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后囊膜混浊的体外上皮-间质转化模型的建立 被引量：1
1
作者 杨宝霞 王晔 +2 位作者 赵晓雯 刘廷 黄钰森 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期210-217,共8页
背景上皮一间质转化（EMT）是导致后囊膜混浊（PCO）的主要发病机制之一，研究LECs的EMT过程对PCO的防治具有重要意义，但目前缺乏研究EMT的PCO体外细胞模型。目的建立新的人晶状体囊外摘出术PCO的体外囊袋培养模型，探讨PCO形成过程中L... 背景上皮一间质转化（EMT）是导致后囊膜混浊（PCO）的主要发病机制之一，研究LECs的EMT过程对PCO的防治具有重要意义，但目前缺乏研究EMT的PCO体外细胞模型。目的建立新的人晶状体囊外摘出术PCO的体外囊袋培养模型，探讨PCO形成过程中LECsEMT的发生情况。方法利用健康供体的40只尸眼行体外模拟的白内障摘出术，游离晶状体囊袋后用昆虫针固定于培养皿，置于含体积分数10％胎牛血清的DMEM／F12培养液中培养4周，分别于培养后0、3、7、14和28d在光学显微镜下观察培养囊袋中LECs的生长情况；收集0、3、7和28d的囊袋组织制备组织病理学切片，采用苏木精一伊红染色法检测囊袋上LECs的细胞形态；采用免疫组织化学染色法检测EMT标志物OL—SMA、E—cadherin和Vimentin蛋白在囊袋上LECs中的表达和定位；采用实时荧光定量PCR和Westernblot法检测不同时间点囊袋上LECs中a-SMA、E—cadherin和VimentinmRNA及其蛋白的表达变化。结果未进行培养的囊袋后囊膜上未发现LECs生长，囊袋培养后3d可见后囊膜周边出现LECs并逐渐向中央区增生，培养后7dLECs完全覆盖后囊膜，略呈铺路石样外观并出现皱褶，此后随着培养时间的延长皱褶的数量增多并伸长，囊袋张力增强。免疫组织化学染色结果显示，随培养时间的延长，囊袋上LECs中E—cadherin的表达强度逐渐下降，而a-SMA和Vimentin的表达强度逐渐增强。实时荧光定量PCR检测表明，培养后0、3、7、14和28d囊袋上LECs中E—cadherinmRNA的相对表达量分别为3．35±0．13、1．47±0．20、1．13±0．14、1．00±0．85和0．23±0．03，VimentinmRNA的相对表达量分别为1．00±0．73、1．05±0．14、2．24±0．43、2．84±0．34和8．570±0．40，d—SMAmRNA的相对表达量分别为1．00±0．06、2．68±0．28、4．24±0．05、2．05±0．90和15．30±0．19，总体比较差异均有统计学意义（E—c 展开更多
关键词 上皮-间质转化 晶状体上皮细胞 后发性白内障 白内障摘出/不良反应 晶状体囊 细 胞培养 人 囊袋模型
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载药型晶状体囊袋张力环对猪眼晶状体囊袋内上皮细胞增殖的影响
2
作者 赵玉新 王昭霞 +5 位作者 高夕宁 曾蕊 李静 叶少碧 季配红 吴明星 《中国医师杂志》 CAS 2012年第5期580-584,共5页
目的研究载药型晶状体囊袋张力环对体外培养猪眼晶状体囊袋模型中晶状体上皮细胞增殖的影响，探讨载药型晶状体囊袋张力环防治后发性白内障的可能性。方法连续环形撕囊晶状体超声乳化吸除术制备猪眼晶状体囊袋模型，并随机分为CTR组：... 目的研究载药型晶状体囊袋张力环对体外培养猪眼晶状体囊袋模型中晶状体上皮细胞增殖的影响，探讨载药型晶状体囊袋张力环防治后发性白内障的可能性。方法连续环形撕囊晶状体超声乳化吸除术制备猪眼晶状体囊袋模型，并随机分为CTR组：植入未经处理的晶状体囊袋张力环（n=13）；CTR—PLGA，biG132组：植入表面包裹PLGA—MG132的晶状体囊袋张力环（n=13）。晶状体囊袋模型体外培养3周，显微镜下方格计数法计算后囊膜细胞移行面积；晶状体囊袋模型行组织病理学检查；ELISA检测纤维连接蛋白表达量的差异。结果晶状体上皮细胞经2～3d生长潜伏期后，CTR组在（9．06±1．61）d完全覆盖后囊膜；随着培养时间的延长，后囊膜上细胞层次增加，囊膜皱褶增多；组织病理学检查可见薄层均质红染的后囊膜上被覆一层或多层排列紧密、核深染胞浆丰富的晶状体上皮细胞。而CTR-PLGA-MG132组，经4～5d生长潜伏期后，即可见晶状体上皮细胞点片状脱落，呈细小圆点状，仅残留少量细胞；1周后，细胞片状脱落、漂浮，后囊膜出现无细胞覆盖区；组织病理学检查可见均质红染的后囊膜上细胞排列松散，见无细胞覆盖区，前后囊膜平整光滑。ELISA检测CTR．PLGA．MG132组囊袋模型纤维连接蛋白表达量[（25．14±3．73）μg/ml]显著小于CTR组[（106．86±22．34）μg／m1]，差异有统计学意义（t=81．72，P〈0．01）。结论相比CTR组晶状体囊袋模型，CTR．PLGA．MG132组晶状体囊袋模型残留细胞在后囊膜上移行面积、纤维连接蛋白表达均明显减少。CTR—PLGA-MG132，可有效抑制猪眼晶状体囊袋模型中晶状体上皮细胞的增殖，减少上皮．问质转化。载药型晶状体囊袋张力环是白内障术后防治后发性白内障的一种创新性尝试。 展开更多
关键词 白内障摘除术/副作用 晶体囊/代谓 /病理学 聚乙醇酸/药理学 猪
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