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视网膜神经节细胞体外培养、纯化及生物学特性研究 被引量：31
1
作者 吴永青 葛坚 +3 位作者 邱鹏新 李艳艳 林明楷 郭彦 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期190-193,10,共5页
目的建立体外视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｓ，ＲＧＣｓ）培养和纯化模型。方法出生后１～３天ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）乳鼠，ＲＧＣｓ在ｂａｓａｌｍｅｄｉｕｍｅａｇｌｅ（ＢＭＥ）培养基中... 目的建立体外视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｓ，ＲＧＣｓ）培养和纯化模型。方法出生后１～３天ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）乳鼠，ＲＧＣｓ在ｂａｓａｌｍｅｄｉｕｍｅａｇｌｅ（ＢＭＥ）培养基中培养，相差显微镜下观察细胞生长规律。羊抗鼠单克隆抗体ＦＩＴＣＴｈｙ１．１鉴定ＲＧＣｓ，并通过Ｔｈｙ１．１单抗进行ＲＧＣｓ的分离纯化。四唑盐（ｍｏｎｏｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）微量比色法检测细胞活性。结果较高的细胞接种密度或加入顶盖提取液（ｔｅｃｔａｌｅｘｔｒａｃｔ，Ｔｅ）均有利于混合培养的ＲＧＣｓ生长存活。ＭＴＴ检测法显示加Ｔｅ培养的实验组其吸光度（Ａ）值较对照组增加了３倍；在ＲＧＣｓ培养２天时，按细胞接种密度为１×１０３个／ｍｍ２的培养组较５００个／ｍｍ２的培养组，有突起的细胞数多３倍以上。ＲＧＣｓ经Ｔｈｙ１．１单抗纯化，其纯化率约达９５％。在无神经营养因子的条件下，纯化培养的ＲＧＣｓ于４８ｈ后很少存活。而混合培养的ＲＧＣｓ存活时间可持续２或３周。结论在一定条件下的ＲＧＣｓ能够于体外培养存活，其生长存活能力依赖于靶组织及其它视网膜细胞的营养作用。采用Ｔｈｙ１．１单克隆抗体纯化的方法可? 展开更多
关键词 视网膜 神经节细胞 RGCS 细胞培养 青光眼
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