“彗星”分析法测定人癌体外培养细胞的放射敏感性 被引量：8

1

作者 高远红 杨伟志 +3 位作者 闫洁 袁智勇 刘新帆 徐国镇 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期217-219,共3页

目的　探讨“彗星”分析法在检测人癌体外培养细胞放射敏感性方面的应用价值。方法应用“彗星”法对人鼻咽高分化鳞状细胞癌CNE 1和肺腺癌 973细胞进行检测 ,以尾力矩作为定量评价指标 ,检测细胞照射后的DNA初始损伤和损伤后的修复能力 ... 目的　探讨“彗星”分析法在检测人癌体外培养细胞放射敏感性方面的应用价值。方法应用“彗星”法对人鼻咽高分化鳞状细胞癌CNE 1和肺腺癌 973细胞进行检测 ,以尾力矩作为定量评价指标 ,检测细胞照射后的DNA初始损伤和损伤后的修复能力 ;同时 ,用经典的克隆形成方法测算CNE 1和 973细胞的D0 值和Dq值 ,并对两种实验方法所得结果进行比较。结果　 (1)“彗星”法测定显示 ,CNE 1细胞的初始DNA损伤大于 973细胞 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,提示CNE 1细胞的放射敏感性高于 973细胞 ;细胞存活曲线检测显示 ,CNE 1细胞的D0 值为 1.6 31,973细胞的D0 值为 1.82 2 ,提示CNE 1细胞的放射敏感性高于 973细胞。两种方法检测结果所反映细胞放射敏感性的趋势一致。(2 )“彗星”分析法检测显示 ,973细胞DNA损伤的半修复时间为 33min ,CNE 1细胞的半修复时间为 4 1min ,提示 973细胞对DNA损伤的修复能力强于CNE 1细胞 ;细胞存活曲线显示 ,973细胞的Dq值为2 .15 2 ,CNE 1细胞的Dq值为 0 .6 2 6 ,提示 973细胞的亚致死损伤修复能力大于CNE 1细胞。两种方法测定结果所反映的损伤修复能力的差异也一致。结论　“彗星”分析法检测CNE 1和 973细胞的DNA初始损伤及修复所反映的放射敏感性 ,与经典细胞存活曲线法所测的放射敏? 展开更多

关键词 “彗星”分析法 放射敏感性 体外培养 DNA损伤 肿瘤细胞

原文传递

人脐血源基质细胞与骨髓基质细胞对造血功能损伤修复作用的比较研究

2

作者 樊智敏 张曦 +2 位作者 刘耀 彭贤贵 高力 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期106-109,共4页

目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5... 目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5、7、10、14、21 d检测1次外周血细胞,于照射后7和21 d分别制备股骨骨髓涂片观察骨髓细胞形态学改变,收集小鼠骨髓细胞并作集落培养。结果 3组小鼠移植后白细胞、血小板、红细胞在3～5 d降至最低,hUCBDSCs组白细胞和血小板均从7 d开始回升,10 d后回升速度与程度提高,21 d时回升接近未照射水平,hBMSCs组从7 d开始回升,回升趋势与hUCBDSCs组相似,21 d后回升程度低于未照射水平,对照组从7 d后开始回升,回升较慢,21 d回升程度低于实验组(P<0.05);hUCBDSCs组,hBMSCs组及对照组红细胞均在3 d时降至最低,21 d后恢复,但实验组较对照组回升更快,(P<0.05),hUCBDSCs组与hBM-SCs无甚差异(P>0.05)。集落培养CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-GMEM,hUCBDSCs组21 d为(113±6)、(167±6)、(131±6)、(14±4)个,hBMSCs组(46±6)、(141±11)、(118±18)、(10±1)个,对照组为(87±3)、(122±4)、(84±7)、(5±1)个(P<0.05)。hUCBDSCs组所有小鼠均存活。结论 hUCBDSCs较hBMSCs修复造血功能损伤和血小板恢复的作用更佳,hUCBDSCs移植是1种安全有效的促进造血损伤修复的方法。 展开更多

关键词 人脐血基质细胞 人骨髓基质细胞 造血修复 造血微环境 外周血细胞 集落培养 BALB C小鼠

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AHTG与柔红霉素的偶联物体外对正常人粒单祖细胞的影响及其抗Molt-4细胞作用

3

作者 夏维林 唐锦治 +1 位作者 张锦玲 张东华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 1994年第S2期106-108,共3页

本文采用克隆测定法观察抗人胸腺细胞球蛋白与柔红霉素偶联物（AHTG-Dcx-DNR）体外对正常人粒单祖细胞的影响及其抗T淋巴细胞白血病细胞系Molt-4作用。不同浓度偶联物与骨髓细胞共同孵育2h后进行CFU-GM培养，结果表明，含柔红霉素（DNR... 本文采用克隆测定法观察抗人胸腺细胞球蛋白与柔红霉素偶联物（AHTG-Dcx-DNR）体外对正常人粒单祖细胞的影响及其抗T淋巴细胞白血病细胞系Molt-4作用。不同浓度偶联物与骨髓细胞共同孵育2h后进行CFU-GM培养，结果表明，含柔红霉素（DNR）0.01mg／L和0．1mg/L的偶联物对正常人骨髓CFU-GM的抑制率较相同浓度的游离DNR小（P＜0.01和P＜0.05），而较高浓度的偶联物（含DNRlmg／L)对CFU-GM则呈一定抑制作用。偶联物处理Molt-4细胞后能有效地抑制白血病集落的形成，呈量效关系，提示该偶联物体外有抗白血病作用。 展开更多

关键词 免疫偶联物 粒单造血祖细胞 白血病细胞系 克隆测定

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人肺癌细胞药物敏感性的琼脂培养MTT测定 被引量：15

4

作者 曹建国 廖端芳 +3 位作者 陈剑雄 朱炳阳 张德菊 唐小卿 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第3期182-184,199,共4页

采用修改Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ－Ｓａｌｍｏｎ体外双层琼脂法与琼脂培养ＭＴＴ法同时对人肺癌细胞进行药物敏感性测定。结果表明：琼脂培养ＭＴＴ法成功率为１００％（４２／４２）；双层琼脂法成功率为５０％（２１／４２）。两法同时可... 采用修改Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ－Ｓａｌｍｏｎ体外双层琼脂法与琼脂培养ＭＴＴ法同时对人肺癌细胞进行药物敏感性测定。结果表明：琼脂培养ＭＴＴ法成功率为１００％（４２／４２）；双层琼脂法成功率为５０％（２１／４２）。两法同时可供药敏分析的１２６药物浓度次中，琼脂培养ＭＴＴ法测定肺癌细胞的药物敏感率为３２．５％（４１／１２６），双层琼脂法的药物敏感率为３９．７％（５０／１２６），两者间无明显差异（ｐ＞０．０５）；两法测定结果的总符合率为９２．８％（１１７／１２６）。提示琼脂培养的ＭＴＴ法测定可以取代双层琼脂法测定人实体瘤对不同药物的反应以供临床参考。 展开更多

关键词 琼脂培养 MTT测定 药物敏感性 肺肿瘤

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一种检测酵母嗜杀活性的简便方法及其应用 被引量：3

5

作者 刘巍峰 鲍晓明 高东 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期57-60,共4页

本文以嗜杀酵母ＥＲＲＩ为材料建立了一种双层平板单菌落嗜杀活性检测法。此法与常规营养缺陷型筛选方法相结合，可直接筛选出具有嗜杀活性的酵母营养缺陷型菌株ＭＫ２—３：Ｋ＋Ｒ＋Ｌｅｕ－，并成功地用于检测理化因子对嗜杀质粒的消... 本文以嗜杀酵母ＥＲＲＩ为材料建立了一种双层平板单菌落嗜杀活性检测法。此法与常规营养缺陷型筛选方法相结合，可直接筛选出具有嗜杀活性的酵母营养缺陷型菌株ＭＫ２—３：Ｋ＋Ｒ＋Ｌｅｕ－，并成功地用于检测理化因子对嗜杀质粒的消除作用。进一步采用此法在直接混合培养中做出了嗜杀酵母对敏感酵母作用的动力学曲线。结果表明，敏感酵母活菌数在混合培养的对数生长后期开始急剧下降。 展开更多

关键词 酵母菌 嗜杀活性 检测方法

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无毒性单磷酸脂质A对小鼠血清集落刺激因子的影响

6

作者 肖锦松 崔风军 赵文仲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期149-152,共4页

用~3H-TdR掺入法和琼脂集落培养法比较观察条件培养液(CM)中集落刺激因子(CSF)的活性,结果表明两法显著相关,从Re突变型的明苏尼达沙门氏菌Re_(595)(Salmonella Minnesota Re_(595))得来的单磷酸脂质A(MPLA)静注后小鼠血清CSF水平明显提... 用~3H-TdR掺入法和琼脂集落培养法比较观察条件培养液(CM)中集落刺激因子(CSF)的活性,结果表明两法显著相关,从Re突变型的明苏尼达沙门氏菌Re_(595)(Salmonella Minnesota Re_(595))得来的单磷酸脂质A(MPLA)静注后小鼠血清CSF水平明显提高,12h达高峰,24h恢复正常,有明显的量效关系,在诱生CSF的同时还产生一些不耐热的集落抑制因子(CIF),说明MPLA是一种很强的CSF诱生剂。 展开更多

关键词 单磷酸脂质A 免疫增强剂

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Graves病合并白细胞减少患者血清对骨髓细胞粒-单核细胞系集落形成单位生长的影响 被引量：21

7

作者 李梅 邱明才 +3 位作者 李欣 周征 韩俊领 赵英新 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期643-645,共3页

目的　探讨Graves病 (GD)患者血清成分对骨髓细胞粒 单核细胞系集落形成单位 (GM CFU)生长的影响。方法　对 11名正常人和 11例GD合并白细胞减少患者的骨髓细胞进行体外培养 ,观察他巴唑、甲状腺素、甲状腺刺激免疫球蛋白 (TSI)和GD患... 目的　探讨Graves病 (GD)患者血清成分对骨髓细胞粒 单核细胞系集落形成单位 (GM CFU)生长的影响。方法　对 11名正常人和 11例GD合并白细胞减少患者的骨髓细胞进行体外培养 ,观察他巴唑、甲状腺素、甲状腺刺激免疫球蛋白 (TSI)和GD患者血清对GM CFU生长的影响。结果　TSI和GD合并白细胞减少患者的血清对正常人和GD合并白细胞减少患者的骨髓GM CFU集落生长有抑制作用 (P <0 .0 1) ,他巴唑、甲状腺素和GD白细胞正常患者的血清对正常人和GD白细胞减少患者的骨髓GM CFU集落生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论　TSI和GD合并白细胞减少患者的血清能明显抑制GM CFU的生长 。 展开更多

关键词 GRAVES病 白细胞减少 血清 骨髓细胞粒 单核细胞系集落形成单位

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系统性红斑狼疮患者骨髓造血干/祖细胞体外培养及其发病机制的研究 被引量：16

8

作者 李娟 尹培达 +1 位作者 罗绍凯 彭爱华 《风湿病学杂志》 CSCD 2000年第3期143-145,共3页

目的　比较正常人与系统性红班狼疮 (SLE)患者的造血干 /祖细胞生长情况及从造血干 /祖细胞水平探讨SLE的发病机制。方法　用半固体甲基纤维素集落培养法观察 16例活动期及其中 3例经治疗缓解的SLE患者的粒 巨噬细胞集落 (GM CFU)、红... 目的　比较正常人与系统性红班狼疮 (SLE)患者的造血干 /祖细胞生长情况及从造血干 /祖细胞水平探讨SLE的发病机制。方法　用半固体甲基纤维素集落培养法观察 16例活动期及其中 3例经治疗缓解的SLE患者的粒 巨噬细胞集落 (GM CFU)、红系集落 (E CFU)、巨核细胞集落 (MK CFU)。结果　活动期SLE患者的GM CFU、E CFU、MK CFU分别为 (182± 5 0 )、(5 6± 2 7)、(8± 5 ) ,均明显低于正常对照组 ,缓解期SLE患者的GM CFU、E CFU比活动期的明显增加 ,而MK CFU与活动期比较无明显变化。结论　活动期SLE患者的造血干 /祖细胞增生、分化功能异常 ,缓解后的SLE患者其巨核细胞系恢复迟于粒系、红系 ,SLE的发病可能与造血干 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 造血干细胞 祖细胞 发病机制

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肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡关系的研究 被引量：17

9

作者 钟军 熊戴群 +1 位作者 罗辉 陈文学 《实用癌症杂志》 2007年第6期560-564,568,共6页

目的探讨肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡的关系。方法使用^(60)Coγ射线对人小细胞型肺癌细胞株(NCI-H446)和人宫颈鳞癌细胞株(Siha)和人胃癌细胞株(SGC-7901)进行照射,采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线,根据Do值、Dq值等放射生物... 目的探讨肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡的关系。方法使用^(60)Coγ射线对人小细胞型肺癌细胞株(NCI-H446)和人宫颈鳞癌细胞株(Siha)和人胃癌细胞株(SGC-7901)进行照射,采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线,根据Do值、Dq值等放射生物学参数,比较肿瘤细胞的放射敏感性。琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,透射电镜观察凋亡特有的形态,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率,分析3种肿瘤细胞的凋亡率与放射敏感性的关系。结果3种肿瘤细胞Do值的大小依次为NCI-H446<Siha<SGC-7901,Dq值大小依次为NCI-H446<Siha<SGC-7901,放射敏感性的高低依次是NCI-H446>Siha>SGC-7901。琼脂糖凝胶电泳能够观察到细胞凋亡的特有梯状条带(DNALadder),电镜能够观察到凋亡的特有的形态,如细胞核固缩、染色质浓缩、凋亡小体形成等,流式细胞仪检测到明显的凋亡峰。肿瘤细胞凋亡率随着照射剂量的增加而增高,呈良好的剂量-效应关系,并且3种肿瘤细胞株凋亡峰值的大小依次为NCI-H446>Siha>SGC-7901,与其放射敏感性高低一致。结论放射线能够诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡率随着照射剂量的增加而增高。放射诱导的肿瘤细胞凋亡率越高,则其放射敏感性越高。肿瘤细胞凋亡率的检测对预测其放射敏感性有一定的价值。 展开更多

关键词 放射敏感性 细胞凋亡 平板克隆形成法 流式细胞仪 琼脂糖凝胶电泳

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蝎毒对B16黑色素瘤细胞生长的抑制作用 被引量：15

10

作者 付士波 鞠桂芝 杨英 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期178-181,共4页

目的 :观察蝎毒 (scorpion venom,SV)及其分离组分对小鼠 B1 6黑色素瘤细胞生长的抑制作用。方法 :采用 MTT法检测肿瘤细胞存活率 ,集落形成法检测肿瘤细胞增殖 ,采用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 :4 0 0和 80 0 mg· L- 1 ... 目的 :观察蝎毒 (scorpion venom,SV)及其分离组分对小鼠 B1 6黑色素瘤细胞生长的抑制作用。方法 :采用 MTT法检测肿瘤细胞存活率 ,集落形成法检测肿瘤细胞增殖 ,采用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 :4 0 0和 80 0 mg· L- 1 的 SV可明显抑制 B1 6黑色素瘤细胞生长 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。蝎毒组分 (SV- 、SV- 和 SV- )在浓度为 2 0 0、4 0 0及 80 0 mg· L- 1 时 ,对 B1 6细胞生长有明显的抑制作用 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1 ) ;在 4 0 0和 80 0 mg· L- 1 时 ,可使 G0 / G1 期细胞数明显减少 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1 ) ,G2 +M期细胞明显增多 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1 ) ,S期细胞呈降低趋势 ,而 SV对细胞周期进程未见明显影响。当 SV、SV- 、SV- 及 SV- 的浓度为 4 0 0和 80 0 mg· L- 1 时 ,对 B1 6细胞集落形成均有明显的抑制作用 (P<0 .0 1 )。结论 :在一定浓度范围内蝎毒及其组分对 B1 6黑色素瘤细胞的存活与增殖均有明显的抑制作用 ,纯化后各组分的抑瘤作用优于蝎毒 ,但其抑制作用低于阳性对照丝裂霉素 (Mitom ycin- c,MMC)组。提示蝎毒引起细胞周期进程改变可能是其抑瘤作用的机制之一。 展开更多

关键词 蝎毒 黑色素瘤 实验性 集落形成单位测定 细胞周期

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股骨头缺血性坏死骨髓活性的研究 被引量：10

11

作者 于学忠 陈晓亮 +1 位作者 王英振 李骁 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2002年第4期374-377,共4页

目的 :股骨头缺血性坏死的病因及发病机制不明。本研究旨在探讨因非创伤所致股骨头缺血性坏死骨髓活性有无异常 ,揭示骨坏死发生机理。方法 :对 1999年 9月～ 2 0 0 0年 4月间骨坏死病人骨髓成纤维样细胞集落形成单位 (FCFUs)进行培养 ... 目的 :股骨头缺血性坏死的病因及发病机制不明。本研究旨在探讨因非创伤所致股骨头缺血性坏死骨髓活性有无异常 ,揭示骨坏死发生机理。方法 :对 1999年 9月～ 2 0 0 0年 4月间骨坏死病人骨髓成纤维样细胞集落形成单位 (FCFUs)进行培养 ,观察其生长特点及集落数目 ,观察骨坏死病人与对照组之间有无差异。结果 :骨坏死组骨髓成纤维样细胞集落形成单位的贴壁生长增殖速度慢于对照组 ,FCFUs形成集落数目与对照组相比存在明显差异。结论 :非创伤性股骨头缺血性坏死存在骨髓活性下降 。 展开更多

关键词 股骨头坏死 骨髓 成纤维样细胞 集落形成单位测定

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集落挖掘法在抗肝癌噬菌体单链抗体库筛选中的应用 被引量：7

12

作者 周旻 杨冬华 +3 位作者 汤绍辉 卢筱华 黄卫 李康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1246-1248,共3页

目的:建立肝癌细胞包被膜的集落挖掘法方法,探讨其在抗人肝癌噬菌体抗体库筛选中的价值。方法:采用“吸附-洗脱-扩增”将抗人肝癌噬菌体单链抗体库亲和富集1至4轮,再用集落挖掘法和随机挑取法检测每轮库菌克隆,筛选出能与肝癌细胞结合... 目的:建立肝癌细胞包被膜的集落挖掘法方法,探讨其在抗人肝癌噬菌体抗体库筛选中的价值。方法:采用“吸附-洗脱-扩增”将抗人肝癌噬菌体单链抗体库亲和富集1至4轮,再用集落挖掘法和随机挑取法检测每轮库菌克隆,筛选出能与肝癌细胞结合的阳性克隆,计算阳性克隆比例(即阳性克隆出现频率),并进行比较。结果:经1至4轮亲和富集后,集落挖掘法检出阳性克隆的频率分别为:0.3%、5.1%、11.5%、69.7%,而随机挑取法检出的频率分别为:0%、4.2%、8.3%、64.6%,差异无统计学意义,两者检出的阳性率一致,但前者一次检测的克隆量大、检出阳性克隆的绝对数多。结论:集落挖掘法是一种高效、简便、快速的筛选方法。 展开更多

关键词 集落挖掘法 肝肿瘤

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薯蓣皂苷元对人低分化胃腺癌细胞株生长的抑制作用 被引量：6

13

作者 李晶华 李春爱 +4 位作者 霍锐 李兆良 韩中明 王本祥 周秋丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期198-200,共3页

目的 :观察薯蓣皂苷元 (diosgenin,Dio)对人低分化胃腺癌细胞株 (MGC- 80 3)的细胞分裂和集落形成的影响 ,初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制。方法 :采用四唑蓝 (MTT)比色法、平板集落形成实验以及[3H]- Td R掺入实验。结果 :MTT法检测 Di... 目的 :观察薯蓣皂苷元 (diosgenin,Dio)对人低分化胃腺癌细胞株 (MGC- 80 3)的细胞分裂和集落形成的影响 ,初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制。方法 :采用四唑蓝 (MTT)比色法、平板集落形成实验以及[3H]- Td R掺入实验。结果 :MTT法检测 Dio作用 2 4、 4 8、 72 h的半数抑制浓度 (IC50 )为 5 6 .2 90、 2 7.837、1 7.72 3mg· L- 1 ;平板集落形成实验显示 Dio半数集落形成抑制浓度为 5 .4 86 mg· L- 1 ;Dio在较低浓度 (3.75 0和 7.5 0 0 mg· L- 1 )下 ,可直接抑制 MGC- 80 3细胞 DNA的合成。结论 :Dio能够明显抑制 MGC- 80 展开更多

关键词 薯蓣皂甙配基 药理学 胃肿瘤 药物疗法 腺癌/药物疗法 细胞分化 集落形成单位测定

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姜黄素对鼻咽癌抗拒株的放射增敏作用及其机制研究 被引量：7

14

作者 朱道琦 黄沐 +8 位作者 刘钊汝 李爱武 邵萌 刘远亮 房淼 杨家彬 吕英 莫志贤 范钦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1086-1091,共6页

目的探讨姜黄素对放射诱导产生的鼻咽癌抗拒株CNE-2R的放射增敏作用及其机制。方法通过MTT实验筛选姜黄素的最佳浓度;对克隆生存实验结果进行L-Q拟合和单机多靶拟合,计算相关放射生物学参数;再通过流式细胞术检测细胞周期的改变;最后通... 目的探讨姜黄素对放射诱导产生的鼻咽癌抗拒株CNE-2R的放射增敏作用及其机制。方法通过MTT实验筛选姜黄素的最佳浓度;对克隆生存实验结果进行L-Q拟合和单机多靶拟合,计算相关放射生物学参数;再通过流式细胞术检测细胞周期的改变;最后通过RT-qPCR实验检测细胞周期及DNA损伤修复相关基因的表达情况。结果浓度在10μmol·L^(-1)的姜黄素对CNE-2R细胞无明显抑制作用。给药后抗拒株CNE-2R的α/β值从6.56增加到1 596;SF2从1.93 Gy减少到0.361 Gy;N值从1.60减少到1.06;D0值从3.27减少到2.12;Dq值从1.53减少到0.12。细胞周期G2期明显增多,G1期稍微减少,S期明显减少。CDK4基因的表达明显上调,GADD45 g、BRCA1基因的表达明显下调。结论姜黄素通过调控GADD45 g、CDK4、BRCA1基因的表达,改变CNE-2R的细胞周期和影响DNA损伤修复,发生G2期阻滞,从而增加了抗拒株的放射敏感性。 展开更多

关键词 姜黄素 鼻咽癌 放射增敏 克隆形成 细胞周期 RT-QPCR

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放线菌素23-21对人早幼粒白血病细胞的杀伤和诱导分化 被引量：6

15

作者 林菁 李常春 黄自强 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期130-134,共5页

放线菌素23-21(Act23-21)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)具有杀伤和诱导分化双重作用,其效应的强度和性质对剂量变化较敏感。采用Act23-21 5-50ng/ml处理24～72h,HL-60细胞的PC值有不同程度的降低,可低于10％,以集落形成法测得剂量—细胞... 放线菌素23-21(Act23-21)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)具有杀伤和诱导分化双重作用,其效应的强度和性质对剂量变化较敏感。采用Act23-21 5-50ng/ml处理24～72h,HL-60细胞的PC值有不同程度的降低,可低于10％,以集落形成法测得剂量—细胞存活率曲线为阈值指数型,杀伤指数达2以上。Act23-21在低浓度下(1.0～4.0ng/ml)能诱导HL-60细胞发生形态学和功能学分化,成熟细胞可达49％,细胞的分化性状能持续表达。Act23-21的诱导作用比放线菌素D(Act D)稍强,逊于二甲基亚砜(DMSO),而其诱导细胞分化性状持续表达的能力强于DMSO。 展开更多

关键词 放线菌素 HL-60细胞 NBT还原

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靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证

16

作者 张仪婷 席文锦 +6 位作者 王鹏举 赵晓娟 郑瑞 梁思辛 蒙若彤 阎博 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期289-295,共7页

目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落... 目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。 展开更多

关键词 安全性 毒理学 靶向人表皮生长因子2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞 集落形成实验 溶血 血管刺激性 器官毒性

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洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用 被引量：3

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作者 林心建 黄自强 李常春 《福建医学院学报》 1996年第1期17-20,共4页

目的：探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法：以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙（ＤＴ）对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果：０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ在体外能显著杀伤ＨＬ－６０．Ｋ５６２．ＳＭ... 目的：探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法：以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙（ＤＴ）对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果：０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ在体外能显著杀伤ＨＬ－６０．Ｋ５６２．ＳＭＭＣ－７７２１，ＳＧＣ－７９０１细胞，并呈剂量依赖性，药物作用２４ｈ．ＩＣ５０分别是０．１３２．０．１８２．０．２６５．０．４８９μｇ／ｍｌ。对正常成纤维细胞株ＨＬＦ的ＩＣ（５０）为４．２８８μｇ／ｍｌ．明显高于癌细胞，对癌细胞具有选择毒性作用。克隆形成实验中，０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ处理１２ｈ，对ＨＬ－６０和ＳＧＣ－７９０１细胞集落形成有明显的抑制作用，ＩＣ５０分别是０．０５６．０．ｌ１９μｇ／ｍｌ。结论：应用洋地黄毒甙及其他Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶抑制剂防治肿瘤是一个值得探讨新方向。 展开更多

关键词 洋地黄毒甙 人癌细胞株 抗肿瘤作用 体外试验

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三氧化二砷对胃癌细胞放射增敏作用的研究 被引量：3

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作者 刘少龙 罗辉 谢淑华 《江西医学院学报》 CAS 2009年第2期47-50,57,共5页

目的探讨三氧化二砷(As2O3)是否对胃癌细胞有放射增敏作用。方法以人胃癌细胞株SGC-7901为研究对象,所有实验均重复3次,取其均值为最终结果。①四甲基四氮唑盐比色法(MTT法)检测As2O3的单药毒性,确立细胞半数抑制浓度(IC50),并行单纯照... 目的探讨三氧化二砷(As2O3)是否对胃癌细胞有放射增敏作用。方法以人胃癌细胞株SGC-7901为研究对象,所有实验均重复3次,取其均值为最终结果。①四甲基四氮唑盐比色法(MTT法)检测As2O3的单药毒性,确立细胞半数抑制浓度(IC50),并行单纯照射组及As2O3+照射组MTT检测,计算q值大小。②放射增敏实验分成空白对照组、单纯给药组、单纯照射组及As2O3+照射组,采用平板克隆形成分析法计算各组细胞存活分数(SF),运用"多靶单击数学模型"拟合细胞存活曲线,得出平均致死剂量(Do)、准阈剂量(Dq)、放射增敏比(SER),并观察单纯照射组及As2O3+照射组对肿瘤细胞的杀伤作用。结果胃癌细胞株SGC-7901细胞IC50值为12.65μmol/L,与单纯照射组及单纯给药组相比,As2O3与放射治疗联合作用能显著抑制SGC-7901细胞的增殖,并显示出As2O3与放射治疗的协同作用(q>1.15)。单纯照射组Do、Dq分别为2.75、2.52Gy,2μmol/LAs2O3+照射组Do、Dq、SER(Do值比)、SER(Dq值比)分别为2.18Gy、1.89Gy、1.26、1.33,5μmol/LAs2O3+照射组Do、Dq、SER(Do值比)、SER(Dq值比)分别为1.78Gy、1.72Gy、1.54、1.51。结论As2O3对人胃癌细胞株SGC-7901有一定的放射增敏作用,为临床放疗及与As2O3联合运用提供了实验依据。 展开更多

关键词 三氧化二砷 放射敏感性 人胃癌细胞株SGC-7901细胞 平板克隆形成法

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绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的表达可促进NIH3T3细胞增殖 被引量：5

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作者 杜方原 陈大勇 +3 位作者 张宇飞 孙晓林 郭文庆 刘淑英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1188-1192,共5页

目的研究外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(ex JSRV Env)对NIH3T3小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法构建含完整的外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因(ex ISRV-env)的重组质粒pc DNA4/myc-His/ex JSRV-env,并鉴定其正确性。采用脂质体转染技术pc DN... 目的研究外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(ex JSRV Env)对NIH3T3小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法构建含完整的外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因(ex ISRV-env)的重组质粒pc DNA4/myc-His/ex JSRV-env,并鉴定其正确性。采用脂质体转染技术pc DNA4/myc-His/ex JSRV-env瞬时转染NIH3T3细胞,利用反转录PCR和Western blot法检测Env的表达,利用CCK-8法和平板克隆形成实验检测Env表达对NIH3T3细胞增殖的影响。结果成功构建了含ex JSRV-env的重组真核表达质粒pc DNA4/myc-His/ex JSRV-env;以重组质粒瞬时转染NIH3 T3细胞,检测到JSRV Env蛋白的表达,CCK-8法和平板克隆形成实验结果表明转染pc DNA4/myc-His/ex JSRV-env的细胞增殖速度显著高于对照组(空白及阴性)细胞。结论 NIH3T3细胞表达的JSRV Env蛋白可促进NIH3 T3细胞的增殖。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 囊膜蛋白 细胞增殖 平板克隆形成实验

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软琼脂克隆形成实验评价药物体外抑瘤性与成瘤性 被引量：5

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作者 齐乃松 郭建 +1 位作者 王雪 文海若 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期444-450,共7页

目的:分别采用肿瘤细胞系和转化细胞系摸索软琼脂克隆形成实验的适宜条件,并对冬凌草甲素(oridonin,ORI)的抑瘤性和没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)促瘤性进行评价。方法:1)摸索实验条件:采用6孔板固态培养法,按不同密度(每孔500~20 000... 目的:分别采用肿瘤细胞系和转化细胞系摸索软琼脂克隆形成实验的适宜条件,并对冬凌草甲素(oridonin,ORI)的抑瘤性和没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)促瘤性进行评价。方法:1)摸索实验条件:采用6孔板固态培养法,按不同密度(每孔500~20 000个)将肿瘤细胞系(Hela,K562和Hep G2)和转化细胞系(Bhas 42)与软琼脂混合铺板,计数克隆形成率。2)Hep G2细胞分别与质量浓度为0.016、0.08、0.4、2、10、50μg·mL^(-1)的ORI溶液混合后铺板;Bhas 42细胞预先经质量浓度为0.3、1、3μg·mL^(-1)的EG溶液处理后,镜下观察细胞达到转化状态后,与软琼脂混合铺板培养。经培养后观察给药处理对克隆形成率的影响。3)利用流式细胞仪分析ORI和EG对细胞周期的影响。结果:细胞接种密度为每孔1 000个左右时,利用肿瘤细胞和转化细胞开展软琼脂克隆形成实验效果较好。ORI作为抑瘤药物在低浓度条件可显著降低Hep G2细胞的克隆形成率(P<0.01),且对细胞增殖有抑制作用。EG随给药浓度增加可显著升高Bhas 42的克隆形成率(P<0.01),但对细胞增殖影响不显著。结论:软琼脂克隆形成实验以克隆形成率为检测指标,可较为简便而灵敏地检测药物引起的抑瘤性和促瘤性。该实验结果与细胞周期分析结果相互印证。两者的有机结合,可用于药物对细胞增殖及成瘤性的影响的初步分析。 展开更多

关键词 软琼脂克隆形成实验 试验条件 肿瘤细胞系 转化细胞系 成瘤性 抑瘤性 冬凌草甲素 没食子酸乙酯

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