鸡传染性支气管炎病毒研究进展 被引量：20

1

作者 贺会利 魏小兵 +5 位作者 欧长波 徐敏 闫艺婷 刘明成 勾肖晶 刘兴友 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第7期73-77,共5页

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。由于IBV基因组的RNA酶缺乏严密的校正功能,容易发生变异,使该病毒的基因型、血清型复杂,给该病的防控带来很... 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。由于IBV基因组的RNA酶缺乏严密的校正功能,容易发生变异,使该病毒的基因型、血清型复杂,给该病的防控带来很大的困难,从而给养殖业造成了重大经济损失。从2003年起对IBV的分子生物学方面的研究也成了热点,寻找防控此病的有效措施。论文概述了近年来在IBV的基因组、结构蛋白、分子诊断及反向遗传学技术等方面的研究进展,为IBV的研究和防控提供参考。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 基因组结构 结构蛋白 分子生物学诊断 反向遗传学技术

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鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量：8

2

作者 苗立中 祖立闯 +5 位作者 王艳 马秀丽 亓丽红 宋敏训 沈志强 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期426-432,共7页

参照IBV S1基因序列,RT-PCR扩增长约867bp的S1基因主要抗原区域,将目的片段定向克隆到pET30α原核表达载体,转化Rossetta表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组S1蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的免疫活... 参照IBV S1基因序列,RT-PCR扩增长约867bp的S1基因主要抗原区域,将目的片段定向克隆到pET30α原核表达载体,转化Rossetta表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组S1蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的免疫活性。以该蛋白作为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗体的间接ELISA检测方法。该方法与其他6种常见禽病病毒(H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡法氏囊病毒(IBDV))阳性血清不发生交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;相对于HI试验的符合率、敏感性、特异性分别为91.58%、91.24%和92.31%;相对于IDEXX ELISA的符合率、敏感性、特异性分别为94.55%、95.42%和92.96%;应用该方法检测山东及周边地区2 685份免疫鸡和168份未免疫鸡血清样品,免疫合格率和阳性感染率分别为85.25%和17.26%。本试验截短表达的S1蛋白具有良好的免疫活性,建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,将为IBV的免疫抗体监测、临床野毒感染快速诊断和流行病学调查提供了一种新的血清学诊断技术,具有良好的推广应用前景。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1蛋白 截短表达 活性鉴定 间接ELISA 检测

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鸡传染性支气管炎病毒M41株种毒的冻干鉴定 被引量：5

3

作者 张敏 蒋桃珍 +2 位作者 王静文 张兵 陈玲 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第8期5-8,共4页

为制备合格的鸡传染性支气管炎病毒M41株种毒,将M41株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获尿囊液、分装、冻干,并对冻干毒进行了无菌检验、支原体检验、剩余水分测定、真空度测定、外源病毒检验、病毒含量测定、特异性检验、致病性试验。... 为制备合格的鸡传染性支气管炎病毒M41株种毒,将M41株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获尿囊液、分装、冻干,并对冻干毒进行了无菌检验、支原体检验、剩余水分测定、真空度测定、外源病毒检验、病毒含量测定、特异性检验、致病性试验。结果表明,该冻干毒种各项检验均符合规定,可作为研究用种毒。本研究可为其他禽源病毒种毒的制备提供借鉴。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 冻干 鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒血凝谱 被引量：3

4

作者 江国托 祁贤 +2 位作者 王秀荣 卢景良 李学贞 《中国家禽》 北大核心 1998年第9期6-7,共2页

用鸡传染性支气管炎病毒标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｔ、Ｎ１１５、ＩＢＶ６２株及国内华中（ＨＺ）、华东（ＨＤ）、华南（ＨＮ）、华北（ＨＢ）、东北（ＤＢ）及西北（ＸＢ）等地方性分离株试验，研究ＩＢＶ血凝特性。结果表明，ＩＢＶ... 用鸡传染性支气管炎病毒标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｔ、Ｎ１１５、ＩＢＶ６２株及国内华中（ＨＺ）、华东（ＨＤ）、华南（ＨＮ）、华北（ＨＢ）、东北（ＤＢ）及西北（ＸＢ）等地方性分离株试验，研究ＩＢＶ血凝特性。结果表明，ＩＢＶ不直接凝集鸡、牛、兔、小白鼠、仓鼠、猪、鹅、马、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞；１％胰蛋白酶３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后，可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞；１０％乙醚３７℃作用ＩＢＶ２ｈ后，可凝集鸡、牛、小白鼠、仓鼠、鹅、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞；１％卵磷脂酶Ｃ３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后，可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 血凝谱 分离株

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鸡传染性支气管炎病毒(M41)HI抗原的制备与初步应用 被引量：2

5

作者 钱晓佳 周欣 +2 位作者 薛邦玉 杨大光 王新卫 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第30期9545-9546,9548,共3页

实验比较了不同方法制备IBV HI抗原,并比较不同PLC1处理浓度、不同保存时间等因素对制备IBV HI抗原的影响,筛选出制备抗原的最佳条件:选择10 U/ml的PLC1与等体积超速离心后的M41 IBV以及pH值7.40、.01 mol/L PBS稀释液混合,在37℃水浴作... 实验比较了不同方法制备IBV HI抗原,并比较不同PLC1处理浓度、不同保存时间等因素对制备IBV HI抗原的影响,筛选出制备抗原的最佳条件:选择10 U/ml的PLC1与等体积超速离心后的M41 IBV以及pH值7.40、.01 mol/L PBS稀释液混合,在37℃水浴作用2 h并不断振荡,取出后加入β-丙内酯4℃灭活24 h。在HI实验中,该抗原不与AIVH5、AIVH9、ND单因子血清反应,仅与IB阳性血清反应,有高度特异性。用高岭土37℃处理1 h可明显降低SPF阴性血清非特异反应。上述抗原在4℃保存3周血凝价达到最高。应用该抗原检测免疫前后鸡群IBV抗体,取得良好效果,证明用该方法与条件所制备的抗原可以用于IB诊断及临床实验。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 I型磷酸酯酶 β-丙内酯 血凝实验

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RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究 被引量：2

6

作者 王泽霖 王丽 +2 位作者 阎若潜 刘素云 菅复春 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第4期304-309,共6页

用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４... 用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４１，Ｃｏｎｎ，Ｇｒａｙ，Ｔ，Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒，上毒，云毒，ＨＫ，１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ。结果除Ｈｏｌｔｅ株，２个分离株（宜毒，云毒）外，其余均被成功地扩增出６０２ｂｐ的片段。将ＩＢＶＨ１２０株０６ｋｂＰＣＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记为探针，分别与上述各ＩＢＶ毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交，均呈现阳性反应，而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＤＮＡ，ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒，作为诊断ＩＢＶ的新方法。 展开更多

关键词 传染性 支气管炎病毒 鸡病 检测 核酸探针

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Vero细胞悬浮驯化及增殖鸡传染性支气管炎病毒工艺研究 被引量：1

7

作者 程旭 姜逸 +5 位作者 高明燕 周生 俞燕 李建梅 沈欣悦 范建华 《现代畜牧兽医》 2021年第11期1-3,共3页

细胞苗因工艺优良、产品性质稳定等特点,一直是禽苗研究的主要方向。研究利用QX型传染性支气管炎毒株MJ株感染生物反应器中悬浮培养的Vero细胞,确定培养参数。结果表明,微载体浓度10 g/L、10%DMEM培养基、细胞与微载体比例为50∶1时,细... 细胞苗因工艺优良、产品性质稳定等特点,一直是禽苗研究的主要方向。研究利用QX型传染性支气管炎毒株MJ株感染生物反应器中悬浮培养的Vero细胞,确定培养参数。结果表明,微载体浓度10 g/L、10%DMEM培养基、细胞与微载体比例为50∶1时,细胞生长状态良好。MJ株与Vero细胞感染复数为0.50时,病毒扩增效率最高,在108 h病毒含量可达到10^(6.53) TCID_(50)/mL。 展开更多

关键词 VERO细胞 悬浮培养 鸡传染性支气管炎病毒 微载体 感染复数

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鸡传染性支气管炎病毒M基因真核表达载体的构建及免疫效力研究 被引量：1

8

作者 孙晓云 刘成倩 +1 位作者 易建中 李红 《上海农业学报》 CSCD 2017年第2期104-108,共5页

从GenBank上下载鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120型标准株M基因的标准序列,以此标准序列为模板设计合成一对引物。从IBV尿囊液中提取总RNA,采用PCR技术扩增出M基因,将扩增出的目的片段克隆至pMD18-T载体上获得pMD18-IBV-M质粒,通过亚克... 从GenBank上下载鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120型标准株M基因的标准序列,以此标准序列为模板设计合成一对引物。从IBV尿囊液中提取总RNA,采用PCR技术扩增出M基因,将扩增出的目的片段克隆至pMD18-T载体上获得pMD18-IBV-M质粒,通过亚克隆将目的基因连接到经过改造的pEGFP-C1-SCP-SEC载体上,成功构建真核表达质粒pC1-IBV-M。通过间接免疫荧光试验验证了构建的真核载体能在真核细胞内表达,通过动物免疫试验来检测该真核表达载体对动物的免疫保护情况。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M基因 动物试验

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鸡传染性支气管炎病毒H120株和H52株种毒的制备与鉴定

9

作者 孔冬妮 侯力丹 +3 位作者 刘丹 李启红 杨承槐 黄小洁 《动物医学进展》 北大核心 2019年第12期6-11,共6页

鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株种毒由中国兽医药品监察所制备和供应,种毒的保存期为10年,为了保证种毒的质量和供应,需要定期制备种毒。将H120株、H52株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获鸡胚尿囊液,与50 g/L牛乳蔗糖溶液等体积混... 鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株种毒由中国兽医药品监察所制备和供应,种毒的保存期为10年,为了保证种毒的质量和供应,需要定期制备种毒。将H120株、H52株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获鸡胚尿囊液,与50 g/L牛乳蔗糖溶液等体积混匀,进行分装和冷冻真空干燥。对其进行剩余水分测定、真空度测定、病毒含量、安全性、免疫原性、纯净(无菌检验、支原体检验、外源病毒)和特异性检验,检验结果表明,各项检验均符合规定。同时为了区分H120株、H52株种毒,用实验室已建立的RT-PCR和酶切方法对两种种毒进行鉴别检验,结果表明能准确区分H120株和H52株种毒。试验结果为疫苗生产提供了能长期保存且稳定性好、高滴度的生产用种毒,也可为其他禽源病毒种毒的制备提供借鉴。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 种毒 制备 鉴定

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用地高辛标记的核酸探针从尿囊液和组织中检测传染性支气管炎病毒 被引量：4

10

作者 王泽霖 王丽 +2 位作者 闫若潜 钟凯 王新卫 《中国预防兽医学报》 CSCD 2000年第1期64-66,共3页

将IBVT株基因组S1 基因上0.6kb 片段(位于S1 基因上1121bp～1723bp 之间) 克隆到PIBPCRCloning vector 中,用地高辛标记探针,分别与9 株IBV的PCR 产物和12 株IBV 的核酸进行点杂交均呈阳性反应,而该探针不与IBDV和NDV 的RNA,EDS76 ... 将IBVT株基因组S1 基因上0.6kb 片段(位于S1 基因上1121bp～1723bp 之间) 克隆到PIBPCRCloning vector 中,用地高辛标记探针,分别与9 株IBV的PCR 产物和12 株IBV 的核酸进行点杂交均呈阳性反应,而该探针不与IBDV和NDV 的RNA,EDS76 病毒的DNA及正常鸡胚尿囊液的抽提物反应。探针检测IBVPCR产物的灵敏度为100～200pg。用该探针检测不同毒株IBV在鸡胚中的繁殖动态,接种24～30 小时后的的尿囊液均获阳性结果。用M 和宜株混合感染5 日龄雏鸡12 小时能从气管粘液中检出病毒,38～46 小时后能从肾组织中检出病毒。对7 只就诊病鸡的病变肾脏进行杂交检测,有5 只呈阳性反应。核酸杂交技术为生产上提供了直接从尿囊液和感染鸡组织中快速检测病毒,诊断IBV 展开更多

关键词 支气管炎病毒 地高辛标记探针 点杂交 鸡 IBV

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鸡传染性支气管炎病毒地高辛标记探针检测方法的的建立和应用 被引量：5

11

作者 孟凡磊 刁有祥 +3 位作者 王辉 王妮 刘方娜 刘霞 《福建农业学报》 CAS 2007年第1期39-42,共4页

根据GenBank中已经发表的IBV N基因的保守序列,设计合成一对引物,利用RT-PCR技术扩增IBVN基因的582 bp的核酸片段,并制备出地高辛标记的IBV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与不同毒株的IBV核酸发生特异性杂交,而与对照的NDV、鹅... 根据GenBank中已经发表的IBV N基因的保守序列,设计合成一对引物,利用RT-PCR技术扩增IBVN基因的582 bp的核酸片段,并制备出地高辛标记的IBV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与不同毒株的IBV核酸发生特异性杂交,而与对照的NDV、鹅副粘病毒的核酸杂交反应为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对IBV的最低检出量为10 pg,显示所制备的核酸探针用于IBV的检测是可行的。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 地高辛标记核酸探针 检测

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温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响

12

作者 胡江锋 胡春艳 张小娟 《畜牧兽医科学（电子版）》 2021年第18期4-6,共3页

为了在生产鸡传染性支气管炎活疫苗时,获得高效价的制苗用病毒液,该文从无特定病原体(SPF)鸡胚接种后的孵育温度方面进行探索,研究温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响。结果显示,在用SPF鸡胚增殖鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株时... 为了在生产鸡传染性支气管炎活疫苗时,获得高效价的制苗用病毒液,该文从无特定病原体(SPF)鸡胚接种后的孵育温度方面进行探索,研究温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响。结果显示,在用SPF鸡胚增殖鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株时,以鸡胚液病毒含量指标衡量,接种后的鸡胚在35~37℃孵育为宜,在35.5~36.5℃孵育为佳,超过37℃或低于35℃孵育,不论接毒量大小或孵育时间长短,其鸡胚液的病毒含量均不达标,且37℃以上对鸡传染性支气管炎病毒的增殖更不利。鸡传染性支气管炎病毒对温度比较敏感,鸡胚增殖时,应尽量控制接种鸡胚在35.5~36.5℃孵育,不要超过37℃,为鸡传染性支气管炎鸡胚病毒液的高效生产提供了方法与指导。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎活疫苗 SPF鸡胚 病毒含量 孵育温度

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鸡传染性支气管炎H_(120)细胞活疫苗规模化生产的研究

13

作者 张玉杨 王四保 +1 位作者 郭成留 方立春 《中国家禽》 北大核心 2005年第10期11-13,共3页

通过近两年时间的试验,摸索出并掌握了利用转瓶培养鸡传支H120细胞弱毒的关键技术,利用转瓶机成功生产出鸡传支H120细胞弱毒活疫苗三批,依照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》,经物理性状、无菌、支原体、特异性、外源病毒及安全... 通过近两年时间的试验,摸索出并掌握了利用转瓶培养鸡传支H120细胞弱毒的关键技术,利用转瓶机成功生产出鸡传支H120细胞弱毒活疫苗三批,依照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》,经物理性状、无菌、支原体、特异性、外源病毒及安全检验均合格,EID50平均值分别为6.93、6.71和6.82,免疫保护率均达87%以上。 展开更多

关键词 鸡 传染性支气管炎 H120细胞活疫苗 规模化生产 转瓶培养 免疫保护率

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传染性支气管炎病毒在鸡胚成纤维细胞中适应及复制的生物学特性研究 被引量：2

14

作者 金梅林 陈焕春 +2 位作者 何启盖 吴斌 吴美洲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第11期3-5,共3页

将传染性支气管郯病毒ＩＢＶ－ＮＨ、Ｔ、Ｈ５２、Ｍ４１适应鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），连续传代获得毒价稳定细胞适应毒并对其生物学特性进行研究。观察了ＩＢＶ致ＣＥＦ细胞病变效应的特征，测定ＴＣＩＤ５０滴度为１０６．０～１０... 将传染性支气管郯病毒ＩＢＶ－ＮＨ、Ｔ、Ｈ５２、Ｍ４１适应鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），连续传代获得毒价稳定细胞适应毒并对其生物学特性进行研究。观察了ＩＢＶ致ＣＥＦ细胞病变效应的特征，测定ＴＣＩＤ５０滴度为１０６．０～１０６．０。细胞培养病毒提纯后负染置电镜下进行形态学观察，见到典型的冠状病毒粒子。病毒经胰酶处理显示出血凝特性，该血凝性能被特异性血清所抑制。表明ＣＥＦ细胞病变（ＣＰＥ）确为ＩＢＶ所致。通过对４株ＩＢＶ在ＣＥＦ细胞中最佳培养时间及繁殖量关系的摸索，证实了３６～７２ｈ释放到培养液中有活性的病毒粒子达高峰，ＴＣＩＤ５０最高可达１０７．０／ｍｌ。 展开更多

关键词 鸡胚成纤维细胞 传染性支气管炎 病毒 鸡 病变

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鸡肾型传染性支气管炎的诊断与防治

15

作者 刘兴友 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 1995年第8期33-36,共4页

某鸡场鸡发生以呼吸道及肾病变为主的疾病,经流行病学调查、病理剖检、病毒分离、电镜观察、生物学特性及理化特性试验、血清中和试验、动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎。采用分离毒鸡胚组织灭活苗结合Aust T株灭活油乳苗有效地防... 某鸡场鸡发生以呼吸道及肾病变为主的疾病,经流行病学调查、病理剖检、病毒分离、电镜观察、生物学特性及理化特性试验、血清中和试验、动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎。采用分离毒鸡胚组织灭活苗结合Aust T株灭活油乳苗有效地防治了该病。 展开更多

关键词 鸡病 肾型 传染性支气管炎 诊断 防治

全文增补中