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三叶青查尔酮异构酶基因的克隆及序列分析
1
作者
邓思珊
刘洪旭
马丽红
《中国医药科学》
2023年第17期26-29,共4页
目的 阐明三叶青中查尔酮异构酶(CFI)的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制。方法取三叶青新鲜叶片提取总RNA,以所提的总RNA为模板,随机引物(N8)作为引物进行逆转录反应;以逆转录产物为模板,使用正向引物CFI-F与反向引物...
目的 阐明三叶青中查尔酮异构酶(CFI)的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制。方法取三叶青新鲜叶片提取总RNA,以所提的总RNA为模板,随机引物(N8)作为引物进行逆转录反应;以逆转录产物为模板,使用正向引物CFI-F与反向引物CFI-R进行PCR;PCR产物经回收纯化后与克隆载体pMD18-T连接并转化至大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆进行测序。结果 测序结果分析显示,该基因片段长为760 bp,含一个长为714 bp的开放阅读框,编码237个氨基酸(NCBI登录号:OP358477)。NCBI数据库BLAST搜索分析显示,该基因编码产物与CFI高度同源;进化树分析表明三叶青的CFI基因与大齿牛果藤的亲缘关系最近。结论 本研究为进一步探究三叶青黄酮类成分的生物合成机制奠定基础。
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关键词
三叶青
查尔酮异构酶
分子克隆
生物信息学分析
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职称材料
荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法
被引量：
7
2
作者
李晓静
黄旭明
+1 位作者
胡桂兵
王惠聪
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期531-536,共6页
为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括...
为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查儿酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)]的测定方法,指出了酶液的纯化、酶活性的保护以及反应底物的溶解方法等对试验结果的稳定性和可靠性的影响,介绍了试验过程中常遇到的问题和具体的解决方法以及试验过程中的注意事项.应用改进后的方法测定荔枝发育过程中果皮PAL、CHI、DFR和UFGT的酶活性,结果发现活性变化趋势与前人的报道基本一致.改进的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性的测定方法可靠,可为相关的研究提供重要的参考.
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关键词
荔枝
酚类代谢酶
苯丙氨酸解氨酶（PAL）
查儿酮异构酶（CHI）
二氢黄酮醇还原酶（DFR）
类黄酮糖基转移酶（UFGT）
酶活性测定方法
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职称材料
矮牵牛查尔酮黄烷酮异构酶(chiA)基因启动子的克隆和测序
被引量：
2
3
作者
范惠琴
姚泉洪
+1 位作者
黄晓敏
彭日荷
《上海农业学报》
CSCD
1998年第3期14-16,共3页
通过PCR扩增，从矮牵牛中克隆了能在花瓣、花药、花粉中特异表达的查尔酮黄烷酮异构酶（chiA）基因启动子，序列分析表明，该启动子含1305个核苷酸，与国外报道的序列完全一致。
关键词
特异表达
查尔酮
chiA基因
启动子
矮牵牛
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职称材料
题名
三叶青查尔酮异构酶基因的克隆及序列分析
1
作者
邓思珊
刘洪旭
马丽红
机构
福建省医学科学研究院、福建省医学测试重点实验室
出处
《中国医药科学》
2023年第17期26-29,共4页
基金
福建省医学创新课题(2020CXA021)
福建省属公益类科研院所基本专项(2022R1012002)。
文摘
目的 阐明三叶青中查尔酮异构酶(CFI)的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制。方法取三叶青新鲜叶片提取总RNA,以所提的总RNA为模板,随机引物(N8)作为引物进行逆转录反应;以逆转录产物为模板,使用正向引物CFI-F与反向引物CFI-R进行PCR;PCR产物经回收纯化后与克隆载体pMD18-T连接并转化至大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆进行测序。结果 测序结果分析显示,该基因片段长为760 bp,含一个长为714 bp的开放阅读框,编码237个氨基酸(NCBI登录号:OP358477)。NCBI数据库BLAST搜索分析显示,该基因编码产物与CFI高度同源;进化树分析表明三叶青的CFI基因与大齿牛果藤的亲缘关系最近。结论 本研究为进一步探究三叶青黄酮类成分的生物合成机制奠定基础。
关键词
三叶青
查尔酮异构酶
分子克隆
生物信息学分析
Keywords
Tetrastigma
hemsleyanum
Diels
et
Gilg
chalcone
-
flavanone
isomerase
Molecular
clone
Bioinformatics
analysis
分类号
S567.239 [农业科学—中草药栽培]
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职称材料
题名
荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法
被引量：
7
2
作者
李晓静
黄旭明
胡桂兵
王惠聪
机构
华南农业大学园艺学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期531-536,共6页
基金
国家自然科学基金(30971985)
现代农业(荔枝龙眼)产业技术体系(nycytx-32)
公益性行业(农业)科研专项(20090344-5)
文摘
为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查儿酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)]的测定方法,指出了酶液的纯化、酶活性的保护以及反应底物的溶解方法等对试验结果的稳定性和可靠性的影响,介绍了试验过程中常遇到的问题和具体的解决方法以及试验过程中的注意事项.应用改进后的方法测定荔枝发育过程中果皮PAL、CHI、DFR和UFGT的酶活性,结果发现活性变化趋势与前人的报道基本一致.改进的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性的测定方法可靠,可为相关的研究提供重要的参考.
关键词
荔枝
酚类代谢酶
苯丙氨酸解氨酶（PAL）
查儿酮异构酶（CHI）
二氢黄酮醇还原酶（DFR）
类黄酮糖基转移酶（UFGT）
酶活性测定方法
Keywords
Litchi
chinensis
phenolic
metabolism
phenylalanine
ammonia-lyase
（PAL）
chalcone
flavanone
isomerase
（CHI）
dihydroflavonol
4-reductase
（DFR）
UDP-glucose：
flavonoid
3-O-glucosyhransferase
（UFGT）
enzyme
activity
assay
method
分类号
Q946.5 [生物学—植物学]
S667.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
矮牵牛查尔酮黄烷酮异构酶(chiA)基因启动子的克隆和测序
被引量：
2
3
作者
范惠琴
姚泉洪
黄晓敏
彭日荷
机构
上海市农业遗传育种重点实验室
出处
《上海农业学报》
CSCD
1998年第3期14-16,共3页
基金
上海市科技发展基金!973913011
文摘
通过PCR扩增，从矮牵牛中克隆了能在花瓣、花药、花粉中特异表达的查尔酮黄烷酮异构酶（chiA）基因启动子，序列分析表明，该启动子含1305个核苷酸，与国外报道的序列完全一致。
关键词
特异表达
查尔酮
chiA基因
启动子
矮牵牛
Keywords
Specific
expression
chalcone
flavanone
isomerase
(chiA)
Promoter
Petunia
分类号
S681.61 [农业科学—观赏园艺]
Q943 [农业科学—园艺学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
三叶青查尔酮异构酶基因的克隆及序列分析
邓思珊
刘洪旭
马丽红
《中国医药科学》
2023
0
下载PDF
职称材料
2
荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法
李晓静
黄旭明
胡桂兵
王惠聪
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
7
下载PDF
职称材料
3
矮牵牛查尔酮黄烷酮异构酶(chiA)基因启动子的克隆和测序
范惠琴
姚泉洪
黄晓敏
彭日荷
《上海农业学报》
CSCD
1998
2
下载PDF
职称材料
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