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菌丝特异性基因和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响 被引量：1
1
作者 王迪 黄劲 +5 位作者 姚昌昊 王梅竹 程敏 郭鑫瑶 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第10期1126-1132,共7页
目的探讨菌丝特异性基因(ECE 1)和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响。方法选取ece 1Δ/Δ菌株(ECE 1基因敲除菌株)、ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株(ECE 1基因敲除回补菌株)、BWP17菌株(CiP30质粒转化的亲本菌株)及M2174菌株(Candid... 目的探讨菌丝特异性基因(ECE 1)和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响。方法选取ece 1Δ/Δ菌株(ECE 1基因敲除菌株)、ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株(ECE 1基因敲除回补菌株)、BWP17菌株(CiP30质粒转化的亲本菌株)及M2174菌株(Candidalysin毒素敲除菌株),采用沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)37℃培养48 h并观察其培养特征,使用牛血清白蛋白培养基、卵黄培养基及三丁酸甘油酯培养基检测4种菌株的胞外水解酶活力,采用菌丝诱导实验观察4种菌株的菌丝形成能力;取4~6周龄Balb/c雌性小鼠70只,均分为BWP17组、ece 1Δ/Δ组及ece 1Δ/Δ+ECE 1组、M2174组及生理盐水(Saline,阴性对照)组,各组小鼠分别侧尾静脉注射2×10^(8) CFU/L上述4种菌液及等量Saline,观察各组小鼠注射后30 d内的体质量变化和90 d内的死亡情况,同时取各组死亡小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏及肾脏制作切片、采用苏木精-伊红染色(HE)后观察各组组织的病理学特征。结果白念珠菌的菌落特征均表现为菌落较大、光滑湿润、呈奶油状圆形分布,在CHROMagar Candida培养基上的菌落颜色显示为浅绿色到深绿色;胞外水解酶检测结果显示ece 1Δ/Δ+ECE 1组、BWP17组及ece 1Δ/Δ组的蛋白酶(SAP)及磷脂酶(PL)活力强,脂肪酶(Lip)活力阴性,但M2174组只有磷脂酶活力高表达;白念珠菌ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株的菌丝形成能力最强,ece 1Δ/Δ菌株菌丝形成能力最弱;感染白念珠菌后小鼠第28天时死亡率为21.43%~57.14%,第90天时死亡率为78.57%~100.00%;各感染组死亡小鼠肾脏的病理学改变情况最为明显,心、肝、脾及肺等病变较轻,以慢性炎症为主。结论ECE 1基因的表达增强了白念珠菌胞外水解酶的活力及其菌丝形成能力,ECE 1基因编码的Candidalysin对感染小鼠发挥了重要的毒力作用。 展开更多
关键词 念珠菌 白色 动物实验 candidalysin 毒力因子 胞外水解酶 菌丝诱导
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