以大白菜pol型细胞质雄性不育系16C14花蕾为试验材料,采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA,利用DSN(duplex-specific nuclease)对所得cDNA进行均一化处理,之后与pDONR^(TM)/Zeo载体重组并转化DH10...以大白菜pol型细胞质雄性不育系16C14花蕾为试验材料,采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA,利用DSN(duplex-specific nuclease)对所得cDNA进行均一化处理,之后与pDONR^(TM)/Zeo载体重组并转化DH10B大肠杆菌菌株,构建了大白菜pol型雄性不育花蕾均一化cDNA文库。经检测,文库滴度为3.2×10~6 cfu?mL^(-1),库容量约为1.28×10~7 cfu,重组率97%,插入片段平均大小1.2 kb左右。随机挑选100个阳性菌斑进行测序,冗余度仅为3.7%,文库质量较高。本研究成功构建了大白菜胞质雄性不育系花蕾均一化cDNA文库,为进一步研究大白菜pol雄性不育相关分子机制奠定基础。展开更多
