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题名羊梭菌病快速鉴别PCR方法的建立及初步应用
被引量：2
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作者
李田美
吴正双
许大伟
姜艳芬
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机构
西北农林科技大学动物医学院
内蒙古自治区动物卫生监督所
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出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第7期20-25,共6页
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基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0500504)
陕西省农业科技创新与攻关项目(2015NY171)
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文摘
根据GenBank已公布的产气荚膜梭菌和腐败梭菌的α毒素基因序列,分别设计并合成针对2种α毒素基因的特异性引物,通过扩增条件的优化,建立快速鉴别产气荚膜梭菌和腐败梭菌的双重PCR方法。特异性试验显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌则均未能扩增出相应条带。灵敏度试验结果显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌基因组DNA最低检测量分别为17.95pg/μL和1.261pg/μL。应用该方法对样品进行检测,其中5份为产气荚膜梭菌阳性。成功建立了特异性强、敏感性高的双重PCR方法,可以有效进行产气荚膜梭菌和腐败梭菌的快速鉴别,对羊梭菌病病原快速鉴定及流行病学调查具有重要意义。
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关键词
产气荚膜梭菌
腐败梭菌
Α毒素
鉴别
双重PCR
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Keywords
clostridium perfringens
clostridium septium
alpha toxin
identification
duplex PCR
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分类号
S858.26
[农业科学—临床兽医学]
S855.12
[农业科学—兽医学]
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