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表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因烟草及其抗真菌病的研究 被引量：84
1
作者 蓝海燕 张丽华 +4 位作者 王兰岚 陈正华 田颖川 陈正华 王长海 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第1期70-77,共8页
利用烟草碱性β－１，３－葡聚糖酶及菜豆碱性几丁质酶基因构建了组成型表达的双价植物 表达载体ｐＢＬＧＣ，利用农杆菌介导法转化了烟草，并得到了转基因植株。对其进行分子生物 学分析的结果表明，部分转基因植株在所有检测中都显示... 利用烟草碱性β－１，３－葡聚糖酶及菜豆碱性几丁质酶基因构建了组成型表达的双价植物 表达载体ｐＢＬＧＣ，利用农杆菌介导法转化了烟草，并得到了转基因植株。对其进行分子生物 学分析的结果表明，部分转基因植株在所有检测中都显示较强的阳性反应，这说明外源基因 已整合到烟草基因组中并得到正确表达。活体接菌实验初步表明，转基因植株与对照相比，对 赤星病的侵染具有较强的抵抗能力。 展开更多
关键词 Β-1 3-葡聚糖酶基因 转基因烟草 抗真菌病
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导入β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因可育油菜及其抗菌核病的研究 被引量：67
2
作者 蓝海燕 王长海 +4 位作者 张丽华 刘桂珍 王岚兰 陈正华 田颖川 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期142-146,共5页
利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15... 利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15(Kan15mg/L)培养基上的绿苗中有30%为PCR阳性植株,而在K25(Kan10mg/L)培养基上的绿苗有53%的阳性率。对部分PCR阳性的转基因植株进行了点杂交分析,结果均表现出较强的杂交信号,这初步说明外源基因已整合到油菜基因组中。转基因植株的活体接种油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorium)试验表明,部分转基因植株比对照显示较强抗病性。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 转基因油菜 抗菌核病 农杆菌介导
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转几丁质酶基因防植物病害研究:进展、问题与展望 被引量：52
3
作者 高必达 《生物工程进展》 CSCD 1999年第2期21-28,共8页
综合评述了近几年转几丁质酶基因防植物病害研究中的发现与进展：（１）至少３１种病原真菌（含变种和专化型）可诱导植物几丁质酶，（２）据称已提纯的植物几丁质酶对立枯丝核菌等真菌呈现了体外抑菌活性；（３）一些生防细菌的防病作... 综合评述了近几年转几丁质酶基因防植物病害研究中的发现与进展：（１）至少３１种病原真菌（含变种和专化型）可诱导植物几丁质酶，（２）据称已提纯的植物几丁质酶对立枯丝核菌等真菌呈现了体外抑菌活性；（３）一些生防细菌的防病作用依赖于其几丁质酶基因的存在；（４）数种植物几丁质酶基因和一种细菌几丁质酶基因已被转入水稻、烟草、番茄等植物，一些转基因株系抗病性显著增强；（５）粘质沙雷氏菌的一种几丁质酶基因已被转入荧光假单胞菌和根瘤菌中，转基因细菌对立枯丝核菌有显著抑制作用。就几丁质酶抑菌谱、转基因的策略和研究中存在的疑点进行了分析讨论。建议今后的研究方向应集中在以下几方面：（１）加速转几丁质酶基因或几丁质酶基因与其它基因组合的植物实用化；（２）进一步研究不同基因组合的增效作用及增效机理；（３）查明个别几丁质酶基因的抑菌谱及选择性抑菌机制；（４）转几丁质酶基因或与其它基因的组合于植物内生细菌。 展开更多
关键词 植物 几丁质酶 病害防治
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向大豆导入几丁质酶基因的初步研究 被引量：44
4
作者 徐香玲 邹联沛 +1 位作者 刘伟华 李集临 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期101-107,共7页
以根癌农杆菌的Ｔｉ质粒为介导，将抗真菌病的几丁质酶基因，导入黑龙江省栽培大豆－东农３７号，吉林２８号等１４个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽，并再生植株，经ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交检测，确认为转化植株。用花粉管通道导... 以根癌农杆菌的Ｔｉ质粒为介导，将抗真菌病的几丁质酶基因，导入黑龙江省栽培大豆－东农３７号，吉林２８号等１４个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽，并再生植株，经ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交检测，确认为转化植株。用花粉管通道导入法，直接导入几丁质酶基因，共获２２３粒种子，经ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交检测的１１３株大豆幼苗中，有７株呈阳性反应，证明几丁质酶基因已导入并整合到大豆的基因组中。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 转基因植株 大豆 基因
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获得抗稻瘟病和纹枯病的转多基因水稻 被引量：43
5
作者 冯道荣 许新萍 +3 位作者 范钦 李宝健 雷财林 凌忠专 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期293-300,共8页
将多个抗真菌病基因连同筛选基因 hpt一起导入一水稻品种中 ,共获得 4 9个独立的整合有 1～ 4个抗真菌病基因的转基因植株系。转基因植株中几丁质酶的酶活均高于非转化对照植株 ,且转多个几丁质酶基因或与 β- 1,3-葡聚糖酶基因一起的... 将多个抗真菌病基因连同筛选基因 hpt一起导入一水稻品种中 ,共获得 4 9个独立的整合有 1～ 4个抗真菌病基因的转基因植株系。转基因植株中几丁质酶的酶活均高于非转化对照植株 ,且转多个几丁质酶基因或与 β- 1,3-葡聚糖酶基因一起的转基因植株较转单个几丁质酶基因的植株有更高的酶活性。抗病试验表明 ,这些不同组合的 R2 代转基因植株对纹枯病和稻瘟病的抗性较非转化原种对照都有了提高。 展开更多
关键词 水稻 几丁质酶基因 Β-1 3-葡聚糖酶基因 稻瘟病 纹枯病 抗生 转基因植株
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几丁质酶-葡聚糖酶双价基因导入滇型杂交稻恢复系提高稻瘟病抗性的研究 被引量：34
6
作者 许明辉 唐祚舜 +5 位作者 谭亚玲 田颖川 李成云 张树华 陈正华 田文忠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期330-334,共5页
将含有菜豆 (Phaseoluslimensis)几丁质酶基因和烟草 (Nicotianatabacum) β 1,3 葡聚糖酶基因的pBLGC(16 5kb)质粒用基因枪法导入滇型杂交稻 (OryzasativaL .ssp .japonica)恢复系“南 2 9”中 ,总计获得 93个转化再生植株 ,以β 1,3... 将含有菜豆 (Phaseoluslimensis)几丁质酶基因和烟草 (Nicotianatabacum) β 1,3 葡聚糖酶基因的pBLGC(16 5kb)质粒用基因枪法导入滇型杂交稻 (OryzasativaL .ssp .japonica)恢复系“南 2 9”中 ,总计获得 93个转化再生植株 ,以β 1,3 葡聚糖酶基因制备探针对T1 代株系进行Southern杂交分析 ,17个株系为杂交阳性 ,证实外源基因完整结构已整合到水稻基因组中 ;连续多代的PCR追踪检测证实外源基因已遗传至T4 代 ;对所获得的 6个PCR检测阳性T4代品系进行了稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)生理小种接种鉴定和稻瘟病大田诱发鉴定 ,结果表明 ,转基因品系对稻瘟病的抗性较受体对照大幅度提高 ,获得了稻瘟病新抗源 ,但不同品系稻瘟病抗性并不相同。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 葡聚糖酶基因 遗传转化 杂交稻 稻瘟病
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转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因提高棉花对枯萎病和黄萎病的抗性 被引量：44
7
作者 程红梅 简桂良 +7 位作者 倪万潮 杨红华 王志兴 孙文姬 张保龙 王晓峰 马存 贾士荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1160-1166,共7页
枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过... 枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过花粉管通道法转化棉花,经PCR和Southern杂交检测以及1996～2000年温室及病圃多代筛选鉴定,已培育出对枯、黄萎病抗性提高的转基因棉花株系。将抗病基因导入国产抗虫棉品种GK19中,还获得了兼抗病、虫的转基因优系。 展开更多
关键词 几丁质酶 黄萎病 葡聚糖酶基因 β-1 抗性 枯萎病 Southern 3-葡聚糖酶 协同增效作用 植物表达载体 花粉管通道法 2000年 转基因棉花 抗虫棉品种 棉花生产 传统育种 防御体系 双价基因 筛选鉴定 杂交检测 GK19 基因导入
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几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因研究进展 被引量：37
8
作者 李春娟 单世华 +1 位作者 许婷婷 宫清轩 《生物技术通讯》 CAS 2004年第5期502-505,共4页
几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是重要的水解酶,实践证明,转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因植物能比较有效地抵抗真菌侵染。本文综述了几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶结构分类、抗真菌机理,及其近年来在抗黄曲霉病研究中的应用研究,并对今后的... 几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是重要的水解酶,实践证明,转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因植物能比较有效地抵抗真菌侵染。本文综述了几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶结构分类、抗真菌机理,及其近年来在抗黄曲霉病研究中的应用研究,并对今后的研究及应用进行了预测。 展开更多
关键词 几丁质酶 Β-1 3-葡聚糖酶基因 黄曲霉病 侵染 水解酶 植物 抗真菌 研究进展 综述 抵抗
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几丁质酶及其研究进展 被引量：22
9
作者 蓝海燕 陈正华 《生命科学研究》 CAS CSCD 1998年第3期163-171,176,共10页
本文从几丁质酶的分布、分类、发育调节、可诱导性、分子生物学及抗病基因工程等方面近年来的进展进行了综合论述，并对其进一步的应用提出展望．
关键词 几丁质酶基因 防御反应 基因工程 几丁质酶 分布
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抗菌核病转基因油菜植株的获得 被引量：13
10
作者 张丽华 党本元 +5 位作者 周奕华 毛勇 张铁汉 曾君祉 王兰岚 陈正华 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第12期41-46,共6页
将携带菜豆几丁质酶基因的植物表达载体pBch 通过农杆菌介导法导入甘兰型油菜H165 中。经卡那霉素对T0 、T1 和T2 代植株进行连续的筛选和菌核病(sclerotiniasclerotinorium) 接种试验, 共获得33 株抗菌核病的T2 代植株。对其中的22 株... 将携带菜豆几丁质酶基因的植物表达载体pBch 通过农杆菌介导法导入甘兰型油菜H165 中。经卡那霉素对T0 、T1 和T2 代植株进行连续的筛选和菌核病(sclerotiniasclerotinorium) 接种试验, 共获得33 株抗菌核病的T2 代植株。对其中的22 株进行PCR 检测, 从6 株扩增得到与菜豆几丁质酶基因大小对应的DNA 带型,Southern 杂交证实其中2 株呈现阳性结果, 表明外源基因已整合到油菜基因组中。对转化植株抗菌核病的接种试验及在菌核病高发区的种植试验表明, 含几丁质酶基因的转化体对菌核病具有抗性, 并已得到T3 展开更多
关键词 油菜 几丁质酶基因 抗菌核病植株 育种
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几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入甘蔗 被引量：30
11
作者 顾丽红 张树珍 +4 位作者 杨本鹏 蔡文伟 黄东杰 王文治 李娇 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第2期277-280,共4页
将含有经过修饰的烟草(Nicotiana tabacumL.)Ⅰ类几丁质酶基因和Ⅰ类β-1,3-葡聚糖酶基因的双价植物表达载体pCG-Ⅱ在农杆菌介导下转化甘蔗优良品种ROC10和ROC22,获得抗G418的转化植株52株,经PCR检测33株呈阳性;对部分经PCR检测呈阳性... 将含有经过修饰的烟草(Nicotiana tabacumL.)Ⅰ类几丁质酶基因和Ⅰ类β-1,3-葡聚糖酶基因的双价植物表达载体pCG-Ⅱ在农杆菌介导下转化甘蔗优良品种ROC10和ROC22,获得抗G418的转化植株52株,经PCR检测33株呈阳性;对部分经PCR检测呈阳性的转化植株进行Southern杂交和黑穗病抗病性的体外抑菌实验,结果显示这两个基因均已整合到部分甘蔗的基因组中,且它们对甘蔗黑穗病的抗性均有不同程度的提高。 展开更多
关键词 甘蔗 几丁质酶基因 β-1 3-葡聚糖酶基因 转基因
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通过农杆菌介导将菜豆几丁质酶基因导入马铃薯 被引量：17
12
作者 周思军 李希臣 +2 位作者 刘昭军 刘文萍 南相日 《中国马铃薯》 2000年第2期70-72,共3页
选用两个生产上主栽马铃薯品种“鲁引 1号”和“鲁引 4号”的试管微型薯为材料 ,通过农杆菌介导成功地将菜豆几丁质酶基因导入到马铃薯中。试管微型薯薯片与农杆菌共培养 3d后 ,转到含卡那霉素 10 0mg/L的分化培养基上诱导不定芽分化。... 选用两个生产上主栽马铃薯品种“鲁引 1号”和“鲁引 4号”的试管微型薯为材料 ,通过农杆菌介导成功地将菜豆几丁质酶基因导入到马铃薯中。试管微型薯薯片与农杆菌共培养 3d后 ,转到含卡那霉素 10 0mg/L的分化培养基上诱导不定芽分化。待抗性芽长到 1 0～ 1 5cm高时 ,转入含卡那霉素 10 0mg/L的液体培养基中进行生根筛选。经过分化和生根两轮筛选的转化植株的PCR检测结果均为阳性 ,而未经转化的对照植株为阴性 ,证明该筛选系统是可靠的。早熟品种鲁引 1号的转化频率明显高于晚熟品种克新 4号 ,其最高转化频率为 4 1 0 % ,平均每个外植体可得到 3 85株转化苗。 展开更多
关键词 马铃薯 根癌农杆菌 NPTⅡ 遗传转化 几丁质酶
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利用激光微束穿刺法获得抗黄萎病转基因棉花的研究 被引量：24
13
作者 刘桂珍 蓝海燕 +4 位作者 田颖川 李树诚 乐锦华 王兰岚 陈正华 《中国激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期279-283,共5页
通过激光微束穿刺法 ,将 β 1,3 葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达载体 pBLGC导入棉花幼胚。转化一代棉花幼苗用蘸根法进行抗黄萎病筛选 ,将存活的苗移入病圃进行了卡那霉素(Kan 1% )抗性测定。结果表明 ,在移栽的 2 9株幼苗中 ,有 ... 通过激光微束穿刺法 ,将 β 1,3 葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达载体 pBLGC导入棉花幼胚。转化一代棉花幼苗用蘸根法进行抗黄萎病筛选 ,将存活的苗移入病圃进行了卡那霉素(Kan 1% )抗性测定。结果表明 ,在移栽的 2 9株幼苗中 ,有 9株表现出明显的Kan抗性 ,对 9株抗Kan植株进行了PCR检测 ,结果显示 ,其中 7株表现为阳性。病圃中的T1代转基因植株在经历了黄萎病发病高峰期后 ,7株PCR阳性植株表现明显抗病 ,并已正常开花结铃 ,其他T1代植株及对照植株全部因后期发病死亡。这初步证明外源基因已整合到棉花基因组中 ,且使转基因植株对黄萎病表现出一定的抗性。 展开更多
关键词 激光微束穿刺法 黄萎病 转基因棉花
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转几丁质酶基因(RC24)水稻中大2号抗纹枯病特性研究 被引量：21
14
作者 袁红旭 许新萍 +2 位作者 张建中 郭建夫 李宝健 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期39-42,共4页
导入外源几丁质酶基因“RC2 4”的水稻中大 2号接种纹枯病菌的结果表明 ,接种病菌后病斑扩展速率和田间病情指数小 ,表现为对水稻纹枯病高抗。组织病理学研究表明纹枯病菌能侵入中大 2号 ,并引发纹枯病 ,入侵时间和症状出现的时间与非... 导入外源几丁质酶基因“RC2 4”的水稻中大 2号接种纹枯病菌的结果表明 ,接种病菌后病斑扩展速率和田间病情指数小 ,表现为对水稻纹枯病高抗。组织病理学研究表明纹枯病菌能侵入中大 2号 ,并引发纹枯病 ,入侵时间和症状出现的时间与非转基因感病对照没有显著差异 ,但病菌菌丝体消解现象出现早于对照 ,其抗病性主要表现为限制病菌扩展。以中大 2号与非转基因水稻材料配制的杂交组合的抗病性表明 ,杂交组合的抗病性均高于非转基因亲本 ,但其抗病性也会因母本的不同而有所变化。 展开更多
关键词 转基因水稻 几丁质酶基因 纹枯病 抗病性
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基因枪法向小麦导入几丁质酶基因的研究 被引量：14
15
作者 刘伟华 李文雄 +4 位作者 胡尚连 徐香玲 李集临 陈正华 胡赞民 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第1期54-59,共6页
利用基因枪法,以菜豆几丁质酶基因转化小麦幼胚愈伤组织。在轰击压力1300psi,轰击距离6cm、100μg金粉/枪和轰击距离9cm、150μg金粉/枪的2种处理条件下,获得4株春小麦东农7742转化植株,转化频率分别为0.36%和0.56%。经PCR和PCR-Souther... 利用基因枪法,以菜豆几丁质酶基因转化小麦幼胚愈伤组织。在轰击压力1300psi,轰击距离6cm、100μg金粉/枪和轰击距离9cm、150μg金粉/枪的2种处理条件下,获得4株春小麦东农7742转化植株,转化频率分别为0.36%和0.56%。经PCR和PCR-Southern杂交分析,证实菜豆几丁质酶基因已整合到T0和T1小麦基因组中。采用氨基葡萄糖法测定几丁质酶活力,结果表明,转基因小麦的几丁质酶活力明显高于对照株;转基因植株对白粉病症状减缓,并获得一株赤霉菌接种未扩展的转基因T1植株。 展开更多
关键词 基因枪法 小麦 几丁质酶基因 转化 抗真菌病
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中国棉铃虫核型多角体病毒几丁质酶基因的定位与克隆 被引量：16
16
作者 彭辉银 李星 +3 位作者 张双民 Basil M.Arif 陈新文 胡志红 《中国病毒学》 CSCD 1998年第2期139-143,共5页
以α３２ＰｄＡＴＰ标记含ＣｆＭＮＰＶ几丁质酶基因的重组质粒为探针，在６８℃条件下对棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶ）进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，将ＨａＳＮＰＶ的几丁质酶基因分别定位在ＢａｍＨＩＥ、ＢｇｌⅡ... 以α３２ＰｄＡＴＰ标记含ＣｆＭＮＰＶ几丁质酶基因的重组质粒为探针，在６８℃条件下对棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶ）进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，将ＨａＳＮＰＶ的几丁质酶基因分别定位在ＢａｍＨＩＥ、ＢｇｌⅡＥ、ＥｃｏＲＩＧ、ＨｉｎｄⅢＦ、ＸｂａＩＨ、ＢａｍＨＩ＋ＨｉｎｄＩＩＭ和ＢａｍＨＩ＋ＸｂａＩＨ，并以ｐＴＺ１９Ｒ为载体获得了ＸｂａＩＨ片段克隆。 展开更多
关键词 棉铃虫 核型多角体病毒 几丁质酶 基因定位
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几丁质酶基因转化甜菜的初步研究 被引量：10
17
作者 马龙彪 徐香玲 +2 位作者 张悦琴 傅宁 吴则东 《中国糖料》 2000年第3期18-20,共3页
本试验通过农杆菌(Agrobacterium)介导法将菜豆几丁质酶基因导入甜菜(BetavulgarisL.) ,再生植株经卡那霉素筛选后 ,进行PCR分析 ,结果表明 :再生植株的转化率为27.3 %。
关键词 几丁质酶基因 甜菜 真菌病 转基因抗病育种
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东亚飞蝗几丁质酶家族基因的表达特性与功能研究 被引量：23
18
作者 李大琪 杜建中 +6 位作者 张建琴 郝耀山 刘晓健 王亦学 马恩波 张建珍 孙毅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期485-492,共8页
【目的】研究东亚飞蝗几丁质酶家族基因的时空表达特性及其在蜕皮发育中的生物学功能,筛选在飞蝗发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的飞蝗有效控制提供重要的基础数据。【方法】在东亚飞蝗EST数据库搜索几丁质酶基因片段,... 【目的】研究东亚飞蝗几丁质酶家族基因的时空表达特性及其在蜕皮发育中的生物学功能,筛选在飞蝗发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的飞蝗有效控制提供重要的基础数据。【方法】在东亚飞蝗EST数据库搜索几丁质酶基因片段,用生物信息学方法分析所获得的基因片段序列;以飞蝗不同龄期第4天若虫和5龄东亚飞蝗不同组织部位为材料提取RNA并反转录为cDNA,应用RT-PCR方法研究时空表达特性;选取在表皮高表达的几丁质酶基因LmCht6,采用RNA干扰方法研究其生物学功能。【结果】基于东亚飞蝗EST库搜索和进一步的序列分析,共获得7条几丁质酶基因片段;不同组织部位与不同龄期RT-PCR结果表明这7条几丁质酶基因的时空表达特性存在明显差异,其中LmCht6主要在表皮表达;LmCht6的RNA干扰试验表明:2龄飞蝗注射dsLmCht6后,其几丁质酶基因LmCht6表达量明显降低;飞蝗从2龄到3龄的龄期转化过程中,表现为发育延迟,新表皮与旧表皮无法完全分离,导致死亡率达到72.2%。【结论】东亚飞蝗拥有多个几丁质酶基因,它们的时空表达特性存在差异;LmCht6在飞蝗蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能,该基因被沉默后飞蝗无法完成蜕皮而导致死亡。 展开更多
关键词 东亚飞蝗 几丁质酶基因 RT-PCR RNA干扰
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转几丁质酶-葡聚糖酶基因水稻稻瘟病抗谱分析 被引量：16
19
作者 许明辉 李成云 +5 位作者 李进斌 谭学林 田颖川 陈正华 唐祚舜 田文忠 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期307-310,共4页
用来源于云南各地属于 2 4个稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)生理小种的 3 3个菌株 ,对受体品种南 2 9及其 4个转几丁质酶 β 1,3 葡聚糖酶串联基因水稻T5 代品系进行了温室接种鉴定。结果表明 ,不能侵染受体品种南 2 9的 13个菌株也不... 用来源于云南各地属于 2 4个稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)生理小种的 3 3个菌株 ,对受体品种南 2 9及其 4个转几丁质酶 β 1,3 葡聚糖酶串联基因水稻T5 代品系进行了温室接种鉴定。结果表明 ,不能侵染受体品种南 2 9的 13个菌株也不能侵染转基因品系 ,可侵染受体品种南 2 9的 2 0个菌株一般不能侵染转基因品系 ,转基因水稻对稻瘟病菌抗性范围较受体对照扩大 ,证明转几丁质酶 葡聚糖酶基因水稻对稻瘟病具有一定的广谱抗性 ;诱发条件下 ,转基因品系大田叶瘟病情指数为 0～ 1级 ,穗瘟发病率为 0 .3 %～ 10 .2 3 % ,抗性较受体对照大幅度提高 ,表明这些品系在稻瘟病抗病育种中是有应用潜力的。 展开更多
关键词 几丁质酶-葡聚糖酶基因 水稻 稻瘟病 抗谱 转基因
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环状芽孢杆菌C-2几丁酶基因的克隆 被引量：11
20
作者 郑洪武 王焰玲 张义正 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期28-32,共5页
环状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｉｒｃｕｌａｎｓ）Ｃ２总ＤＮＡ经ＰｓｔＩ部分酶切后分离２～１０ｋｂ的片段，插入质粒ｐＵＣ１９的ＰｓｔＩ位点，转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ），利用几丁质平板从约８０００个... 环状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｉｒｃｕｌａｎｓ）Ｃ２总ＤＮＡ经ＰｓｔＩ部分酶切后分离２～１０ｋｂ的片段，插入质粒ｐＵＣ１９的ＰｓｔＩ位点，转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ），利用几丁质平板从约８０００个重组子中筛选到一个几丁酶基因阳性克隆（命名为ｐＣＨＴ１）。用１２种限制酶对重组质粒进行的酶切分析表明，重组质粒中的插入片段长３０ｋｂ，其中各有一个ＫｐｎＩ，ＳａｃＩ和ＳｓｐＩ位点。把该克隆片段反向插入ｐＵＣ１９的ＰｓｔＩ位点所得到的重组子同样具有几丁酶基因表达活性，说明此片段含有一个完整的几丁酶基因，其自身的启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实了该片段来自于Ｂ．ｃｉｒｃｕｌａｎｓＣ２基因组，且以单拷贝形式存在，它不能与来自于其它７株几丁酶产生菌的总ＤＮＡ杂交。 展开更多
关键词 环状芽孢杆菌 几丁酶 基因克隆 克隆
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