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巨核细胞/血小板E1A激活基因阻遏子基因敲除小鼠构建及胎肝巨核细胞诱导分化
1
作者 刘晶 梅竹 +4 位作者 周婷 刘春影 刘丹 闫承慧 宋海旭 《临床军医杂志》 CAS 2024年第2期156-158,162,共4页
目的构建巨核细胞/血小板特异性E1A激活基因阻遏子基因(Creg1)敲除小鼠,并诱导小鼠胚胎胎肝巨核细胞的分化,为研究Creg1在巨核细胞分化和血小板生理功能中的作用提供实验工具及方法。方法将雌性Creg1^(flox/flox)小鼠与雄性血小板因子4(... 目的构建巨核细胞/血小板特异性E1A激活基因阻遏子基因(Creg1)敲除小鼠,并诱导小鼠胚胎胎肝巨核细胞的分化,为研究Creg1在巨核细胞分化和血小板生理功能中的作用提供实验工具及方法。方法将雌性Creg1^(flox/flox)小鼠与雄性血小板因子4(Pf4)-Cre^(+)小鼠繁育,获得Creg1flox/wtPf4-Cre^(+)小鼠,进一步交配获得巨核细胞/血小板特异性Creg1敲除小鼠(Creg1^(flox/flox)Pf4-Cre^(+),简写为Creg1^(-/-))。采用聚合酶链式反应及琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定。取Creg1^(flox/flox)和Creg1^(-/-)孕龄约15 d小鼠的胎肝,体外培养胎肝细胞4 d,加入血小板生成素,光镜下观察两组巨核细胞形态和大小的区别。结果本研究成功构建了Creg1^(-/-)小鼠。与Creg1^(flox/flox)小鼠比较,Creg1^(-/-)小鼠巨核细胞中Creg1 mRNA的表达量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与Creg1^(flox/flox)小鼠比较,Creg1^(-/-)小鼠胎肝巨核细胞诱导分化4 d时,光镜下观察发现,巨核细胞的直径明显变小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Creg1^(-/-)小鼠作为研究巨核细胞和血小板相关疾病发生机制的实验工具鼠,可能揭示尚未发现和阐明的重要病理生理学机制,为临床治疗血小板疾病提供理论基础支持。 展开更多
关键词 E1A激活基因阻遏子基因 巨核细胞 血小板 分化
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人E1A激活基因阻遏子-Fc重组蛋白在小鼠肥胖中作用研究
2
作者 田孝祥 刘丹 +2 位作者 王硕 宋海旭 闫承慧 《临床军医杂志》 CAS 2020年第10期1140-1143,共4页
目的探讨自主制备的人E1A激活基因阻遏子(CREG)-Fc重组蛋白对小鼠肥胖的影响。方法将30只8周龄雄性C57 BL/6小鼠随机平均分为3组:正常饮食(ND)组、高脂饮食(HFD)组及CREG-Fc蛋白处理组。CREG-Fc采用皮下注射方式,每2周给药1次,剂量2100... 目的探讨自主制备的人E1A激活基因阻遏子(CREG)-Fc重组蛋白对小鼠肥胖的影响。方法将30只8周龄雄性C57 BL/6小鼠随机平均分为3组:正常饮食(ND)组、高脂饮食(HFD)组及CREG-Fc蛋白处理组。CREG-Fc采用皮下注射方式,每2周给药1次,剂量2100μg/kg,持续12周。第12周时,测量并比较3组小鼠的体质量、体脂含量及代谢情况。12周后处死小鼠,测定小鼠血脂谱、血糖、胰岛素、转氨酶及白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果与ND组比较,HFD组小鼠的体质量显著升高,体脂含量增加,血脂、血糖、转氨酶、胰岛素及IL-1β水平均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HFD组比较,CREG-Fc蛋白处理组小鼠的体质量显著降低,体脂含量减少,代谢率升高,血脂、血糖、转氨酶、胰岛素及IL-1β水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人CREG-Fc重组蛋白可显著减轻小鼠肥胖及肥胖相关代谢异常。 展开更多
关键词 E1A激活基因阻遏子-Fc 融合蛋白 肥胖 代谢异常
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