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4种细胞毒活性方法评价紫草素体外肿瘤细胞抑制作用效果 被引量:13
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作者 柴冰阳 陈泽慧 +2 位作者 张闪闪 应雪 张波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期172-177,共6页
目的研究4种细胞毒活性测定方法对紫草素体外肿瘤细胞抑制作用的评价效果,对紫草萘醌为代表的天然色素在细胞毒活性评价中常出现的假阴性现象进行对比分析。方法将紫草素与其高敏感株急性早幼粒白血病HL-60细胞和低敏感株人非小细胞肺癌... 目的研究4种细胞毒活性测定方法对紫草素体外肿瘤细胞抑制作用的评价效果,对紫草萘醌为代表的天然色素在细胞毒活性评价中常出现的假阴性现象进行对比分析。方法将紫草素与其高敏感株急性早幼粒白血病HL-60细胞和低敏感株人非小细胞肺癌A549细胞体外共培养,通过台盼蓝法、磺酰罗丹明B(SRB)法、Cell Counting Kit-8(CCK-8)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)法进行平行实验,测定紫草素在0.4~128μmol/L抑制细胞生长的量效关系曲线。结果台盼蓝法、SRB法、CCK-8法、MTT法测得紫草素对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.57、0.77、1.36、1.01μmol/L,对A549细胞的IC50分别为6.30、10.38、13.48、15.24μmol/L。紫草素浓度分别在3.2、32μmol/L以下时,4种检测方法得到其对2种细胞的抑制率均呈线性增长,超过此浓度即出现差异。其中台盼蓝法与SRB法结果一致性良好,而MTT法与CCK-8法测得的抑制率较低。对于HL-60细胞,紫草素12.8μmol/L时,CCK-8测得抑制率为81%,台盼蓝法为96%;对于A549细胞,紫草素128μmol/L时,MTT法测得抑制率为89%,台盼蓝法为99%。紫草素的吸收光谱与甲臜在波长400~600 nm存在重叠,最大重叠峰在550~570nm,CCK-8试剂与紫草素对HL-60细胞存在协同抑制效应。台盼蓝法结果显示高浓度紫草素几乎完全杀死板孔内细胞,相比对照组差异显著,但MTT法和CCK-8法结果出现假阴性。结论紫草萘醌为代表的天然色素的细胞毒活性评价不建议使用MTT法和CCK-8法,推荐使用SRB法和台盼蓝法。 展开更多
关键词 紫草素 细胞毒活性评价 四甲基偶氮唑盐法 磺酰罗丹明B法 CCK-8 台盼蓝法
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噻唑兰法和CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖反应的比较 被引量:9
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作者 秦庆华 尹承芬 +3 位作者 董宁 张庆红 祝筱梅 姚咏明 《感染.炎症.修复》 2012年第4期199-202,共4页
目的:比较噻唑兰(MTT)法和CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖反应的最佳实验条件,并比较两种不同检测方法的灵敏度.方法:分离小鼠脾脏淋巴细胞,分别比较不同培养时间(69、70、71、72、73 h)、不同反应剂量(5、10、15、20、25 μl)、... 目的:比较噻唑兰(MTT)法和CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖反应的最佳实验条件,并比较两种不同检测方法的灵敏度.方法:分离小鼠脾脏淋巴细胞,分别比较不同培养时间(69、70、71、72、73 h)、不同反应剂量(5、10、15、20、25 μl)、不同细胞数量(0、2.5×10^4、5×10^4、10×10^4、20×10^4)反应体系的MTT法和CCK-8法的吸光度值.结果:对于2×105的反应体系,MTT法的最佳培养时间为71 h,最佳反应剂量为15 μl.而CCK-8法的最佳培养时间为72 h,最佳反应剂量为10 μl.同时,通过对比两种不同检测方法对于相同细胞数量培养体系的吸光度值发现,CCK-8法的灵敏度要高于MTT法.结论:CCK-8法是一种较MTT法更优的检测小鼠淋巴细胞增殖反应的实验方法. 展开更多
关键词 噻唑兰 CCK-8 淋巴细胞 增殖反应
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地黄梓醇对新生大鼠炎性成骨细胞的保护作用 被引量:9
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作者 何强 钱卫庆 +3 位作者 姚年伟 周梦玲 刘易昕 尹宏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第29期4626-4631,共6页
背景:有研究表明成骨细胞代谢异常也可能是膝骨关节炎中软骨下骨矿化异常的原因。目的:验证地黄梓醇对成骨细胞增殖及药物毒性研究,以及对脂多糖诱导的炎性成骨细胞的抗炎保护作用。方法:①新生SD大鼠成骨细胞进行原代提取、培养、传代... 背景:有研究表明成骨细胞代谢异常也可能是膝骨关节炎中软骨下骨矿化异常的原因。目的:验证地黄梓醇对成骨细胞增殖及药物毒性研究,以及对脂多糖诱导的炎性成骨细胞的抗炎保护作用。方法:①新生SD大鼠成骨细胞进行原代提取、培养、传代,通过观察成骨细胞的形态、碱性磷酸酶染色以及矿化结节染色法(茜红素S法)染色,确定成骨细胞活性及增殖情况;②CCK-8法观察不同质量浓度地黄梓醇(0,1,10,100 mg/L)对成骨细胞活性的影响;③采用不同质量浓度脂多糖(0,10,20,40,80,160 mg/L)诱导胎鼠炎性成骨细胞模型,CCK-8法验证筛选最佳浓度;④实验分为正常组、模型组、低浓度地黄梓醇组、中浓度地黄梓醇组、高浓度地黄梓醇组,各组成骨细胞在80 mg/L脂多糖诱导为炎性成骨细胞后,分别给药8 h,CCK-8法观察不同质量浓度地黄梓醇对炎性成骨细胞的影响。实验方案经南京市六合区人民医院医学伦理委员会批准。结果与结论:①将成骨细胞培养至第4代,经碱性磷酸酶染色后可见阳性细胞胞浆内有灰黑色颗粒,细胞体形态呈不规则形;②地黄梓醇质量浓度低于1 mg/L时,对成骨细胞无明显影响;高于10 mg/L时,地黄梓醇对成骨细胞具有促进其增殖作用且无药物毒性作用(P<0.05);③不同质量浓度脂多糖对成骨细胞均有炎性损害,当其质量浓度高于80 mg/L时,对成骨细胞的炎性损伤呈显著趋势(P<0.01),因此实验选择80 mg/L为最佳损伤浓度;④地黄梓醇质量浓度低于1 mg/L时,对成骨细胞炎性反应无明显保护作用;高于10 mg/L时,对成骨细胞炎性反应能起到明显保护作用(P<0.05);⑤结果说明,地黄梓醇达到一定浓度时对成骨细胞无药毒作用且能促进增殖,对脂多糖诱导的炎性成骨细胞有抗炎保护作用。 展开更多
关键词 地黄梓醇 成骨细胞 软骨细胞 脂多糖 CCK-8
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CCK-8法检测阿糖胞苷对白血病细胞株增殖抑制作用 被引量:7
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作者 赵惠君 周妮娜 谢晓恬 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期460-463,共4页
目的探索阿糖胞苷(Ara-C)治疗急性白血病的剂量、时间与效应的相关性。方法采用CCK-8法,检测不同剂量梯度范围内(0.1~200μmol/L)、Ara-C作用不同时间(4~48 h),对白血病细胞株Jurkat(ALL)和NB4(AML)增殖抑制作用的差异与特征规律。结... 目的探索阿糖胞苷(Ara-C)治疗急性白血病的剂量、时间与效应的相关性。方法采用CCK-8法,检测不同剂量梯度范围内(0.1~200μmol/L)、Ara-C作用不同时间(4~48 h),对白血病细胞株Jurkat(ALL)和NB4(AML)增殖抑制作用的差异与特征规律。结果 Jurkat细胞和NB4细胞在一定的Ara-C作用浓度范围内,均存在着随作用时间延长,增殖抑制逐渐提升的效应。在4 h和8 h 2个作用时间组中,随着Ara-C剂量递增,Jurkat细胞的增殖抑制率明显增加;而NB4细胞仅在0.5~50μmol/L浓度梯度范围内呈现剂量与效应的相关性。结论 Ara-C作为细胞周期特异性药物(CCSA),对肿瘤细胞的增殖抑制效应存在明显的时间-剂量相关性,Jurkat对Ara-C的敏感性高于NB4。[临床儿科杂志,2012,30(5):460-463] 展开更多
关键词 阿糖胞苷 剂量梯度 CCK-8 白血病
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Lithium promotes proliferation and suppresses migration of Schwann cells 被引量:4
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作者 Xiao-Kun Gu Xin-Rui Li +1 位作者 Mei-Ling Lu Hui Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第10期1955-1961,共7页
Schwann cell proliferation,migration and remyelination of regenerating axons contribute to regeneration after peripheral nervous system injury.Lithium promotes remyelination by Schwann cells and improves peripheral ne... Schwann cell proliferation,migration and remyelination of regenerating axons contribute to regeneration after peripheral nervous system injury.Lithium promotes remyelination by Schwann cells and improves peripheral nerve regeneration.However,whether lithium modulates other phenotypes of Schwann cells,especially their proliferation and migration remains elusive.In the current study,primary Schwann cells from rat sciatic nerve stumps were cultured and exposed to 0,5,10,15,or 30 mM lithium chloride(LiCl)for 24 hours.The effects of LiCl on Schwann cell proliferation and migration were examined using the Cell Counting Kit-8,5-ethynyl-2′-deoxyuridine,Transwell and wound healing assays.Cell Counting Kit-8 and 5-ethynyl-2′-deoxyuridine assays showed that 5,10,15,and 30 mM LiCl significantly increased the viability and proliferation rate of Schwann cells.Transwell-based migration assays and wound healing assays showed that 10,15,and 30 mM LiCl suppressed the migratory ability of Schwann cells.Furthermore,the effects of LiCl on the proliferation and migration phenotypes of Schwann cells were mostly dose-dependent.These data indicate that lithium treatment significantly promotes the proliferation and inhibits the migratory ability of Schwann cells.This conclusion will inform strategies to promote the repair and regeneration of peripheral nerves.All of the animal experiments in this study were ethically approved by the Administration Committee of Experimental Animal Center of Nantong University,China(approval No.20170320-017)on March 2,2017. 展开更多
关键词 5-ethynyl-2′-deoxyuridine cell counting kit-8 cell viability LITHIUM MIGRATION peripheral nerve PROLIFERATION regeneration Schwann cell wound healing assay
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Aquaporin-1 down regulation associated with inhibiting cell viability and inducing apoptosis of human lens epithelial cells 被引量:5
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作者 Hong-Hua Zheng Guo-Xing Xu +2 位作者 Jian Guo Li-Cheng Fu Yao Yao 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2016年第1期15-20,共6页
AIM:To investigate the role of Aquaporin-1(AQP-1)in lens epithelial cells(LECs)and its potential target genes.AQP-1 is specifically expressed in LECs of eyes and is significant for lens homeostasis and transparen... AIM:To investigate the role of Aquaporin-1(AQP-1)in lens epithelial cells(LECs)and its potential target genes.AQP-1 is specifically expressed in LECs of eyes and is significant for lens homeostasis and transparency maintenance.Herein,AQP-1 expression in LECs was investigated to evaluate its influence on cell survival in association with its potential role in cataract formation.·M ETHODS:LECs were transfected with lentivirus carrying AQP-1 small interfering RNA(si RNA).Real-time polymerase chain reaction(PCR)and Western blotting were conducted to detect AQP-1 expression in LECs from different groups.Meanwhile,cell counting kit-8(CCK-8)assay and flow cytometry were performed to measure LEC proliferation and apoptosis,respectively.·RESULTS:AQP-1 expression was significantly reduced in LECs,both at m RNA and protein levels(〈0.05),after si RNA treatment.Decreased cell viability was detected by CCK-8 assay in LECs with si RNA interference,compared to control cells(〈0.05).The apoptosis rate significantly increased in cells after si RNA interference(〈0.05).·CONCLUSION:The decreased cell viability following AQP-1 down regulation is largely due to its induction of apoptosis of LECs.AQP-1 reduction might lead to changes of physiological functions in LECs,which might be associated with the occurrence and development of cataracts. 展开更多
关键词 AQUAPORIN-1 small interfering RNA lensepithelial cells proliferation APOPTOSIS cell counting kit-8 flow cytometry
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基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响 被引量:5
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作者 庞晓丽 刘建卫 +2 位作者 李虎虎 杨琳 王青龙 《中西医结合心脑血管病杂志》 2020年第13期2067-2071,共5页
目的基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响。方法体外培养鼠胸主动脉段,给予补阳还五汤载药血清干预评估其对血管新生的影响;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),给予补阳还五汤载药血清干预,采用细胞计数8(CCK-8)、划痕迁移法... 目的基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响。方法体外培养鼠胸主动脉段,给予补阳还五汤载药血清干预评估其对血管新生的影响;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),给予补阳还五汤载药血清干预,采用细胞计数8(CCK-8)、划痕迁移法和三维细胞培养法评估补阳还五汤对内皮细胞增殖、迁移和成管的影响;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对血管生成因子进行检测,分析补阳还五汤对促血管新生相关因子表达的影响。结果各组血管段均可观察到新生血管生成,与对照组比较,补阳还五汤干预后存活的新生血管数量明显增多;体外内皮细胞干预结果显示,补阳还五汤可促进HBMECs的增殖、迁移和成管,促进血管内皮生长因子(VEGF)表达。结论补阳还五汤具有促进血管新生的作用,该作用可能与上调VEGF表达有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤 血管新生 血管内皮生长因子 人脑微血管内皮细胞 细胞计数8 划痕迁移法
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紫芸解毒止痛酊中红花的质量控制及其促骨髓间充质干细胞增殖的作用 被引量:4
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作者 韦乐华 王思怡 +3 位作者 敖智广 豆荣昆 向飞丹州 茆灿泉 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期453-457,共5页
目的对紫芸解毒止痛酊(ZYD)中的关键药材红花进行DNA条形码和HPLC化学质量控制,并探究羟基红花黄色素A(HSYA)在促骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖中的作用。方法采用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材红花并分析其与近缘物种的序列差异;HPL... 目的对紫芸解毒止痛酊(ZYD)中的关键药材红花进行DNA条形码和HPLC化学质量控制,并探究羟基红花黄色素A(HSYA)在促骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖中的作用。方法采用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材红花并分析其与近缘物种的序列差异;HPLC法测定5个批次的ZYD中HSYA的含量;CCK-8法测定BMSCs的细胞相对增殖率。结果 ZYD中红花的ITS2序列与NCBI数据库结果一致,系统进化树构建后发现其与近缘物种各自聚类成分支;5个批次的HSYA含量分别为23. 72±0. 44、24. 49±0. 15、25. 23±0. 51、23. 52±0. 21、23. 44±0. 42μg·m L^-1(n=6),RSD分别为1. 87%、0. 65%、2. 06%、0. 89%、1. 82%;与对照组比较,CCK-8法检测到ZYD、HSYA、红花提取液(HH)组分处理BMSCs 48 h后细胞的相对增殖率均大于100%,有显著促进细胞增殖的作用。结论 ITS2 DNA条形码和HSYA可作为ZYD中关键药材红花质量控制的重要指标,ZYD、HH的促BMSCs细胞增殖作用与HSYA的成分功效有关。 展开更多
关键词 紫芸解毒止痛酊 红花 羟基红花黄色素A ITS2 骨髓间充质干细胞 DNA条形码 质量控制 高效液相色谱法 CCK-8 细胞相对增殖率
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利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法
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作者 雷虹 田野 +4 位作者 王孝功 吴健中 王常鹤 陈妍珂 苟兴春 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第8期1421-1426,共6页
目的:利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法,并进行优化、验证。方法:培养Jurkat细胞,加入不同浓度的胸腺肽制剂分别刺激24 h或48 h,然后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测Jurkat细胞的增殖水平。同时,并对利用Jurkat细胞增... 目的:利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法,并进行优化、验证。方法:培养Jurkat细胞,加入不同浓度的胸腺肽制剂分别刺激24 h或48 h,然后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测Jurkat细胞的增殖水平。同时,并对利用Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法的专属性、重复性、灵敏度、精密度及适用性进行验证。结果:最佳检测条件:胸腺肽使用浓度范围为20~200μg/mL;刺激时间为24 h;CCK-8染液孵育时间为3 h。胸腺肽活性在20~200μg/mL范围内,增殖相对提高率具有一定的浓度依赖性;重复性验证RSD均小于15%;Jurkat细胞增殖法检测破坏后的胸腺肽活性显著降低,且与E-玫瑰花环法检测的胸腺肽活性结果呈正相关关系(r=0.75,P<0.05)。结论:基于Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法具有准确客观、灵敏和稳定等优点,能够满足胸腺肽活性检测要求,可进一步推广。 展开更多
关键词 胸腺肽 活性 细胞计数试剂盒 E-玫瑰花环法
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活细胞计数试剂盒在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用 被引量:1
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作者 刘玥 帅春 +3 位作者 李杰生 尹虹 宋艳斌 马文丽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期582-584,共3页
目的探讨活细胞计数试剂盒(CCK-8)在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-dc)对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用。方法采用CCK-8检测不同浓度5-Aza-2’-dc对K562细胞的增殖抑制作用,并检测其半数抑制浓度对K562细胞的细胞周... 目的探讨活细胞计数试剂盒(CCK-8)在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-dc)对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用。方法采用CCK-8检测不同浓度5-Aza-2’-dc对K562细胞的增殖抑制作用,并检测其半数抑制浓度对K562细胞的细胞周期和凋亡的影响。结果 5-Aza-2’-dc的半数抑制浓度为15.55nmol/L,采用该浓度处理K562细胞后,G2期发生阻滞,增殖抑制,并出现凋亡峰。结论不同浓度的5-Aza-2’-dc对K562细胞增殖的抑制作用不同,且呈浓度依赖关系。CCK-8检测法可运用于甲基化转移酶抑制剂对人慢性粒细胞白血病细胞增殖的影响。 展开更多
关键词 活细胞计数试剂盒 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 K562 增殖
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姜黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞抑制作用的研究 被引量:3
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作者 蓝育青 郑海生 +2 位作者 张弛 周怀胜 郭慧 《中国实用医药》 2010年第17期1-3,共3页
目的研究姜黄素对体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,探索防治青光眼手术区滤过泡纤维瘢痕化的新途径。方法用0~80μg/ml姜黄素作用体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞... 目的研究姜黄素对体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,探索防治青光眼手术区滤过泡纤维瘢痕化的新途径。方法用0~80μg/ml姜黄素作用体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞的影响。CCK-8法检测细胞生长活性。结果在0~80μg/ml浓度作用24~96h范围内,姜黄素可以抑制人眼Tenon囊成纤维细胞的增长,且呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素可抑制体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞增殖。 展开更多
关键词 姜黄素 青光眼 TENON囊成纤维细胞 CCK-8
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姜黄素对肝星状细胞MyD88蛋白表达及细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 宋慧东 叶国荣 +2 位作者 罗国彪 欧阳鹏 舒建昌 《中国临床研究》 CAS 2016年第9期1171-1173,1177,共4页
目的观察姜黄素干预对肝星状细胞(HSC)中髓样分化因子88(My D88)蛋白表达及HSC凋亡的影响。方法将常规传代培养的HSC分为对照组、My D88高表达组、My D88阻断剂组和姜黄素组。My D88高表达组将构建的重组原核表达质粒p ET-32a-p My D88... 目的观察姜黄素干预对肝星状细胞(HSC)中髓样分化因子88(My D88)蛋白表达及HSC凋亡的影响。方法将常规传代培养的HSC分为对照组、My D88高表达组、My D88阻断剂组和姜黄素组。My D88高表达组将构建的重组原核表达质粒p ET-32a-p My D88转染至HSC;转染72 h后,My D88阻断剂组加入氨基噻唑类My D88特异性抑制剂继续作用24 h,姜黄素组加入姜黄素继续作用24 h。收集各组细胞,采用流式细胞术检测My D88蛋白的相对表达量[以荧光指数(FI)表示],采用CCK-8法检测各组细胞凋亡率。结果流式细胞术结果显示,My D88表达水平(FI值)在对照组、My D88高表达组、My D88阻断剂组和姜黄素组组间比较差异有统计学意义(6.10±0.37,14.10±0.23,7.50±0.65,8.60±0.53,P<0.05),其中My D88高表达组、My D88阻断剂组和姜黄素组相对表达量明显高于对照组,My D88阻断剂组和姜黄素组的相对表达量低于My D88高表达组。CCK-8法结果显示,对照组、My D88高表达组、My D88阻断剂组、姜黄素组细胞凋亡率组间比较差异有统计学意义[(23.6±1.3)%、(56.8±2.9)%、(33.4±1.1)%、(35.8±2.2)%,P<0.01],其中My D88高表达组、My D88阻断剂组和姜黄素组HSC细胞的凋亡率明显高于对照组,My D88阻断剂组和姜黄素组的HSC细胞的凋亡率低于My D88高表达组。结论姜黄素和氨基噻唑类My D88特异性抑制剂均可显著下调HSC细胞My D88蛋白表达,并降低HSC细胞的凋亡率。 展开更多
关键词 髓样分化因子88 姜黄素 人肝星状细胞 氨基噻唑类 髓样分化因子88特异性抑制剂 流式细胞术 CCK-8
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两亲性嵌段共聚物普朗尼克的细胞毒性及细胞摄取 被引量:3
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作者 李倩 王明 +1 位作者 邓成程 尹东锋 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期1124-1128,1133,共6页
目的:考察不同型号、混合普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7的细胞毒性和细胞摄取,筛选出可供后续胶束研究的混合普朗尼克最优配比。方法:选取Pluronic F68、F127、P85、P105、P123,按HLB值分为2组,以一定比例交叉混合,采用CCK-8法和高效液相... 目的:考察不同型号、混合普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7的细胞毒性和细胞摄取,筛选出可供后续胶束研究的混合普朗尼克最优配比。方法:选取Pluronic F68、F127、P85、P105、P123,按HLB值分为2组,以一定比例交叉混合,采用CCK-8法和高效液相色谱法,测定普朗尼克、混合普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7的细胞毒性和细胞摄取量。结果:试验结果表明,F68、F127对细胞的毒性较小,而P85、P105、P123对细胞的毒性相对较大;当2种普朗尼克配比使用的质量浓度小于100μg·mL-1时,MCF-7及耐药MCF-7 2种细胞的存活率均大于70%。随着混合普朗尼克的浓度增加,细胞毒性均逐渐增强;F68与P85配比使用时,细胞毒性最大,且配比浓度为1∶4时的细胞毒性大于1∶2。Pluronic P85、P105、P123均可促进肿瘤细胞的药物摄取,Pluronic F68、F127基本不促进药物的摄取。F127-P123较其他混合普朗尼克表现出更强的摄取能力。结论:随着HLB值的降低及浓度的增大,普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7细胞的毒性增加。混合普朗尼克可以促进肿瘤细胞对于化疗药物的摄取。 展开更多
关键词 普朗尼克 细胞毒性 CCK-8 细胞摄取 高效液相色谱法
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新型赝复体用硅橡胶材料的体外细胞毒性评价 被引量:2
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作者 田艾 陈悦 +3 位作者 廖健 孙旭 藤敏华 梁星 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1046-1049,1056,共5页
本文对自制赝复体用硅橡胶材料的体外细胞毒性进行测定与评价,为后期临床应用提供依据。参照国标GB/T16886.5-2003,采用CCK-8法检测新型硅橡胶对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性,计算细胞相对增殖率,通过倒置相差显微镜和扫描电镜观察细... 本文对自制赝复体用硅橡胶材料的体外细胞毒性进行测定与评价,为后期临床应用提供依据。参照国标GB/T16886.5-2003,采用CCK-8法检测新型硅橡胶对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性,计算细胞相对增殖率,通过倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态。结果表明新型硅橡胶材料的细胞相对增殖率为91.65%(24h)、87.03%(48h)和87.30%(72h),细胞毒性1级,存在轻微细胞毒性。电镜观察24、48和72h的细胞均呈现典型的长梭形、长三角形形态,细胞生长良好。结果显示,新型硅橡胶材料在细胞毒性方面,符合生物医学材料要求。 展开更多
关键词 硅橡胶 赝复体 细胞毒性 CCK-8
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周期性张应力对牙周膜成纤维细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 邵扬 张广耘 袁晓 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第4期384-387,391,共5页
目的探讨周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响及其机制。方法采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组分别给予1、2、4、6、12和24 h的力学刺激,刺激幅度10%、频率为0.1 Hz... 目的探讨周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响及其机制。方法采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组分别给予1、2、4、6、12和24 h的力学刺激,刺激幅度10%、频率为0.1 Hz。以静态组为对照组。应用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测hPDLF增殖情况,RT-PCR检测增殖性细胞核抗原(PCNA)和核因子-κB(NF-κB)的表达;以NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨甲酸盐(PDTC)预处理细胞作为对照组,检测hPDLF增殖情况。结果加力组细胞在加力1、2 h增殖下降,6 h开始增殖,12 h增殖达高峰,24 h增殖受到明显的抑制;PDTC抑制细胞增殖以及pcna和nf-κB mRNA的表达。结论在一定的时间范围内,周期性张应力能促hPDLF增殖;随着时间的延长,细胞增殖受抑制;NF-κB信号传导通路在周期性张应力介导的hPDLF增殖中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 周期性张应力 人牙周膜成纤维细胞 增殖 细胞计数试剂-8 核因子-ΚB
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CCK-8法检测重组人白细胞介素-2的活性 被引量:2
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作者 马静 路琛 +2 位作者 左丽 胡平生 赵星 《贵阳医学院学报》 CAS 2011年第5期503-504,507,共3页
目的:建立快速、简便、稳定的检测白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)活性的方法。方法:利用CCK-8(cell counting kit-8)试剂盒,检测3个生产厂家的IL-2对CTLL-2细胞株增殖的影响。结果:IL-2浓度在2~2 000 U/ml范围内,IL-2浓度与细胞增... 目的:建立快速、简便、稳定的检测白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)活性的方法。方法:利用CCK-8(cell counting kit-8)试剂盒,检测3个生产厂家的IL-2对CTLL-2细胞株增殖的影响。结果:IL-2浓度在2~2 000 U/ml范围内,IL-2浓度与细胞增殖成正比,3个厂家的IL-2活性存在差异。结论:CCK-8法简便易行,结果可靠,重复性好,可用于IL-2活性的检测。 展开更多
关键词 白细胞介素2 CCK-8 生物技术
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The Characterization of Steam Distillation as an Extraction Method to Extract Volatile Compounds from <i>Prunella vulgaris</i>and the Investigation of Their Anti-Tumorous Effect
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作者 William Chi Keung Mak Sean Walsh 《Journal of Biosciences and Medicines》 2021年第8期120-142,共23页
<em>Prunella vulgaris</em> (PV) is a perennial plant which is widely grown around the world. It has been widely used as a medicinal treatment for generations. Previous studies showed extracts from this pla... <em>Prunella vulgaris</em> (PV) is a perennial plant which is widely grown around the world. It has been widely used as a medicinal treatment for generations. Previous studies showed extracts from this plant had a wide range of therapeutic efficacy, including anti-tumorous effect. However, the volatile organic compounds (VOCs) extracted from it were rarely explored. This paper reports on the characterization of a steam distillation process to extract VOCs in PV and also the anti-tumorous effects of the PV distillate using the tetrazolium-based Cell Counting Kit-8 (CCK-8) as the test agent, when the VOCs were used to treat oral squamous cancer cells, SSC154. It was found that most abundant VOCs came out steadily and continuously for as long as the duration of the steam extraction could extend. However, some compounds such as benzaldehyde did show depletion as the distillation process progressed, while some compounds such as caryophyllene oxide was only sparsely found at the beginning of distillation. The PV distillate was mildly effective in its cytotoxicity to cancer cells SCC154, in a dosage dependent manner. 展开更多
关键词 Chinese Herbal Medicine Steam Distillation Prunella vulgaris Xia Ku Cao Volatile Organic Compounds GC-MS cell Cytotoxicity cell counting kit-8
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神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨 被引量:1
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作者 于洋 柳春 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第16期15-18,共4页
目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd... 目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。 展开更多
关键词 神经生长因子 颗粒细胞 细胞计数试剂盒-8 溴脱氧尿嘧啶核苷 增殖
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姜黄素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的研究 被引量:1
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作者 蓝育青 郑海生 +1 位作者 张弛 宋欣 《中国医学工程》 2010年第1期69-71,共3页
目的研究姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts HPF)增殖的影响,探索翼状胬肉防治新方法。方法用0~80μg/mL姜黄素作用体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人翼状胬肉成纤维... 目的研究姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts HPF)增殖的影响,探索翼状胬肉防治新方法。方法用0~80μg/mL姜黄素作用体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人翼状胬肉成纤维细胞的影响。CCK-8法检测细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期时相变化。结果在0~80μg/mL浓度作用24~96h范围内,姜黄素可以抑制HPF细胞的增长,且呈剂量和时间依赖性。0、10、20、40、80μg/mL姜黄素作用24h后,姜黄素作用组均出现G0-G1期细胞百分比上升,S期细胞百分比下降,且姜黄素对成纤维细胞的抑制作用呈剂量依赖性。结论姜黄素可抑制体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增殖。 展开更多
关键词 姜黄素 翼状胬肉 成纤维细胞 CCK-8 流式细胞仪
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人源性ApoE4基因转染PC12细胞株建立及麦芽酚铝对其细胞活力影响
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作者 张婷 李立荣 +4 位作者 王姗姗 赵宇卿 张淑惠 王翡 牛侨 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第6期677-682,共6页
目的建立人源性载脂蛋白E4(ApoE4)基因转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12细胞(以下简称"PC12细胞"),探讨麦芽酚铝对该细胞株细胞活力的影响。方法将携带有人源性ApoE4基因重组慢病毒载体转染PC12细胞株,用嘌呤霉素进行筛... 目的建立人源性载脂蛋白E4(ApoE4)基因转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12细胞(以下简称"PC12细胞"),探讨麦芽酚铝对该细胞株细胞活力的影响。方法将携带有人源性ApoE4基因重组慢病毒载体转染PC12细胞株,用嘌呤霉素进行筛选,获得ApoE4稳定过表达PC12细胞株(PC12-ApoE4组)和阴性空载体对照PC12细胞株(PC12-NC组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法分别检测PC12组、PC12-NC组、PC12-ApoE4组细胞的R-Apo E和(或)H-Apo E-FLAG的mRNA相对表达量,以鉴定构建效果。分别用浓度为0.00、100.00、200.00和400.00μmol/L的麦芽酚铝溶液对PC12-ApoE4组和PC12组细胞染毒24 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率。结果 PC12-ApoE4组、PC12-NC组细胞荧光显微镜下均可见荧光表达,提示转染成功;PC12组细胞未见荧光表达。PC12组细胞R-Apo E基因、PC12-NC组细胞R-Apo E基因、PC12-ApoE4组细胞H-Apo E-FLAG基因的mRNA的相对表达量的中位数分别为1.00、1.01和148.74;其中,PC12组与PC12-NC组细胞R-Apo E基因的mRNA的相对表达量均低于PC12-ApoE4组细胞H-Apo E-FLAG基因(P<0.01)。麦芽酚铝染毒后,细胞存活率在染毒剂量及细胞类型的主效应以及交互效应上均有统计学意义(P<0.01);其中,麦芽酚铝在0.00~400.00μmol/L浓度下,随着染毒剂量的增加,2种细胞的细胞存活率均降低,均呈剂量-效应关系(P<0.01)。结论成功构建稳定表达人源性ApoE4基因的细胞株。麦芽酚铝和ApoE4基因对PC12细胞存活率的影响存在交互作用,ApoE4基因可增强麦芽酚铝对PC12细胞的细胞毒性。 展开更多
关键词 载脂蛋白E基因 PC12细胞 慢病毒转染 基因重组 聚合酶链反应 CCK-8 麦芽酚铝
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