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c-Cbl、Cbl-b和EGFR在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:9
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作者 董茜 刘云鹏 +2 位作者 曲秀娟 侯科佐 李琳琳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第1期59-64,共6页
背景与目的:c-Cbl和Cbl-b是CBL(the Casitas B-cell lymphoma)家族的两个重要成员,具有连接体功能及E3泛素连接酶功能,在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)下调过程中发挥重要作用。本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b... 背景与目的:c-Cbl和Cbl-b是CBL(the Casitas B-cell lymphoma)家族的两个重要成员,具有连接体功能及E3泛素连接酶功能,在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)下调过程中发挥重要作用。本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b和EGFR在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:将124例胃癌术后标本和16例癌旁正常胃组织制作成组织芯片,应用免疫组化方法检测c-Cbl、Cbl-b和EGFR的表达情况,并分析其与临床及病理因素的关系。结果:124例胃癌中c-Cbl、Cbl-b和EGFR的阳性率分别为71.0%、82.3%和56.5%,均显著高于癌旁正常胃组织(分别为18.0%、25.0%和12.5%,均P<0.01)。c-Cbl表达与浸润深度及病理分期呈正相关(r=0.219,P=0.015和r=0.266,P=0.003);Cbl-b表达与淋巴结转移及病理分期呈正相关(r=0.190,P=0.034和r=0.298,P=0.001);EGFR表达与浸润深度及病理分期呈正相关(r=0.286,P=0.001和r=0.362,P=0.000)。c-Cbl、Cbl-b与EGFR表达强度均呈正相关(r=0.241,P=0.007和r=0.183,P=0.042)。27例胃癌标本同时强阳性表达c-Cbl、Cbl-b和EGFR,多为分化程度差、肿瘤组织浸润程度深、淋巴结转移数目多及分期晚的病例。结论:c-Cbl、Cbl-b和EGFR的高表达与胃癌的侵袭和发展有关,c-Cbl和Cbl-b有可能成为胃癌新的分子标志物。 展开更多
关键词 C-cbl cbl-b 表皮生长因子受体(EGFR) 胃癌
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Cbl-b and PI3K/Akt pathway are differently involved in oxygen- glucose deprivation preconditioning in PC12 cells 被引量:11
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作者 Zhang Wei Yu Huan +7 位作者 Zou Wei Wang Yan-fu Liang Xiao-feng Zhang Bo Kong Jing-jing Li Pai Zhang Duo-duo Yin Lin 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2013年第21期4132-4138,共7页
Background Transient sublethal ischemia is known as ischemic preconditioning, which enables cells and tissues to survive subsequent prolonged lethal ischemic injury. Ischemic preconditioning exerts neuroprotection thr... Background Transient sublethal ischemia is known as ischemic preconditioning, which enables cells and tissues to survive subsequent prolonged lethal ischemic injury. Ischemic preconditioning exerts neuroprotection through phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt pathway. Cbl-b belongs to the Casitas B-lineage lymphoma (Cbl) family, and it can regulate the cell signal transduction.The roles of ubiquitin ligase Cbl-b and PI3K/Akt pathway and the relationship between them in oxygen-glucose deprivation preconditioninq (OGDPC) in PC12 cells were investiaated in the ore.~e.nt study 展开更多
关键词 OGD preconditioning cbl-b PI3K/Akt pathway GSK Caspase 3 bcl-2 PC12 cells
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c-Cbl、Cbl-b和EGFR在非小细胞肺癌中的表达及其预后价值 被引量:6
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作者 焦昕 金波 +4 位作者 曲秀娟 闫顺朝 侯科佐 刘云鹏 胡雪君 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第6期512-517,共6页
背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)与肺癌的发展密切相关,其功能受泛素连接酶(Casitas B-lineage lymphoma,Cbl)家族调节,本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b和EGFR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cance... 背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)与肺癌的发展密切相关,其功能受泛素连接酶(Casitas B-lineage lymphoma,Cbl)家族调节,本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b和EGFR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其在预后判断方面的应用价值。方法采用组织微阵列联合免疫组织化学染色技术检测94例NSCLC组织中c-Cbl、Cbl-b、EGFR的表达,分析其与临床病理因素及预后之间的关系。结果 c-Cbl、Cbl-b和EGFR的阳性表达率分别为30.9%(29/94)、84.0%(79/94)和60.6%(57/94)。c-Cbl、Cbl-b蛋白表达与年龄、病理类型、TNM分期、淋巴结有无转移及吸烟史无关。EGFR、c-Cbl、Cbl-b的表达与患者的总生存无明显相关。亚组分析显示,在EGFR阳性组患者中,c-Cbl阳性组患者的总生存期(overall survival,OS)明显优于c-Cbl阴性组的患者(P=0.014)。结论检测c-Cbl蛋白的表达水平可能有助于预测EGFR阳性NSCLC患者的预后。 展开更多
关键词 肺肿瘤 表皮生长因子受体 C-cbl cbl-b 预后
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MicroRNA-150在结膜黏膜相关淋巴组织淋巴瘤增殖、迁移及侵袭中的作用 被引量:8
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作者 李玉珍 钱昱 +2 位作者 单彧 梁文君 魏锐利 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期727-733,共7页
目的观察结膜黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤中microRNA-150(miR-150)的表达,探讨miR-150在结膜MALT淋巴瘤中影响肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制。方法使用qPCR法检测第二军医大学长征医院收治的3例结膜MALT淋巴瘤患者肿瘤组织及瘤旁组... 目的观察结膜黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤中microRNA-150(miR-150)的表达,探讨miR-150在结膜MALT淋巴瘤中影响肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制。方法使用qPCR法检测第二军医大学长征医院收治的3例结膜MALT淋巴瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中miR-150及其可能的下游靶分子Cbl-b的表达。将miR-150抑制物和阴性对照转染人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226,采用CCK-8法和流式细胞术研究miR-150对RPMI 8226细胞增殖和凋亡的影响,通过Transwell实验研究miR-150对RPMI 8226细胞迁移和侵袭的影响,用蛋白质印迹法检测miR-150对RPMI 8226细胞中Cbl-b表达的调控。结果与瘤旁组织相比,结膜MALT淋巴瘤组织中miR-150表达上调(P<0.05,P<0.01);抑制miR-150后,RPMI 8226细胞的增殖受到抑制,细胞凋亡明显增加,迁移和侵袭能力降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在结膜MALT淋巴瘤组织中,miR-150下游靶基因Cbl-b表达下调(P<0.01);抑制miR-150后,RPMI 8226细胞内Cbl-b蛋白的表达上调(P<0.01)。结论 MiR-150对淋巴瘤细胞的增殖、迁移和侵袭有促进作用,其表达上调参与了MALT淋巴瘤的发生。其机制可能与miR-150对下游分子Cbl-b的抑制性调控有关。 展开更多
关键词 结膜肿瘤 黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 microRNA-150 cbl-b 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵袭
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E3泛素连接酶Cbl家族在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 张邢松 沈蓉 +1 位作者 朱兴华 缪小兵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期34-39,共6页
目的:探讨Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B-lineage lymphoma,Cbl)蛋白家族在子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达及临床意义。方法:利用免疫组化法检测114例CSCC中c-Cbl、Cbl-b和Cbl-c的表达情况,分析c-Cb... 目的:探讨Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B-lineage lymphoma,Cbl)蛋白家族在子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达及临床意义。方法:利用免疫组化法检测114例CSCC中c-Cbl、Cbl-b和Cbl-c的表达情况,分析c-Cbl、Cbl-b和Cbl-c表达水平与CSCC患者临床病理特征、无瘤生存期(disease free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)的关系。结果:114例CSCC患者中,c-Cbl高表达87例,低表达27例;Cbl-b高表达69例,低表达45例;Cbl-c高表达55例,低表达59例。c-Cbl在癌组织和癌旁鳞状上皮组织化学评分(histochemistry score,H-score)分别为143.80±8.76、95.13±6.54,其在癌组织中的表达高于癌旁鳞状上皮(P<0.001);Cbl-b在癌组织和癌旁鳞状上皮H-score分别为83.95±5.28、93.54±3.91,其在癌和癌旁鳞状上皮中的表达无差异(P=0.146);Cbl-c在癌组织和癌旁鳞状上皮H-score分别为83.62±6.34、36.54±4.64,其在癌组织中的表达高于癌旁鳞状上皮(P<0.001)。c-Cbl在高~中分化以及最大径<4 cm肿瘤中表达较高(P均<0.05),但c-Cbl表达与患者年龄、脉管侵犯、浸润深度、淋巴结转移以及FIGO分期无关(P均>0.05)。Cbl-b在浸润深度>2/3纤维肌层患者中表达较高(P=0.045),但Cbl-b表达与患者年龄、脉管侵犯、肿瘤分化、肿瘤最大径、淋巴结转移以及FIGO分期无关(P均>0.05)。Cbl-c在低分化肿瘤中表达较高(P=0.012),但Cbl-c表达与患者年龄、脉管侵犯、浸润深度、肿瘤最大径、淋巴结转移以及FIGO分期无关(P均>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示:c-Cbl高表达患者比低表达患者的DFS和OS长(P均<0.05);Cbl-b以及Cbl-c表达与患者的DFS和OS均无关(P均>0.05)。Cox单因素和多因素分析显示:c-Cbl表达是影响DFS的独立预后因素(P=0.042);c-Cbl表达是影响OS的相关因素,但不是OS的独立预后因素(P=0.096)。结论:c-Cbl高表达CSCC患者比低表达患者的DFS和OS延长;c-Cbl表达是影响DFS的独立预后因素,但不是OS的 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 鳞状细胞癌 泛素连接酶 C-cbl cbl-b cbl-c
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泛素连接酶Cbl-b调控p38MAPK在胰岛素与硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡中的作用 被引量:5
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作者 徐天娇 刘勇 +2 位作者 李萍 胥晓丽 曾菊绒 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1170-1174,共5页
目的初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只,随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病模型组(DCM组)、糖尿病心肌病+胰岛素组(DCM+In组)、糖尿病心肌病+硒组(DCM+Se组)、糖尿病心肌病+... 目的初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只,随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病模型组(DCM组)、糖尿病心肌病+胰岛素组(DCM+In组)、糖尿病心肌病+硒组(DCM+Se组)、糖尿病心肌病+胰岛素+硒组(DCM+In+Se组)。TUNEL法观察心肌细胞凋亡;Western blot观察凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3和PARP剪切片段的变化,同时观察Cbl-b和p38MAPK表达变化;免疫沉淀法检测Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用。结果胰岛素与硒协同抑制心肌细胞凋亡(P<0.01);胰岛素联合硒协同,增加Cbl-b的表达,降低p38MAPK表达(P<0.01);两药联合协同增加Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用(P<0.01)。结论胰岛素与硒通过调控Cbl-b,抑制p38MAPK而阻止Bax转位来协同抑制心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 胰岛素 糖尿病心肌病 凋亡 cbl-b P38丝裂原活化蛋白激酶 KU70
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程序性死亡受体配体1和E3泛素连接酶Cbl-b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 李鹏 常玉喜 +7 位作者 王慧娟 张国伟 闫相涛 张米娜 杨金坡 张晓娟 马杰 马智勇 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第1期45-49,共5页
目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)和E3泛素连接酶Cbl-b蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取2004年7月至2009年6月河南省肿瘤医院保存的NSCLC组织标本及癌旁组织标本各165例,制作组织切片。采用免疫组织化学... 目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)和E3泛素连接酶Cbl-b蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取2004年7月至2009年6月河南省肿瘤医院保存的NSCLC组织标本及癌旁组织标本各165例,制作组织切片。采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达,并分析NSCLC组织中PD-L1与Cbl-b蛋白表达的关系,以及PD-L1、Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率分别为72. 73%(120/165)、38. 79%(64/165),癌旁组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率均为7. 88%(13/165); NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率显著高于癌旁组织(χ~2=5. 292、3. 076,P <0. 05)。PD-L1蛋白表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数、病理类型及病理分级无关(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者的性别及肿瘤病理类型有关(P <0. 05),与患者的年龄、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数及病理分级无关(P> 0. 05)。NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达呈直线关系(R2=0. 075,P <0. 01),其模型为y=21. 464 93+0. 532 65x。PD-L1蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位总生存期(OS)分别为45. 0、52. 0个月,PD-L1蛋白高表达与低表达NSCLC患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。75例鳞状细胞癌患者中,PD-L1蛋白高表达和低表达患者的中位OS分别为45. 0、81. 0个月,PD-L1蛋白高表达的鳞状细胞癌患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。90例腺癌患者中,PD-L1高表达和低表达患者的中位OS分别为50. 0、39. 0个月,PD-L1高表达与低表达腺癌患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位OS分别为39. 0、54. 5个月,Cbl-b蛋白高表达患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。结论 Cbl-b和PD-L1蛋白在NSCLC组织中均呈高表达。PD-L1与Cbl-b蛋白表达呈直线相关。Cbl-b蛋白表达情况与 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 程序性死亡受体1 程序性死亡受体配体1 E3泛素连接酶 cbl-b
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多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞c-Cbl和Cbl-b基因表达下调 被引量:2
8
作者 方苏 郭翔宇 +5 位作者 冷秀秀 李萡 牛宇哲 陈少华 杨力建 李扬秋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期842-845,共4页
目的 研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中c-Cbl和Cbl-b基因表达情况。方法 收集23例MM患者和22例健康人PBMC, 利用SYBR-Green 实时荧光定量PCR方法检测MM患者和健康人PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因相对表达水平; 利用RT-PC... 目的 研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中c-Cbl和Cbl-b基因表达情况。方法 收集23例MM患者和22例健康人PBMC, 利用SYBR-Green 实时荧光定量PCR方法检测MM患者和健康人PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因相对表达水平; 利用RT-PCR方法分别扩增MM患者和健康人c-Cbl基因第7-10外显子, 并对PCR产物进行序列分析。结果MM组c-Cbl表达水平(中位数0.798%), 与健康对照组c-Cbl表达水平(中位数2.443%)相比, 显著降低(P〈0.05); Cbl-b表达水平(中位数0.714%)与健康对照组Cbl-b表达水平(中位数2.179%)比较, 也显著降低(P〈0.05﹚。在2例MM患者中检测到c-Cbl基因第7-10外显子存在2个大小不同的片段: 483 bp和148 bp, 分别为野生型c-Cbl和删除突变的c-Cbl基因, 所有PCR产物测序后均未发现突变。结论 MM患者PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因表达下调。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 C-cbl cbl-b 荧光定量PCR RT-PCR
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ITP中T细胞活化信号分子c-Cbl和Cbl-b的表达变化 被引量:3
9
作者 钟隽 陈少华 +5 位作者 郁志 陆帅 谭家雄 杨力建 李萡 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期472-475,共4页
目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健... 目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健康成人作为对照.结果:ITP组Cbl-b的表达水平(中位数为0.091%)与健康成人组Cbl-b的表达水平(中位数为0.366%)相比,明显降低(P<0.001);而c-Cbl基因在ITP组中的表达水平(中位数为0.372%)与健康成人组的表达水平(中位数为0.298%)相比没有统计学差异,但c-Cbl基因在ITP女性患者样本中的表达水平(中位数为0.236%)明显低于男性患者样本c-Cbl的表达水平(中位数为0.479%)(P=0.039).结论:ITP患者外周血中Cbl-b表达下调,可能是其T细胞免疫异常活化的原因之一. 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 cbl-b C-cbl 基因表达
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泛素连接酶Cbl—b基因短发卡RNA慢病毒载体构建及其对A375细胞生物学行为的影响 被引量:1
10
作者 王小坡 倪娜娜 +5 位作者 熊竞舒 宋昊 姜祎群 陈浩 曾学思 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期177-181,共5页
目的 构建人泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA(shRNA)重组慢病毒载体,探讨其对人黑素瘤A375细胞生物学行为的影响。方法 设计并合成3条沉默Cbl-b 基因的特异性shRNA及1条阴性对照shRNA,构建慢病毒载体。将A375细胞分成5组,即分别用3... 目的 构建人泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA(shRNA)重组慢病毒载体,探讨其对人黑素瘤A375细胞生物学行为的影响。方法 设计并合成3条沉默Cbl-b 基因的特异性shRNA及1条阴性对照shRNA,构建慢病毒载体。将A375细胞分成5组,即分别用3条特异性shRNA转染的CBLB-shRNA-1组、CBLB-shRNA-2组、CBLB-shRNA-3组,阴性对照组(阴性对照shRNA转染),空白对照组(转染空载体)。应用实时荧光定量PCR和Western印迹检测转染后72 h各组A375细胞沉默效率;CCK8法检测转染后24、48、72及96 h细胞增殖能力;流式细胞仪检测转染后72 h细胞凋亡情况、细胞周期,Transwell法检测转染后72 h细胞侵袭能力。结果 成功构建3条Cbl-b shRNA慢病毒载体,Western印迹示CBLB-shRNA-3蛋白沉默效率最高。CCK8检测表明,CBLB-shRNA-3组A375细胞增殖能力在转染后72 h和96 h较阴性对照组、空白对照组明显降低(均P 〈 0.01)。流式细胞仪检测示,CBLB-shRNA-3组凋亡率[(22.73 ± 6.58)%]明显高于阴性对照组[(6.08 ± 1.35)%]和空白对照组[(6.34 ± 1.07)%,均P 〈 0.01]。CBLB-shRNA-3组G1期细胞比例明显高于阴性对照组和空白对照组(P 〈 0.01),而S期细胞比例明显低于阴性对照组和空白对照组(P 〈 0.01)。Transwell检测示,阴性对照组、空白对照组和CBLB-shRNA-3组转染后72 h时穿膜细胞数分别为76.60 ± 1.82、73.20 ± 3.83、19.60 ± 1.14,差异有统计学意义(F = 794.50,P 〈 0.01)。结论 成功构建能高效沉默Cbl-b蛋白的CBLB-shRNA-3重组shRNA慢病毒载体,其可促进A375细胞凋亡,抑制A375细胞增殖、细胞周期进程和侵袭能力。 展开更多
关键词 黑素瘤 原癌基因蛋白质c—cbl RNA 小分子干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 基因 cbl-b A375细胞 短发卡RNA
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Cbl-b基因shRNA干扰载体的构建及鉴定 被引量:3
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作者 胡彬 倪娜娜 +3 位作者 吕雅琳 陈浩 刘毅 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期204-207,共4页
目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Ne... 目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,并予以DNA测序鉴定.重组干扰质粒构建成功后,将干扰质粒与Cbl-b过表达载体共转染293T细胞,于转染后48 h,通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测各质粒对Cbl-b基因的表达抑制效应.结果 测序分析证实,4对shRNA寡核苷酸序列分别成功插入至shRNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo中,将构建成功的PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒与Cbl-b真核表达载体共转染细胞48 h后,通过荧光实时定量PCR法及Western印迹测定,发现4条shRNA序列对Cbl-b的表达均有一定的抑制效应,其中以1号shRNA序列重组质粒对Cbl-b表达的抑制程度最高(P<0.05).结论 成功构建并筛选出沉默效应最高的Cbl-b shRNA真核细胞表达载体. 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 RNA 小分子干扰 黑色素瘤
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Cbl-b基因介导T细胞免疫杀伤小鼠LA795肺腺癌细胞的实验研究 被引量:3
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作者 黄海涛 张华 《临床肺科杂志》 2017年第3期538-541,共4页
目的利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默T细胞Cbl-b基因表达,观察转染T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。方法筛选高效特异性沉默Cbl-b基因的siRNA序列转染T739小鼠脾脏T细胞,转染72h后,利用酶联免疫... 目的利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默T细胞Cbl-b基因表达,观察转染T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。方法筛选高效特异性沉默Cbl-b基因的siRNA序列转染T739小鼠脾脏T细胞,转染72h后,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-2、INF-γ等T细胞免疫因子分泌情况,比较单纯T细胞、阴性对照T细胞及转染T细胞与小鼠肺腺癌细胞LA795混合培养肿瘤杀伤率。结果转染72h后,转染组细胞因子IL-2、INF-γ分泌水平较空转组和空白组显著增加。在体外实验中,与单纯T细胞及阴性对照T细胞相比,转染T细胞能更高效杀伤小鼠肺腺癌细胞LA795,最高杀瘤率达到58.38±3.82%。结论利用特异性siRNA技术沉默Cbl-b基因能够促进小鼠T细胞因子IL-2和INF-γ分泌,增强T细胞对肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。 展开更多
关键词 cbl-b 基因沉默 T淋巴细胞 肺腺癌 免疫疗法
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乳腺癌组织CBL-B蛋白表达与生物学行为和预后关系 被引量:3
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作者 邓淳 肖斌 +3 位作者 李纬玮 陆景润 李林海 莫非 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期276-282,共7页
目的Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B cell lymphoma,CBL)蛋白家族是一组具有环指结构域(really interesting new gene,RING)的E3泛素连接酶,CBL-B正是其中一员。本研究探讨CBL-B蛋白在乳腺癌组织中表达与预后的关系,为乳腺癌分子机制研... 目的Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B cell lymphoma,CBL)蛋白家族是一组具有环指结构域(really interesting new gene,RING)的E3泛素连接酶,CBL-B正是其中一员。本研究探讨CBL-B蛋白在乳腺癌组织中表达与预后的关系,为乳腺癌分子机制研究及改善患者预后提供帮助。方法免疫组化染色检测CBL-B在30例取自台州医院的乳腺癌组织和癌旁组织表达;通过构建过表达CBL-B的MDA-MB-231细胞株与正常的MDA-MB-231细胞株进行Transwell细胞迁移以及细胞侵袭实验;从USCS Xena数据库下载乳腺癌基因表达及临床信息等相关数据共1217例,通过生物信息学分析CBL-B对乳腺癌临床预后的作用。结果免疫组化实验结果显示,CBL-B在正常组织中得分(265.79±37.3)高于乳腺癌组织(205.39±27.6),t=25.67,P<0.001。Transwell迁移小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为78±17、41±14,t=11.401,P=0.001;侵袭小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为83±15、33±12,t=13.020,P=0.001;显示CBL-B蛋白对MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移与侵袭能力均呈现抑制作用。在不同分子分型中,除HER2+亚型以外(t=0.689,P=0.481),CBL-B基因表达水平在Luminal A型(2.013±0.721,t=10.283,P=0.013)、Luminal B型(1.974±1.321,t=13.721,P=0.002)和基底样乳腺癌(2.152±1.220,t=12.321,P=0.005)中,均低于正常组织(2.321±0.317)。在不同浸润程度中,CBL-B基因表达水平(2.112±0.542)在混合型乳腺癌中最高,t=15.782,P=0.001;在黏液癌中(1.636±0.624)最低,t=14.212,P=0.001;生存曲线分析结果显示,CBL-B高表达的乳腺癌患者生存率较高,说明CBL-B与乳腺癌预后具有潜在的关联性,P<0.001。结论CBL-B表达水平与乳腺癌患者预后呈正关联,且在乳腺癌中呈现低表达的特点,预示它可能成为影响乳腺癌患者预后的一个新作用靶点。 展开更多
关键词 cbl-b 乳腺癌 分子分型 浸润程度 临床预后
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Cbl-b调控T细胞的免疫耐受 被引量:4
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作者 张梦瑶 孙晓莉 +1 位作者 唐丽 贺福初 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期445-447,共3页
免疫系统是一个复杂的有机整体,作为调控免疫耐受的分子之一,Cbl-b主要通过诱导T细胞无能与调控性T细胞来负调控免疫作用。本综述旨在阐述Cbl-b负调控免疫作用的具体机制,以及其自身的表达调控机制,以此找到一个新颖且重要的疾病治疗方向。
关键词 cbl-b 免疫抑制 T细胞无能 泛素 免疫突触 调控性T细胞
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c-Cbl和Cbl-b在胃癌组织中的表达及其临床意义
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作者 李向阳 卢文杰 朱琼琼 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第22期3526-3531,共6页
目的:研究c-Cbl和Cbl-b在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法:选取2012-01/2014-12河南医学高等专科学校附属医院经手术切除得到了胃癌组织标本100例,设为观察组,另外选择其中20例癌旁正常胃组织标本设为对照组,将2组标本均制为组织芯片... 目的:研究c-Cbl和Cbl-b在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法:选取2012-01/2014-12河南医学高等专科学校附属医院经手术切除得到了胃癌组织标本100例,设为观察组,另外选择其中20例癌旁正常胃组织标本设为对照组,将2组标本均制为组织芯片,通过免疫组织化学方法对c-Cbl和Cbl-b表达的情况进行检测,研究其表达与临床病理特征间的关系.结果:c-Cbl和Cbl-b在观察组中的阳性率分别为72.0%与83.0%,均高于对照组(阳性率分别为20.0%与25.0%);c-Cbl在胃癌组织中的表达与胃癌的病理分期和浸润深度呈明显正相关,其表达量随着病理分期加重、浸润深度加深而增加.Cbl-b在胃癌组织中的表达与胃癌的病理分期和淋巴结是否转移呈明显正相关,其表达量随着病理分期加重、淋巴结发生转移而增加;c-Cbl和Cbl-b在胃癌组织中的表达呈正相关(P<0.05),两种蛋白同时呈强阳性表达者29例,病例的临床病理特征主要是分期晚、淋巴结转移数目多、肿瘤组织浸润程度深和分化程度差.结论:胃癌的发展与侵袭会增加c-C b l和Cbl-b表达的阳性率,c-Cbl和Cbl-b的检测对于胃癌的临床诊断有一定的临床意义与价值,值得推广. 展开更多
关键词 C-cbl cbl-b 胃癌组织 表达 临床意义
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Cbl-b基因和血小板参数在免疫性血小板减少症病人中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 张丹 吴冬会 +3 位作者 傅磊 陆尧 王科 李玉云 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第10期1412-1416,共5页
目的:检测Cbl-b基因和血小板参数在原发免疫性血小板减少症(ITP)病人外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达情况,并研究其临床意义。方法:选取68例初诊的ITP病人(ITP组)和同期40名健康的体检者(对照组)为研究对象,检测并比较2组间Cbl-b mRNA... 目的:检测Cbl-b基因和血小板参数在原发免疫性血小板减少症(ITP)病人外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达情况,并研究其临床意义。方法:选取68例初诊的ITP病人(ITP组)和同期40名健康的体检者(对照组)为研究对象,检测并比较2组间Cbl-b mRNA的相对表达量和血小板参数血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)和大血小板比率(P-LCR)的差异,分析ITP组病人不同亚组分组间Cbl-b mRNA表达的差异以及其与部分临床指标的相关性,分别采用logistic回归和ROC曲线分析发生ITP的影响因素以及其对ITP的诊断价值。结果:ITP组Cbl-b mRNA的表达和PLT低于对照组,MPV、PDW和P-LCR高于对照组(P<0.01)。Cbl-b mRNA的表达随着血小板分级增高而增高,出血评分<2分组的Cbl-b mRNA的表达量高于出血评分≥2分组(P<0.05~P<0.01)。Cbl-b mRNA的表达与PLT呈正相关关系(P<0.01),与出血评分、MPV和P-LCR均呈负相关关系(P<0.05~P<0.01)。logistic回归分析表明Cbl-b mRNA低表达(OR=17.525,95%CI:2.589~118.637)、MPV升高(OR=2.515,95%CI:1.506~4.200)和P-LCR升高(OR=1.211,95%CI:1.067~1.376)可能是ITP发生的独立危险因素(P<0.01)。ROC曲线分析显示Cbl-b mRNA、MPV、P-LCR及三者联合预测发生ITP的AUC分别是0.920、0.899、0.883和0.972,联合检测的预测AUC均高于单项检测。结论:ITP病人PBMCs中Cbl-b基因表达降低,MPV和P-LCR升高,Cbl-b与出血评分、PLT、MPV和P-LCR有一定的相关性,三者的异常表达是发生ITP的危险因素,联合检测三者对于是否发生ITP具有较高预测价值。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 cbl-b 血小板参数 危险因素
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小干扰RNA对小鼠淋巴细胞cbl-b基因表达的抑制作用 被引量:2
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作者 史振铎 陈卫华 +6 位作者 陆英 杨波 温晓飞 李学峰 李良 胡昕海 王跃闽 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1172-1174,共3页
目的设计合成及筛选自身免疫关键基因——chl—b(Casitas B-cell lineage lymphoma-b,cbl—b)基因小分子干扰RNA(siRNA)。方法应用RNA设计软件,模拟cbl—b小鼠cbl—bmRNA二级结构,设计并合成针对cbl—bmRNA的4对21核苷酸(nt)si... 目的设计合成及筛选自身免疫关键基因——chl—b(Casitas B-cell lineage lymphoma-b,cbl—b)基因小分子干扰RNA(siRNA)。方法应用RNA设计软件,模拟cbl—b小鼠cbl—bmRNA二级结构,设计并合成针对cbl—bmRNA的4对21核苷酸(nt)siRNA,96孔板转染小鼠淋巴细胞,以空白及转染非特异siRNA(与cbl—bmRNA无同源性的21ntsiRNA)作为对照,应用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测小鼠淋巴细胞cbl—b蛋白表达。结果cbl—b基因siRNA工作浓度为100nmol/L时转染小鼠淋巴细胞转染率最高,可达(87.48±1.94)%,平均荧光强度最强,可达33.09±1.77。与对照相比,转染cbl—b siRNA的小鼠淋巴细胞蛋白表达明显下调,以siRNA-4最显著,抑制率达85%,转染非特异性siRNA的小鼠淋巴细胞cbl—b蛋白表达水平无明显变化。结论得到cbl—b siRNA转染小鼠淋巴细胞最佳转染条件,成功筛选能高效抑制cbl—b蛋白表达的siRNA-4,其有效抑制时间约为48h,有望通过沉默cbl—b基因直接活化淋巴细胞,增强机体主动免疫杀伤肿瘤细胞。 展开更多
关键词 cblb 小干扰RNA 淋巴细胞
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MiRNA在E3泛素连接酶Cbl-b抑制CD4^+T细胞活化中的作用研究 被引量:2
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作者 闫韵秋 张进平 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2017年第6期441-448,共8页
本研究探讨miRNA在Cbl-b抑制CD4^+T细胞活化中的作用机制。采用miRNA深度测序的方法检测WT CD4^+T细胞、Cbl^(-b-)/-CD4^+T细胞、抗CD3抗体活化的WT CD4^+T细胞和抗CD3抗体活化的Cbl-b^(-/-)CD4^+T细胞中miRNA的表达谱。结果显示,miR-12... 本研究探讨miRNA在Cbl-b抑制CD4^+T细胞活化中的作用机制。采用miRNA深度测序的方法检测WT CD4^+T细胞、Cbl^(-b-)/-CD4^+T细胞、抗CD3抗体活化的WT CD4^+T细胞和抗CD3抗体活化的Cbl-b^(-/-)CD4^+T细胞中miRNA的表达谱。结果显示,miR-125b-2-3p、miR-125b-5p、miR-99a-5p和miR-99a-3p同时在Cbl-b-/-CD4^+T细胞和抗CD3抗体活化的Cbl-b^(-/-)CD4^+T细胞中显著高表达。运用miRWalk2.0预测差异表达miRNA的靶基因并用GO和KEGG分析差异表达的miRNA的可能作用机制。结果显示差异表达的miRNA可能通过MAPK等信号通路来影响Cbl-b抑制CD4^+T细胞的活化。综上所述,Cbl-b可能通过miR-125b-2-3p、miR-125b-5p、miR-99a-5p和miR-99a-3p等miRNA调控MAPK等信号通路来抑制CD4^+T细胞的活化。 展开更多
关键词 cbl-b CD4+T细胞 MIRNA 深度测序
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泛素连接酶Cbl-b在黑素瘤组织和细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义 被引量:2
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作者 王小坡 温斯健 +5 位作者 粟倩雅 宋昊 倪娜娜 姜祎群 陈浩 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期861-864,共4页
目的:探讨泛素连接酶Cbl-b在皮肤黑素瘤组织及黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法收集69份黑素瘤、30份色素痣组织,采用免疫组化法检测Cbl-b蛋白表达水平。实时荧光定量PCR、免疫印迹法分别检测黑素瘤细胞系A375、M14、... 目的:探讨泛素连接酶Cbl-b在皮肤黑素瘤组织及黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法收集69份黑素瘤、30份色素痣组织,采用免疫组化法检测Cbl-b蛋白表达水平。实时荧光定量PCR、免疫印迹法分别检测黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞中Cbl-b mRNA及蛋白表达水平。结果69份皮肤黑素瘤标本中,52份(75.36%)表达Cbl-b;30份色素痣标本中,4份(13.33%)表达Cbl-b,两组Cbl-b蛋白表达水平差异有统计学意义(χ2=32.745,P〈0.01)。黑素瘤组织中Cbl-b表达水平与肿瘤进展程度、Clark分级和Breslow厚度均呈正相关(rs分别为0.569、0.654、0.727,均P〈0.01)。实时荧光定量PCR显示,A375、M14、MV3细胞Cbl-b mRNA表达差异有统计学意义(F=176.537,P〈0.01)。免疫印迹法显示,A375细胞Cbl-b蛋白表达水平最高,黑素细胞最低。结论 Cbl-b蛋白在皮肤黑素瘤组织及其细胞株中均高表达。 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 黑色素瘤 黑素细胞 肿瘤侵润 肿瘤分级 cbl-b
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microRNA-1183通过抑制CBL-B的表达促进胃癌细胞的增殖及转移 被引量:1
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作者 范一博 车晓芳 +3 位作者 赵欢 胡雪君 曲秀娟 刘云鹏 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期202-205,211,共5页
目的研究micro RNA-1183对胃癌细胞增殖及转移的影响,初步探讨micro RNA-1183和CBL-B信号转导通路在此过程中的作用。方法将人胃癌细胞MGC803瞬时转染micro RNA模拟物micro RNA-1183,采用实时PCR法检测胃癌细胞中micro RNA-1183的表达,... 目的研究micro RNA-1183对胃癌细胞增殖及转移的影响,初步探讨micro RNA-1183和CBL-B信号转导通路在此过程中的作用。方法将人胃癌细胞MGC803瞬时转染micro RNA模拟物micro RNA-1183,采用实时PCR法检测胃癌细胞中micro RNA-1183的表达,MTT法检测细胞增殖的能力,Transwell法检测细胞的转移。双荧光素酶报告基因检测系统检测micro RNA-1183与CBL-B的结合,Western blotting观察蛋白的表达。结果 MTT法显示micro RNA-1183可促进胃癌细胞MGC803的增殖,Transwell法显示micro RNA-118促进了胃癌细胞MGC803的转移。BLAST对比分析结果显示,CBL-B是micro RNA-1183的靶基因之一。Western blotting结果显示,过表达micro RNA-1183后,CBL-B的表达明显下调。双荧光素酶报告基因检测系统证实CBL-B是micro RNA-1183的靶基因。敲除CBL-B后,促进了MGC803的增殖与转移。micro RNA-1183通过抑制CBL-B促进了胃癌细胞MGC803的增殖与转移。结论 micro RNA-1183通过抑制CBL-B的表达,促进胃癌细胞MGC803的增殖及转移。 展开更多
关键词 胃癌 microRNA-1183 cbl-b 增殖 转移
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