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黄唇鱼(Bahaba flavolabiata)的全基因组测序和基因组特征研究 被引量:2
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作者 区又君 温久福 +1 位作者 李加儿 梁洪海 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期491-498,共8页
黄唇鱼(Bahaba flavolabiata)为国家二级重点保护野生动物、IUCN(世界自然保护联盟)红色名录的极度濒危物种(CR)。基于其样本数量极其有限,全基因组研究可以提供大量与重要性状相关的功能基因和分子标记,从而揭示其重要生命现象的遗传... 黄唇鱼(Bahaba flavolabiata)为国家二级重点保护野生动物、IUCN(世界自然保护联盟)红色名录的极度濒危物种(CR)。基于其样本数量极其有限,全基因组研究可以提供大量与重要性状相关的功能基因和分子标记,从而揭示其重要生命现象的遗传机制。采用二代测序技术于2018年5月完成了黄唇鱼基因组精细图的测序,分析结果表明,测序得到约202 Gb的高质量数据,总测序深度约为317×;组装得到的基因组大小为637.43 Mb,Contig N50约为88 Kb,Scaffold N50约为4.65 Mb;重复序列约142.72 Mb,占比22.39%,预测得到23743个基因、920个t RNA、85个rRNA、176个假基因;98.46%的基因可以注释到NR、GO等数据库中;有67个基因家族是黄唇鱼所特有的。本研究从单碱基错误率、核心基因完整性及二代Reads比对分析3个方面对黄唇鱼基因组精细图的组装结果进行了评估,结果显示所组装的基因区的完整性较好。黄唇鱼基因组序列图谱的绘制完成,对于黄唇鱼自然资源的保护和种质资源挖掘具有极其重要的科学意义。 展开更多
关键词 黄唇鱼 全基因组 测序 濒危鱼类
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猪繁殖与呼吸综合征病毒缺失变异株的基因组特征 被引量:92
2
作者 高志强 郭鑫 +2 位作者 杨汉春 陈艳红 查振林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期578-584,共7页
对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株HB-2(sh)/2002的全基因组序列进行了测定与分析.该毒株基因组全长为15 373 nt(不包括PolyA尾),与国内外美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于88.7%~95.1%之间.序列分析表明,该毒株是1个天然存在缺... 对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株HB-2(sh)/2002的全基因组序列进行了测定与分析.该毒株基因组全长为15 373 nt(不包括PolyA尾),与国内外美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于88.7%~95.1%之间.序列分析表明,该毒株是1个天然存在缺失的变异毒株,其ORF1a的Nsp2存在编码12个氨基酸的连续36个核苷酸的缺失,ORF3存在编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失.这是国内外首次发现PRRSV存在缺失变异现象,研究结果补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据,为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础. 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因组特征 缺失 变异株 PRRSV 全基因组序列 序列相似性 生物学特性 变异毒株 首次发现 信息数据 研究结果 分离株 国内外 核苷酸 氨基酸 分析表 编码 全长 遗传
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鹅圆环病毒浙江永康株全基因组的克隆及序列分析 被引量:29
3
作者 余旭平 郑新添 +2 位作者 何世成 朱军莉 沈琴芳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期860-864,共5页
为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大... 为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大小相符的DNA片段,经测序确认为GoCV特异序列,推测样品中存在GoCV。根据测定的序列进一步设计反向扩增引物,经扩增、测序、拼接后获得GoCV全长基因组序列。基因组序列分析表明,浙江永康株GoCV_yk01全长1821bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制相关的茎环结构和Rep蛋白保守基序等特征,它与德国、中国台湾发表的序列在全基因组水平有91%~93%的同源性,在Rep和外壳蛋白的氨基酸水平有94%~97%的同源性。应用ClustalW方法作进化树分析显示,GoCV_yk01序列与德国株及中国台湾株均不在同一分支。圆环病毒可以感染淋巴细胞等增殖快的细胞,引起免疫抑制,从而造成其他病原的并发和继发感染,怀疑GoCV可能在2004年初永康爆发的鹅流感中起到了一定的协同作用。该GoCV_yk01是中国内地首次检测确认并测定全基因组序列的鹅圆环病毒。 展开更多
关键词 圆环病毒 全基因组序列
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2014年广东省登革热大流行的病原体来源及分子进化特点 被引量:25
4
作者 郭前方 崔国辉 +5 位作者 方丹云 晏辉钧 周俊梅 司露露 吴德 江丽芳 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期21-28,共8页
【目的】分离培养与鉴定2014年广东省登革热暴发流行的病原体,从分子进化方向分析其来源和遗传进化特点,为登革热的监测和防控提供科学依据。【方法】在2014年登革热暴发流行期间,采集广东省不同地区登革热患者的血清标本,从中分离培养... 【目的】分离培养与鉴定2014年广东省登革热暴发流行的病原体,从分子进化方向分析其来源和遗传进化特点,为登革热的监测和防控提供科学依据。【方法】在2014年登革热暴发流行期间,采集广东省不同地区登革热患者的血清标本,从中分离培养登革病毒并进行型别鉴定。采用RT-PCR和测序技术获取病毒的E基因和全基因组序列,并对其进行系统进化分析、贝叶斯进化分析和遗传变异分析。【结果】分离培养与鉴定了40株登革病毒1型(DENV-1)病毒,获得了这40株分离株的完整E基因序列和其中6株分离株的全基因组序列。E基因进化分析结果显示,40株分离株中有16株为基因Ⅰ型,24株为基因Ⅴ型。16株基因Ⅰ型毒株中有14株与2013年广州市和2013年新加坡流行的毒株高度同源,核苷酸相似度为99.6%~99.9%,另2株基因Ⅰ型毒株则与2013年马来西亚流行的毒株亲缘关系最近,核苷酸相似度为99.7%。24株基因Ⅴ型毒株均与2009年孟加拉、广州市和2013年不丹流行的毒株同源性高,核苷酸相似度为99.0%~99.9%。对6株病毒全基因组进化分析结果显示,其中5株病毒与2013年广州市和中山市流行的毒株高度同源,核苷酸相似度为99.6%~99.8%,另一株病毒则与2002年的缅甸流行株亲缘关系最近,核苷酸相似度为98.8%。对E基因的遗传变异分析结果显示,与2013年广东省的流行代表株比较,2014年广东省分离株有5个氨基酸位点发生了变异,其中3个(S88V,E203G,T275R)位于EⅡ区的毒力位点区域,1个(S305P)位于EⅢ区的毒力位点区域。【结论】2014年广东省登革热的病原体主要为DENV-1,且至少有2种基因型同时在流行;其可能来源于2013年广东省流行的毒株,也可能来源于新加坡、马来西亚、缅甸等东南亚国家的毒株,其中2013年广东省流行的毒株可能是重要来源之一,提示须加强对本地毒株及传播媒介的监测和研究,以便了解登革� 展开更多
关键词 登革热 登革病毒 E基因 全基因组 系统进化分析 贝叶斯分析
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长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒调查及基因特征分析 被引量:22
5
作者 王黎源 杨振东 +6 位作者 孙毅 庄璐 汤芳 崔宁 秦书理 王炳军 刘玮 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第7期629-632,共4页
目的探讨长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)情况及其基因特征,分析长角血蜱在发热伴血小板减少综合征(SFTS)传播中的作用。方法在SFTS严重流行区河南省信阳市采集长角血蜱,采用实时RTPCR方法检测蜱中SFTSV核酸,阳性蜱... 目的探讨长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)情况及其基因特征,分析长角血蜱在发热伴血小板减少综合征(SFTS)传播中的作用。方法在SFTS严重流行区河南省信阳市采集长角血蜱,采用实时RTPCR方法检测蜱中SFTSV核酸,阳性蜱进行SFTSV全基因组序列测定,并与当地病人血液中的SFTSV序列及GenBank中公布的SFTSV全基因组序列进行比较。结果共检测285只长角血蜱,SFTSV携带率为20.4%(58/285)。其中,游离蜱携带率31.9%(46/144),寄生蜱携带率8.5%(12/141),差异有统计学意义(χ2=24.136,P〈0.01)。基于SFTSV的L、M和S片段构建的系统发育树,信阳地区长角血蜱的SFTSV序列与来自当地病人的SFTSV序列聚在同一分支,序列同源性分别为99.5%~99.7%,99.4%~99.5%和99.4%~99.5%。结论信阳地区SFTS高发病率与当地长角血蜱SFTSV高携带率有关,长角血蜱可能是SFTSV的传播媒介。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征病毒 全基因组 长角血蜱 传播媒介
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基因型鹅副粘病毒NA-1株全基因组的克隆及特性分析 被引量:18
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作者 徐明 丁壮 +6 位作者 毕玉海 李志杰 常爽 黄海楠 宋子运 尹仁福 杜眉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期610-613,618,共5页
将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的GPMV ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT—PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将... 将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的GPMV ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT—PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化.克隆PGEMT载体.转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定并进行序列测定.对测定结果进行拼接得到全长cDNA序列(GenBank登录号:DQ659677)。NA-1株核苷酸比新城疫病毒(NDV)核苷酸多6个碱基,位于1644~1645nt之间,符合NDV核苷酸“六碱基原则”。序列分析结果表明,GPMVNA-1株与各地代表株核苷酸同源性81.2%~91.3%。同时根据各毒株F基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,结果表明GPMNNA-1株与SFO2和QY97病毒株同属于基因Ⅶ型,不同于基因Ⅸ型NDV的国家标准株F48E9和基因Ⅱ型的LaSota传统弱毒株。 展开更多
关键词 基因Ⅶ型鹅副粘病毒 新城疫病毒 全基因组
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猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-1(sh)/2002株全基因组分子特征分析 被引量:9
7
作者 高志强 郭鑫 +2 位作者 陈艳红 查振林 杨汉春 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期270-274,共5页
A full-length genome of a Chinese porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) isolate and designated as HB-1(sh)/2002,was sequenced and analyzed. The size of complete genome for the isolate is 15,411 n... A full-length genome of a Chinese porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) isolate and designated as HB-1(sh)/2002,was sequenced and analyzed. The size of complete genome for the isolate is 15,411 nucleotides obtained from a set of overlapping cDNA clones excluding poly A tail,and is comprised of 9 ORFs,two of which encode nonstructural proteins and the others encode the structural proteins. The full-length sequence of HB-1(sh)/2002 was compared with that of two Chinese isolates,BJ-4 and CH-1a.Comparative analysis presented that the complete nucleotide sequence of HB-1(sh)/2002 shared 89.8% and 96.0% identity with BJ-4 and CH-1a,respectively.Compared with the other isolates,it seemed to be more extensive in Nsp2 of nonstructural regions and ORF5 of structural coding regions,respectively.Especially,Nsp2 only shared 77.3% and 89.1% identity with BJ-4 and CH-1a.The ORF5 shared 87.0% and 93.5% identity with BJ-4 and CH-1a.Phylogenetic analysis based on Nsp2 deduced amino acid sequence suggested that HB-1(sh)/2002 belongs to the same subgroup as CH-1a, and Nsp2 can be used as basis for monitoring the genetic variation and typing the PRRSV isolates further. 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因组 分子特征 RNA病毒 囊膜糖蛋白
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我国首株猪盖他病毒的分离与鉴定 被引量:17
8
作者 周峰 崔丹丹 +5 位作者 王傲杰 王新港 常洪涛 陈陆 李永涛 王川庆 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期59-66,共8页
盖他病毒(Getah virus,GETV)是一种广泛分布于欧亚大陆及澳大利亚北部太平洋沿岸的人兽共患虫媒病毒,我国目前各地仅从蚊子中分离到该病毒。本研究在对一猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流产胎儿进行多重RT-PCR检测时,由检测猪瘟... 盖他病毒(Getah virus,GETV)是一种广泛分布于欧亚大陆及澳大利亚北部太平洋沿岸的人兽共患虫媒病毒,我国目前各地仅从蚊子中分离到该病毒。本研究在对一猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流产胎儿进行多重RT-PCR检测时,由检测猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的一对引物扩增出一非特异性条带,测序及在NCBI数据库中BLAST结果显示,该序列与GETV序列高度相似。经病毒分离、传代、蚀斑纯化,获得一株能够在Marc-145细胞上稳定生长的分离物。电镜观察显示,该病毒有囊膜及纤突,直径约70nm,接近于球形,具有披膜病毒科甲病毒属成员的典型形态特征,将该分离物命名为HNJZ-S1株盖塔病毒(Getah virus)。全基因序列分析结果显示,分离物HNJZ-S1基因组全长11 689bp,与GenBank中现有14株GETV序列相似性为97.4%~99.3%,其与韩国猪源毒株AY702913(登录号AY702913)序列相似性最高(99.3%)。遗传进化分析显示,HNJZS1与日本蚊源毒株12IH26、马源毒株14-I-605-C1、14-I-605-C2及中国蚊源毒株HB0234亲缘关系最近,处于同一进化分支。其E2基因推导的氨基酸序列分析结果显示,HNJZ-S1与韩国猪源毒株AY702913和QIAG9302以及日本马源毒株14-I-605-C1、14-I-605-C2和中国蚊源毒株HB0234等处于同一进化分支。本研究首次从我国发病猪群中检测并分离到GETV,也是迄今为止中国唯一一株来自脊椎动物的盖他病毒,对猪源GETV的感染谱和致病性、感染和传播机制、环境微生物学及公共卫生等相关研究具有重要意义,并为之提供了宝贵的研究素材。 展开更多
关键词 流产胎儿 病毒分离 盖他病毒(GETV) 全基因序列
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西瓜花叶病毒中国分离株全基因组核苷酸序列测定 被引量:15
9
作者 张建新 吴云锋 +1 位作者 王睿 罗朝鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期153-156,共4页
Watermelon and melon mosaic disease is the important disease in agricultural production,mostly caused by watermelon mosaic virus.In this paper,the complete nucleotide sequence of watermelon mosaic virus Chinese isolat... Watermelon and melon mosaic disease is the important disease in agricultural production,mostly caused by watermelon mosaic virus.In this paper,the complete nucleotide sequence of watermelon mosaic virus Chinese isolate(WMV-Ch)was firstly determined.Excluding the 3’-terminal poly(A)tail,the genome was 10037 nt long,containing 5’-and 3’-terminal untranslated regions and a large open reading frame.The genome encoded a polyprotein of 3217 amino acids with a predicted Mr of 365.8 kD.Based on comparison with the proposed location of cleavage sites of other potyvirus polyproteins,10 mature proteins were predicted.There were 92.5% nucleotide and 96.4% amino acid identities over entire genome between WMV-Ch and France isolate(WMV-Fr),respectively.The nucleotide identity of the coat protein genes among WMV-Ch and WMV from different countries was all less than 95%,and phylogenetic tree revealed that WMV-Ch was most close to Japanese isolate. 展开更多
关键词 西瓜花叶病毒 全基因组 序列测定 结构分析
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PVY^(NTN-NW)榆林分离物的全基因组序列测定与分析 被引量:16
10
作者 高芳銮 常飞 +2 位作者 沈建国 谢联辉 詹家绥 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期270-279,共10页
【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)代表成员,是马铃薯和烟草生产中分布最为广泛并造成严重经济损失的病毒之一。研究旨在揭示PVY榆林分离物ShX14的全基因组特征,并准确判断... 【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)代表成员,是马铃薯和烟草生产中分布最为广泛并造成严重经济损失的病毒之一。研究旨在揭示PVY榆林分离物ShX14的全基因组特征,并准确判断其株系分子类型。【方法】根据已经报道的PVY不同基因保守区设计11对简并引物,采用片段重叠法从感染PVY的马铃薯病叶中扩增、克隆获得榆林分离物ShX14的全长序列,并对其序列特征、重组位点、系统发育关系等进行分析。同时,应用系统发育与性状关联分析(phylogeny-trait association analysis)评估PVY分离物与株系的关联性。【结果】测序获得的ShX14分离物核苷酸序列全长为9 724 nt(不含3′端的多聚腺苷酸尾)。该病毒基因组含有一个9 186 nt的开放阅读框,编码3 061个氨基酸的多聚蛋白(polyprotein)。在P3顺反子中+2相位上也发现由移码(reading frame shift)产生的PIPO蛋白。全基因组序列比较分析显示,ShX14分离物与HN2、SYR-NB-16分离物(PVYNTN-NW株系SYR-I型)的核苷酸、氨基酸序列的一致性分别为98%—99%和98%—100%。该分离物的P1、HC-Pro/P3和CP基因的5′端均检测到显著的重组信号,重组位点分别位于2 318、5 674和8 385 nt,与PVYNTN-NW株系(SYR-I型)的重组位点相似。系统发育分析结果显示该分离物与HN2、SYR-NB-16分离物相聚成簇,表明其在系统发育关系上,与PVYNTN-NW株系(SYR-I型)的亲缘关系最近。系统发育分析与性状关联分析结果显示该分离物与PVYNTN-NW株系(SYR-I型)的关联系数(association index,AI)、简约分值(parsimony score,PS)和最大单系分支(maximum monophyletic clade,MC)3个统计检验均显著,表明其与PVYNTN-NW株系(SYR-I型)存在显著的关联性。同时,应用多重RT-PCR成功扩增出约为1 000、600和400 bp的3个特异性片段,与PVYNTN-NW株系(SYR-I型)的特异条带大小相一致。这些结果也进一步确定该分 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 全基因组 重组 系统发育 系统发育与性状关联分析
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绵羊肺腺瘤病毒NM株前病毒基因组的克隆与全序列分析 被引量:15
11
作者 刘淑英 马学恩 +1 位作者 齐景伟 王宇 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期443-448,共6页
本研究参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成8对引物,从内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺肿瘤组织中提取总DNA为模板,对JSRV-NM株基因组分8段进行PCR扩增,产物分别为8个(531bp,888bp,949bp,944bp,1428bp,... 本研究参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成8对引物,从内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺肿瘤组织中提取总DNA为模板,对JSRV-NM株基因组分8段进行PCR扩增,产物分别为8个(531bp,888bp,949bp,944bp,1428bp,947bp,1836bp,538bp)基因片段,将其分别克隆入pMD-18T载体中进行双向测序并拼接序列,获得完整的JSRV-NM株前病毒基因组全序列。结果表明,JSRV-NM株前病毒基因组全长7430bp,有相互重叠的4个较长的开放阅读框(ORF),分别代表gag、pro、pol和env基因。与绵羊肺腺瘤病毒Ⅰ型即南非代表株(NC-001494)和绵羊肺腺瘤病毒Ⅱ型即美国代表株(AF105220)的核苷酸同源性比较分别为90.4%和90%,推导出的氨基酸同源性分别为90%和89.1%。分析JSRV-NM株基因组结构,发现在LTR的上游和下游都具有外源性exJSRV特有的ScaⅠ酶切位点,在gag基因编码的NC区发现有2个较典型的“胱氨酸—组氨酸序列”,可形成锌指结构。在env基因编码的TM区有特异性的“YXXM”基序。用地高辛标记外源性exJSRV特异的JSRV-2片段制成探针,原位杂交法检测自然感染绵羊肺腺瘤病(OPA)的病肺组织中JSRV-NM的RNA及前病毒DNA,结果表明OPA患羊肺肿瘤细胞的胞浆和核内都有JSRV-2基因mRNA的表达,说明JSRV-NM株是具有致瘤作用的外源性反转录病毒。这是我国首次报道的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列。 展开更多
关键词 绵羊肺腺瘤病毒 全基因组 克隆 序列分析
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国内新型基因2型牛病毒性腹泻病毒研究进展 被引量:15
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作者 张倩 陶洁 +10 位作者 张东 区炳明 林航 杨颖 张信军 朱礼倩 王建业 贺生中 孟婷 谢静 朱国强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第1期80-86,共7页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)有两种基因型:基因1型(BVDV-1)和基因2型(BVDV-2)。以往的流行病学调查显示BVDV-1的分布和流行区域更加广泛,但近年来国内BVDV-2的发病率呈持续升高趋势。BVDV-2通常会引起严重的急... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)有两种基因型:基因1型(BVDV-1)和基因2型(BVDV-2)。以往的流行病学调查显示BVDV-1的分布和流行区域更加广泛,但近年来国内BVDV-2的发病率呈持续升高趋势。BVDV-2通常会引起严重的急性感染和出血综合征,给养牛业造成巨大损失。本文就BVDV-2特异性检测方法和基因分型的建立,型特异性BVDV-2毒株的分离与鉴定,BVDV-2优势分离株的全基因组测定与遗传特性分析及BVDV-1和BVDV-2抗原和抗体检测平台的建立等方面展开简要综述。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离株 检测 鉴定 全基因组
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鸽圆环病毒浙江株全基因组的克隆及序列分析 被引量:14
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作者 余旭平 竺春 +2 位作者 郑新添 母安雄 于洪涛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期355-361,共7页
鸽圆环病毒(Pigeon circovrius,PiCV)是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原,鸽子感染圆环病毒后可以出现昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻、呼吸窘迫等症状。本研究应用建立的PCR方法,检测了从浙江省5个鸽场采集的样品,结果在杭州... 鸽圆环病毒(Pigeon circovrius,PiCV)是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原,鸽子感染圆环病毒后可以出现昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻、呼吸窘迫等症状。本研究应用建立的PCR方法,检测了从浙江省5个鸽场采集的样品,结果在杭州某鸽场检测到阳性。进一步设计引物分段PCR扩增、克隆并测定了2株鸽圆环病毒的全基因组序列,分别命名为PiCV-zj1和PiCV-zj2,序列的GenBank登录号为DQ090945和DQ090944。基因组序列分析表明,PiCV-zj1及PiCV-zj2全长均为2039bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制相关的茎环结构和Rep蛋白保守基序等特征,与已发表的国外11株鸽圆环病毒序列在全基因组核苷酸水平有86%~89.1%的同源性,在Rep和外壳蛋白的氨基酸水平分别有92.1%~94.7%和76.6%~81.4%的同源性。应用PHYLIP方法作进化树分析并应用bootstrap重复1000次进行检验,结果显示:10个欧美株组成一个大的分支,而浙江株和澳洲株各自独立分支。这是我国首次检测确认鸽圆环病毒的存在,并测定了2株PiCV病毒的全基因组序列。 展开更多
关键词 圆环病毒 全基因组序列
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2013~2017年江西省猪圆环病毒2型分子流行病学调查 被引量:15
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作者 蒋新华 周荷田 +4 位作者 罗锋 杨丹凤 张志庆 陈松昌 邓舜洲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1143-1150,共8页
为掌握江西地区猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及其遗传变异情况,本研究运用实验室已建立的PCR方法对2013~2017年采集自江西省南昌市、宜春市、新余市、赣州市、吉安市、九江市、上饶市、抚州市、景德镇市、鹰潭市等10个地区的1 08... 为掌握江西地区猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及其遗传变异情况,本研究运用实验室已建立的PCR方法对2013~2017年采集自江西省南昌市、宜春市、新余市、赣州市、吉安市、九江市、上饶市、抚州市、景德镇市、鹰潭市等10个地区的1 082份疑似PCV2感染猪病料组织进行病原学检测,并通过PCR扩增、克隆和基因测序对PCV2的全基因组序列进行分析。研究表明,1 082份病料中有610份为PCV2阳性,总阳性率为56.4%,其中2013~2017年阳性率分别为52.7%、48.8%、58.5%、71.0%和67.4%。共获得89株PCV2全基因组序列,其中有83株为PCV2b基因型,其中53株归类于PCV2b-1C基因亚群,30株归为PCV2b-1A/1B基因亚群;6株为PCV2a型。测序毒株与参考毒株ORF2基因核苷酸、氨基酸序列同源性分别为88.9%~100.0%和86.0%~100.0%;氨基酸序列分析表明,Cap蛋白存在20个氨基酸突变位点。本研究表明,江西地区猪群中PCV2的主导基因型为PCV2b,其中又以PCV2b-1C基因亚群占据主导地位,同时也存在少量PCV2a基因型。 展开更多
关键词 江西省 猪圆环病毒2型(PCV2) 全基因组 分子流行病学调查
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中国广东省18株柯萨奇病毒A6型分离株全基因组特征分析 被引量:13
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作者 曾汉日 陆靖 +5 位作者 郑焕英 陈晓丽 刘冷 郭雪 柯昌文 李晖 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期566-573,共8页
为了解2013年广东省引起手足口病的CVA6全基因组特征,探索研究暴发流行期与非流行期CVA6毒株间的基因异同,本研究选取18株广东省CVA6毒株进行全基因组序列扩增及测序,采用DNASTAR6.0、MEGA5.2和SimPlot3.5.1等软件对获取全基因组序列进... 为了解2013年广东省引起手足口病的CVA6全基因组特征,探索研究暴发流行期与非流行期CVA6毒株间的基因异同,本研究选取18株广东省CVA6毒株进行全基因组序列扩增及测序,采用DNASTAR6.0、MEGA5.2和SimPlot3.5.1等软件对获取全基因组序列进行遗传进化、比对及重组分析。序列比对显示,18株广东省CVA6毒株基因组长度在7 390~7 392bp之间,与原型株Gdula比较,在编码区无碱基插入或缺失,在非编码区存在个别碱基的插入或缺失。遗传进化分析显示,18株广东省CVA6毒株全基因组序列核苷酸和氨基酸同源性分别为90.5%~99.6%和97.5%~99.9%。2013年广东省CVA6流行期毒株在全基因组进化树中处于Ⅲ、Ⅳ两个分支,2011年非流行期毒株只存在于Ⅳ分支。基因重组分析显示,广东省GD870/2013株在P2和P3区存在基因重组现象,GD839/2013株未发现明显的重组来源。结果表明,2013年广东省引起手足口病的CVA6在暴发流行期存在Ⅲ、Ⅳ两条病毒传播链的共同流行,其中Ⅲ传播链在非结构蛋白编码区存在基因重组现象,与Ⅳ传播链相比具有较大基因差异,然而2011年CVA6非流行期间只存在Ⅳ病毒传播链。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A6型 全基因组
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丁型冠状病毒我国猪源株的遗传变异分析 被引量:13
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作者 吴美洲 陈芳洲 +4 位作者 朱银杏 李中华 库旭钢 刘洋 何启盖 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期689-694,共6页
猪丁型冠状病毒病(PDCo VD)是新近报道的呈现世界流行性的猪肠道病毒病。为掌握我国猪丁型冠状病毒(PDCo V)的遗传变异特征,本研究对2014年11月至2015年5月之间采集的我国3个省的10个猪场的64份样品进行了检测,并对8个PDCo V毒株的S基... 猪丁型冠状病毒病(PDCo VD)是新近报道的呈现世界流行性的猪肠道病毒病。为掌握我国猪丁型冠状病毒(PDCo V)的遗传变异特征,本研究对2014年11月至2015年5月之间采集的我国3个省的10个猪场的64份样品进行了检测,并对8个PDCo V毒株的S基因全长以及其中一个毒株的全基因组序列进行了测序分析,PDCo V的检测率为23.4%,比猪流行性腹泻病毒(PEDV)的检测率17.2%要高,同时PDCo V的单独感染率为17.2%,与PEDV混合感染率是6.4%,系统进化树表明本试验中的SXD1毒株与之前我国香港报道的毒株HKU15-44和HKU15-155的同源性最近,而这些毒株可能来自于中国大陆地区,且Song等进行的回溯性检测检到了PDCo V,表明PDCo V是一种重要的猪病毒性腹泻病病原,早就存在但未被检出。S蛋白的第52位氨基酸编码基因的缺失可以作为区分我国PDCo V毒株和韩国以及美国PDCo V毒株的标记。同时PDCo V毒株基因组上的ORF1a、S基因和N基因的变异提示我国应加强PDCo V的监控,尽快研制出针对PDCo VD的疫苗。 展开更多
关键词 猪丁型冠状病毒病 猪丁型冠状病毒 S基因 全基因组 遗传变异
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1型鸭肝炎病毒R株全基因组分析与检测技术的研究 被引量:10
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作者 罗玉均 张桂红 +5 位作者 陈建红 廖明 徐小芹 任涛 张济培 罗开健 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期2835-2842,共8页
【目的】测定1型鸭肝炎病毒(DHV1)毒株R全基因组,建立鸭肝炎病毒1型巢式PCR与实时荧光定量RT-PCR。【方法】设计特异性引物测定DHV1毒株R全基因组,以3D为靶基因序列的引物P1和P2,P3和P4进行巢式PCR,引物F和R进行实时荧光定量RT-PCR。【... 【目的】测定1型鸭肝炎病毒(DHV1)毒株R全基因组,建立鸭肝炎病毒1型巢式PCR与实时荧光定量RT-PCR。【方法】设计特异性引物测定DHV1毒株R全基因组,以3D为靶基因序列的引物P1和P2,P3和P4进行巢式PCR,引物F和R进行实时荧光定量RT-PCR。【结果】序列分析发现该毒株与其它GenBank上发表的DHV1毒株基因组核苷酸序列同源性为94.2%~99.2%,编码聚合蛋白氨基酸序列同源性为98%~98.8%,表明DHV1-R株与其它DHV1毒株之间病毒基因组一级结构有较高的同源性。基因组结构5′UTR-VP0-VP3-VP1-2A1-2A2-2B-2C-3A-3B-3C-3D-3′UTR在遗传进化关系上与副肠孤病毒属(Parechovirus)亲缘关系较近。参照鸭肝炎病毒1型基因序列设计特异性引物,分别进行巢式PCR和SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测鸭肝炎病毒1型,结果表明巢式PCR敏感性为6pg·ml-1。实时荧光定量RT-PCR确定特异性产物的Tm值,同时做普通RT-PCR。试验结果表明,特异性产物的Tm值为85.6℃,最低能检测到含0.015fg·μl-1阳性质粒标准品。【结论】建立的巢式PCR与SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性,为鸭肝炎病毒1型的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 1型鸭肝炎病毒 全基因组 巢式PCR 荧光定量RT-PCR
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河南省手足口病例肠道病毒71型分离株的全基因组序列分析 被引量:10
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作者 张绍丽 许汴利 +4 位作者 郭万申 陈立 卫海燕 杜燕华 李幸乐 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期938-941,共4页
目的对2008年河南省手足口病患者体内分离的肠道病毒71型(EV71)进行全基因组核苷酸序列测定。方法采用RT-PCR扩增覆盖全基因组的8个重叠基因片段,双向测序,DNAStar软件中的MegAlign等软件进行同源性分析,MEGA3软件进行进化树分析... 目的对2008年河南省手足口病患者体内分离的肠道病毒71型(EV71)进行全基因组核苷酸序列测定。方法采用RT-PCR扩增覆盖全基因组的8个重叠基因片段,双向测序,DNAStar软件中的MegAlign等软件进行同源性分析,MEGA3软件进行进化树分析和做图。结果8个重叠基因片段序列拼接得到EV71全基因组序列,共7405个核苷酸,与其他EV71病毒基因组构成相似,在非编码区有核苷酸的插入和缺失。同源性分析:在P1区,HENAN08株与安徽株(AnhuiFY08)、深圳株(SHZH98和SHZH03)、浙江株(Zhejiang08)等毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别大于91%和97%;与标准株(BrCr)和台湾流行株(Tw2086)的核苷酸和氨基酸同源性分别大于75%和82%;与CoxsackievirusA16(Cox.A16)的同源性最低,为68.7%和79.6%。在P2和P3区,HENAN08株与其他国内EV71株的同源性均较高,而与BrCr以及TW2086的同源性低于Cox.A16。P1区遗传进化分析表明:HENAN08株与AnhuiFY08和Zhejiang08的进化关系都密切,与Cox.A16疏远。结论HENAN08属EV71病毒的C4亚型,与AnhuiFY08、Zhejiang08和SHZH03进化途径类同。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 全基因组 序列分析
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2009年云南省柯萨奇病毒B5:分离株A210/KM/09全基因序列分析 被引量:10
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作者 刘建生 邵聪文 +5 位作者 赵卫中 张云昆 吉玛 朱艳菊 马忠飞 马绍辉 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期307-311,共5页
目的分析柯萨奇病毒B5(CVB5)云南分离株A210/K2~I/09全基因序列及其遗传特性。方法设计针对CVB5引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和产物直接测序获得序列,利用Mega4.1、RDP3和SimPlot3.5.1软件分析全基因序列。结果CVB5A210/KM... 目的分析柯萨奇病毒B5(CVB5)云南分离株A210/K2~I/09全基因序列及其遗传特性。方法设计针对CVB5引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和产物直接测序获得序列,利用Mega4.1、RDP3和SimPlot3.5.1软件分析全基因序列。结果CVB5A210/KM/09全基因组核苷酸序列长度为7372bp,编码含2185个氨基酸残基的多聚蛋白;A210/KM/09全基因组核苷酸及所推导的氨基酸与CVB5/CCl0/10同源性最高,其同源性分别为92.5%和97.3%;而与其他CVB5毒株如17Y、19CSF、20CSF、1954/85/US、2000/CSF/KOR、03001N、CoxB5/Henard2010、CVB5/SD/09和Faulkner核苷酸和氨基酸同源性分别为80.1%~92.5%和95.0%~97.3%;A210/KM/09与其他CVB5毒株的各区段核苷酸和氨基酸同源性分别为75.3%~96.3%和85.3%~100.O%,其中与VP3、3D区段核苷酸的同源性最低。基于CVB5全长VPl基因序:列进行种系进化分析,可将CVB5分为A、B、C和D4个基因型,其中C基因型可再分为C1~C4基因亚型,D基因型可再分为D1~D4基因亚型。中国CVB5流行株主要聚集在C4基因亚型,国外流行株主要聚集在D1、C2亚型。结论A210/KM/09分离株为C4基因型。 展开更多
关键词 柯萨奇B组5型病毒 全基因组 序列分析 进化树图
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福建NADC30-like PRRSV FJLY01株的全基因组分子特征分析 被引量:10
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作者 魏春华 刘建奎 +4 位作者 戴爱玲 龚丽贞 李晓华 黄思琼 杨小燕 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第3期51-60,67,共11页
【目的】了解福建省NADC30-like PRRSV FJLY01株的分子生物学特征和遗传演化规律,为PRRSV的防控提供参考。【方法】对采自福建省规模化猪场的疑似病料进行PRRSV分离鉴定,以NADC30PRRSV毒株基因序列为参考设计并合成9对引物,分别对分离... 【目的】了解福建省NADC30-like PRRSV FJLY01株的分子生物学特征和遗传演化规律,为PRRSV的防控提供参考。【方法】对采自福建省规模化猪场的疑似病料进行PRRSV分离鉴定,以NADC30PRRSV毒株基因序列为参考设计并合成9对引物,分别对分离株序列进行分段PCR扩增,经克隆测序后进行序列拼接,采用MEGA 6.0软件进行核苷酸及氨基酸同源性比对,并绘制其与其他35株毒株的系统遗传进化树。【结果】FJLY01株基因组全长为15 016bp(不包含polyA),包含10个开放阅读框,5′-UTR长190bp,3′-UTR长148bp,Nsp2基因缺失393bp。Nsp2蛋白存在类似PRRSV MN184和NADC30株的131个氨基酸的缺失。核苷酸比对结果表明,FJLY01株与VR-2332、MLV RespPRRS/Repro、CH-1a和BJ-4株核苷酸的同源性为85.2%~86.3%,与JXA1、HuN4等HP-PRRSV株核苷酸的同源性为83.7%~84.1%,与MN184A、MN184B株核苷酸的同源性为87.9%~88.2%,与NADC30株核苷酸的同源性最高,为97.1%。系统进化树分析表明,该毒株属于NADC30-like毒株,与JXA1、VR2332和CH-1a的亲缘关系较远。【结论】福建省存在NADC30-like毒株,应该加强PRRSV的监测。 展开更多
关键词 PRRSV 全基因组 NADC30-like 福建省
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