动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇快速检测产品的稳健性评价 被引量：8

1

作者 喻俊磊 陈沙 +3 位作者 李雨露 李晴 赵淑娟 兰伟 《江西农业学报》 CAS 2019年第11期105-110,共6页

对市售瘦肉精三联快速检测卡进行了质量检测及稳定性评价,以期为评价和控制快速检测卡质量提供依据。根据国家规范,采用空白基质加标制备盲样,并验证盲样的均匀性和稳定性,对瘦肉精快检产品进行评价测试,系统性地研究产品评价过程中温... 对市售瘦肉精三联快速检测卡进行了质量检测及稳定性评价,以期为评价和控制快速检测卡质量提供依据。根据国家规范,采用空白基质加标制备盲样,并验证盲样的均匀性和稳定性,对瘦肉精快检产品进行评价测试,系统性地研究产品评价过程中温湿度、前处理、贮存时间等条件对性能指标的影响。结果表明:瘦肉精快检产品在温度为0℃和35℃贮存时的检出率分别为84%和96%,湿度为42%和80%时的检出率分别为96%、82%,在7月和12月时的检出率分别为95%和96%,快检产品在模拟振动和不振动条件下的检出率分别为93%和96%,样品前处理加热温度为80℃和100℃时的阳性率分别为89%和98%,不同基质样品包括猪肉组织和猪尿液时的检出率分别为81%和96%,不同操作熟练程度时的检出率分别为82%和96%。由此可知,通过对快检产品设置不同温度水平、贮存条件和样品基质等变量因素,阐明了多种因素对快检产品稳定性的影响。 展开更多

关键词 瘦肉精 食品安全快速检测 胶体金免疫层析试纸条 稳健性评价

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苯醚甲环唑胶体金试纸条的研制及其应用 被引量：5

2

作者 崔廷婷 朱亮亮 +3 位作者 谭晨 王健 王兆芹 万宇平 《食品工业》 CAS 2022年第2期175-179,共5页

基于胶体金免疫层析技术,旨在研制苯醚甲环唑快速检测试纸条,并探究其在蔬菜中的应用。以胶体金标记苯醚甲环唑单克隆抗体,在优化免疫层析条件下研制胶体金免疫层析试纸条。结果表明:研制的胶体金试纸条对蔬菜中苯醚甲环唑的检测限为0.5... 基于胶体金免疫层析技术,旨在研制苯醚甲环唑快速检测试纸条,并探究其在蔬菜中的应用。以胶体金标记苯醚甲环唑单克隆抗体,在优化免疫层析条件下研制胶体金免疫层析试纸条。结果表明:研制的胶体金试纸条对蔬菜中苯醚甲环唑的检测限为0.5 mg/kg,假阳性率为3.33%,假阴性率为0;该试条对其他三唑类杀虫剂无交叉反应,可特异性地检测蔬菜中苯醚甲环唑的残留。试验开发的试纸条具有操作简便、检测速度快、准确性高等优点,适用于基层实验室的大批量样本检测及现场快速检测。 展开更多

关键词 苯醚甲环唑 蔬菜 胶体金免疫层析 试纸条

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草甘膦胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量：4

3

作者 岳绪辉 杜斌 +5 位作者 林栋 令狐克勇 杨梅 付秋平 李丙凤 杨曦 《食品科技》 CAS 北大核心 2021年第12期301-307,共7页

基于竞争抑制免疫层析原理,开展茶叶中草甘膦快速检测试纸条的研制。采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了20 nm胶体金颗粒,然后以胶体金为标记物制备草甘膦单克隆抗体-胶体金偶联物,以硝酸纤维素膜为固相载体,包被草甘膦半抗原-卵清蛋白偶... 基于竞争抑制免疫层析原理,开展茶叶中草甘膦快速检测试纸条的研制。采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了20 nm胶体金颗粒,然后以胶体金为标记物制备草甘膦单克隆抗体-胶体金偶联物,以硝酸纤维素膜为固相载体,包被草甘膦半抗原-卵清蛋白偶联物为检测线、羊抗兔二抗为质控线,建立草甘膦的胶体金快速检测试纸条。同时优化了胶体金最适pH值、抗体最佳使用量、试纸条材料的型号,最终确定胶体金溶液的pH值为7.5,最佳抗体使用量为3.0 μL,硝酸纤维素膜(NC膜)的型号为CN140,胶体金结合垫(金标垫)的型号为GL-b01,样品垫的型号为GS12。通过该方法得到的试纸条对茶叶中草甘膦的检测限为0.50 mg/kg,满足国家标准对茶叶中草甘膦最大残留限量的要求,且对异菌脲、多菌灵、三唑磷、甲基对硫磷、噻菌灵均未产生交叉反应,特异性良好。该方法操作简便,检测时间仅10 min,重复性高、稳定性好,适用于茶叶中草甘膦残留的现场筛查和检测。 展开更多

关键词 草甘膦 胶体金免疫层析技术 试纸条 快速检测

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胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留 被引量：4

4

作者 王兆芹 陈姗姗 +4 位作者 赵义良 惠光朋 王志恒 崔廷婷 万宇平 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第5期1517-1523,共7页

目的建立胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留的分析方法。方法在用间接竞争酶联免疫吸附法分析氯羟吡啶单克隆抗体灵敏度和交叉反应性的基础上,以胶体金标记单克隆抗体作为示踪标志物,以包被氯羟吡啶半抗原-卵清蛋白偶联物和羊抗鼠... 目的建立胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留的分析方法。方法在用间接竞争酶联免疫吸附法分析氯羟吡啶单克隆抗体灵敏度和交叉反应性的基础上,以胶体金标记单克隆抗体作为示踪标志物,以包被氯羟吡啶半抗原-卵清蛋白偶联物和羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜作为载体,制备了氯羟吡啶胶体金免疫层析试纸条。结果氯羟吡啶单克隆抗体的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为1.6μg/L,与地克珠利、二硝托胺、尼卡巴嗪、磺胺喹噁啉、磺胺二甲嘧啶、癸氧喹酯、盐酸氨丙啉和盐酸氯苯胍8种药物均无交叉反应。制备的胶体金免疫层析试纸条肉眼判定禽蛋中氯羟吡啶的检出限为15μg/kg,灵敏度为98%、特异性为93%、假阴性率为2%、假阳性率为7%。结论制备的试纸条具有操作简单、检测快速、成本低等优点,可用于大批量禽蛋样本中氯羟吡啶残留的初步筛选。 展开更多

关键词 氯羟吡啶 胶体金免疫层析法 试纸条 单克隆抗体 禽蛋

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犬血清弓形虫IgG抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制 被引量：4

5

作者 王艳 陈永军 +1 位作者 王权 蒋蔚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期237-241,共5页

采用柠檬酸还原法制备胶体金颗粒,将其标记葡萄球菌蛋白A（SPA）并喷于玻璃纤维上制备胶体金垫。将弓形虫重组抗原（SAG1）和山羊IgG分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上。依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装成胶... 采用柠檬酸还原法制备胶体金颗粒,将其标记葡萄球菌蛋白A（SPA）并喷于玻璃纤维上制备胶体金垫。将弓形虫重组抗原（SAG1）和山羊IgG分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上。依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装成胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果显示,该快速检测试纸条在阳性血清稀释至16倍时仍可见清晰条带,整个检测过程可在5~10 min内完成,肉眼即可判断,无须其他检测设备。与弓形虫ELISA试剂盒进行对照试验,检测结果符合率较高。结果表明,该试纸条适用于犬血清中弓形虫IgG抗体的现场快速检测和筛选工作。 展开更多

关键词 弓形虫 胶体金免疫层析 试纸条 快速检测

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A族链球菌胶体金免疫层析试纸条的制备及应用 被引量：2

6

作者 龚成 张晓丽 +4 位作者 潘秀华 汤永平 赵肃清 欧阳众 何华锋 《分子影像学杂志》 2015年第3期296-299,共4页

目的建立一种以胶体金为基础的A族链球菌(Strep-A)免疫层析快速检测方法。方法以双抗体夹心的原理研制胶体金免疫层析试纸条,并对其特异性、灵敏度以及临床应用进行评价。结果最低检出浓度为105CFU/m L;10 min内即可观察结果;与B族链球... 目的建立一种以胶体金为基础的A族链球菌(Strep-A)免疫层析快速检测方法。方法以双抗体夹心的原理研制胶体金免疫层析试纸条,并对其特异性、灵敏度以及临床应用进行评价。结果最低检出浓度为105CFU/m L;10 min内即可观察结果;与B族链球菌、D族链球菌、金黄色葡萄球菌均无交叉反应;检测229例临床样本,以传统的细菌培养鉴定结果为对照,敏感度为97.30%,特异度为98.06%,kappa值为0.950,一致性检测表明两者无显著性差异。结论该方法方便、快捷,能有效的辅助诊断A族链球菌感染,胶体金免疫层析试纸的研制为Strep-A进行现场快速诊断与筛查奠定了基础。 展开更多

关键词 A族链球菌 胶体金免疫层析 试纸

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马铃薯S病毒胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量：2

7

作者 张微 李志新 +1 位作者 付春江 刘卫平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期184-188,共5页

为了研制便于马铃薯(Solanum tuberosum L.)种薯生产田现场快速检测马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)的胶体金免疫层析试纸条。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,在波长524 nm处有最大吸收值,金颗粒大小20-30 nm。将PVS的羊源多克隆抗体... 为了研制便于马铃薯(Solanum tuberosum L.)种薯生产田现场快速检测马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)的胶体金免疫层析试纸条。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,在波长524 nm处有最大吸收值,金颗粒大小20-30 nm。将PVS的羊源多克隆抗体与胶体金进行标记,喷射于玻璃纤维上作为金标垫。将PVS抗体和兔抗羊抗体划线于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,制备胶体金试纸条。试纸条检测结果在2 min之内通过肉眼即可判断。当带PVS样本汁液稀释104倍(W/V)时,仍可检测出。用其他5种常见病毒阳性样品进行检测,未出现交叉反应。田间采集的马铃薯叶片用试纸条检测和酶联免疫检测结果相吻合。本试纸条在密封、干燥、低温的条件下保存,有效期可达180 d。使用方便,操作简单,检测快捷,能够现场检测PVS,无需特殊设备,适用性广,实用性强。 展开更多

关键词 马铃薯S病毒 胶体金免疫层析法 快速检测 试纸条

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辣椒制品中罗丹明B胶体金免疫层析法的建立 被引量：1

8

作者 王文珺 聂丽 +3 位作者 叶升锋 谢艳红 钱瑞 桑华春 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第9期2739-2743,共5页

目的建立灵敏的胶体金免疫层析法快速检测辣椒制品中的罗丹明B(rhodamine B,RB)。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,并通过物理吸附标记罗丹明B单克隆抗体。在优化条件下,建立了基于竞争性抑制的罗丹明B的可视化胶体金免疫层析法。结... 目的建立灵敏的胶体金免疫层析法快速检测辣椒制品中的罗丹明B(rhodamine B,RB)。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,并通过物理吸附标记罗丹明B单克隆抗体。在优化条件下,建立了基于竞争性抑制的罗丹明B的可视化胶体金免疫层析法。结果使用建立的方法检测辣椒制品中罗丹明B,定性检测限为5μg/kg,满足了国家安全限量要求;对实际样本的检测结果与液质联用检测结果一致。结论本研究建立的方法可以实现对辣椒制品中非法使用罗丹明B的灵敏、快速、高效的检测。 展开更多

关键词 罗丹明B 胶体金免疫层析技术 辣椒制品 检测卡

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基于FRET的B族链球菌新型荧光猝灭试纸条的研发和性能评价

9

作者 冯遥 陈泽典 +1 位作者 涂思琳 夏勇 《广州医科大学学报》 2019年第5期8-13,共6页

目的:在B族链球菌(GBS)胶体金免疫层析试纸条中引入异硫氰酸荧光素(FITC)和胶体金颗粒(Au NPs)之间的荧光共振能量转移(FRET),从而实现用裸眼观察和荧光读数法检测GBS。方法:基于双抗体夹心法和FRET研制新型荧光猝灭试纸条,对其检测的... 目的:在B族链球菌(GBS)胶体金免疫层析试纸条中引入异硫氰酸荧光素(FITC)和胶体金颗粒(Au NPs)之间的荧光共振能量转移(FRET),从而实现用裸眼观察和荧光读数法检测GBS。方法:基于双抗体夹心法和FRET研制新型荧光猝灭试纸条,对其检测的特异性、灵敏度进行评价,并初步探究GBS浓度与荧光强度值之间的关系。结果:与草绿色链球菌和肺炎链球菌均无交叉反应;肉眼观察的最低检出浓度为10~5CFU/mL;GBS在10~3-10~8CFU/mL浓度范围内与荧光强度值呈现良好的相关性。结论:该方法简单,便捷,不仅能实现快速诊断与筛查,还能够实现定量分析,这种设计思路可用于其它病原微生物的检测研究。 展开更多

关键词 B族链球菌 荧光共振能量转移 胶体金免疫层析 试纸

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诊断家畜日本血吸虫感染胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量：9

10

作者 许瑞 赵登云 +6 位作者 陆珂 洪炀 李浩 林矫矫 刘金明 徐玉梅 朱传刚 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期474-478,共5页

目的研制一种可用于疫区现场快速诊断家畜日本血吸虫感染的胶体金免疫层析试纸条。方法设计重组蛋白G并在大肠杆菌中表达,得到重组蛋白。对重组蛋白G进行胶体金标记并制备金标垫,分别用可溶性虫卵抗原(SEA)和重组蛋白G划线,作为检测线... 目的研制一种可用于疫区现场快速诊断家畜日本血吸虫感染的胶体金免疫层析试纸条。方法设计重组蛋白G并在大肠杆菌中表达,得到重组蛋白。对重组蛋白G进行胶体金标记并制备金标垫,分别用可溶性虫卵抗原(SEA)和重组蛋白G划线,作为检测线和质控线。采用组装的试纸条检测标准阴、阳性BALB/c鼠与新西兰大白兔血清,以及粪检阴、阳性的绵羊与水牛血清,评估其灵敏度和特异度;利用组装的试纸条检测前后盘吸虫病病牛血清,评价其交叉反应性。结果成功构建了重组蛋白G的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达。以重组蛋白G制备的试纸条可用于检测日本血吸虫感染BALB/c鼠、新西兰大白兔、水牛、绵羊血清抗体。该试纸条检测日本血吸虫感染小鼠与兔血清的灵敏度、特异度均为100%;检测绵羊血清的灵敏度为100%,特异度为88.46%;检测水牛血清的灵敏度为94.44%,特异度为100%;其与前后盘吸虫交叉反应率为5.88%。结论成功研制能检测多种家畜血吸虫病的胶体金免疫层析试纸条,其检测家畜血吸虫感染的灵敏度和特异度均较高。 展开更多

关键词 日本血吸虫病 胶体金免疫层析试纸条 免疫诊断 家畜 重组蛋白G

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三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定 被引量：3

11

作者 封青 李研 +2 位作者 孙晶莹 梁导艳 赵彭花 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第15期5303-5308,共6页

目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸... 目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immune sorbent assay, ELISA)对抗体进行效价测定、亚类测定、交叉鉴定和蛋白质免疫印迹试验(westernblot)特异性鉴定后制备胶体金试剂盒。结果筛选出1株抗三聚氰胺单抗,制备的三聚氰胺胶体金试剂盒敏感值能达到30μg/L。结论获得了高度特异的且能稳定分泌三聚氰胺抗体的细胞株。 展开更多

关键词 单克隆抗体 特性鉴定 酶联免疫吸附 胶体金免疫层析法诊断纸条法

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胶体金免疫层析法快速检测韭菜中腐霉利残留 被引量：1

12

作者 王兆芹 朱亮亮 +4 位作者 冯才伟 崔海峰 魏力杰 崔廷婷 何方洋 《东北农业科学》 2023年第3期125-128,144,共5页

【目的】建立韭菜中腐霉利残留的胶体金免疫层析快速检测方法。【方法】通过合成两种不同结构的腐霉利半抗原,并分别与载体蛋白耦联制得免疫原和包被原,免疫小鼠获得腐霉利单克隆抗体。基于竞争性免疫抑制原理,建立可视化胶体金免疫层... 【目的】建立韭菜中腐霉利残留的胶体金免疫层析快速检测方法。【方法】通过合成两种不同结构的腐霉利半抗原,并分别与载体蛋白耦联制得免疫原和包被原,免疫小鼠获得腐霉利单克隆抗体。基于竞争性免疫抑制原理,建立可视化胶体金免疫层析法。【结果】检测韭菜中腐霉利残留,检测限为5 mg/kg,满足国家标准规定的最大残留限量;对实际样本的检测结果与液相色谱-质谱法检测结果一致。【结论】本研究建立的方法具有简便、快速、准确等优点,可实现对韭菜中腐霉利残留超标的高通量快速筛选。 展开更多

关键词 腐霉利 韭菜 胶体金免疫层析技术(GICA) 快速检测 试纸条

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应用于RPA nfo反应产物结果可视化的胶体金试纸条制备与评价

13

作者 杨晨 薛俊欣 +5 位作者 林雅娟 王小妹 蒋蔚 张曼玉 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第12期41-49,共9页

旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-... 旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-FAM单克隆抗体(亲和力常数为5.38×10~9 L/mol),再运用高浓度NaCl破坏试验,确定了胶体金与6-FAM抗体的最佳标记pH值为8.0,最佳抗体标记量为12μg/mL,并使用模拟样本确定了最佳检测(T)线包被缓冲液为0.2 mol/L(pH值5.0)。然后使用RPA nfo反应产物作为实际样本,观察条带的深浅,最终确定在层析液为0.1 mol/L PB(pH值7.4)、T线包被1 mg/mL SA、反应液用量5μL及金标抗体用量10μL条件下,能实现试纸条最佳检测性能。自主研发的胶体金侧向免疫层析试纸条在加样5 min后能出现清晰的条带,与目前商品化试纸条的可视化判定结果一致,能替代现有的商品化试纸条,降低检测成本、缩短检测时间,对建立RPA nfo-GICS及RPA-CRISPR Cas12a-GICS检测方法奠定了基础。 展开更多

关键词 6-FAM单克隆抗体 生物素-链霉亲和素系统 RPA nfo 胶体金侧向免疫层析试纸条

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呋喃唑酮代谢物单克隆抗体及其新型免疫层析检测试纸条的制备 被引量：8

14

作者 周克楠 唐勇 +3 位作者 蓝彩凤 史聪颖 付强强 梁家杰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第7期927-931,共5页

目的制备呋喃唑酮代谢物AOZ单克隆抗体及其胶体金与荧光淬灭免疫层析试纸条。方法将AOZ衍生成CPAOZ后,与载体蛋白BSA偶联,制备完全抗原CPAOZ-BSA,经皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,共5次,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,获得稳定分泌特异性... 目的制备呋喃唑酮代谢物AOZ单克隆抗体及其胶体金与荧光淬灭免疫层析试纸条。方法将AOZ衍生成CPAOZ后,与载体蛋白BSA偶联,制备完全抗原CPAOZ-BSA,经皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,共5次,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,获得稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。利用获得的抗CPAOZ单克隆抗体制备胶体金及荧光淬灭免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度及特异性进行验证。结果制备的完全抗原经紫外扫描鉴定偶联成功。共获得3株能稳定分泌抗CPAOZ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中效价和特异性最好的1株2H11针对CPAOZ的50%抑制质量浓度(IC50)为0.88 ppb。以该抗体制备的胶体金及荧光淬灭免疫层析试纸条的最低检测限分别为7.5和0.062 5 ppb;两种试纸条与其他3种硝基呋喃类代谢物CPAMOZ、CPAHD、CPSEM均不存在交叉反应。结论成功制备了抗CPAOZ单抗及其胶体金免疫层析和荧光淬灭免疫层析试纸条,两种试纸条均具有较高的灵敏度和较强的特异性,其中荧光淬灭免疫层析试纸条的灵敏度较胶体金免疫层析试纸条高约100倍,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 呋喃唑酮 代谢物 单克隆抗体 胶体金 荧光 免疫层析 试纸条

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