目的:运用人多潜能干细胞研究SOX10在先天性巨结肠症(HD)中的发病机制。方法:选择2014年1月-2015年12月,17例HD患儿作为病例组;与性别、年龄配对的17例非巨结肠手术患儿作为对照组,收集术中切除肠段,提取RNA并检测SOX10表达水平。将人...目的:运用人多潜能干细胞研究SOX10在先天性巨结肠症(HD)中的发病机制。方法:选择2014年1月-2015年12月,17例HD患儿作为病例组;与性别、年龄配对的17例非巨结肠手术患儿作为对照组,收集术中切除肠段,提取RNA并检测SOX10表达水平。将人多潜能干细胞定向分化为神经崤细胞,构建SOX10 sh RNA慢病毒质粒,转入SOX10 sh RNA慢病毒质粒,检测SOX10基因表达下调后,导入SOX10,再次检测SOX10基因表达,与对照组相比上调后,观察神经崤细胞迁移能力。结果:病例组标本检测,痉挛段、移行段和扩张段SOX10/β-actni灰度值分别为(0.9254±0.2758)、(1.3082±0.0546)、(1.3147±0.0613),对照组为(1.3178±0.0715),痉挛段与正常肠段SOX10/β-actni灰度值比较差异有统计学意义(P<0.05)。移行段、扩张段与痉挛段SOX10/β-actni灰度值比较,差异均有统计学意义(P<0.05),与正常肠段比较差异均无统计学意义(P>0.05)。25μL SOX10 sh RNA慢病毒质粒下调SOX10表达下调率为63.7%。加入促迁移因子laminin前,荧光显微镜下随机视野计数结果显示,神经嵴干细胞数量数为28%。加入后神经嵴干细胞数量数为65%,差异有统计学意义(字2=12.829,P<0.05)。结论:SOX10在正常结肠组织中高表达,但在HD结肠痉挛段呈低表达,同时SOX10表达失调参与HD的发生和发展,运用人多潜能干细胞试验证实下调SOX10可导致神经崤细胞迁移障碍,而促迁移因子laminin可恢复其迁移能力。展开更多
文摘目的:运用人多潜能干细胞研究SOX10在先天性巨结肠症(HD)中的发病机制。方法:选择2014年1月-2015年12月,17例HD患儿作为病例组;与性别、年龄配对的17例非巨结肠手术患儿作为对照组,收集术中切除肠段,提取RNA并检测SOX10表达水平。将人多潜能干细胞定向分化为神经崤细胞,构建SOX10 sh RNA慢病毒质粒,转入SOX10 sh RNA慢病毒质粒,检测SOX10基因表达下调后,导入SOX10,再次检测SOX10基因表达,与对照组相比上调后,观察神经崤细胞迁移能力。结果:病例组标本检测,痉挛段、移行段和扩张段SOX10/β-actni灰度值分别为(0.9254±0.2758)、(1.3082±0.0546)、(1.3147±0.0613),对照组为(1.3178±0.0715),痉挛段与正常肠段SOX10/β-actni灰度值比较差异有统计学意义(P<0.05)。移行段、扩张段与痉挛段SOX10/β-actni灰度值比较,差异均有统计学意义(P<0.05),与正常肠段比较差异均无统计学意义(P>0.05)。25μL SOX10 sh RNA慢病毒质粒下调SOX10表达下调率为63.7%。加入促迁移因子laminin前,荧光显微镜下随机视野计数结果显示,神经嵴干细胞数量数为28%。加入后神经嵴干细胞数量数为65%,差异有统计学意义(字2=12.829,P<0.05)。结论:SOX10在正常结肠组织中高表达,但在HD结肠痉挛段呈低表达,同时SOX10表达失调参与HD的发生和发展,运用人多潜能干细胞试验证实下调SOX10可导致神经崤细胞迁移障碍,而促迁移因子laminin可恢复其迁移能力。
