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雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框F2表达的影响 被引量：8
1
作者 陈思萍 何援利 +3 位作者 蔡慧华 刘丽敏 张冬梅 孙冬华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期326-330,共5页
目的探讨雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框(Fox)F2表达的影响。方法采用0.2%Ⅰ型胶原酶消化-筛网过滤-差时贴壁分离法获取原代人子宫内膜基质细胞(HESCs)并进行鉴定。采用10ng/ml转化生长因子β_1(TGF-β_1)作用于HESCs 48h建立宫腔... 目的探讨雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框(Fox)F2表达的影响。方法采用0.2%Ⅰ型胶原酶消化-筛网过滤-差时贴壁分离法获取原代人子宫内膜基质细胞(HESCs)并进行鉴定。采用10ng/ml转化生长因子β_1(TGF-β_1)作用于HESCs 48h建立宫腔粘连细胞模型。以0、10–6、10–8、10–10、10–12mol/L雌二醇(E2)作用于模型组48h,采用qPCR及Western blotting检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)及FoxF2的mRNA和蛋白表达。结果免疫细胞化学法检测显示HESCs波形蛋白阳性,角蛋白18阴性。模型组α-SMA、COLⅠ、FoxF2的mRNA和蛋白表达均高于对照组(P<0.05),模型构建成功。qPCR检测结果显示,与模型组相比,10^(–6)、10^(–8)、10^(–10)mol/L E_2组α-SMA、CO LⅠ、FoxF2的mRNA表达除10^(–10)mol/L E_2组COLⅠ表达无差异外,其余各组表达均下降(P<0.05),10^(–12)mol/L E2_组α-SMA及COLⅠmRNA表达上升,但差异无统计学意义(P>0.05),FoxF2 mRNA表达下降(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与模型组相比,10^(–6)、10^(–8)、10^(–10)mol/L E_2组α-SMA、COLⅠ及FoxF2蛋白表达下降(P<0.05),10^(–12)mol/L E_2组α-SMA蛋白表达上升,但差异无统计学意义(P>0.05),COLⅠ及FoxF2蛋白表达下降(P<0.05)。结论 FoxF2在宫腔粘连中的表达增加。雌激素可在一定范围内逆转宫腔粘连的纤维化进程,并抑制FoxF2的表达。 展开更多
关键词 宫腔粘连 纤维化 雌激素 转化生长因子β1 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原 叉头框F2
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辛伐他汀对高糖致人腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1分泌与表达的影响 被引量：4
2
作者 王悦 何劲松 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期449-453,共5页
目的研究辛伐他汀对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMCs)在高糖刺激下主要细胞外基质Ⅰ型胶原,及其降解酶系基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)分泌与表达的影响。方法胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进... 目的研究辛伐他汀对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMCs)在高糖刺激下主要细胞外基质Ⅰ型胶原,及其降解酶系基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)分泌与表达的影响。方法胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代;待细胞同步后,经2.5%高糖和不同浓度的辛伐他汀干预48 h。半定量RT-PCR检测细胞内Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1 mRNA表达情况;ELISA方法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1的蛋白质水平。结果辛伐他汀显著下调高糖致HPMCsⅠ型胶原和TIMP-1表达,且在蛋白质和基因水平均呈剂量依赖关系(P<0.01);同时,高剂量的辛伐他汀能显著增加高糖环境下MMP-1蛋白质含量(P<0.01),并上调MMP-1 mRNA表达(P<0.01)。结论辛伐他汀能减少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型胶原的合成,并通过调节MMP-1/TIMP-1的平衡,促进Ⅰ型胶原降解,从而减少细胞外基质的沉积。 展开更多
关键词 辛伐他汀 腹膜间皮细胞 Ⅰ型胶原 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶抑制剂-1
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基质金属蛋白酶-13过表达抑制大鼠肝星状细胞中I型胶原表达 被引量：1
3
作者 刘天会 丛敏 +1 位作者 王萍 尤红 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期313-316,共4页
目的肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质的沉积与降解障碍,本研究旨在观察大鼠肝星状细胞过表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)后肝纤维化相关指标的变化。方法构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒,并转染大... 目的肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质的沉积与降解障碍,本研究旨在观察大鼠肝星状细胞过表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)后肝纤维化相关指标的变化。方法构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒,并转染大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),荧光定量PCR与Western blotting方法分别检测MMP-13、CollagenI基因与蛋白水平的表达。结果成功构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒dl6-95-MMP-13;dl6-95-MMP-13转染大鼠HSC细胞7d后,荧光定量PCR结果显示,MMP-13基因转录水平明显增加,而CollagenI在基因转录水平有轻度增加;Western blotting结果显示转染7d后,酶原及活化形式的MMP-13表达明显增加,尤其是活化形式的MMP-13;转染后的大鼠HSC中CollagenI蛋白表达明显下降。结论大鼠HSC高表达MMP-13后显著抑制CollagenI蛋白的表达,其机制主要通过发挥其酶活性降解CollagenI蛋白,而对CollagenI在基因水平的表达无显著影响。 展开更多
关键词 星状细胞 肝纤维化 基质金属蛋白酶-13 collageni
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红花对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响 被引量：17
4
作者 刘燕 傅跃先 +3 位作者 邱林 田晓菲 甘立强 肖军 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第37期7296-7300,共5页
背景:研究发现红花对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原合成有抑制作用,但其具体作用机制与活体研究尚未进一步展开。目的:观察红花对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。设计、时间、地点:随机对照动物实... 背景:研究发现红花对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原合成有抑制作用,但其具体作用机制与活体研究尚未进一步展开。目的:观察红花对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。设计、时间、地点:随机对照动物实验,于2006-11/2008-03在重庆医科大学附属儿童医院动物实验中心及研究所完成。材料:新西兰大白兔27只,雌雄不限;50%红花注射液由山西太原华卫药业有限公司产品,批准文号:国药准字Z14020008。方法:兔耳腹侧建立增生性瘢痕模型,每耳2块。分为5组。术后第45天开始对增生性瘢痕行注射治疗。①正常皮肤组:为自身兔耳腹侧皮肤。②阳性对照组:右耳外侧增生性瘢痕,不予以任何处理。③生理盐水组右耳内侧增生性瘢痕,注射生理盐水。④低浓度红花组:左耳内侧增生性瘢痕,注射125g/L红花液。⑤高浓度红花组:左耳外侧增生性瘢痕,注射500g/L红花液。1次/周,连续注射4次。注射后第2,4,6周分别切取8只兔耳增生性瘢痕及皮肤待查。主要观察指标:瘢痕厚度,硬度;Mallory染色检测成纤维细胞密度胶原纤维排列及致密度。免疫组织化学方法检测每块组织Ⅰ、Ⅲ型胶原面密度,计算Ⅰ/Ⅲ型胶原比值。结果:注射后第4,6周,各组增生性瘢痕色泽均逐渐变浅,厚度及硬度均逐渐变小,尤以高浓度组明显,差异与其他增生性瘢痕组比较存在显著性意义(P<0.05)。注射后第4,6周,高浓度红花组成纤维细胞密度较其他增生性瘢痕组低(P<0.05)。注射后第4,6周,高、低浓度红花组I型胶原面密度值较阳性对照及生理盐水组低(P<0.05),且高浓度红花组低于低浓度红花组(P<0.05);各增生性瘢痕组Ⅰ/Ⅲ型胶原比值在注射后第2,4,6周均逐渐增高;同一时间段,高浓度红花组Ⅰ/Ⅲ型胶原比值为所有增生性瘢痕组中最低(P<0.05),低浓度红花组Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与阳性对照及� 展开更多
关键词 增生性瘢痕 红花 成纤维细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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异丙肾上腺素致小鼠心肌纤维化模型的制备及评价 被引量：12
5
作者 陈蓉 谢梅林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1325-1328,共4页
目的皮下注射异丙肾上腺素制备小鼠心肌纤维化模型并对其进行评价。方法将昆明种小鼠随机分为心肌纤维化模型组和溶媒对照组,每组10只。模型组小鼠皮下注射5 mg·kg-1异丙肾上腺素1 d后,以2.5 mg·kg-1维持至30 d。溶媒对照组... 目的皮下注射异丙肾上腺素制备小鼠心肌纤维化模型并对其进行评价。方法将昆明种小鼠随机分为心肌纤维化模型组和溶媒对照组,每组10只。模型组小鼠皮下注射5 mg·kg-1异丙肾上腺素1 d后,以2.5 mg·kg-1维持至30 d。溶媒对照组同法皮下注射等量的生理盐水。30 d后颈椎脱臼处死小鼠,取心脏称重,计算心重指数(cardiac weight index,CWI);消化法测定心肌羟脯氨酸(hydroxyproline,Hydro)的含量;HE和Massson染色观察心肌纤维化的程度,并计算心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);运用RT-PCR方法测定Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)mRNA表达。结果模型组与溶媒对照组比较,CWI和心肌中Hydro的含量明显增加(P<0.01),心肌细胞间可见较多的纤维组织,相应地,CVF和左心室CollagenⅠmRNA表达明显增加(P<0.01)。结论小鼠皮下注射异丙肾上腺素成功制备了心肌纤维化模型,该法简单、经济、可靠。 展开更多
关键词 异丙肾上腺素 心肌纤维化 动物模型 心重指数 羟脯氨酸 I型胶原
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胶原和胶原酶在人支气管肺泡洗出液细胞及U_(937)细胞中的表达
6
作者 于永利 杨贵贞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期101-103,共3页
采用逆转录-DNA聚合酶链反应检测了人支气管肺泡洗出液细胞及U_(937)细胞人Ⅰ型胶原α-2链及Ⅳ型胶原酶mRNA的表达。结果表明:人支气管肺泡洗出液细胞可表达人Ⅰ型胶原α-2链及Ⅳ型胶原酶mRNA;经PMA刺激的U_(937)细胞表达这两种mRNA。... 采用逆转录-DNA聚合酶链反应检测了人支气管肺泡洗出液细胞及U_(937)细胞人Ⅰ型胶原α-2链及Ⅳ型胶原酶mRNA的表达。结果表明:人支气管肺泡洗出液细胞可表达人Ⅰ型胶原α-2链及Ⅳ型胶原酶mRNA;经PMA刺激的U_(937)细胞表达这两种mRNA。而未经刺激的U_(937)细胞仅表达人Ⅰ型胶原α-2链mRNA。 展开更多
关键词 胶原 胶原酶 支气管肺泡 U937细胞
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