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重组腺病毒载体局部介导 CTLA_4Ig延长小鼠异体移植皮肤的存活 被引量：39
1
作者 罗高兴 吴军 +6 位作者 易绍萱 杨世昕 贺伟峰 周立新 张宁 陈希炜 张小蓉 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2000年第1期37-39,共3页
目的寻求一种简单可行的延长异体移植皮肤存活的方法。方法将ＣＴＬＡ_４ＩｇｃＤＮＡ插入重组腺病毒载体柯氏质粒中，再通过同源重组构建ＣＴＬＡ_４Ｉｇ－重组腺病毒载体；观察该表达载体对体外培养的皮肤组织块的转染情况；并应用该... 目的寻求一种简单可行的延长异体移植皮肤存活的方法。方法将ＣＴＬＡ_４ＩｇｃＤＮＡ插入重组腺病毒载体柯氏质粒中，再通过同源重组构建ＣＴＬＡ_４Ｉｇ－重组腺病毒载体；观察该表达载体对体外培养的皮肤组织块的转染情况；并应用该载体转染皮肤移植物及局部创面，观察其对昆明小鼠→Ｂａｌｂ　ｃ小鼠背部创面异体移植皮肤存活期的影响。结果ＣＴＬＡ_４Ｉｇ重组腺病毒载体能成功转染并达于体外培养的皮肤组织块中；局部应用ＣＴＬＡ_４Ｉｇ重组腺病毒载体使小鼠异体移植皮肤存活期延长至２１ｄ。结论用腺病毒载体局部转染ＣＴＬＡ_４Ｉｇ能有效延长异体移植皮肤的存活。 展开更多
关键词 重组腺病毒载体 CTLA4IG 小鼠 异体移植 皮肤存活 烧伤
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锰离子浓度及其转运通道对水稻幼苗镉吸收转运特性的影响 被引量：19
2
作者 徐莜 杨益新 +4 位作者 李文华 陈蕊 赵艳玲 唐琦 刘仲齐 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1429-1435,共7页
为探明锰(Mn)及其转运通道对水稻镉(Cd)吸收转运特性的影响,以水稻幼苗为材料进行水培试验,对幼苗根系和地上部Cd、Mn的积累特征及其与P-型ATP酶和非选择性阳离子通道(NSCCs)活性的关系进行研究。结果表明,0.8~1.6 mmol·L^(-1)Mn... 为探明锰(Mn)及其转运通道对水稻镉(Cd)吸收转运特性的影响,以水稻幼苗为材料进行水培试验,对幼苗根系和地上部Cd、Mn的积累特征及其与P-型ATP酶和非选择性阳离子通道(NSCCs)活性的关系进行研究。结果表明,0.8~1.6 mmol·L^(-1)Mn能显著降低水稻根系和地上部的Cd含量,并能提升水稻细胞壁中Cd的分配比率和降低胞液中Cd的分配比率。在含4.5μmol·L^(-1)Cd和1.6 mmol·L^(-1)Mn的营养液中,NSCCs对水稻根系和地上部Cd含量的贡献率分别为34.9%和17.0%,P-型ATP酶的贡献率分别为24.7%和7.6%;NSCCs对水稻根系和地上部Mn的贡献率分别为24.0%和10.3%,明显低于其对Cd的贡献率,而P-型ATP酶对根系和地上部Mn的贡献率分别为69.5%和20.3%,显著高于其对Cd的贡献率。综上认为,Cd主要通过离子通道进入水稻根系细胞,Mn主要通过载体蛋白进入水稻根系细胞。Mn可能通过竞争离子通道和载体蛋白来抑制水稻幼苗对Cd的吸收和转运。 展开更多
关键词 镉 锰 水稻 离子通道 载体蛋白
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胸腔积液肝素结合蛋白检测对肺炎旁胸腔积液鉴别诊断的临床价值 被引量：16
3
作者 张莉 白永凤 +1 位作者 蒋峻梅 祝进 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期853-857,共5页
目的探讨胸腔积液肝素结合蛋白（HBP）检测在胸腔积液患者中对肺炎旁胸腔积液（PPE）鉴别诊断的应用价值。方法病例对照研究。收集2018年2至7月在衢州市人民医院住院的189例胸腔积液患者的胸腔积液标本，其中肺炎旁胸腔积液（肺炎组）7... 目的探讨胸腔积液肝素结合蛋白（HBP）检测在胸腔积液患者中对肺炎旁胸腔积液（PPE）鉴别诊断的应用价值。方法病例对照研究。收集2018年2至7月在衢州市人民医院住院的189例胸腔积液患者的胸腔积液标本，其中肺炎旁胸腔积液（肺炎组）72例，结核性胸腔积液（结核组）24例，恶性胸腔积液（恶性组）46例，其他原因引起的漏出液（漏出液组）47例。对所有胸腔积液进行常规分析和胸腔积液乳酸脱氢酶（LDH）、胸腔积液腺苷脱氨酶（ADA）、胸腔积液总蛋白（TP）检测，并采用酶联免疫吸附法测定胸腔积液HBP水平。各组总体水平差异采用Kruskal－Wallis H检验，方差齐性多组比较采用单因素方差分析，方差不齐多组比较采用LSD检验，计数资料比较采用卡方检验。绘制ROC曲线评价胸腔积液中HBP、LDH、ADA、TP水平在PPE鉴别诊断中的应用。结果胸腔积液HBP浓度在肺炎组为316.1（99.5，399.8）ng/ml，结核组为64.7（18.6，96.8）ng/ml，恶性组15.2（8.4，33.3）ng/ml，漏出液组14.1（6.5，23.0）ng/ml。肺炎组胸腔积液HBP水平与其他3组之间比较，差异有统计学意义（H＝120.3，P〈0.05）。当cut－off值为64.2 ng/ml时受试者工作特征（ROC）曲线下面积为0.953，灵敏度为88.9%（64/72），特异度为89.7%（105/117），阳性预测值为84.2%（64/76），阴性预测值为92.9%（105/113），总符合率为89.4%（169/189）。结论胸腔积液HBP水平诊断效能高，能较好区分胸腔积液患者的PPE，可能是PPE鉴别诊断的生物标志物。 展开更多
关键词 胸水 血蛋白质类 载体蛋白质类 抗微生物阳离子肽类 肺炎 胸腔积液 诊断 鉴别
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3种色谱模式联用在中药活性成分初步筛选中的应用 被引量：11
4
作者 毛希琴 邹汉法 +4 位作者 封顺 孔亮 黄晓冬 厉欣 罗权舟 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期992-995,共4页
提出了反相高效液相色谱 (RP HPLC)、固定化脂质体色谱 (ILC)以及固定化载体蛋白色谱 (ICPC) 3种色谱模式联用筛选中药中活性成分的新思路 ,并用于传统中药川芎中的生物活性成分的初步筛选。从川芎的甲醇提取液中筛选出几种既有细胞膜... 提出了反相高效液相色谱 (RP HPLC)、固定化脂质体色谱 (ILC)以及固定化载体蛋白色谱 (ICPC) 3种色谱模式联用筛选中药中活性成分的新思路 ,并用于传统中药川芎中的生物活性成分的初步筛选。从川芎的甲醇提取液中筛选出几种既有细胞膜的穿透能力又有与载体蛋白的结合能力的成分 ,并对其中两种主要的组分进行了初步的结构鉴定。 展开更多
关键词 色谱模式联用 中药 活性成分 筛选 固定化脂质体色谱 载体蛋白 川芎 液相色谱 分离
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白喉毒素无毒变异体CRM_(197)的表达及其载体作用 被引量：12
5
作者 王春娥 叶强 李凤祥 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期687-691,共5页
目的表达白喉毒素无毒变异体CRM197,并考察其载体作用。方法利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达CRM197,用金属镍离子亲和层析纯化;以重组CRM197为蛋白载体,在EDAC的作用下,与活化的A群脑膜炎球菌荚膜多糖(GAMP)结合,制备GAMP-rC... 目的表达白喉毒素无毒变异体CRM197,并考察其载体作用。方法利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达CRM197,用金属镍离子亲和层析纯化;以重组CRM197为蛋白载体,在EDAC的作用下,与活化的A群脑膜炎球菌荚膜多糖(GAMP)结合,制备GAMP-rCRM197结合物,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法测定血清中A群脑膜炎球菌多糖特异性IgG抗体,并分析其免疫原性。结果重组CRM197在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的25%左右;Western blot证明重组CRM197具有良好的反应原性;各针接种后,结合物诱生的多糖特异性IgG水平均显著高于GAMP组和GAMP+rCRM197混合物组,具有较强的免疫原性;多次接种产生了免疫增强效应,重组CRM197具有载体蛋白的作用。结论已在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组CRM197,以纯化的重组CRM197作为载体制备的GAMP-rCRM197结合物具有良好的免疫原性,为以重组CRM197为蛋白载体制备其他结合疫苗奠定了实验基础。 展开更多
关键词 白喉毒素 无毒变异体 CRM197 载体蛋白 结合疫苗 A群脑膜炎球菌
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环丙沙星人工抗原的合成与鉴定(英文) 被引量：8
6
作者 周玉 李岩松 +2 位作者 王哲 谭建华 柳增善 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期200-203,共4页
采用碳二亚胺法将半抗原环丙沙星与卵清蛋白和牛血清白蛋白进行偶联。采用非变性凝胶电泳法和紫外分光光度法对偶联物中环丙沙星与载体蛋白的分子结合比进行分析。紫外分光光度法表明,环丙沙星与卵清蛋白和牛血清白蛋白的分子结合比分别... 采用碳二亚胺法将半抗原环丙沙星与卵清蛋白和牛血清白蛋白进行偶联。采用非变性凝胶电泳法和紫外分光光度法对偶联物中环丙沙星与载体蛋白的分子结合比进行分析。紫外分光光度法表明,环丙沙星与卵清蛋白和牛血清白蛋白的分子结合比分别为6∶1和13∶1。非变性凝胶电泳显示,即使只有6个环丙沙星分子与载体蛋白偶联,偶联物在凝胶中的迁移轨迹与载体蛋白和偶联剂处理的载体蛋白对照样品均有明显不同。结果表明,非变性凝胶电泳法和紫外分光光度法可用于环丙沙星与卵清蛋白和牛血清白蛋白分子结合比的定性分析和定量分析。 展开更多
关键词 环丙沙星 半抗原 载体蛋白 分子结合比 非变性凝胶电泳
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抗菌肽在大肠杆菌中的融合表达 被引量：9
7
作者 张学敏 金莉莉 +1 位作者 王铮 王秋雨 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1172-1181,共10页
抗菌肽作为新一代抗生素的潜在应用价值使其备受关注,大量高纯度的抗菌肽是开展基础及临床实验的关键。天然来源的抗菌肽资源有限、纯化困难,化学合成抗菌肽成本高、活性不稳定,因此通过基因重组表达得到大量抗菌肽是低成本、高效益的... 抗菌肽作为新一代抗生素的潜在应用价值使其备受关注,大量高纯度的抗菌肽是开展基础及临床实验的关键。天然来源的抗菌肽资源有限、纯化困难,化学合成抗菌肽成本高、活性不稳定,因此通过基因重组表达得到大量抗菌肽是低成本、高效益的方法。目前采用大肠杆菌表达系统获得抗菌肽已成为研究者的首选,通常以形成融合蛋白的方式表达,这不仅可避免抗菌肽对宿主的杀伤作用,也保护了抗菌肽免受蛋白酶降解。文章结合课题组的研究工作,综述了近年来抗菌肽在大肠杆菌中表达的融合载体、融合蛋白的裂解方法及表达条件优化的研究进展。 展开更多
关键词 抗菌肽 载体蛋白 融合表达 裂解方法 条件优化
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细菌多糖结合疫苗载体蛋白的免疫原性干扰作用 被引量：8
8
作者 陈琼 石继春 叶强 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第7期1034-1039,共6页
细菌多糖蛋白结合疫苗(b型流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌多糖结合疫苗)普遍用于2岁以下婴幼儿免疫。目前该类疫苗广泛使用的蛋白载体有破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、CRM19(7白喉毒素... 细菌多糖蛋白结合疫苗(b型流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌多糖结合疫苗)普遍用于2岁以下婴幼儿免疫。目前该类疫苗广泛使用的蛋白载体有破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、CRM19(7白喉毒素的一种突变体)和未分型流感嗜血杆菌蛋白D(nontypeable haemophilus influenzae protein D,PD)。本文就目前这类疫苗免疫接种中载体特异的T辅助细胞刺激作用、载体诱导的表位抑制作用(carrier-induced-epitopic suppression,CIES)和旁观者干扰效应进行初步探讨。 展开更多
关键词 多糖蛋白结合疫苗 载体蛋白 免疫原性 干扰
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新型载体蛋白P64K在大肠杆菌中的可溶性表达与纯化 被引量：3
9
作者 熊向华 赵洪亮 +3 位作者 薛冲 张伟 杨秉芬 刘志敏 《生物技术通讯》 CAS 2004年第3期231-234,共4页
用常规PCR方法从脑膜炎球菌中克隆出P64K基因,构建重组质粒pET28a-P64K转化BL21穴DE3雪宿主菌,经IPTG诱导表达筛选P64K蛋白的高表达菌株。结果证实P64K蛋白为胞内可溶性表达,表达量约占胞内总蛋白的30%。重组P64K蛋白经Butyl疏水柱、G20... 用常规PCR方法从脑膜炎球菌中克隆出P64K基因,构建重组质粒pET28a-P64K转化BL21穴DE3雪宿主菌,经IPTG诱导表达筛选P64K蛋白的高表达菌株。结果证实P64K蛋白为胞内可溶性表达,表达量约占胞内总蛋白的30%。重组P64K蛋白经Butyl疏水柱、G200分子筛柱和Q阴离子柱三步层析后纯度达到95%以上,为今后进一步的功能和应用研究打下了良好的基础。 展开更多
关键词 载体蛋白 P64K 大肠杆菌 可溶性表达 纯化 重组质粒
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质谱法测定4种真菌毒素与载体蛋白偶联物的结合比 被引量：6
10
作者 王莹 王希春 +3 位作者 金福源 何成华 郑浩 张海彬 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期219-223,共5页
采用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOFMS)对由3种真菌毒素伏马菌素B1(FB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与两种载体蛋白... 采用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOFMS)对由3种真菌毒素伏马菌素B1(FB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与两种载体蛋白卵清白蛋白(OVA)、血清白蛋白(BSA)分别偶联制备得到的4种小分子-载体蛋白偶联物FB1-OVA、FB1-BSA、OTA-BSA、DON-OVA的偶联结合比进行测定,并与紫外吸收光谱法进行比较。基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法测得偶联物FB1-OVA、FB1-BSA、OTA-BSA、DON-OVA的结合比分别为5:1、11:1、3:1、0;紫外吸收光谱法测得OTA-BSA的结合比为4.4:1,DON-OVA的结合比为3.4:1,无法测定FB1-OVA、FB1-BSA结合比。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法 紫外吸收光谱法 真菌毒素 载体蛋白 偶联物 结合比
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壳聚糖颅内局部缓释化疗载体的初步研究 被引量：4
11
作者 马金阳 黄书岚 +2 位作者 何文 徐海涛 刘仁忠 《中国临床神经外科杂志》 2005年第2期127-128,共2页
目的探讨壳聚糖作为颅内局部缓释化疗载体的可行性。方法64只SD大鼠,随机分为实验组和对照组,分别于颅内注入50μl壳聚糖混悬液或生理盐水,术后3d、7d、14d和30d采样,双抗体夹心酶标免疫分析法测量血清中NSE和S-100蛋白含量,并观察脑组... 目的探讨壳聚糖作为颅内局部缓释化疗载体的可行性。方法64只SD大鼠,随机分为实验组和对照组,分别于颅内注入50μl壳聚糖混悬液或生理盐水,术后3d、7d、14d和30d采样,双抗体夹心酶标免疫分析法测量血清中NSE和S-100蛋白含量,并观察脑组织形态学变化。结果两组血清NSE和S-100蛋白水平在各时间点均无显著差异。组织学上除实验组局部有轻度异物有反应外,与对照组无明显差异。结论壳聚糖对脑组织无明显不良影响,可用作颅内局部缓释化疗的载体。 展开更多
关键词 壳聚糖 缓释化疗 载体 脑组织 大鼠
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BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定
12
作者 柳凯月 董亚尊 +6 位作者 吴双双 马一瑄 刘鸿雁 王北艳 于立权 宋佰芬 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第1期69-76,共8页
NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基... NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 ns4b基因 载体构建 蛋白表达
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脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研究进展
13
作者 孟清霞 许项可 +1 位作者 安文珏 张珂 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期370-375,共6页
脑膜炎球菌多糖结合疫苗基本采用化学结合方式制备,最常用的方式为酰胺缩合反应,由于多糖与蛋白以共价键形式结合,因此制备的结合疫苗稳定性较高,具有较好的技术优势,在脑膜炎球菌相关疾病预防中发挥重要作用。脑膜炎球菌多糖结合疫苗... 脑膜炎球菌多糖结合疫苗基本采用化学结合方式制备,最常用的方式为酰胺缩合反应,由于多糖与蛋白以共价键形式结合,因此制备的结合疫苗稳定性较高,具有较好的技术优势,在脑膜炎球菌相关疾病预防中发挥重要作用。脑膜炎球菌多糖结合疫苗应用于2岁以内婴幼儿的免疫接种,保护效果持久。本文就脑膜炎球菌多糖结合疫苗制备的影响因素、多糖与载体蛋白的结合方式、国内外现状以及制备过程中存在的问题进行综述。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌 多糖结合疫苗 载体蛋白
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2007-2020年中国多糖结合疫苗使用现状
14
作者 陈娅妮 王迪 +4 位作者 周佳佳 曹雷 郑徽 刘艳 安志杰 《中国疫苗和免疫》 CSCD 北大核心 2024年第1期71-76,共6页
目的分析中国多糖结合疫苗使用现状。方法从中国药品检定部门网站、国家免疫规划信息管理系统和中国统计年鉴收集2007-2020年多糖结合疫苗批签发量、2014-2020年报告接种剂次数和出生人口,分析疫苗批签发量,估算出生儿童多糖结合疫苗人... 目的分析中国多糖结合疫苗使用现状。方法从中国药品检定部门网站、国家免疫规划信息管理系统和中国统计年鉴收集2007-2020年多糖结合疫苗批签发量、2014-2020年报告接种剂次数和出生人口,分析疫苗批签发量,估算出生儿童多糖结合疫苗人均接种剂次。结果2007-2020年中国多糖结合疫苗共批签发46120.4万剂,年均上升5.53%;其中TT、CRM_(197)、OMP载体蛋白的疫苗分别占92.63%、6.69%、0.68%。2014-2020年出生儿童人均接种多糖结合疫苗1.46剂,从2014年的1.17剂上升至2020年的2.51剂;东部、中部、西部地区人均接种剂次分别为1.84剂、1.62剂、1.13剂。结论2007-2020年中国多糖结合疫苗使用量逐年增加,东部地区疫苗覆盖水平相对较高。需完善多糖结合疫苗免疫策略以指导其合理使用。 展开更多
关键词 多糖结合疫苗 载体蛋白 疫苗接种 覆盖水平
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机体细胞镉摄入离子转运通道研究进展 被引量：6
15
作者 于振 朱毅 罗云波 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期10-17,共8页
镉是人体非必需金属离子,长期镉暴露易引发镉中毒。机体内没有负责镉转运的特定载体,镉可通过必需金属离子转运载体进入机体细胞。机体内能够转运镉的载体有多种,主要包括铁的转运载体二价金属离子转运蛋白1(DMT1)、钙离子通道(电压门... 镉是人体非必需金属离子,长期镉暴露易引发镉中毒。机体内没有负责镉转运的特定载体,镉可通过必需金属离子转运载体进入机体细胞。机体内能够转运镉的载体有多种,主要包括铁的转运载体二价金属离子转运蛋白1(DMT1)、钙离子通道(电压门控钙通道(VGCC)、瞬时感受器电位(TRP)和钙库调控的钙通道(SOC))以及锌铁调控蛋白ZIP家族中的ZIP8和ZIP14等,且不同的机体细胞镉吸收所需转运载体不同。转运载体对镉离子的转运符合米氏方程,不同载体调节镉吸收的米氏常数Km值不同。机体细胞镉的吸收是个复杂的过程,通常存在着多种转运载体的交互作用,机体细胞可根据环境变化而选择镉的转运载体。对镉的生理毒性,以及细胞镉吸收常用的转运载体类型加以阐述,并分析了不同机体细胞镉吸收的可能转运载体,以期为后续探究机体细胞镉吸收具体分子机制提供理论指导。 展开更多
关键词 镉 摄入机制 载体蛋白 离子转运通道 交互作用
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A群脑膜炎球菌多糖-重组蛋白Pep10结合物的制备及其免疫原性 被引量：5
16
作者 刘汉平 薛红刚 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第7期591-594,共4页
目的制备A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)-重组蛋白Pep10结合物,并检测其免疫原性,探讨重组蛋白Pep10作为一种候选载体蛋白的可行性。方法GAMP经溴化氰(CNBr)活化后,共价接合己二酰肼(ADH)手臂,在碳二亚胺(EDAC)催化下与重组蛋白Pep10偶联,制... 目的制备A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)-重组蛋白Pep10结合物,并检测其免疫原性,探讨重组蛋白Pep10作为一种候选载体蛋白的可行性。方法GAMP经溴化氰(CNBr)活化后,共价接合己二酰肼(ADH)手臂,在碳二亚胺(EDAC)催化下与重组蛋白Pep10偶联,制备结合物GAMP-ADH-Pep10。纯化后免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP IgG抗体水平,并分析载体诱导的免疫抑制率。结果所制备的多糖衍生物GAMP-ADH及多糖-蛋白结合物GAMP-ADH-Pep10均具有GAMP抗原特异活性,免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GAMP血清IgG抗体,且接近GAMP-ADH-TT疫苗诱生的抗体水平,并能形成免疫记忆。重组蛋白Pep10诱导的免疫抑制率远低于TT诱导的免疫抑制率。结论制备的重组蛋白Pep10与A群脑膜炎球菌多糖偶联能发挥较强的载体效应,为研究理想载体蛋白提供了新的思路。 展开更多
关键词 A群脑膜炎球菌多糖 载体蛋白 结合物 免疫原性
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抗Resistin合成多肽抗体的制备及鉴定 被引量：4
17
作者 赵明辉 王彦 +2 位作者 张春明 王德芝 韩佩珍 《生物医学工程与临床》 CAS 2005年第3期163-165,共3页
目的制备抵抗素合成肽及其抗体。方法根据人抵抗素cDNA编码的氨基酸序列合成抵抗素分子22～34位的13个氨基酸的多肽(CSMEEAINERIQE),并利用MBS双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫家兔制备抗抵抗素合成多肽的抗体,并经亲... 目的制备抵抗素合成肽及其抗体。方法根据人抵抗素cDNA编码的氨基酸序列合成抵抗素分子22～34位的13个氨基酸的多肽(CSMEEAINERIQE),并利用MBS双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫家兔制备抗抵抗素合成多肽的抗体,并经亲和层析进行了纯化。结果对此抗体进行鉴定的结果表明,抗人抵抗素合成多肽抗体可与天然抵抗素分子发生特异性反应,并可用于免疫沉淀和Westernblot。结论该抗体的制备为Resistin分子功能的研究及肥胖和2型糖尿病的机制研究提供了有用的工具。 展开更多
关键词 抵抗素 载体蛋白 多肽抗体 亲和层析 制备 鉴定 激素蛋白 胰岛素
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氯羟吡啶人工抗原合成和鉴定 被引量：5
18
作者 谢忠良 李文 何计国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期228-231,共4页
目的:将氯羟吡啶的衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)制备人工抗原。方法:采用威廉森合成法合成了氯羟吡啶的衍生物(CLOP-2C),再分别经活泼酯法和氯甲酸异丁酯法合成氯羟吡啶的人工抗原(CLOP-2C-BSA,CLOP-2C-OVA)。结果... 目的:将氯羟吡啶的衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)制备人工抗原。方法:采用威廉森合成法合成了氯羟吡啶的衍生物(CLOP-2C),再分别经活泼酯法和氯甲酸异丁酯法合成氯羟吡啶的人工抗原(CLOP-2C-BSA,CLOP-2C-OVA)。结果:通过TLC、质谱、红外光谱等方法鉴定表明成功制备了氯羟吡啶衍生物。紫外扫描图谱表明人工抗原偶联成功,且半抗原与载体的分子结合比率分别为8.26和4.7。结论:成功的制备了氯羟吡啶人工抗原。 展开更多
关键词 氯羟吡啶 半抗原 载体蛋白 人工抗原
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链霉菌磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶对载体蛋白的底物选择性的研究进展 被引量：5
19
作者 姚黎栋 王月月 +3 位作者 樊伟明 张仁炳 江辉 李永泉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1188-1194,共7页
磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPTase)催化脂肪酸合酶(FAS)、聚酮合酶(PKS)和非核糖体肽合成酶(NRPS)中载体蛋白从脱辅基形态转化为全辅基形态,对脂肪酸、PKS产物和NRPS产物的生物合成起着不可或缺的作用。本文介绍并总结了链霉菌PPTase对... 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPTase)催化脂肪酸合酶(FAS)、聚酮合酶(PKS)和非核糖体肽合成酶(NRPS)中载体蛋白从脱辅基形态转化为全辅基形态,对脂肪酸、PKS产物和NRPS产物的生物合成起着不可或缺的作用。本文介绍并总结了链霉菌PPTase对载体蛋白底物选择性的最新研究进展:Ⅲ型PPTase特异性催化同一个多肽链中ACP的辅基化;Ⅱ型PPTase倾向于催化Ⅰ型PKS中ACP和NRPS中PCP的辅基化;Ⅰ型PPTase倾向于催化Ⅱ型PKS中ACP和Ⅱ型FAS中ACP的辅基化;编码基因位于基因簇内的Ⅰ型/Ⅱ型PPTase倾向于催化编码基因位于同基因簇内的PKS/NRPS中ACP/PCP的辅基化;这些研究结果为阐明并改造链霉菌辅基化网络以提高特定次级代谢产物的产量提供了参考和借鉴。 展开更多
关键词 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶 载体蛋白 聚酮合酶 非核糖体肽合成酶
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硫胺素的生理作用及导致其缺乏的主要因素 被引量：5
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作者 杨静 侯水生 +1 位作者 余健剑 杨琳 《中国饲料》 北大核心 2012年第9期31-33,共3页
本文主要就硫胺素的生理作用、吸收机制及导致其缺乏的主要因素作一综述。
关键词 硫胺素 载体蛋白 缺乏
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