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转生长激素基因彩鲫(Colorful Curcaincarp)的获得及检测 被引量:5
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作者 伍翠芳 顾继锐 +5 位作者 刘会明 张文露 洪芳 蒋天明 吴江 徐恒 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期1085-1087,共3页
The recombinant plasmid pFV2cfGH was constructed using Growth hormone gene which was cloned from the channel catfish cDNA library,the β-action promoter of carp and the polyadenylation signal from the salmon growth ho... The recombinant plasmid pFV2cfGH was constructed using Growth hormone gene which was cloned from the channel catfish cDNA library,the β-action promoter of carp and the polyadenylation signal from the salmon growth hormone gene, and recombinant plasmid pFV2cfGH was microinjected into the fertilized eggs of the colorful crucian carp. 60 transgenic Colorful Crucian carps total DNA were got ,and growth hormone gene were detected by PCR. The result shows that the channel catfish growth hormone gene had been transmitted into the genome of the Colorful Crucian carp and the integration rate is about 47%. 展开更多
关键词 生长激素基因 转基因鱼 观赏鱼类 生长速度 转基因育种技术 转基因方法 基因安全 哺乳动物 体形 分子生物学研究
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彩鲫Ran基因全长cDNA的克隆及其组织表达特异性分析 被引量:3
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作者 李常健 刘军 +2 位作者 石耀华 杨书婷 桂建芳 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-179,共7页
根据Ran的保守区序列设计简并引物 ,结合SMARTcDNA合成及RACE PCR技术 ,克隆到彩鲫(Carassiusauratuscolorvariety)的Ran基因的cDNA全长 ,其编码区全长为 6 4 8bp ,编码 2 15个氨基酸。采用BLAST程序在NCBI数据库中对其进行同源基因搜... 根据Ran的保守区序列设计简并引物 ,结合SMARTcDNA合成及RACE PCR技术 ,克隆到彩鲫(Carassiusauratuscolorvariety)的Ran基因的cDNA全长 ,其编码区全长为 6 4 8bp ,编码 2 15个氨基酸。采用BLAST程序在NCBI数据库中对其进行同源基因搜索 ,结果表明 ,其推测的编码氨基酸序列与斑马鱼和鲑鱼的Ran基因编码的氨基酸序列的同源性分别高达 98%和 97%。还对其编码区全长序列进行了原核表达 ,以经纯化的表达蛋白免疫家兔 ,制备出了具有较高特异性的多克隆抗体。采用Westernblotting进行的组织特异性分析表明 ,Ran蛋白在卵巢、精巢和肾中表达 ,在心、脑、肝、脾和肌肉中不表达。本工作为采用免疫耗竭法、免疫共沉淀、体外系统模拟等方法进一步研究鱼类Ran基因的生理功能及分离鉴定其结合蛋白提供了良好基础。 展开更多
关键词 彩鲫 克隆 表达 抗体 Ran基因 特异性
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鱼类染色体组操作的研究 Ⅰ.静水压休克诱导三倍体水晶彩鲫 被引量:51
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作者 桂建芳 梁绍昌 +2 位作者 孙建民 黄文郁 蒋一珪 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期336-344,388,共9页
采用静水压休克方法研究了促使第二极体保留诱发三倍体水晶彩鲫的最佳条件。在卵受精后4—5min采用600kg/cm^2或650kg/cm^2的静水压处理3min,不但能导致100%的三倍化,而且胚胎的存活率相当高,孵化率为对照组的90%左右。研究表明,静水... 采用静水压休克方法研究了促使第二极体保留诱发三倍体水晶彩鲫的最佳条件。在卵受精后4—5min采用600kg/cm^2或650kg/cm^2的静水压处理3min,不但能导致100%的三倍化,而且胚胎的存活率相当高,孵化率为对照组的90%左右。研究表明,静水压休克是进行鱼类染色体组操作的有效方法,休克的最佳条件易于掌握,处理程序易于标准化。文中讨论了静水压处理的条件与三倍体出现率和胚胎存活率的关系,以及最佳条件下和不适条件下胚胎死亡的原因。 展开更多
关键词 三倍体 染色体组操作 静水压休克
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鱼类染色体组操作的研究 Ⅱ.静水压处理和静水压与冷休克结合处理诱导水晶彩鲫四倍体 被引量:45
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作者 桂建芳 孙建民 +2 位作者 梁绍昌 黄文郁 蒋一珪 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期333-342,共10页
采用静水压处理和静水压与冷休克结合处理两种方法进行了抑制第一次卵裂诱导水晶彩鲫四倍体的研究。水晶彩鯽受精卵在受精后(发育水温14—15℃)50、54、55和60min时的静水压(650kg/cm^2)处理(3min)组中都出现了四倍化胚胎,而在受精后48... 采用静水压处理和静水压与冷休克结合处理两种方法进行了抑制第一次卵裂诱导水晶彩鲫四倍体的研究。水晶彩鯽受精卵在受精后(发育水温14—15℃)50、54、55和60min时的静水压(650kg/cm^2)处理(3min)组中都出现了四倍化胚胎,而在受精后48和48min以前的相同处理组中都没有观察到四倍化胚胎。在受精后(发育水温16-18℃)48、50、52、55、56和60min时的静水压与冷休克结合处理组中,也都出现了四倍化胚胎,且四倍化率比仅用静水压处理高,但存活率更低。在经过处理而发育形成的胚胎中,既有四倍体、次四倍体和4n/2n嵌合体,也有二倍体和次二倍体,并在一些次二倍体和次四倍体中期相中还观察到休克处理致使染色体断裂的痕迹——染色体片段。在抑制卵裂诱发加倍的效应期内,可能存在瞬间对休克耐受性较强的时期,而在此前后,对休克更为敏感。在少数处理组中,已筛选出了数尾四倍体鱼。文中还对鱼类四倍体的诱导技术、抑制卵裂诱发染色体组加倍的效应期以及四倍化胚胎的存活率和生命力等有关问题进行了分析和讨论。 展开更多
关键词 鱼类 染色体组 四倍体 水晶彩鲫
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雌核发育银鲫和两性融合彩鲫卵母细胞体外诱导成熟过程中周期蛋白合成和MPF活性变化的比较研究 被引量:4
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作者 王玉凤 杨仲安 +1 位作者 杨书婷 桂建芳 《动物学报》 CSCD 2000年第1期71-80,共10页
采用体外诱导卵母细胞成熟技术 ,比较研究了雌核发育银鲫和两性融合发育彩鲫卵母细胞成熟过程中周期蛋白合成和MPF活性变化情况。结果表明 :1 7α ,2 0 β 二氢孕酮(简称DP)浓度为 0 5μg/ml,温度为 2 4℃ ,光照时间 2 0小时为最适诱... 采用体外诱导卵母细胞成熟技术 ,比较研究了雌核发育银鲫和两性融合发育彩鲫卵母细胞成熟过程中周期蛋白合成和MPF活性变化情况。结果表明 :1 7α ,2 0 β 二氢孕酮(简称DP)浓度为 0 5μg/ml,温度为 2 4℃ ,光照时间 2 0小时为最适诱导条件。在相同条件下 ,两性生殖彩鲫卵母细胞体外诱导成熟速度明显快于银鲫。相应的细胞学研究表明 ,在体外诱导时 ,银鲫和彩鲫卵母细胞的发育成熟是正常的。银鲫卵母细胞生发泡破裂 (GVBD)时已有周期蛋白的合成 ,但生发泡破裂开始后则呈现合成速度下降直至没有合成的现象。尽管如此 ,卵母细胞中MPF活性却仍保持继续增强之势 ,至GVBD达1 0 0 %时 ,活性最强。而在两性融合发育彩鲫卵母细胞成熟过程中 ,周期蛋白的合成呈现出由较多到无 ,再逐渐到多的变化。GVBD开始时 ,周期蛋白合成较多 ,此后则急剧下降至几无周期蛋白的合成 ,以后随着成熟诱导的进行 ,周期蛋白的合成速度又缓慢回升至GVBD开始时的状态。与此相对应 ,MPF活性也出现从较强变无 ,再逐渐增至最强的变迁。这些结果初步揭示 ,鱼类卵母细胞中周期蛋白的合成和MPF活性的出现与卵母细胞的成熟分裂密切相关 ,雌核发育银鲫卵母细胞生发泡破裂开始以后 ,周期蛋白合成的消失可能与其特殊的三极纺锤体形成及其后的动力? 展开更多
关键词 雌核发育银鲫 两性融合发育彩鲫 卵母细胞
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Hira基因产物在银鲫和彩鲫卵子发生过程中的动态变化 被引量:5
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作者 郭秋红 赵占克 +1 位作者 王玉凤 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期611-617,共7页
为进一步研究Hira基因在卵子发生和雌核发育过程中的作用,通过原位杂交和免疫荧光定位的方法检测了Hira mRNA和蛋白质在雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫卵子发生过程中的动态变化。结果表明,银鲫和彩鲫卵子发生过程中Hira基因转录产物的变... 为进一步研究Hira基因在卵子发生和雌核发育过程中的作用,通过原位杂交和免疫荧光定位的方法检测了Hira mRNA和蛋白质在雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫卵子发生过程中的动态变化。结果表明,银鲫和彩鲫卵子发生过程中Hira基因转录产物的变化基本一致,在Ⅰ期卵母细胞的细胞核中大量表达,至Ⅱ期卵母细胞时转至细胞质中均匀分布,在Ⅲ期卵母细胞中,杂交信号逐渐移向细胞的周边,到Ⅳ期时随着卵黄物质大量积累,杂交信号几乎不见。HIRA蛋白在银鲫和彩鲫卵子发生过程中的变化略有差别。HIRA蛋白在银鲫Ⅰ期卵母细胞中没有表达,在Ⅱ期卵母细胞的细胞质中有弱表达,在Ⅲ期早期卵母细胞的周边有强烈表达;而在彩鲫Ⅰ期卵母细胞中就有HIRA蛋白的弱表达,至Ⅱ期时HIRA蛋白在细胞质中大量表达,Ⅲ期早期卵母细胞的细胞质中有弱表达。在银鲫和彩鲫Ⅲ期末和Ⅳ期卵母细胞中都很难观察到荧光信号。Hira mRNA和蛋白质在银鲫和彩鲫早期卵母细胞中有较强表达,且在银鲫和彩鲫卵子发生过程中没有显著差异,说明其可能对于脊椎动物卵子发生和减数分裂没有显著影响,而是在受精和/或胚胎发育过程中起作用。 展开更多
关键词 雌核发育银鲫 两性生殖彩鲫 卵子发生 Hira基因 原位杂交 免疫荧光定位
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彩鲫与建鲤杂交F_1体色的初步研究 被引量:2
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作者 刘文骁 陈宏 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期100-103,共4页
利用建鲤和彩鲫正反交获得了鲤鲫F1(彩鲫♀×建鲤♂)和鲫鲤F1(建鲤♀×彩鲫♂)两个杂交群体,将两个杂交群体各分为两组,分别在室内水族箱和室外池塘中饲养6个月后,通过显微镜对鳞片黑色素细胞的数量进行统计,利用丙酮抽提液对... 利用建鲤和彩鲫正反交获得了鲤鲫F1(彩鲫♀×建鲤♂)和鲫鲤F1(建鲤♀×彩鲫♂)两个杂交群体,将两个杂交群体各分为两组,分别在室内水族箱和室外池塘中饲养6个月后,通过显微镜对鳞片黑色素细胞的数量进行统计,利用丙酮抽提液对鳞片红色素细胞的吸光值进行测定。结果发现,鲤鲫F1的红色素细胞吸光值与彩鲫接近(P>0.05),黑色素细胞数值极显著低于建鲤(P<0.01);鲫鲤F1红色素细胞吸光值极显著低于彩鲫(P<0.01),黑色素细胞值显著低于建鲤(P<0.05)。 展开更多
关键词 建鲤 彩鲫 杂交后代 体色
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长尾彩鲫人工繁殖及苗种体色变化观测试验
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作者 胡世然 李建光 +3 位作者 张竹青 朱玲 蒋晓红 刘艳 《现代农业科技》 2009年第17期310-312,共3页
采用注射催产药物的方法进行长尾彩鲫人工繁殖及其体色变化观察试验,结果表明:人工催产亲鱼50组,雌雄比为1∶1,雌鱼重7.5kg,平均尾重150.0g,产卵21.00万粒,平均每1kg雌鱼产卵2.80万粒,平均每尾雌鱼产卵4 200粒;孵化鱼苗17.00万尾,孵化率... 采用注射催产药物的方法进行长尾彩鲫人工繁殖及其体色变化观察试验,结果表明:人工催产亲鱼50组,雌雄比为1∶1,雌鱼重7.5kg,平均尾重150.0g,产卵21.00万粒,平均每1kg雌鱼产卵2.80万粒,平均每尾雌鱼产卵4 200粒;孵化鱼苗17.00万尾,孵化率为80.95%。此外,鱼苗入池后经过20d培育,平均尾重0.61g,显现彩红色的比例占3.52%。培育154d后规格达10.10g/尾,显现彩红色的比例占85.80%。总之,采用注射催产药物的方法进行长尾彩鲫人工繁殖,比自然产卵繁殖率提高30.23%;在鱼苗孵化后20d是对鱼类进行体色增色转化的最佳时机;彩鲫规格达10.0g/尾前为淘汰低品位鱼类的理想时间。 展开更多
关键词 长尾彩鲫 人工繁殖 体色变化 观测
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