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黄芪多糖对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤生长及HSP70表达的影响 被引量:51
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作者 谷俊朝 余微波 +2 位作者 王宇 张忠涛 屈翔 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第20期1534-1537,共4页
目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白... 目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白在乳腺肿瘤病理生理机制中的作用,了解黄芪多糖对乳腺肿瘤生物学行为的影响,从分子生物学水平探索其作用机制。方法:将对数生长期的乳腺癌细胞MA891接种于TA2小鼠皮下,模型建立后随机分为两组,每组10只,生理盐水组(A组)和黄芪多糖组(B组),黄芪多糖组小鼠自接种后第2天,给予成人用量6倍的黄芪多糖粉针剂溶于生理盐水中皮下注射(200mg/kg),而生理盐水组则给予同等量的生理盐水皮下注射,连续治疗23d活杀,MTT法检测小鼠淋巴细胞活性,对比肿瘤瘤质量变化,免疫组化法检测HSP70、VEGF和Bcl-2表达。结果:治疗组小鼠瘤质量有所减轻(抑瘤率为13·56%),但两组相比差异无统计学意义(3·32±1·96vs2·87±1·65,P>0·05),而治疗组淋巴细胞活性显著提高(吸光度OD570值分别为1·941±0·025vs1·985±0·023,P<0·05),肿瘤组织HSP70、VEGF和Bcl-2表达均有显著降低(光密度分别为0·28±0·37vs0·21±0·22,P<0·05;0·31±0·41vs0·23±0·15,P<0·05;0·26±0·11vs0·22±0·16,P<0·05)。结论:黄芪多糖提高了荷瘤小鼠淋巴细胞免疫活性,并抑制了肿瘤血管生成及细胞凋亡相关因子的表达,体现出一定的抑瘤作用,而热休克蛋白70亦参与了乳腺肿瘤的病理生理过程,并与肿瘤血管生成和细胞凋亡存在密切的关系。 展开更多
关键词 黄芪/药理学 多糖类/药理学 乳腺肿瘤 乳房肿瘤 实验性 细胞系 热休克蛋白质70 肿瘤模型 动物 小鼠
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Tumor blood vessels formation in osteosarcoma:vasculogenesis mimicry 被引量:45
2
作者 蔡宣松 贾永伟 +1 位作者 梅炯 汤如勇 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期94-98,共5页
BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarco... BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarcoma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. METHODS: Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarcoma were also performed. RESULTS: Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicle of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. CONCLUSION: These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry. 展开更多
关键词 Bone Neoplasms cell line tumor Collagen Humans IMMUNOHISTOCHEMISTRY Neovascularization Pathologic OSTEOSARCOMA Research Support Non-U.S. Gov't
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木犀草素抗肿瘤细胞增殖及增敏抗肿瘤药物作用研究 被引量:39
3
作者 王洪燕 全康 +2 位作者 蒋燕灵 吴加国 唐修文 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-36,共7页
目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀... 目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀草素对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人子宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃腺癌细胞(AGS)、人胃癌细胞(MGC-803)的抗增殖作用均<20%,对人结肠癌细胞(Caco2)和人肝癌细胞(HepG2)的抗增殖作用约20%。Bexarotene单一用药时对Hela细胞抑制率达50%(IC50)的浓度约为2μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约0.2μmol/L,5μmol/L木犀草素与0.1μmol/L Bexarotene联用对Hela细胞的抗增殖作用达44%,Bexarotene与木犀草素联用在MGC-803、HepG2、A549细胞中增敏较小,在Caco2和MCF-7细胞中无增敏作用;顺铂单一用药时对Hela细胞的IC50>30μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约3μmol/L,联用后在MGC-803、HepG2和A549中增敏较小;博来霉素单一用药时对Hela细胞的IC50>100μmol/L,对A549细胞的IC50约为100μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后Hela细胞的IC50约为1μmol/L,与10μmol/L木犀草素联用后A549细胞的IC50约为10μmol/L。木犀草素与格列卫联用在MGC-803、HepG2、A549和AGS中增敏较小。结论:木犀草素在低于10μmol/L浓度时,对肿瘤细胞体外抗增殖作用较小。低浓度(5μmol/L^10μmol/L)的木犀草素在不同的肿瘤细胞中对抗肿瘤药的增敏作用强度不同,在Hela细胞中增敏作用最显著。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 药物作用 木犀草素 投药和剂量 博来霉素 抗肿瘤药 治疗应用 顺铂 药物疗法 联合 药物协同作用
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模拟IMRT模式的生物效应研究初探 被引量:30
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作者 钱立庭 杨伟志 刘新帆 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期431-433,共3页
目的模拟临床调强适形放疗的照射模式对人大肠癌细胞系HT-29进行生物效应变化的初步研究.方法采用指数生长期的HT-29细胞制成单细胞悬液,于接种后12 h内进行不同模式和剂量的照射.分成3个照射组:(1)急速照射组(包括0、1、2、3、5、7、1... 目的模拟临床调强适形放疗的照射模式对人大肠癌细胞系HT-29进行生物效应变化的初步研究.方法采用指数生长期的HT-29细胞制成单细胞悬液,于接种后12 h内进行不同模式和剂量的照射.分成3个照射组:(1)急速照射组(包括0、1、2、3、5、7、10Gy共7个剂量点),剂量点的照射完成时间为0~5 min,剂量率为6 Gy/min;(2)IMRT照射模式组(包括15 min完成照射组及30min完成照射组),剂量率同上,每组所含照射剂量点同急速照射组,其中15min和30min照射组指各剂量点完成照射时间分别是15 min和30min.采用成克隆分析法计算存活分数,运用多靶单击数学模型拟合曲线,求出Do、Dq等参数值.结果急速照射组、15 min照射组和30 min照射组的Dq值分别为1.54、1.74和1.72Gy;Do值分别为0.82、0.89和1.00Gy;SF2分别为0.448、0.548和0.558.结论 IMRT模式下随分次照射时间的延长,相对剂量率降低,从而导致生物效应下降. 展开更多
关键词 调强适形放射疗法 细胞存活曲线 细胞系 肿瘤 生物效应 模拟临床 效应研究 IMRT HT-29细胞 照射剂量
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GRP78在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用 被引量:21
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作者 张海燕 刘宝琴 +2 位作者 邓娓娓 都镇先 王华芹 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第18期1379-1382,共4页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:对2种人甲状腺未分化癌细胞系FRO、ARO分别设空白对照组和蛋白酶体抑制剂处理组;及siGRP78、随机序列核酸siRNA和错位型siGRP78组。利用蛋白酶体... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:对2种人甲状腺未分化癌细胞系FRO、ARO分别设空白对照组和蛋白酶体抑制剂处理组;及siGRP78、随机序列核酸siRNA和错位型siGRP78组。利用蛋白酶体抑制剂MG132(1μmol/L)、PSI(10nmol/L)和EPOX(5nmol/L)作用2种细胞系,实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞GRP78 mRNA、蛋白表达。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:蛋白酶体抑制剂处理24h后,2种细胞系中GRP78 mRNA及蛋白水平保持相似增长高峰,为空白对照组2~3倍(P<0.01);siGRP78转染24h,细胞总GRP78 mRNA丢失>80%,转染48h,GRP78蛋白总量丢失>75%。蛋白酶体抑制剂MG132作用后,ARO、FRO细胞凋亡率分别为8.3%和78.3%;当siGRP78靶向沉默GRP78后,蛋白酶体抑制剂诱导2种细胞凋亡率显著增加,ARO细胞凋亡率提高5倍左右(P<0.01)。结论:2种甲状腺癌细胞系存在GRP78基因表达,不同程度干扰蛋白酶体抑制剂凋亡诱导作用;沉默GRP78基因表达可提高蛋白酶体抑制剂对肿瘤细胞杀伤率。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤/病理学 流式细胞术 细胞凋亡 细胞系 肿瘤
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温下方逆转A549/DDP细胞的多药耐药及对膜表面蛋白表达的影响 被引量:16
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作者 季旭明 欧阳兵 +2 位作者 王春燕 张引强 江涛 《中国药物与临床》 CAS 2006年第12期885-888,T0001,共5页
目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,... 目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果温下方含药血清能明显逆转A549/DDP细胞的多药耐药,增敏倍数为2~2.5倍。并可明显降低P-gp、LRP、MRP蛋白表达。结论温下方通过降低P-gp、LRP、MRP的表达以增强A549/DDP对化疗药的敏感性,逆转肺腺癌细胞的多药耐药。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 糖蛋白 温下方 多药耐药相关蛋白
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维甲酸对胃癌细胞生长抑制及凋亡的诱导作用 被引量:12
7
作者 周艳红 徐瑞成 呼文亮 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第5期339-343,共5页
目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细... 目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:9-cis-RA可抑制MGC80-3细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为8·07×10-6mol/L;显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;10-5mol/L浓度的9-cis-RA药物作用后96h可明显诱导MGC80-3细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带;流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰,G0/G1期细胞百分率明显升高,由对照组的(61·5±2·2)%增加到(74·3±4·7)%,F=149·795,P=0·000;同时处于S期的细胞数减少,由对照组的(26·3±1·3)%减少到(17·2±1·4)%,F=143·936,P=0·000。细胞周期出现G1期阻滞。结论:9-cis-RA对MGC80-3细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤/病理学 维甲酸/药理学 细胞系 肿瘤 细胞凋亡 比色法 流式细胞术
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无血清悬浮法培养MCF-7细胞系并筛选该细胞系中肿瘤干细胞相关亚群的初步研究 被引量:14
8
作者 许立生 王水 +1 位作者 许健 杜青 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第10期736-740,共5页
目的:研究无血清培养基悬浮培养MCF-7乳腺癌细胞系,筛选并鉴定MCF-7乳腺癌细胞系中的肿瘤干细胞相关亚群。方法:应用乳腺癌培养基在无血清的条件下悬浮培养MCF-7乳腺癌细胞系。通过无血清培养筛选乳腺癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群,将其... 目的:研究无血清培养基悬浮培养MCF-7乳腺癌细胞系,筛选并鉴定MCF-7乳腺癌细胞系中的肿瘤干细胞相关亚群。方法:应用乳腺癌培养基在无血清的条件下悬浮培养MCF-7乳腺癌细胞系。通过无血清培养筛选乳腺癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群,将其接种于含血清培养基,观察分化。应用单克隆形成实验、表面标志检测、HOECHST33342染色检测来确定培养出的细胞中肿瘤干细胞的比例及其培养后肿瘤干细胞含量的变化。结果:乳腺癌MCF-7细胞系中有约2.12%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由漂浮的细胞球。细胞球可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,贴壁分化后细胞形态与直接在含血清培养基中培养的MCF-7无明显差别。流式细胞仪表面标志检测,细胞球中约含83.13%表达CD24-CD44+的细胞,HOECHST33342染色提示细胞球中约含10.06%的侧亚群(sidepopulation)细胞。结论:MCF-7细胞系可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系。该细胞系中含有比例较低的具有增殖和分化能力的乳腺癌干细胞相关亚群。表面标志以及HOECHST33342检测差异提示细胞球中仅约1/8细胞具有干细胞的功能。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理学 肿瘤干细胞/病理学 细胞系 肿瘤 细胞培养技术/方法
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建立胃癌实验动物模型方法的研究 被引量:12
9
作者 贺岩 李莹杰 +2 位作者 王齐敏 刘淼 金晓明 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第4期251-254,I0001,共5页
目的通过对人低分化胃癌细胞系SGC-7901状态和接种细胞数目的研究,建立良好的皮下接种胃癌的动物模型。方法采用腹腔注射SGC-7901细胞,使裸鼠形成腹水;光镜及电镜观察细胞状态;将购买的SGC-7901细胞以及形成腹水后的肿瘤细胞分别以1... 目的通过对人低分化胃癌细胞系SGC-7901状态和接种细胞数目的研究,建立良好的皮下接种胃癌的动物模型。方法采用腹腔注射SGC-7901细胞,使裸鼠形成腹水;光镜及电镜观察细胞状态;将购买的SGC-7901细胞以及形成腹水后的肿瘤细胞分别以1×108、1×107和1×106个进行裸鼠皮下接种,每组接种5只。观察其肿瘤形成时间、大小、状态及病理学变化。结果SGC-7901细胞接种裸鼠形成腹水后进行培养的肿瘤细胞增殖状态发生改变;购买的SGC-7901细胞以1×108及1×107接种裸鼠,在第21天肿瘤组织中央均出现出血和坏死;1×106的裸鼠第21天未见肉眼可见的肿瘤形成。腹水培养的肿瘤细胞,接种1×108的裸鼠在第21天肿瘤组织中央可见大面积的出血和坏死;接种1×107及1×106的裸鼠在第21天均未见出血和坏死,接种1×107的肿瘤组织体积较大。结论SGC-7901细胞接种裸鼠形成腹水后的细胞,更容易建立SGC-7901细胞皮下接种的胃癌动物模型,其中以接种细胞数为1×107的肿瘤生长较好,更适用于胃癌的实验研究。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 胃肿瘤 动物模型
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吉西他滨对非小细胞肺癌细胞放射增敏的实验研究 被引量:14
10
作者 苗劲柏 张仁尧 +3 位作者 申文江 侯生才 陈鸿义 胡滨 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期325-328,共4页
目的 研究低浓度吉西他滨对非小细胞肺癌细胞系A5 4 9(wtp5 3)的放射增敏作用、并探讨用药后最佳放射时间。方法 ①以不同浓度的吉西他滨与A5 4 9细胞作用 2 4h ,MTT法选择生长抑制率≤ 10 %的药物浓度 (IC10 )。②将细胞分为对照组 (... 目的 研究低浓度吉西他滨对非小细胞肺癌细胞系A5 4 9(wtp5 3)的放射增敏作用、并探讨用药后最佳放射时间。方法 ①以不同浓度的吉西他滨与A5 4 9细胞作用 2 4h ,MTT法选择生长抑制率≤ 10 %的药物浓度 (IC10 )。②将细胞分为对照组 (Ct)、单纯用药组 (Ch)、单纯照射组 (R1、R2 )、未弃药照射组 (CR)及弃药后照射组 (DCR1、DCR2 )。R1组行单纯60 Co2Gy照射 ;Ch组单纯用药 ;CR组及DCR1组均用IC10 浓度作用 2 4h ,CR组于 2 4h末、DCR1分别于弃药后 30min、1、3、6、12及 2 4h予60 Co2Gy照射。比较细胞存活分数 ,选择最佳弃药时间 (T)。③用IC10 药物浓度作用DCR2 2 4h ,于弃药后T时间经60 Co0 .5、1.0、2 .0、4 .0、6 .0、8.0Gy剂量照射 ,绘制细胞存活曲线 ;与R2 组 (同剂量单纯照射 )比较 ,计算增敏比 (D0 值比和Dq 值比 )。结果 IC10 浓度吉西他滨的放射增敏作用在弃药后 3h最为明显 [增敏比分别为 1.88(D0 值比 )、1.90 (Dq 值比 ) ];弃药 6h后与对照组比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;这种增敏作用在照射剂量较低时 ( 0 .5、1.0Gy)即已明显表现出来。结论 低浓度吉西他滨对离体非小细胞肺癌A5 4 9(wtp5 3)细胞系具有较好的放射增敏作用 ,且最佳照射时间为弃药后 3h。 展开更多
关键词 吉西他滨 非小细胞肺癌 癌细胞 放射增敏 实验研究
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子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体表达的初步研究 被引量:10
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作者 王志启 王建六 +3 位作者 魏丽惠 赵丹 高敏 郭瑞霞 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期471-475,共5页
目的探讨子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体的表达情况。方法对子宫内膜癌高分化细胞系Ishikawa和中分化细胞系HEC-1A的细胞膜和整个细胞(包括细胞膜、细胞质和细胞核)雌激素受体(ER)α、β表达情况进行研究。用来检测细胞膜雌激素受体... 目的探讨子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体的表达情况。方法对子宫内膜癌高分化细胞系Ishikawa和中分化细胞系HEC-1A的细胞膜和整个细胞(包括细胞膜、细胞质和细胞核)雌激素受体(ER)α、β表达情况进行研究。用来检测细胞膜雌激素受体的细胞经固定处理,用来检测整个细胞ER的细胞经渗透处理,分别对固定与渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞进行间接免疫荧光染色,并在荧光显微镜下观察ER的分布。另对Ishikawa和HEC-1A活细胞(用来检测细胞膜雌激素受体)、渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞(用来检测整个细胞ER)进行间接免疫荧光染色,并用流式细胞仪检测ER的相对荧光强度来表示ER的表达强度。以上实验均以未用一抗的细胞为阴性对照。结果荧光显微镜下观察显示,固定处理的Ishikawa和HEC-1A细胞膜均可见ERα和ERβ标记的荧光,渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞,除细胞膜外,在细胞内部也可见ERα和ERβ标记的荧光。流式细胞仪检测显示,Ishikawa活细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为1.09±0.21和1.27±0.33,高于阴性对照(均为1.00),但两者分别与阴性对照比较,差异均无统计学意义(P>0.05);渗透处理的Ishikawa细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为4.21±0.34和4.69±1.96,均高于活细胞,两者分别与活细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。HEC-1A活细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为1.58±0.13和1.49±0.04,高于阴性对照(均为1.00),与阴性对照分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);渗透处理的HEC-1A细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为2.34±0.33和2.52±0.15,均高于活细胞,两者分别与活细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞中均存在细胞膜雌激素受体。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 细胞膜 受体 雌激素 细胞系 肿瘤
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四嗪二甲酰胺对肺癌细胞株A549的体内外作用 被引量:13
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作者 周永列 胡惟孝 +5 位作者 吕亚萍 邱莲女 王文松 杨忠愚 刘建栋 饶国武 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期26-34,共9页
为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制,将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法,观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作... 为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制,将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法,观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、AnnexinV/PI双标记、Hoechst33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。腹腔注射ZGDHu-1后观察其对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。用RT-PCR和流式细胞术观察A549细胞bcl-2,bax,p53基因和蛋白质的表达改变。结果表明,ZGDHu-1能抑制A549细胞的增殖和活力,呈现作用时间和剂量的依赖关系。A549细胞经ZGDHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,AnnexinV+/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。ZGDHu-1以10,20及40mg.kg-1剂量给裸鼠体内用药14d后,移植瘤生长抑制率分别为43.7%,56.9%和60.0%。A549细胞经ZGDHu-1作用后,bcl-2基因和蛋白有所下调,但主要是上调bax基因和蛋白,导致bax/bcl-2比值明显增高,p53基因和蛋白表达也上调,均呈现剂量依赖性。ZGDHu-1在体内能明显抑制移植瘤的生长,体外通过诱导细胞凋亡抑制A549细胞增殖,其机制可能与上调bax和p53基因的表达有关。 展开更多
关键词 四嗪二甲酰胺 肺癌 细胞株A549 增殖 细胞凋亡 肿瘤移植
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多糖诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展 被引量:10
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作者 赵圆 尚德静 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第6期472-475,共4页
多糖是普遍存在于动物、植物和微生物中的大分子物质,在细胞识别、信号传导、调节肌体免疫及细胞的迁移、增殖、分化和代谢等方面均有十分重要的作用。近年来众多研究结果表明,多糖可抗肿瘤活性,抑制多种肿瘤细胞生长。究其机制,多糖除... 多糖是普遍存在于动物、植物和微生物中的大分子物质,在细胞识别、信号传导、调节肌体免疫及细胞的迁移、增殖、分化和代谢等方面均有十分重要的作用。近年来众多研究结果表明,多糖可抗肿瘤活性,抑制多种肿瘤细胞生长。究其机制,多糖除可诱导免疫因子生成,增强机体免疫功能外,还能直接杀死肿瘤细胞。通过阐述动物、植物和微生物多糖可以诱导多种肿瘤细胞凋亡,说明多糖具有广谱抑制肿瘤细胞生长的作用;初步探讨了多糖诱导肿瘤细胞凋亡的机制,例如激活死亡受体途径和线粒体途径,调控凋亡基因,调节端粒酶和拓扑酶等。 展开更多
关键词 多糖类 细胞系 肿瘤 细胞凋亡 综述文献
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雌二醇诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF和bFGF对MAPK通路的影响 被引量:14
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作者 卢燕琼 蒋斯 +2 位作者 张洁清 宋红林 李力 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期925-931,共7页
目的 探讨雌二醇诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞生成的血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中主要基因蛋白的影响.方法 实验分为4组:雌二醇组(E2组,加入1 μmol/L的雌... 目的 探讨雌二醇诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞生成的血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中主要基因蛋白的影响.方法 实验分为4组:雌二醇组(E2组,加入1 μmol/L的雌二醇作用30 min),抑制剂组[包括Bibf1120组:加入10 μmol/L的VEGF受体抑制剂——Bibf1120; Ponatinib组:加入2.5 μmol/L的bFGF受体抑制剂——Ponatinib; U0126组:加入10μmol/L的MAPK激酶(MEK)特异性抑制剂——U0126.各组均预处理1 h],抑制剂+E2组(包括Bibf1120+E2组、Ponatinib+E2组和U0126+E2组,各抑制剂预处理1h后,加入1μmol/L的雌二醇作用30 min);对照组(仅加入无血清DMEM培养基).(1)以不同浓度(分别为0.01、0.1、1、10、100μmol/L)雌二醇作用于Ishikawa细胞后,采用蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白活化水平.(2)采用荧光定量PCR技术检测各组细胞中VEGF、bFGF、MEK1/2、ERK1/2mRNA的表达,蛋白印迹法检测各组细胞中VEGF、bFGF蛋白的表达及磷酸化NEK1/2(p-MEK1/2)、p-ERK1/2蛋白活化水平,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期比例,体外穿膜实验检测各组细胞的迁移能力.结果 (1)不同浓度(分别为0.01、0.1、1、10、100 μmo1/L)的雌二醇作用30 min后Ishikawa细胞中p-ERK1/2蛋白的活化水平分别为0.16±0.03、0.10±0.03、0.41±0.04、0.19±.0.03、0.19±0.03,均明显高于对照组的0.05±0.00 (P<0.05),且雌二醇浓度为1μmol/L时其活化水平最高.(2)E2组细胞中VEGF、bFGF mRNA及蛋白的表达水平均高于对照组,分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Bibf1120+E2组细胞中VEGF mRNA及蛋白的表达水平分别与E2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).E2组MEK1/2、ERK1/2mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白活化水平均显著高于对照组(P<0.05);Bibf1120+E2组、Ponatinib+E2� 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 细胞系 肿瘤 血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子2 丝裂原激活蛋白激酶类 雌二醇
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RNA干扰技术逆转卵巢上皮性癌细胞多药耐药的研究 被引量:9
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作者 楼江燕 彭芝兰 +3 位作者 郑莹 王和 何斌 王红静 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期413-416,共4页
目的探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧光定量RT... 目的探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧光定量RT-PCR技术和流式细胞仪分别测定转染前后细胞MDR1mRNA及糖蛋白P-gp表达的变化;三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测转染前后细胞对顺铂、氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇药物敏感性(以ATP抑制率判断)的变化情况。结果转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞MDR1mRNA的抑制率分别为26·42%、84·00%、78·43%、45·85%和0;转染后48h MDR1mRNA的抑制率达到最高峰。转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞P-gp的抑制率分别为16·71%、49·64%、85·23%、65·98%和9·44%;转染后72h P-gp的抑制率达到最高。转染MDR1siRNA后,能够明显提高OVCAR8/TR细胞对紫杉醇和阿霉素的敏感性,在紫杉醇的作用下,转染前后OVCAR8/TR细胞的ATP抑制率分别为(25·8±3·1)%和(78·0±9·8)%,转染前后比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论在OVCAR8/TR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1mRNA和P-gp的表达,并能恢复其对紫杉醇和阿霉素的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的多药耐药。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 卵巢肿瘤 基因 MDR 细胞系 肿瘤 转染
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X射线照射对人鼻咽癌细胞株MDR1及P-gp表达影响的研究 被引量:13
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作者 隋晓梅 王若雨 +2 位作者 朱勤伟 李静 邹丽娟 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第8期569-571,586,共4页
目的:探讨X射线照射前后鼻咽癌CNE-1细胞多药耐药基因(MDR1)及其糖蛋白(P-gp)的表达随时间变化情况,及其照射与鼻咽癌细胞多药耐药的关系。方法:对CNE-1细胞进行X射线照射。利用RT-PCR检测照射前后细胞MDR1的表达;Western blotting检测... 目的:探讨X射线照射前后鼻咽癌CNE-1细胞多药耐药基因(MDR1)及其糖蛋白(P-gp)的表达随时间变化情况,及其照射与鼻咽癌细胞多药耐药的关系。方法:对CNE-1细胞进行X射线照射。利用RT-PCR检测照射前后细胞MDR1的表达;Western blotting检测照射前后P-gp的表达;MTT法检测照射前后顺铂对细胞的半数抑制率。结果:MTT法检测照射前CNE-1细胞的IC50值为(1.11±0.05)μg/mL,照射后第7、14、21、28和35天的IC50值均比照射前增高,其值分别为(1.56±0.10)、(2.41±0.11)、(3.24±0.13)、(2.65±0.09)和(1.83±0.15)μg/mL;RT-PCR检测照射前CNE-1细胞MDR1的半定量值为0.47±0.02,照射后第7、14、21、28和35天MDR1的表达比照射前明显增高,其值分别为0.63±0.02、0.86±0.05、0.75±0.07、0.57±0.03和0.58±0.04;Westernblotting检测照射前CNE-1细胞P-gp的半定量值为15.55±1.02,照射后第14、21天比照射前明显增高,其值分别为23.29±1.83、28.98±2.14。结论:X射线照射可引起CNE-1细胞MDR1及P-gp表达增强,同时CNE-1细胞对顺铂产生抵抗。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 细胞系 肿瘤 基因 MDR/辐射效应 抗药性 肿瘤/辐射效应
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黄连素对脱氧胆酸诱导的HT-29人结肠癌细胞增殖的抑制作用及机制研究 被引量:13
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作者 王邦茂 翟春颖 +3 位作者 方维丽 曹晓沧 姜葵 刘文天 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期749-752,共4页
目的观察黄连素对脱氧胆酸(DCA)诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的机制。方法200/μmol/LDCA加到HT-29细胞培养液中,同时给予不同浓度黄连素(1、5、10和20μmol/L),采用MTT法测定细胞增殖;RT-PCR法检测环氧合酶-2(CO... 目的观察黄连素对脱氧胆酸(DCA)诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的机制。方法200/μmol/LDCA加到HT-29细胞培养液中,同时给予不同浓度黄连素(1、5、10和20μmol/L),采用MTT法测定细胞增殖;RT-PCR法检测环氧合酶-2(COX-2)mRNA,免疫组化染色法检测细胞COX-2表达,放免法检测前列腺素E2(PGE2)含量。采用t检验和单因素方差分析。结果DCA作用HT-29细胞6 h,COX-2蛋白表达阳性率较对照组明显升高(65.5%±5.6%比6.2%±1.1%),PGE2合成增加(24.1 ng/L±1.4 ng/L比10.6 ng/L±0.8 ng/L),1μmol/L黄连素对DCA诱导的HT-29细胞作用6 h可抑制细胞增殖,抑制率为7.4%±3.5%。黄连素浓度≥1μmol/L时,可抑制DCA诱导的COX-2 mRNA表达,并抑制PGE2合成,上述作用均呈浓度-时间依赖性。结论黄连素可抑制DCA诱导的HT-29人结肠癌细胞增殖,抑制COX-2 mRNA和蛋白表达及PGE2合成,这可能是黄连素抑制HT-29细胞增殖的机制之一。 展开更多
关键词 黄连素 脱氧胆酸 细胞系 肿瘤 环氧合酶-2
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阻断PI3K/AKT通路对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究 被引量:10
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作者 傅深 孙宜 +2 位作者 章青 邵雨卉 刘泰福 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2006年第6期467-470,共4页
目的研究抑制磷脂酰肌醇3激酶和(或)蛋白激酶B(PI3K/AKT)生存传导路径是否改变乳腺癌细胞的放射敏感性。方法用乳腺癌细胞细胞株MCF7为实验对象,分别接受单纯放射、Ly294002(PI3K抑制剂)和二者结合处理。通过Western印记法证实Ly294002... 目的研究抑制磷脂酰肌醇3激酶和(或)蛋白激酶B(PI3K/AKT)生存传导路径是否改变乳腺癌细胞的放射敏感性。方法用乳腺癌细胞细胞株MCF7为实验对象,分别接受单纯放射、Ly294002(PI3K抑制剂)和二者结合处理。通过Western印记法证实Ly294002可下调AKT活性。采用成克隆法定量分析细胞增殖性死亡。通过半胱天冬酶-3(caspase-3)活性评估细胞凋亡。结果单纯Ly294002(5μmol/L)可抑制AKT的磷酸化,而单纯放射对AKT的活性无明显影响,二者结合可提高对AKT活性的抑制作用。Ly294002(5μmol/L)在放射前与细胞作用1h及放射后作用10d均可提高MCF7细胞对放射的敏感性。Ly294002结合放射可增加MCF7细胞增殖性死亡,SF_4值的放射增敏比为1.25,D_o值的放射增敏比为1.42。Ly294002可增加MCF7细胞放射后诱导的细胞凋亡。结论抑制PI3K通过降低AKT活性,增加MCF7细胞对放射的敏感性,为筛选放射敏感剂进行临床实验提供了依据。 展开更多
关键词 放射敏感性 细胞系 乳腺肿瘤 LY294002 磷脂酰肌醇3激酶和(或)蛋白激酶B
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掌叶半夏提取物的有效部位不同给药途径对人宫颈癌细胞株CaSki裸小鼠移植瘤的抑制作用 被引量:11
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作者 张明星 李桂玲 徐丛剑 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期199-202,共4页
目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内最佳给药途径。方法:建立Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹... 目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内最佳给药途径。方法:建立Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹腔注射组、皮下注射组、顺铂阳性对照组。测量肿瘤径线,计算肿瘤体积并描绘肿瘤生长曲线。药物处理21d,第22天颈椎脱臼处死裸小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率。HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组化检测移植瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:灌胃组、腹腔注射组、顺铂阳性对照组裸小鼠移植瘤重量明显小于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05),抑瘤率分别为38.71%,31.86%,45.92%。且灌胃组、腹腔注射组移植瘤组织Ki-67表达明显低于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05)。结论:PE能够抑制Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的生长,其体内实验的最佳给药途径可以是灌胃或者腹腔注射,推荐实验中采取灌胃方式。抑制Ki-67的表达可能是PE体内抑瘤作用机制之一。 展开更多
关键词 掌叶半夏提取物的有效部位 宫颈癌 Ca Ski细胞株 移植瘤 裸小鼠 Ki-67
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RNA同时干扰四个不同基因对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的实验研究 被引量:10
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作者 宋英 董明敏 杨海峰 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期751-758,共8页
目的 应用RNA干扰技术构建一个载体同时编码四个基因,即血管内皮生长因子(VEGF)、致癌基因蛋白(c-myc)、存活素(survivin)和端粒酶反转录酶的短发夹重组质粒,并与单基因质粒做对比,通过体内外实验,研究其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长... 目的 应用RNA干扰技术构建一个载体同时编码四个基因,即血管内皮生长因子(VEGF)、致癌基因蛋白(c-myc)、存活素(survivin)和端粒酶反转录酶的短发夹重组质粒,并与单基因质粒做对比,通过体内外实验,研究其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响.方法 构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和端粒酶反转录酶并含荧光素标记的短发夹RNA质粒命名为P-1,并构建单独表达VEGF、c-myc、survivin和端粒酶反转录酶的质粒,分别命名为P-2、P-3、P-4和P-5,分别将其将转染人鼻咽癌CNE-2Z细胞株及荷瘤裸鼠瘤体内.以激光共聚焦显微镜观察质粒在CNE-2Z细胞及瘤体内的转染及表达情况.四甲基偶氮噻唑蓝法检测细胞增殖活性,实时PCR在mRNA水平上检测对目的基因表达的抑制作用,免疫印迹法在蛋白水平上检测对目的基因的封闭效果,Trans well侵袭小室模型观察导入CNE-2Z细胞对其恶性生物学行为的改变,流式细胞仪观察各组凋亡率,体内裸鼠成瘤实验观察质粒对肿瘤的抑制效果.结果 多基因干扰质粒转染鼻咽癌细胞后,CNE-2Z细胞增殖受到明显抑制,体外侵袭能力显著下降(P值均<0.05).实时PCR证实多基因组4个不同基因mRNA表达均降低,免疫印迹技术验证目的基因蛋白同时表达下调.流式细胞仪结果证明多基因凋亡率明显高于单基因组(P值均<0.05).体内抑瘤实验表明,与阴性组和空白组相比,P-1组移植瘤生长明显受到抑制(P<0.05),并且多基因质粒抑制肿瘤细胞增长的作用要强于单基因干扰质粒(户值均<0.05).结论 同时干扰多个基因能有效抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导其凋亡,为鼻咽癌基因治疗奠定了良好的实验基础. 展开更多
关键词 RNA干扰 基因疗法 鼻咽肿瘤 细胞系 肿瘤 细胞增殖
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