羊痘在中国的流行现状分析 被引量：56

1

作者 颜新敏 吴国华 +2 位作者 李健 朱海霞 张强 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第24期6-9,共4页

羊痘在中国的西北、华中和华南等地区广泛流行,给养殖业带来较大的经济损失。笔者对2000—2009年羊痘在中国地理位置的分布、年度和月份的流行规律、羊痘的发病率和死亡率、山羊痘和绵羊痘的交叉感染、以及羊痘与其他动物传染病的混合... 羊痘在中国的西北、华中和华南等地区广泛流行,给养殖业带来较大的经济损失。笔者对2000—2009年羊痘在中国地理位置的分布、年度和月份的流行规律、羊痘的发病率和死亡率、山羊痘和绵羊痘的交叉感染、以及羊痘与其他动物传染病的混合感染等做了分析,这对了解羊痘在中国的流行现状有其重要的意义。 展开更多

关键词 羊痘 地理分布 发病率和死亡率 交叉感染 混合感染

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羊痘的研究进展 被引量：17

2

作者 康文玉 徐自忠 +4 位作者 高洪 花群义 周晓黎 杨云庆 董俊 《畜牧兽医杂志》 2005年第3期18-20,共3页

羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病。羊痘是以发热、全身性的皮肤损伤、痘疹和淋巴结病变为特征。羊痘病毒是所有动物痘病毒中最为重要的一种,严重影响养羊业和国际贸易的发展。本文从病原学、流行病学、诊断和预防控制... 羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病。羊痘是以发热、全身性的皮肤损伤、痘疹和淋巴结病变为特征。羊痘病毒是所有动物痘病毒中最为重要的一种,严重影响养羊业和国际贸易的发展。本文从病原学、流行病学、诊断和预防控制等方面对羊痘做一综述。虽然此病从临床症状和宿主特异性上很容易做出诊断,但进一步的实验室确诊还是必要的,现已有多种检测方法和诊断试剂。控制该病最有效的方法还是使用疫苗对易感动物进行免疫接种。 展开更多

关键词 羊痘 山羊痘 绵羊痘 载体疫苗 羊痘病毒 流行病学 症状 病理变化 诊断 防治

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山西舍饲羊群羊痘病毒的分离和实验室诊断 被引量：5

3

作者 史宗勇 史新涛 +3 位作者 袁建琴 古少鹏 陈璋辉 郑明学 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期275-279,共5页

为了分离舍饲羊群羊痘病毒并对其进行诊断研究,对山西舍饲羊群疑似羊痘发病羊的口唇痘状痂皮组织提取物进行细胞培养以扩增病毒,对病变细胞用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining,HE)观察,然后进行动物回归实验和酶联免疫吸附... 为了分离舍饲羊群羊痘病毒并对其进行诊断研究,对山西舍饲羊群疑似羊痘发病羊的口唇痘状痂皮组织提取物进行细胞培养以扩增病毒,对病变细胞用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining,HE)观察,然后进行动物回归实验和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA).结果表明:扩增的病毒经连续培养3代后出现规律性细胞病变;用常规HE染色可见细胞中出现由于病毒感染产生的包涵体;动物回归实验表明已分离的病毒可导致动物发生痘性病变;用ELISA检测出现显色反应,表明样品中存在与酶标抗体发生反应的病毒抗原,样品病毒浓度为6.835 IU·L-1.实验成功诊断并分离出山西舍饲羊群羊痘,为后续研究提供了理论基础. 展开更多

关键词 羊痘 分离 诊断 细胞病变 酶联免疫吸附测定

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2020—2021年日喀则市羊痘的血清学调查分析

4

作者 元振杰 马弘财 +3 位作者 王冬经 旦增欧珠 加央 曾江勇 《现代畜牧兽医》 2023年第1期68-70,共3页

试验旨在研究西藏自治区日喀则市羊痘的免疫效果情况,于2020年10月和2021年4月在日喀则市5个县(区)的主要种羊场采集血清样本1 472份,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对样品进行羊痘抗体检测,使用R软件对检测结果进行统计学分析。结果显示... 试验旨在研究西藏自治区日喀则市羊痘的免疫效果情况,于2020年10月和2021年4月在日喀则市5个县(区)的主要种羊场采集血清样本1 472份,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对样品进行羊痘抗体检测,使用R软件对检测结果进行统计学分析。结果显示,日喀则市羊痘总体阳性率为28.53%(420/1 472)。山羊阳性率为54.15%,绵羊阳性率为24.39%。2岁或2岁以下的阳性率为21.21%,3~6岁阳性率为33.09%,6岁或6岁以上的阳性率为28.14%。母羊阳性率为29.53%,公羊的阳性率为27.55%。研究表明,日喀则市羊痘免疫抗体阳性率为较低,感染风险较高。山羊的免疫效果优于绵羊,3~6岁的种羊免疫效果优于其他年龄的羊。 展开更多

关键词 羊痘 绵羊 山羊 ELISA 日喀则

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我国羊痘的防治 被引量：4

5

作者 张建滨 《中国动物检疫》 CAS 2017年第7期85-87,共3页

羊痘是一种急性、热性、高度接触性的传染病。本文介绍了近年来我国羊痘的流行情况,阐述了羊痘的实验室诊断与免疫现状,分析了羊痘防控工作面临的挑战,如羊养殖方式落后、羊痘的基础免疫和调运监管难度大、企业与科研机构实验室生物安... 羊痘是一种急性、热性、高度接触性的传染病。本文介绍了近年来我国羊痘的流行情况,阐述了羊痘的实验室诊断与免疫现状,分析了羊痘防控工作面临的挑战,如羊养殖方式落后、羊痘的基础免疫和调运监管难度大、企业与科研机构实验室生物安全监管难度大等,以期为我国羊痘的防治工作提供参考。 展开更多

关键词 羊痘 流行特点 实验室诊断 防控建议

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羊痘的PCR诊断与防制

6

作者 陈琼 陈丽华 +4 位作者 陆静静 蒋炳伟 庞银芳 庞建华 张志成 《金陵科技学院学报》 2010年第2期89-92,共4页

通过对发病羊进行临床诊断、病理剖检和PCR检测,最终确诊为山羊痘病毒。同时针对该病的流行病学和临床症状等提出了有效的防制措施,使得疫情得到了有效的控制。

关键词 羊痘 诊断 PCR 防制

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山羊痘病毒ORF103蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量：4

7

作者 张琪 庞文静 +2 位作者 付明哲 史怀平 许信刚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期537-543,共7页

将山羊痘病毒ORF103蛋白基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中进行重组ORF103蛋白的诱导表达,对表达产物进行纯化,并进行Western-blot鉴定;用纯化后的重组ORF103蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立血清间接ELISA检测方法,并进行特异性... 将山羊痘病毒ORF103蛋白基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中进行重组ORF103蛋白的诱导表达,对表达产物进行纯化,并进行Western-blot鉴定;用纯化后的重组ORF103蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立血清间接ELISA检测方法,并进行特异性、灵敏性和重复性试验,最后对临床样品进行检测。结果,原核表达获得了大小约为35 ku的重组ORF103蛋白;Western-blot结果表明,此重组蛋白具有良好的特异性和抗原反应性。山羊痘病毒间接ELISA的优化反应条件为:抗原包被量每孔500 ng,血清以1∶200稀释后作用1 h,酶标二抗以1∶5 000稀释后作用1 h,TMB显色时间为10 min。在该优化条件下,D_(450)≥0.362为阳性,反之为阴性;特异性试验表明,对小反刍兽疫病毒、口疮病毒、马耳他布氏杆菌和产气荚膜梭菌阳性血清的检测结果均为阴性;对60份山羊痘病毒阳性血清进行检测,敏感性为96.6%;重复性试验表明,批内和批间D_(450)值的变异系数分别在1.81%~3.20%和1.34%~7.38%之间;用本研究建立的方法对临床上162份血清进行检测,阳性率为70.4%。上述结果表明,本研究建立的ELISA可用于山羊痘病毒抗体水平的检测。 展开更多

关键词 山羊痘病毒 ORF103蛋白 原核表达 间接ELISA

原文传递

羊痘病毒P32基因的截短表达与鉴定 被引量：4

8

作者 索南卓玛 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第8期76-79,共4页

根据GenBank上发表的羊痘病毒(CPV)P32基因序列,设计并合成一对引物,PCR扩增出837bp基因片段并克隆到pMD18-T载体中,酶切鉴定并测序。将P32基因定向克隆到pET32a表达载体中,酶切及测序鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到了以包... 根据GenBank上发表的羊痘病毒(CPV)P32基因序列,设计并合成一对引物,PCR扩增出837bp基因片段并克隆到pMD18-T载体中,酶切鉴定并测序。将P32基因定向克隆到pET32a表达载体中,酶切及测序鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用镍离子亲和树脂在变性条件下对蛋白进行纯化,Western blot证明该重组蛋白具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 羊痘病毒 P32基因 表达 鉴定

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绵羊痘病毒固原株L2R基因的克隆与生物信息学分析 被引量：4

9

作者 李杨 颜新敏 +5 位作者 吴国华 李健 叶奕优 赵志荀 朱海霞 张强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期201-207,共7页

为分析绵羊痘病毒L2R蛋白的分子特征,本试验提取了绵羊痘病毒固原株(GY)的基因组DNA,设计L2R基因引物,对L2R基因进行扩增,将扩增的基因连接到pGEM-T Easy载体后转化到大肠杆菌Trans 5α感受态细胞,筛选阳性克隆,进行序列测序。利用生物... 为分析绵羊痘病毒L2R蛋白的分子特征,本试验提取了绵羊痘病毒固原株(GY)的基因组DNA,设计L2R基因引物,对L2R基因进行扩增,将扩增的基因连接到pGEM-T Easy载体后转化到大肠杆菌Trans 5α感受态细胞,筛选阳性克隆,进行序列测序。利用生物信息学软件对L2R基因序列进行预测分析。结果显示,L2R基因序列含有一个由279个核苷酸组成的开放阅读框,编码92个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量理论值为10.92ku,理论等电点为6.56。该蛋白质二级结构组成分别是α-螺旋占69.57%,β-折叠占9.78%,无规则卷曲占8.70%,延伸链占11.96%。多序列比对分析结果显示,不同羊痘病毒分离株L2R序列高度保守。进化树分析结果显示,GY株与NK、TU及SA株在一个分支,表明它们之间亲缘关系较近。本试验结果为进一步研究L2R蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础。 展开更多

关键词 羊痘病毒 L2R基因 基因克隆 生物信息学

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羊口疮自然病例的分子学诊断及病理形态学观察 被引量：3

10

作者 武鑫 胡玥 +5 位作者 李良娟 何洁玉 王嘉晨 彭远义 吴建云 胡艳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期14-18,22,共6页

重庆市某羊场发生了急性热性传染病,通过对发病羊只进行采样并对其进行分子生物学诊断,病理组织H.E.染色观察;通过PCR扩增检测出羊痘特异基因P32为阴性,羊口疮特异性基因B2L为阳性,经测序基因比对确诊为羊口疮;病变组织观察发现在肝、... 重庆市某羊场发生了急性热性传染病,通过对发病羊只进行采样并对其进行分子生物学诊断,病理组织H.E.染色观察;通过PCR扩增检测出羊痘特异基因P32为阴性,羊口疮特异性基因B2L为阳性,经测序基因比对确诊为羊口疮;病变组织观察发现在肝、肺、舌组织中炎性细胞浸润,并在组织间隙中发现大量嗜酸性病毒颗粒,肝脏、舌组织部分细胞破裂,肺脏出现增生现象。 展开更多

关键词 羊痘 羊口疮 PCR诊断 组织学观察

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山羊痘病毒毒力因子KLP2的表达及多克隆抗体的制备 被引量：3

11

作者 李金娜 宋书婷 +3 位作者 陈宏伟 刘涛 赵爱云 李有文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期2851-2857,共7页

为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达... 为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达,目的蛋白采用SDS-PAGE和Western blotting检测,并用KCl染色切胶纯化,纯化蛋白加弗氏佐剂免疫家兔,制备的抗体用Western blotting和ELISA检测评价。结果表明,试验成功构建了表达载体p ET42b-KLP2-1和p ET42b-KLP2-2,测序结果显示KLP2-1和KLP2-2基因大小分别为657和984 bp,分别表达了约27和38 ku的蛋白,与理论值相符。切胶纯化的蛋白浓度在1~2 mg/m L之间,制备的抗体用Western blotting检测发现,蛋白有明显的特异条带,ELISA检测抗体的效价均为1∶512。说明试验成功表达了KLP2-1、KLP2-2蛋白,制备了相应的多克隆抗体。 展开更多

关键词 羊痘病毒 KLP2基因 蛋白表达 抗体制备

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羊痘病毒江苏株P32基因的克隆与序列分析 被引量：2

12

作者 张志成 陈琼 +4 位作者 庞银芳 陆静静 戴薇 张大淦 陈钟鸣 《金陵科技学院学报》 2010年第4期79-83,共5页

根据GenBank中羊痘病毒基因（CPV）的核苷酸序列,设计了1对特异性检测引物。采用此引物检测来自于江苏丹阳的24份发病羊的皮肤痂皮。参考已发表的P32全基因的特异性引物,随机选择4份阳性DNA进行P32片段的扩增。将扩增产物纯化后连接pMD1... 根据GenBank中羊痘病毒基因（CPV）的核苷酸序列,设计了1对特异性检测引物。采用此引物检测来自于江苏丹阳的24份发病羊的皮肤痂皮。参考已发表的P32全基因的特异性引物,随机选择4份阳性DNA进行P32片段的扩增。将扩增产物纯化后连接pMD18-T载体,转化DH5α大肠埃希氏菌,选择阳性克隆送基因公司测序。应用DNAStar等分子生物学软件,对所测P32序列与GenBank中的国内外CPV毒株进行了同源性比较和遗传进化树分析。结果发现,24份疑似病料检测全是阳性;4个P32基因扩增产物均为1 023 bp,且样品间P32基因的核苷酸同源性为100%,与GenBank上已发表的的P32基因序列的相似性为97.7%~100%,且中国分离株在进化上属于同一分支。 展开更多

关键词 羊痘病毒 P32基因 克隆 序列分析

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共表达口蹄疫病毒vp1基因和山羊IFN-γ基因的重组山羊痘病毒的构建 被引量：2

13

作者 海岗 韩宗玺 +3 位作者 邵昱昊 王芳 陈洪岩 刘胜旺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期334-338,共5页

将山羊IFN-γ基因插入到含有口蹄疫病毒(FMDV)vp1基因的山羊痘病毒(GPV)转移载体PTK-vp1中,获得含有FMDVvp1基因和山羊IFN-γ基因的重组转移载体pTK-vp-IFNγ,以本实验室构建的表达β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的山羊痘重组病毒rAV41-LacZ... 将山羊IFN-γ基因插入到含有口蹄疫病毒(FMDV)vp1基因的山羊痘病毒(GPV)转移载体PTK-vp1中,获得含有FMDVvp1基因和山羊IFN-γ基因的重组转移载体pTK-vp-IFNγ,以本实验室构建的表达β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的山羊痘重组病毒rAV41-LacZ为亲本毒,与转移载体pTK-vp-IFNγ共同转染犊牛睾丸细胞进行同源重组,通过7轮反向蓝白斑筛选,产生重组山羊痘病毒rAV41-VP-IFNγ,通过PCR和间接免疫荧光实验证实获得了能够稳定表达FMDVvp1和山羊IFN-γ的重组山羊痘病毒。 展开更多

关键词 重组山羊痘病毒 山羊IFN-γ基因 Β-半乳糖苷酶基因

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羊痘病毒宿主范围基因063缺失表达载体的构建 被引量：1

14

作者 柳璇 高娜 +2 位作者 王玉婷 张成 李有文 《塔里木大学学报》 2021年第4期8-14,共7页

为研究羊痘病毒宿主范围基因(Hrg)063的特性及生物学功能,采用overlap PCR技术将绿色荧光蛋白(GFP)基因与063基因两侧的同源臂连接起来,把扩增的目的基因插入到PEASY-T1克隆载体中,构建以GFP基因为报告基因的063基因缺失表达载体,并测... 为研究羊痘病毒宿主范围基因(Hrg)063的特性及生物学功能,采用overlap PCR技术将绿色荧光蛋白(GFP)基因与063基因两侧的同源臂连接起来,把扩增的目的基因插入到PEASY-T1克隆载体中,构建以GFP基因为报告基因的063基因缺失表达载体,并测序鉴定;用脂质体Lipofectamine 2000转染表达载体到羊痘病毒感染的羊睾丸原代细胞中,挑取荧光显微镜下表达为绿色荧光的063基因缺失的羊痘重组病毒,并传代纯化。成功的构建了Hrg 063缺失的表达载体(PEASY-Δ063-GFP),测序结果表明063基因的上下游同源臂与GFP报告基因大小约900 bp,与理论相符。转染后表达载体与羊痘病毒重组,得到了063基因缺失的山羊病毒SS株、TS株和疫苗株3个毒株重组病毒,但纯化时重组病毒不能正常传代。该研究中063基因缺失表达载体的构建为其生物学特性及功能的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 羊痘病毒 063基因 重组病毒 表达载体

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山羊痘病毒A11R基因的克隆及生物信息学分析

15

作者 吴健 朱海霞 +8 位作者 赵志荀 颜新敏 赵银龙 吴娜 李健 张志东 张强 李影 吴国华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期158-163,共6页

为了分析绵羊痘病毒A11R蛋白质的分子特征,提取了山羊痘病毒古浪分离株(GL)的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A11R基... 为了分析绵羊痘病毒A11R蛋白质的分子特征,提取了山羊痘病毒古浪分离株(GL)的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A11R基因序列进行预测分析。结果显示,A11R基因序列由954个核苷酸组成的开放阅读框,编码317个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为36 091.7,理论等电点为5.14。A11R蛋白质的二级结构中,α螺旋占29.02%,β折叠占10.41%,其余60.57%为无规则卷曲。多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株A11R序列高度保守,同源性在98%以上。进化树分析结果显示,GL株与NK株、TU株以及SA株在一个分支,说明它们之间具有较近的亲缘关系,上述研究结果为进一步研究A11R蛋白质的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白质分子间相互作用奠定了基础。 展开更多

关键词 羊痘病毒 A11R 基因克隆 生物信息学

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蛋白激酶PKR在HeLa细胞中的过表达及其siRNA干扰的鉴定

16

作者 吴娜 赵志荀 +7 位作者 吴国华 颜新敏 叶奕优 李应国 朱海霞 李健 张志东 张强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期43-47,共5页

为了研究双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)信号通路对羊痘病毒复制的影响,试验构建了PKR基因的真核表达载体,并在He La细胞中实现了PKR的过表达;从相关文献中筛选了靶向PKR的2对siRNA,检测其对PKR的干扰效果,以RT-PCR方法扩增PKR基因,克隆入... 为了研究双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)信号通路对羊痘病毒复制的影响,试验构建了PKR基因的真核表达载体,并在He La细胞中实现了PKR的过表达;从相关文献中筛选了靶向PKR的2对siRNA,检测其对PKR的干扰效果,以RT-PCR方法扩增PKR基因,克隆入表达载体pc DNA3.1(-)/Myc-His(B),对重组质粒进行双酶切及测序鉴定,将阳性重组质粒或siRNAs分别转染He La细胞,Western-blot检测PKR蛋白的表达水平。结果表明:试验成功构建了PKR基因的真核表达载体pc DNA3.1(-)-PKR,重组质粒在He La细胞中得到了表达;2对siRNA具有较好的干扰效果,其中siRNA1、siRNA2对PKR的干扰效率分别达到76%和52%。 展开更多

关键词 羊痘病毒 PKR基因 真核表达 SIRNA HELA细胞

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