白花丹醌对瘦素刺激的人肝星状细胞周期及其相关蛋白表达的影响 被引量：10

1

作者 韦燕飞 李景强 +3 位作者 张志伟 张园 王玖恒 赵铁建 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1776-1780,共5页

目的研究白花丹醌对瘦素刺激的体外培养人肝星状细胞(HSC-LX2)细胞周期及周期相关蛋白表达的影响,探讨白花丹醌抗肝纤维化的作用机制。方法 ELISA法检测HSC-LX2细胞培养上清液中自分泌瘦素水平。将HSC-LX2细胞分成对照组,瘦素组,白花丹... 目的研究白花丹醌对瘦素刺激的体外培养人肝星状细胞(HSC-LX2)细胞周期及周期相关蛋白表达的影响,探讨白花丹醌抗肝纤维化的作用机制。方法 ELISA法检测HSC-LX2细胞培养上清液中自分泌瘦素水平。将HSC-LX2细胞分成对照组,瘦素组,白花丹醌2、8μmol/L组,秋水仙碱6.25μg/mL阳性对照组。除对照组外,其余各组细胞用瘦素100μg/mL刺激24 h、再与药物共同培养24 h后,流式细胞仪检测HSC-LX2细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1、p21的表达。结果 HSC-LX2细胞自分泌瘦素的浓度先随着培养时间的延长而递减,24 h达到低谷值,48 h后又升至6 h水平,每个时间点分泌的瘦素量无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,瘦素组HSC-LX2细胞增殖能力显著增强,S期和G2/M期细胞比例显著增加;白花丹醌2、8μmol/L干预HSC-LX2细胞后,G0/G1期细胞的比例明显提高,而S期和G2/M期细胞比例明显降低,且呈明显的浓度相关性。与对照组比较,瘦素组HSC-LX2细胞经瘦素刺激后细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1的量显著增加,p21蛋白的表达受到抑制;白花丹醌2、8μmol/L和秋水仙碱明显降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增强p21蛋白表达。结论白花丹醌可明显抑制瘦素诱导的HSC-LX2细胞增殖,该作用主要是通过抑制细胞由G0/G1期向S期转变而产生的,作用机制可能与其降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增加p21蛋白表达相关。 展开更多

关键词 白花丹醌 瘦素 人肝星状细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞周期相关蛋白

原文传递

莫诺苷对脑缺血再灌注大鼠海马细胞周期蛋白表达的影响 被引量：5

2

作者 刘婷婷 许栋明 +5 位作者 孙芳玲 郑文荣 祝自新 田欣 郭德玉 王文 《实验动物科学》 2018年第6期66-69,共4页

目的观察莫诺苷对脑缺血再灌注大鼠细胞周期相关蛋白表达的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠用线栓法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型后,随机分为假手术组、模型组、莫诺苷小剂量组(30 mg/kg体质量... 目的观察莫诺苷对脑缺血再灌注大鼠细胞周期相关蛋白表达的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠用线栓法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型后,随机分为假手术组、模型组、莫诺苷小剂量组(30 mg/kg体质量)、莫诺苷中剂量组(90 mg/kg体质量)、莫诺苷大剂量组(270 mg/kg体质量)。造模7 d后,用Western blot方法检测大鼠患侧海马细胞周期相关蛋白CyclinD1及CDK6的表达情况。结果与假手术组相比,模型组CyclinD1蛋白表达显著增加;与模型组相比,莫诺苷中剂量组与大剂量组CyclinD1显著降低。与假手术组相比,模型组CDK6蛋白表达显著增加;与模型组相比,莫诺苷小、中、大三个剂量组CDK6蛋白表达显著降低。结论莫诺苷能降低大鼠脑缺血再灌注后CyclinD1和CDK6的表达,从而抑制细胞周期相关蛋白的异常激活,发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 莫诺苷 脑卒中 细胞周期蛋白 神经保护作用

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组织中MCM7、Cyclin D1的表达与肝细胞肝癌患者1年生存时间的关系

3

作者 牛广旭 郭晓娟 +2 位作者 辛礼辉 方丽 田云霄 《临床和实验医学杂志》 2023年第2期133-137,共5页

目的研究微染色体维持蛋白7(MCM7)和细胞周期相关蛋白(Cyclin D1)与肝细胞肝癌(HCC)患者1年生存时间的关系。方法回顾性选取2020年1月至2021年6月邯郸市中心医院收治的90例原发性HCC患者。取癌组织、癌旁正常组织各2块,行免疫组织化学检... 目的研究微染色体维持蛋白7(MCM7)和细胞周期相关蛋白(Cyclin D1)与肝细胞肝癌(HCC)患者1年生存时间的关系。方法回顾性选取2020年1月至2021年6月邯郸市中心医院收治的90例原发性HCC患者。取癌组织、癌旁正常组织各2块,行免疫组织化学检查MCM7、Cyclin D1表达情况。比较癌组织及癌旁正常组织MCM7、Cyclin D1阳性检出率;观察不同临床病理特征HCC患者MCM7、Cyclin D1阳性占比情况。最后对90例HCC患者行1年院外随访,观察癌组织MCM7、Cyclin D1阳性患者术后1年存活率差异。结果癌组织内MCM7、Cyclin D1阳性检出率显著高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、病灶数、HBsAg类型HCC患者MCM7阳性检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);肿瘤直径≥5 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、血清AFP≥400μg/L、已发生转移的HCC患者MCM7阳性检出率较高,差异均有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ-IV期、已发生转移的HCC患者Cyclin D1阳性检出率较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。90例行根治性手术的HCC患者均获得1年院外随访,1年病死率18.89%,存活率81.11%;64例癌组织MCM7阳性患者1年病死率25.00%,存活率75.00%,26例癌组织MCM7阴性患者中病死率3.85%,存活率96.15%,Kaplan-Meier生存分析显示癌组织MCM7阳性检出率越高患者病死率越高(Log-Rank=5.229,P=0.022);66例癌组织Cyclin D1阳性患者1年病死率24.24%,存活率75.76%,24例癌组织Cyclin D1阴性患者中病死率4.17%,存活率95.83%,Kaplan-Meier生存分析显示癌组织Cyclin D1阳性检出率越高患者病死率越高(Log-Rank=4.481,P=0.034)。结论HCC患者癌组织内MCM7、Cyclin D1表达显著增高,且MCM7、Cyclin D1与HCC病情进展有关,同时MCM7、Cyclin D1表达阳性可能会对HCC患者1年生存率造成影响。 展开更多

关键词 原发性肝细胞癌 微染色体维持蛋白7 细胞周期相关蛋白 临床病理特征 生存曲线

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氢醌染毒对红白血病细胞株K562细胞周期的影响及其机制 被引量：3

4

作者 赵雪 温缘缘 +6 位作者 肖芸 万秀方 李攀登 王永红 郑丹 谢婷婷 张亚莉 《山东医药》 CAS 2019年第4期19-22,共4页

目的探讨氢醌(HQ)对红白血病细胞株K562细胞周期的影响及其作用机制。方法取生长至对数期时K562细胞,设空白对照组及HQ染毒低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别以HQ终浓度为0、15、30、60μmol/L处理,各实验组间隔处理72 h后,流式细胞术... 目的探讨氢醌(HQ)对红白血病细胞株K562细胞周期的影响及其作用机制。方法取生长至对数期时K562细胞,设空白对照组及HQ染毒低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别以HQ终浓度为0、15、30、60μmol/L处理,各实验组间隔处理72 h后,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫印迹法检测CDC25A、CDK2、Cyclin E、Cycli-n A、p53、p21、PCNA等细胞周期相关蛋白表达。结果空白对照组及HQ染毒低剂量组、中剂量组、高剂量组G0/G1期细胞所占比例分别为55. 90%±2. 71%、40. 16%±3. 34%、29. 97%±1. 23%、32. 84%±0. 93%,S期细胞比例分别为43. 42%±2. 61%、57. 01%±3. 50%、66. 87%±1. 77%、66. 66%±0. 31%,G2/M期细胞比例分别为0. 73%±0. 78%、3. 27%±2. 05%、4. 40%±5. 07%、0. 18%±1. 54%,与空白对照组比较,各染毒剂量组G0/G1细胞比例下降,S期细胞比例增加(P <0. 05),G2/M期细胞差异无统计学意义(P> 0. 05)。与空白对照组比较,CDC25A蛋白表达在HQ染毒各剂量组降低(P <0. 05),HQ染毒各剂量组间高剂量组<中剂量组<低剂量组(P <0. 05)。与空白对照组比较,Cyclin E、PCNA蛋白表达在HQ染毒低剂量组差异无统计学意义,在中、高剂量组表达量降低(P <0. 05),HQ染毒各剂量组间高剂量组<中剂量组<低剂量组(P <0. 05)。与空白对照组比较,p53蛋白在HQ染毒低、中剂量组表达量增高(P <0. 05),在高剂量组表达差异无统计学意义,HQ染毒各剂量组间高剂量组<中剂量组<低剂量组(P <0. 05)。CDK2、Cyclin A和p21蛋白在空白对照组与HQ染毒各剂量组间的表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 HQ致K562细胞周期发生S期阻滞,可能与其下调CDC25A、Cyclin E、PCNA蛋白表达有关。 展开更多

关键词 红白血病 苯 氢醌 S期阻滞 周期相关蛋白

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沉默Sam68对鼻咽癌5-8F细胞增殖的影响及其机制 被引量：3

5

作者 杨彬 冯德辉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期258-261,共4页

目的探讨Sam68基因对鼻咽癌5-8F细胞增殖能力的影响及可能的分子机制。方法通过靶向沉默鼻咽癌5-8F细胞内源性Sam68基因,研究细胞增殖能力的变化情况,并采用qRT-PCR和Western blotting实验方法检测Sam68、细胞周期相关蛋白及其上游分子... 目的探讨Sam68基因对鼻咽癌5-8F细胞增殖能力的影响及可能的分子机制。方法通过靶向沉默鼻咽癌5-8F细胞内源性Sam68基因,研究细胞增殖能力的变化情况,并采用qRT-PCR和Western blotting实验方法检测Sam68、细胞周期相关蛋白及其上游分子的表达情况。结果转染Sam68靶向siRNA的5-8F细胞中,Sam68蛋白和mRNA表达水平均明显降低。MTT、细胞周期实验证实干扰Sam68后5-8F细胞的增殖能力受到抑制;Western blotting检测结果显示细胞周期相关蛋白Cyclin D1表达明显下调,p27表达上调,同时p-FOXO3a、p-Akt和p-GSK-3β的表达明显下调,而总FOXO3a、Akt和GSK-3β的表达则无明显变化。结论 Sam68可能通过激活Akt/FOXO3a信号通路对细胞增殖的相关分子进行调控,进而影响鼻咽癌细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 Sam68 鼻咽癌 增殖 细胞周期相关蛋白

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CDK1和CCNB1表达水平在肝细胞癌中的临床意义 被引量：1

6

作者 朱文文 肖葛琼 《健康研究》 CAS 2023年第1期70-73,79,共5页

目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B1(cell cycle-related proteins cyclin B1,CCNB1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶... 目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B1(cell cycle-related proteins cyclin B1,CCNB1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测患者HCC肿瘤组织和癌旁正常组织中CDK1与CCNB1的相对表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线评估CDK1和CCNB1以及两者并联模型在HCC中的诊断价值以及和病理分期的相关性。随访5年,评估患者CDK1和CCNB1表达水平对患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)的影响。结果CDK1、CCNB1在HCC组织中表达显著上调,二者间呈正相关(r=0.769,P<0.01),且均与HCC病理分期显著正相关(r=0.828、0.726,P<0.01)。CDK1和CCNB1诊断HCC的曲线下面积(AUC)分别为0.817和0.810,联合诊断的AUC值为0.837。相比于CDK1和CCNB1高表达组,CDK1和CCNB1低表达的HCC患者PFS和OS均显著延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CDK1、CCNB1在HCC中具有较高的临床诊断和预后价值,两者的表达水平和HCC的病理分期密切相关。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶1 细胞周期蛋白B1 肝细胞癌 受试者工作特征

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地黄益智方对老年性痴呆模型大鼠细胞周期蛋白异常表达的影响 被引量：13

7

作者 安红梅 胡兵 +3 位作者 邢三丽 郁志华 陈久林 靳淼 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2012年第1期47-49,共3页

目的观察地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠细胞周期蛋白异常表达的影响,并探讨其机制。方法 120只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组及地黄益智方小、中、大剂量组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型,造模... 目的观察地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠细胞周期蛋白异常表达的影响,并探讨其机制。方法 120只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组及地黄益智方小、中、大剂量组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型,造模24 h后开始灌胃给药,地黄益智方小、中、大剂量组给药量分别为0.12、0.24、0.48 g浸膏/(100 g.d),空白组和模型组给予等体积的蒸馏水,连续4周。免疫组化法动态检测各组大鼠大脑皮层及海马cyclin D1、cyclin E、p16、CDK6的表达变化。结果 Aβ1-40造模后24 h可见cyclin D1、CDK6表达升高,造模后2周时cyclin E表达升高,造模后4周时p16表达升高;小、中、大剂量地黄益智方可改善Aβ1-40诱导cyclin D1、cyclin E、p16以及CDK6异常表达。结论老年性痴呆模型大鼠早期存在脑细胞周期蛋白异常表达现象,地黄益智方对异常表达的cyclin D1、cyclin E、p16及CDK6有一定改善作用。 展开更多

关键词 地黄益智方 老年性痴呆 细胞周期蛋白 大鼠

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miR-365通过靶向FoxO1抑制胃癌细胞的增殖 被引量：1

8

作者 陈路 胡爽 +3 位作者 张慧敏 王君 黄凤 王志文 《生命科学研究》 CAS CSCD 2021年第2期109-116,共8页

为了探究miR-365对胃癌细胞活力、增殖的影响及作用机制,使用RT-qPCR技术检测胃癌细胞(AGS和MGC80-3)与正常胃上皮细胞(GES-1)中miR-365的内源性表达水平及临床样本中胃癌组织和癌旁组织中miR-365的内源性表达水平;使用CCK-8检测细胞增... 为了探究miR-365对胃癌细胞活力、增殖的影响及作用机制,使用RT-qPCR技术检测胃癌细胞(AGS和MGC80-3)与正常胃上皮细胞(GES-1)中miR-365的内源性表达水平及临床样本中胃癌组织和癌旁组织中miR-365的内源性表达水平;使用CCK-8检测细胞增殖活力;使用RT-qPCR及Western-blot检测周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、CDK6、周期蛋白D1(cyclinD1)和FoxO1的mRNA及蛋白质水平;采用荧光素酶报告实验验证miR-365与FoxO13´-UTR的结合能力。实验结果显示,与正常胃上皮细胞相比,两种胃癌细胞内miR-365的表达下调;转染miR-365模拟物后,胃癌细胞的增殖活力下降,cyclinD1、CDK4、CDK6及FoxO1的mRNA和蛋白质水平均下调;miR-365可结合FoxO1的3´-UTR,进而抑制FoxO1蛋白的表达;与癌旁组织比较,癌组织中miR-365的表达降低。以上结果表明,miR-365可通过靶向结合FoxO1的3´-UTR抑制FoxO1蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 miR-365 胃癌 细胞增殖 FoxO1蛋白 细胞周期相关蛋白质

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17β-雌二醇和1，25-二羟维生素D_3对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化的影响

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作者 周筠 宋利格 +1 位作者 张秀珍 张克勤 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期839-843,共5页

目的探讨雌激素和维生素D对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化的协同调节作用及其机制。方法小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞用无酚红α-MEM完全培养基培养；用MTT法检测细胞增殖率；用实时荧光定量PCR法检测干预前后MC3T3-E1细胞中细胞周期相关基... 目的探讨雌激素和维生素D对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化的协同调节作用及其机制。方法小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞用无酚红α-MEM完全培养基培养；用MTT法检测细胞增殖率；用实时荧光定量PCR法检测干预前后MC3T3-E1细胞中细胞周期相关基因[细胞周期素E（cyclin E）、增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期素依赖性激酶抑制物（Cdkn2b）]和成骨细胞分化标志物[Ⅰ型胶原（COLⅠ）、碱性磷酸酶（ALP）和骨桥蛋白（OPN）]基因的表达。ALP活性染色用BCIP／NBT显色法。结果单用雌激素17β-雌二醇（E_2）可促进MC3T3-E1细胞的增殖，尤其在生理浓度时作用最强，单用维生素D活性产物1，25-二羟维生素D_3[1，25-（OH）_2D_3]对MC3T3-E1细胞的增殖无影响，1，25-（OH）_2D_3不影响E_2对MC3T3-E1细胞的促增殖作用。E_2上调MC3T3-E1细胞中cyclinE和PCNA的表达，同时下调Cdkn2b基因的表达，1，25-（OH）_2 D_3单独应用不能影响上述基因表达的变化，也不影响E_2对上述基因的调节作用。E_2可促进MC3T3-E1细胞中分化标志物（COLI、ALP和OPN）基因的表达，加用1，25-（OH）_2 D_3后可增强此作用。结论雌激素和维生素D作为两种重要的调节骨代谢的激素，在促进成骨细胞增殖方面可能无协同作用，而在促进其分化方面可能有协同作用。 展开更多

关键词 雌激素 维生素D 成骨细胞 细胞周期相关蛋白

原文传递

肾癌组织中CREPT的表达情况及对预后的影响

10

作者 董亚娟 鲁林楠 《实用癌症杂志》 2024年第4期652-654,共3页

目的探究肾癌组织中肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)的表达及对患者预后的影响。方法选取68例肾癌患者为研究对象,术中取其癌组织与癌旁正常组织,用免疫组织化学法检测两种细胞组织内CREPT表达的差异,并收集患者的年龄、性别等资料,... 目的探究肾癌组织中肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)的表达及对患者预后的影响。方法选取68例肾癌患者为研究对象,术中取其癌组织与癌旁正常组织,用免疫组织化学法检测两种细胞组织内CREPT表达的差异,并收集患者的年龄、性别等资料,分析CREPT表达与肾癌患者临床病理特征的关系。另随访3年,分析CREPT表达与肾癌患者预后的关系。结果癌组织中CREPT高表达率高于癌旁正常组织,有统计学差异(P<0.05)。CREPT表达与肾癌患者的TNM分期、Fuhrman分级联系紧密,有统计学差异(P<0.05)。CREPT高表达肾癌患者的3年生存率低于CREPT低表达患者,有统计学差异(P<0.05)。结论肾癌癌组织内的CREPT呈现为高表达状态,其表达与肾癌患者的TNM分期、Fuhrman分级联系紧密,而CREPT表达水平越高,患者3年生存率越低,预后越差,临床需予以高度重视。 展开更多

关键词 肾癌 预后 肿瘤高表达细胞周期相关蛋白 生存率

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抗人CDC7单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1

11

作者 李志广 张现伟 +3 位作者 蒋小梅 旷兴林 魏大鹏 章崇杰 《中国当代医药》 2012年第35期13-15,共3页

目的制备抗人CDC7蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法以GST-CDC7为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗人CDC7单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用间接ELISA,West... 目的制备抗人CDC7蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法以GST-CDC7为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗人CDC7单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用间接ELISA,WesternBlot,免疫细胞化学(ICC)对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到1株能稳定分泌抗人CDC7的细胞株1F7D2C9。亚类鉴定为IgG2a,轻链为kappa链,ELISA法鉴定该抗体腹水效价为1:102400,抗体亲和常数为1.558×109L/mol,WesternBlotting分析表明,此抗体能特异识别细胞株的天然CDC7蛋白质。免疫细胞化学进一步显示CDC7分布于细胞核中。结论成功制备了抗人CDC7单克隆抗体,为研究CDC7与细胞癌变的关系建立了基础。 展开更多

关键词 细胞分裂周期蛋白激酶7 单克隆抗体 DNA复制 制备 鉴定

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