫外吸收波长为270nm。测得该酶分子量为33000,亚基分子量为16500。该酶亚基由156个氨基酸残基组成,不含酪氨酸。 展开更多
关键词 蚯蚓 超氧化物岐化酶 提纯
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利用牛血块分离提取铜锌超氧化物歧化酶的工艺研究 被引量:13
11
作者 张良 薛刚 黄开勋 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第4期334-337,共4页
改进了传统提取超氧化物歧化酶的工艺 ,即直接用血块 ,加入保护剂、溶膜剂 ,采用机械破碎法破膜 ,热变性及两次乙醇 -氯仿沉淀除杂蛋白 ,然后丙酮沉淀 ,按照此工艺分离提取获得高纯度的Cu ,Zn SOD ,比活达到 6 988U/mg·pro。
关键词 牛血 铜锌超氧化物歧化酶 分离 提取 工艺
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Mn-SOD and CuZn-SOD polymorphisms and interactions with risk factors in gastric cancer 被引量:11
12
作者 Jian-Feng Yi Shi-Liang Kang +6 位作者 Xiang-Ting Zeng Yu-Min Li Tao Liu Jun-Qiang Zhang Wen-Ting He Xun Li Wen-Ce Zhou 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第37期4738-4746,共9页
AIM: To investigate the effects of superoxide dismutase (SOD) polymorphisms (rs4998557 , rs4880), Helicobacter pylori (H. pylori ) infection and environmental factors in gastric cancer (GC) and malignant potential of ... AIM: To investigate the effects of superoxide dismutase (SOD) polymorphisms (rs4998557 , rs4880), Helicobacter pylori (H. pylori ) infection and environmental factors in gastric cancer (GC) and malignant potential of gastric precancerous lesions (GPL). METHODS: Copper-zinc superoxide dismutase (SOD1, CuZn-SOD)-G7958A (rs4998557 ) and manganese superoxide dismutase (SOD2, Mn-SOD)-Val16Ala (rs4880 ) polymorphisms were genotyped by SNaPshot multiplex polymerase chain reaction (PCR) in 145 patients with GPL (87 cases of gastric ulcer, 33 cases of gastric polyps and 25 cases of atrophic gastritis), 140 patients with GC and 147 healthy controls. H. pylori infection was detected by immunoblotting analysis. RESULTS: The SOD1-7958A allele was associated with a higher risk of gastric cancer [odds ratio (OR) = 3.01, 95% confidence intervals (95% CI): 1.83-4.95]. SOD216Ala/Val genotype was a risk factor for malignant potential of GPL (OR = 2.04, 95% CI: 1.19-3.49). SOD216Ala/genotype increased the risk of gastric cancer (OR = 2.85, 95% CI: 1.66-4.89). SOD1-7958A/genotype, SOD2-16Ala/genotype, alcohol drinking, positive family history and type Ⅰ H. pylori infection were associated with risk of gastric cancer, and there were additive interactions between the two genotypes and the other three risk factors. SOD2-16Ala/Val genotype and positive family history were associated with malignant potential of GPL and jointly contributed to a higher risk for malignant potential of GPL (OR = 7.71, 95% CI: 2.10-28.22). SOD1-7958A/genotype and SOD2-16Ala/genotype jointly contributed to a higher risk for gastric cancer (OR = 6.43, 95% CI: 3.20-12.91). CONCLUSION: SOD1-7958A/and SOD2-16Ala/-genotypes increase the risk of gastric cancer in Chinese Han population. SOD2-16Ala/-genotype is associated with malignant potential of GPL. 展开更多
关键词 copper-zinc superoxide dismutase Manganese superoxide dismutase Gastric cancer Gastric precancerous lesions Gene polymorphisms Interaction
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微量元素铜及铜锌超氧化物歧化酶的模拟化学 被引量:12
13
作者 刘临 梅光泉 《微量元素与健康研究》 CAS 2004年第6期57-59,67,共4页
铜和锌都是人体所必需的微量元素 ,铜 (Ⅱ )为铜锌超氧化物歧化酶的活性中心 ,能消除体内有害自由基 ,维护正常生理功能。综述了铜的生物学效能以及铜锌超氧化物歧化酶的模拟化学。
关键词 铜锌超氧化物歧化酶 模拟物
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重金属离子对烟叶SOD活性的影响 被引量:10
14
作者 邓家军 张宇斌 +4 位作者 胡继伟 乙引 苏贤坤 黄先飞 秦樊鑫 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第5期1171-1175,共5页
为了研究重金属对烟叶铜锌超氧化物歧化酶的作用规律,消除活体烟叶中其他因素的影响,试验采用离体方法,利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶的酶液。研究了不同浓度的Cu2+、Zn2+、Pb2+... 为了研究重金属对烟叶铜锌超氧化物歧化酶的作用规律,消除活体烟叶中其他因素的影响,试验采用离体方法,利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶的酶液。研究了不同浓度的Cu2+、Zn2+、Pb2+、Hg2+、Ag+、Ni2+对铜锌超氧化物歧化酶活性的影响,结果显示,在浓度为0~80 mg.L-1范围内,Cu2+、Zn2+都能使铜锌超氧化物歧化酶的活性先降低后升高,但在相同浓度下,Cu2+使酶活性变化的幅度大于Zn2+。Ag+使铜锌超氧化物歧化酶的活性的变化趋势与Cu2+、Zn2+基本一致,仅变化幅度不如Cu2+、Zn2+显著。Ni2+能加强铜锌超氧化物歧化酶的活性,在浓度为0~80 mg.L-1范围内,酶活性的提高率为0~144.28%。随着Pb2+、Hg2+浓度的增大,铜锌超氧化物歧化酶的活性呈现先升高后降低的趋势,在浓度为0~50 mg.L-1范围内,Pb2+、Hg2+能使铜锌超氧化物歧化酶的活性提高,提高率的范围分别为0~50.39%和0~15.68%;但当浓度为80 mg.L-1时,Pb2+、Hg2+使铜锌超氧化物歧化酶的活性的降低率分别为78.27%和59.94%。铜锌超氧化物歧化酶在重金属离子Cu2+、Zn2+、Pb2+、Hg2+、Ag+、Ni2+胁迫下,所表现出来的酶活性可能主要是受3个方面因素共同作用的结果。 展开更多
关键词 烟叶 铜锌超氧化物歧化酶 活性 重金属胁迫 响应
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近江牡蛎铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究 被引量:9
15
作者 曾利荣 张尔贤 +1 位作者 林哲甫 俞丽君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期583-587,共5页
经65℃加热,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶过滤和DE-52柱层析,从近江牡蛎(OstrearivularisGould)软体部分提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD).对其理化性质鉴定表明,... 经65℃加热,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶过滤和DE-52柱层析,从近江牡蛎(OstrearivularisGould)软体部分提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD).对其理化性质鉴定表明,用此法纯化的酶纯度均一.该酶系由两个相同亚基组成的二聚体,分子量27.9kD.该酶的紫外吸收峰在272.5nm,红外光谱表现出其氨基酸组成特征,与猪血SOD存在差异.该酶在不同的升温速率下及经不同浓度的H2O2处理后的稳定性与猪血SOD不同.其氨基酸组成与不同来源的同类酶存在差异. 展开更多
关键词 牡蛎 纯化 性质 CUZN-SOD SOD
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鸡红细胞Cu,Zn-SOD的纯化及部分性质研究 被引量:9
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作者 张兰杰 候冬岩 +1 位作者 辛广 袁勤生 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期266-270,共5页
目的:从鸡红细胞分离铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),并对其部分性质进行研究。方法:用氯仿-乙醇除杂蛋白、丙酮沉淀、热变性、DEAE-32柱色谱等方法,对鸡红细胞Cu,Zn-SOD进行分离纯化。结果:得到Cu,Zn-SOD干粉5.9mg,比活10196.27U/mg蛋... 目的:从鸡红细胞分离铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),并对其部分性质进行研究。方法:用氯仿-乙醇除杂蛋白、丙酮沉淀、热变性、DEAE-32柱色谱等方法,对鸡红细胞Cu,Zn-SOD进行分离纯化。结果:得到Cu,Zn-SOD干粉5.9mg,比活10196.27U/mg蛋白,活力回收70.43%,纯化倍数为125.82。理化性质分析表明:该酶的最大紫外吸收波长264nm,相对分子量约为31000D,相对亚基分子量约为16500D,pH在6~9范围内稳定性很好,在40~60℃内保温30min酶活基本不变,2mmol/LSDS对此酶没有明显的抑制,该酶对H2O2和KCN敏感。结论:鸡红细胞含有丰富的Cu,Zn-SOD。 展开更多
关键词 鸡红细胞 铜锌超氧化物歧化酶 纯化 性质
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羊红细胞铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究 被引量:11
17
作者 张彩莹 袁勤生 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第1期4-7,共4页
目的从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分理化性质进行研究。方法采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、DE FF柱色谱的方法 ,对羊红细胞Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果羊红细胞 5 2 0g得... 目的从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分理化性质进行研究。方法采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、DE FF柱色谱的方法 ,对羊红细胞Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果羊红细胞 5 2 0g得Cu ,Zn SOD总活力为 4 6 70 0 0u ,比活为 812 6u/mg·pro,纯化倍数为 2 6 .2 ,活性回收率为 6 1%。理化性质分析表明 :该酶的最大紫外吸收波长为 2 5 8nm ,亚基相对分子量为 16 .1kD ,每个亚基含 1个铜原子和 1个锌原子。pH在 6~ 11范围内该酶稳定性很好 ,在 35℃~ 75℃范围内 ,保温 2 0min ,酶活基本没有损失。 2mmol/L的SDS对Cu ,Zn SOD没有明显的抑制作用 ,而 2mmol/L的H2 O2 对该酶表现出较强的抑制作用。结论采用此方法分离纯化的Cu ,Zn SOD达到电泳纯 ,其理化性质与其它动物血液来源的Cu ,Zn SOD一致。 展开更多
关键词 羊红细胞 铜锌超氧化物歧化酶 纯化 性质
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狗肝铜锌超氧化物歧化酶的纯化 被引量:7
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作者 吕星 方允中 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第4期496-500,共5页
本文采用加热、硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从狗肝中提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD),并对其理化性质进行了鉴定。结果表明酶的纯度均一。与文献报道的不同来源的同类酶相同,狗肝Cu·Zn-SOD系由两个相同亚基组成的二聚... 本文采用加热、硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从狗肝中提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD),并对其理化性质进行了鉴定。结果表明酶的纯度均一。与文献报道的不同来源的同类酶相同,狗肝Cu·Zn-SOD系由两个相同亚基组成的二聚体,每分子晦蛋白合有两个铜和两个锌原子。分子量33.6kD,N-末端氨基酸为丙氨酸。 展开更多
关键词 超氧物歧化酶
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重组人铜锌SOD在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用 被引量:6
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作者 葛宇 刘玲 +2 位作者 高剑英 高俊杰 袁勤生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期156-161,共6页
用衰减全反射(ATR)傅立叶变换红外光谱技术研究了重组人铜锌SOD(rhCu,Zn-SOD)在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用。结果显示,在脱水过程中,蛋白质结构发生了重排,无论是真空干燥还是冷冻干燥,子峰峰位都发生偏移,α-螺旋结构消失... 用衰减全反射(ATR)傅立叶变换红外光谱技术研究了重组人铜锌SOD(rhCu,Zn-SOD)在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用。结果显示,在脱水过程中,蛋白质结构发生了重排,无论是真空干燥还是冷冻干燥,子峰峰位都发生偏移,α-螺旋结构消失,产生无规卷曲结构。糖和硼酸盐能够有效地维持酶的天然构象,其中海藻糖对冻干过程中rhCu,Zn-SOD的α-螺旋结构维持率为93%。 展开更多
关键词 傅立叶红外光谱 蛋白质 重组人铜锌S0D 二级结构 保护剂 脱水过程 α—螺旋结构
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野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达 被引量:6
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作者 丛海峰 徐世清 +5 位作者 司马杨虎 张升祥 王更先 董航 刘莹 柳学广 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期234-240,共7页
超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种... 超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种果蝇的同源性平均为69.3%,与线虫为57%,各物种中与Cu/Zn结合的残基高度保守。利用ExPASy的ScanProsite以及PSort和TMpred对此编码的蛋白质结构和功能域分析,预测出其具有2段Cu/Zn-SOD特异序列,且该蛋白不存在信号肽以及跨膜区。将Cu/Zn-SOD cDNA克隆到pET-28 a(+)表达载体,测序鉴定后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定其表达的融合蛋白质分子量为19.4 kD。 展开更多
关键词 野桑蚕 铜锌超氧化物歧化酶 序列分析 原核表达
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