Apelin对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大的作用及其机制 被引量：4

1

作者 周颖 陈游洲 乔树宾 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2014年第9期733-737,共5页

目的：探讨Apelin对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的作用及其细胞内信号转导机制。方法：培养1-3 d新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,给予AngⅡ刺激。在此基础上给予不同浓度Apelin。测定[3H]亮氨酸掺入量、细胞表面积以及总... 目的：探讨Apelin对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的作用及其细胞内信号转导机制。方法：培养1-3 d新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,给予AngⅡ刺激。在此基础上给予不同浓度Apelin。测定[3H]亮氨酸掺入量、细胞表面积以及总蛋白表达量评价心肌细胞肥大程度。免疫印迹法测定细胞B型尿钠肽、β肌球蛋白重链、活化T细胞的核因子3、钙调神经磷酸酶、磷酸化钙调神经磷酸酶、钙调蛋白激酶Ⅱ、磷酸化钙调蛋白激酶Ⅱ的蛋白表达水平。逆转录-聚合酶链反应法测定B型尿钠肽和β肌球蛋白重链mRNA表达水平。结果：Apelin可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其作用呈剂量依赖性。同时,Apelin可以抑制AngⅡ诱导的B型尿钠肽和β肌球蛋白重链mRNA表达水平、B型尿钠肽和β肌球蛋白重链、活化T细胞的核因子3、磷酸化钙调神经磷酸酶、钙调蛋白激酶Ⅱ和磷酸化钙调蛋白激酶Ⅱ的蛋白表达水平升高,且均与Apelin浓度呈剂量依赖性。结论：Apelin可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其机制与Ca2＋依赖的钙调神经磷酸酶信号转导通路有关。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 心肌细胞肥大 钙调神经磷酸酶 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ

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电磁辐射对大鼠海马神经元钙调蛋白激酶Ⅱ和环磷腺苷反应元件结合蛋白表达的影响 被引量：2

2

作者 史长华 李玉红 +1 位作者 胡亚涛 许倩 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期880-882,共3页

目的探讨2000μW／cm2电磁辐射后钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和环磷腺苷反应元件结合蛋白（CREB）在元代培养海马神经元中表达的变化和意义。方法体外培养新生大鼠大脑海马神经元，实验分为空白对照组，假辐射组和1h／d、2h／d、3h／d辐... 目的探讨2000μW／cm2电磁辐射后钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和环磷腺苷反应元件结合蛋白（CREB）在元代培养海马神经元中表达的变化和意义。方法体外培养新生大鼠大脑海马神经元，实验分为空白对照组，假辐射组和1h／d、2h／d、3h／d辐射组。辐射组接受功率密度为2000μW／cm。的近场辐射，连续辐射5d。采用Western—Blot法检测海马神经元CaMKII和CREB蛋白的表达，RT—PCR法检测CaMKII和CREBmRNA表达的变化。结果电磁辐射后，1h／d、2h／d、3h／d辐射组大鼠海马神经元CaMKⅡ蛋白[分别为（0．59±0．05）、（0．44±0．08）、（0．18±0．04）]及其mRNA[分别为（0．41±0．08）、（0．34±0．04）、（0．24±0．02）]表达水平较空白对照组[（0．78±0．07）、（0．62±0．12）]明显降低（P〈0．05）；CREB蛋白[分别为（0．49±0．05）、（0．40±0．04）、（0．17±0．03）]及其mRNA[分别为（0．68±0．11）、（0．53±0．08）、（0．30±0．03）]表达水平较空白对照组[（0．69±0．10）、（0．80±0．12）]明显降低（P〈0．05）。结论海马神经元CaMKⅡ和CREB的表达变化可能参与了电磁辐射致大鼠学习记忆功能改变的病理生理过程。 展开更多

关键词 电磁辐射 海马神经元 钙调蛋白激酶Ⅱ 环磷腺苷反应元件结合蛋白

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钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN62对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及机制 被引量：5

3

作者 王路广 戴琳玉 +1 位作者 闫宇 肖永红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期152-157,共6页

目的研究钙调蛋白激酶Ⅱ(calmodulin kinaseⅡ,CaMKⅡ)抑制剂KN62对转化生长因子-β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)刺激的LX2肝星形细胞(LX2 hepatic stellate cells,LX2⁃HSCs)增殖、凋亡的影响及可能的机制。方法取1、5、1... 目的研究钙调蛋白激酶Ⅱ(calmodulin kinaseⅡ,CaMKⅡ)抑制剂KN62对转化生长因子-β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)刺激的LX2肝星形细胞(LX2 hepatic stellate cells,LX2⁃HSCs)增殖、凋亡的影响及可能的机制。方法取1、5、10、20μmol/L KN62作用于LX2,各培养1、3、6、12、24 h,CCK⁃8法检测细胞增殖并依据其结果分为5个实验组:空白对照组,5 ng/mL TGF⁃β1组,低、中、高浓度KN62(1、5、10μmol/L)+TGF⁃β1组。TUNEL法检测细胞凋亡,Western Blot检测CaMK II、Bcl⁃2、Bax及caspase⁃12蛋白表达。结果KN62作用6 h后不同时间点,各浓度组OD值比较差异均有统计学意义(P<0.05),但20μmol/L与10μmol/L比较差异均无统计学意义(P>0.05);低、中、高浓度KN62+TGF⁃β1组细胞增殖率分别为82.3%、67.4%、50.1%,凋亡率分别为(30.8±6.1)%、(54.5±4.5)%、(75.7±5.6)%,差异均有统计学意义(F=80.070,P<0.001;F=73.199,P<0.001);各浓度KN62组均能降低CaMKII(F=84.355,P<0.001)及Bcl⁃2蛋白表达(F=110.896,P<0.001),增加Bax蛋白表达(F=156.086,P<0.001),致Bcl⁃2/Bax比值降低;随KN62浓度增加,procaspase⁃12和cleaved caspase⁃12蛋白表达均升高(P<0.001)。结论CaMKⅡ抑制剂KN62能够抑制LX2增殖并诱导其凋亡,可能与caspase⁃12依赖性内质网应激凋亡途径有关。 展开更多

关键词 肝星状细胞 钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN62 增殖 凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12

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钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂对心肌细胞电生理特性的调节作用 被引量：3

4

作者 黄燕 黄从新 +3 位作者 王丹丹 王鑫 唐艳红 王腾 《中华心律失常学杂志》 2016年第3期229-235,共7页

目的：研究钙调蛋白激酶Ⅱ（ CaMK Ⅱ）抑制剂（ KN－93）对异丙肾上腺素（ ISO）作用下心肌细胞电生理特性的影响。方法酶解法急性分离小鼠心室肌细胞，将心肌细胞分为4组：正常对照组、异丙肾上腺素干预组（ ISO组）、异丙肾上腺素＋K... 目的：研究钙调蛋白激酶Ⅱ（ CaMK Ⅱ）抑制剂（ KN－93）对异丙肾上腺素（ ISO）作用下心肌细胞电生理特性的影响。方法酶解法急性分离小鼠心室肌细胞，将心肌细胞分为4组：正常对照组、异丙肾上腺素干预组（ ISO组）、异丙肾上腺素＋KN－92干预组（ ISO＋KN－92组）、异丙肾上腺素＋KN－93干预组（ ISO＋KN－93组）；应用全细胞膜片钳技术研究ISO及KN－93对心肌细胞L－型钙电流（ ICaL ）的影响；应用激光扫描共聚焦显微技术记录ISO及KN－93作用下心肌细胞钙瞬变；western bolt检测相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比，ISO使ICaL峰值电流密度增大[ISO组：（－4．25±0．99） pA／pF，对照组：（－2．66±1．31） pA／pF，P＝0．01]：L型钙通道激活加速[ISO组半数激活电压：（－0．43±0．66） mV，对照组半数激活电压：（3．94±1．58） mV，P＜0．01]、失活加速[ISO组半数失活电压：（－10．91±1．11） mV，对照组半数失活电压：（－8．03±0．58） mV， P＜0．01]，并缩短失活后恢复时间[ ISO组恢复时间常数：（82．74±2．21） ms，对照组恢复时间常数：（119．32±4．24） ms，P＜0．01]；ISO使钙瞬变幅值增大（0．5 HZ：ISO组2．08±0．72，对照组1．05±0．43，P＜0．01；1．0 HZ：ISO组1．95±0．75，对照组1．07±0．41，P＜0．01），易诱发钙紊乱（P＜0．01）。 KN－93减弱ISO引起的钙稳态变化，使ICaL峰值电流密度减小（P＜0．05），激活减慢（P＜0．01），延长失活后恢复时间（P＜0．01）；并使钙瞬变幅值减小（0．5 HZ：P＜0．05，1．0 HZ：P＜0．05），减少钙紊乱。结论 KN－93能调节ISO引起的心肌细胞电生理特性的改变，在预防心律失常中发挥作用。 展开更多

关键词 异丙肾上腺素 钙调蛋白激酶ii抑制剂 L型钙电流 钙瞬变

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阻断Ryanodine受体对兔儿茶酚胺敏感性室速模型心律失常发生的抑制作用 被引量：2

5

作者 肖幸 柯俊 +3 位作者 张存泰 贺莉 肖志超 阮磊 《内科急危重症杂志》 2012年第6期370-372,共3页

目的:观察阻断Ryanodine受体对兔儿茶酚胺敏感性室速(CPVT)模型心律失常发生的抑制作用。方法:将40只日本长耳兔随机分为4组:正常对照组、模型组、钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93组、Ryanodine受体阻滞剂兰尼碱组,每组10只。制备兔左室楔形... 目的:观察阻断Ryanodine受体对兔儿茶酚胺敏感性室速(CPVT)模型心律失常发生的抑制作用。方法:将40只日本长耳兔随机分为4组:正常对照组、模型组、钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93组、Ryanodine受体阻滞剂兰尼碱组,每组10只。制备兔左室楔形心肌块的灌流模型,同步记录心内、外膜动作电位及跨壁心电图。正常组灌流台氏液,模型组灌流咖啡因和异丙肾上腺素建立CPVT模型,KN-93组和兰尼碱组预先给予各自药物预灌,然后灌流咖啡因和异丙肾上腺素,观察在快频率程序刺激下各组触发活动和室性心动过速的发生率。结果:对照组、模型组、KN-93(1μmol/L)和兰尼碱组(10μmol/L)触发活动的发生率分别为0/10、10/10、4/10和2/10,多形性室速或室颤的发生率分别为0/10、9/10、3/10、1/10;提示KN-93和兰尼碱均可减少CPVT模型的触发活动和室性心律失常的发生(均P<0.05)。结论:阻断Ryanodine受体能够有效抑制CPVT模型的触发性室性心律失常,Ryanodine受体有望成为防治该类心律失常新的重要靶点。 展开更多

关键词 RYANODINE受体 钙调蛋白激酶Ⅱ 儿茶酚胺敏感性室性心动过速

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钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂对肥厚心肌细胞早期后除极的影响 被引量：1

6

作者 柯俊 张存泰 +6 位作者 马业新 吕家高 刘俊 刘念 阮燕菲 白融 林立 《内科急危重症杂志》 2007年第6期292-294,311,共4页

目的:探讨钙调蛋白激酶Ⅱ特异性抑制剂KN-93对肥厚心肌细胞动作电位时程(APD)及早期后除极(EAD)发生率的影响。方法:选取雌性新西兰大白兔,通过缩窄腹主动脉制备兔心肌肥厚模型(LVH组),并设假手术组(sham组)作对照比较,仅游离腹主动脉,... 目的:探讨钙调蛋白激酶Ⅱ特异性抑制剂KN-93对肥厚心肌细胞动作电位时程(APD)及早期后除极(EAD)发生率的影响。方法:选取雌性新西兰大白兔,通过缩窄腹主动脉制备兔心肌肥厚模型(LVH组),并设假手术组(sham组)作对照比较,仅游离腹主动脉,未进行缩窄。8周后,应用超声心动图观察左心室肥厚程度。采用胶原酶消化法分离单个心肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录动作电位(AP),分别给予低钾(2mmol/L)、低镁(0.25mmol/L)台氏液灌流(sham组、LVH组)、含KN-92(KN-92组)、KN-93(KN-93组)的低钾、低镁台氏液灌流,观察慢频率电刺激(0.25～0.5Hz)条件下各组心肌细胞EAD的发生率,同时观察KN-92、KN-93对肥厚心肌细胞APD的影响。结果:8周后,与Sham组相比,心肌肥厚组的心脏外形明显增大,左室壁明显增厚,模型建立成功。电流钳模式下记录动作电位,在低钾、低镁台氏液灌流及慢频率电刺激下,Sham组、LVH组、KN-92组(0.5μmol/L)及KN-93组(0.5μmol/L)EAD的发生率分别为0/12、11/12、10/12和5/12。当KN-92组及KN-93组中药物浓度增至1μmol/L时,肥厚心肌细胞EAD的发生率分别为10/12和2/12,同时其对APD无明显影响(P>0.05)。结论:钙调蛋白激酶Ⅱ特异性抑制剂KN-93能够有效抑制肥厚心肌EAD的发生,这可能是其抗肥厚心肌室性心律失常发生的主要作用机制。 展开更多

关键词 钙调蛋白激酶Ⅱ KN-93 心肌肥厚 早期后除极 膜片钳技术

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桑黄多糖P1对肝癌HepG2细胞周期和钙调蛋白信号通路的影响 被引量：22

7

作者 钟石 李有贵 +2 位作者 林天宝 吕志强 计东风 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期417-423,共7页

目的探讨桑黄多糖P1抑制人源性肝癌Hep G2细胞增殖的作用机制。方法桑黄多糖P16.25~200 mg·L-1与Hep G2细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率。桑黄多糖P1 100和200 mg·L-1与Hep G2细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和凋亡;... 目的探讨桑黄多糖P1抑制人源性肝癌Hep G2细胞增殖的作用机制。方法桑黄多糖P16.25~200 mg·L-1与Hep G2细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率。桑黄多糖P1 100和200 mg·L-1与Hep G2细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和凋亡;荧光分光光度法测定细胞内Ca2＋浓度;实时荧光定量PCR检测细胞内钙调蛋白（Ca M）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca MKⅡ）、表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）、K-ras和c-fos基因表达;Western蛋白质印迹法检测细胞内Ca MKⅡ和Kras蛋白表达。结果桑黄多糖P1对Hep G2细胞存活的抑制率随药物浓度的增大而显著提高,100和200 mg·L-1时抑制率高达44.0%和61.3%。桑黄多糖P1 200 mg·L-1处理48 h S期细胞百分含量明显升高,由对照组的（23.3±3.4）%升高至（37.8±2.2）%（P〈0.01）,而G2/M期细胞百分含量明显降低,由对照组的（15.3±1.2）%降至（3.4±1.9）%（P〈0.01）;细胞凋亡率无明显变化。与对照组相比,桑黄多糖P1 100和200 mg·L-1处理48 h后Ca M,Ca MKⅡ,EGF,EGFR,K-ras和c-fos mRNA水平显著下降（P〈0.01）;Western蛋白质印迹检测结果显示,桑黄多糖P1作用48 h后Hep G2细胞内Ca MKⅡ和K-ras蛋白水平与对照组相比显著下降（P〈0.01）。桑黄多糖P1 200 mg·L-1处理细胞后,细胞内Ca2＋荧光强度显著升高,0~20 min内分别由951增至1430（P〈0.01）,而对照组一直维持在1150左右。结论桑黄多糖P1可能通过提高细胞内Ca2＋浓度以及下调Ca M,Ca MKⅡ,EGF,EGFR,K-ras和c-fos基因的表达,诱导Hep G2细胞S期阻滞,从而抑制Hep G2细胞增殖。 展开更多

关键词 桑黄多糖P1 HEPG2细胞 细胞周期 钙调蛋白激酶Ⅱ 钙离子

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钙离子及其结合蛋白、蛋白激酶对阿片成瘾的调节作用

8

作者 张静 《中国药物滥用防治杂志》 CAS 2015年第6期365-367,359,共4页

钙离子是细胞内重要的第二信使。与受体偶联的细胞内钙离子、钙调蛋白和两者依赖的钙蛋白激酶Ⅱ能够通过与中脑边缘多巴胺系统的相互作用来影响药物成瘾,在药物依赖和耐受等过程中具有重要作用。对三者的研究将指引人们对药物成瘾过程... 钙离子是细胞内重要的第二信使。与受体偶联的细胞内钙离子、钙调蛋白和两者依赖的钙蛋白激酶Ⅱ能够通过与中脑边缘多巴胺系统的相互作用来影响药物成瘾,在药物依赖和耐受等过程中具有重要作用。对三者的研究将指引人们对药物成瘾过程神经机制的理解,并为开发低耐受性、低依赖性镇痛药物和药物依赖的防治以及解决戒毒后的"复吸"等问题奠定基础。 展开更多

关键词 钙离子 钙调蛋白 钙蛋白激酶Ⅱ 阿片 成瘾 调节

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白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2介导的CaM/CaMK Ⅱ/BDNF信号通路的影响 被引量：9

9

作者 宋春红 王杰琼 +5 位作者 李芳 李自发 魏盛 王美艳 薛玲 姜运良 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第10期1794-1800,共7页

目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝... 目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝气郁证大鼠模型,使用白芍提取物进行药物干预。模型制备成功后检测下丘脑CACNA1C蛋白表达,以及下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和CaMKⅡ的磷酸化水平。离体培养海马原代神经元,通过KCl激活L型钙通道,检测白芍提取物中的有效成分单体芍药苷对细胞内钙超载的影响。结果:PMS肝气郁证大鼠下丘脑CACNA1C蛋白表达增加,CaMKⅡ磷酸化水平提高,BDNF表达减少,说明白芍提取物可显著改善上述蛋白表达异常的现象,抑制KCl激活的L型钙通道引起的细胞内钙离子浓度的增加。结论:白芍提取物可能是通过调控细胞内Cav1.2,抑制其下游CaM/CaMKⅡ信号通路的活化发挥治疗PMS肝气郁证的作用。 展开更多

关键词 PMS肝气郁证 白芍提取物 L型钙通道α1C亚基基因 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ 脑源性神经营养因子

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阿片类药物对NG108-15细胞Ca^(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的作用 被引量：6

10

作者 郭庆民 刘景生 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期652-656,共5页

目的　观察阿片类依赖时Ca2 + 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋... 目的　观察阿片类依赖时Ca2 + 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)活性。结果　DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h可使细胞浆和细胞核CaM和CaMKII活性升高 ,该变化可被CaM特异性拮抗剂W 7所抑制 ;CaMKII特异性抑制剂KN 6 2可抑制CaMKII活性的增高 ,而对CaM活性无明显影响。DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h后 ,加入纳洛酮 ,CaM活性、CaMKII活性进一步增高。结论　Ca2 + CaMKII信息通路参与了阿片依赖的机制。 展开更多

关键词 阿片类药物 钙调蛋白 蛋白激酶Ⅱ NG108-15细胞 CaMKⅡ

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RyR2磷酸化在心力衰竭中的作用 被引量：5

11

作者 陈会花 章忱 吕嵘 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期359-362,共4页

心力衰竭在细胞水平主要表现为心肌以兴奋-收缩耦联(excitement-contraction coupling,ECC)为基础的收缩功能障碍,而Ca2+信号转导在此过程中起着非常重要的作用。肌浆网(sarcoplasmic reticulum,SR)兰尼碱受体(ryanodine receptor type ... 心力衰竭在细胞水平主要表现为心肌以兴奋-收缩耦联(excitement-contraction coupling,ECC)为基础的收缩功能障碍,而Ca2+信号转导在此过程中起着非常重要的作用。肌浆网(sarcoplasmic reticulum,SR)兰尼碱受体(ryanodine receptor type 2,RyR2)是心肌最重要的钙释放通道,RyR2磷酸化是肌浆网钙释放的基础,而RyR2磷酸化主要受蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)的调控。目前对RyR2磷酸化的研究已经非常广泛,但对其涉及心力衰竭的具体发病机制仍有争议,本综述主要针此问题进行阐述。 展开更多

关键词 兰尼碱受体 心力衰竭 蛋白激酶A 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ

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急、慢性抑制CaMKⅡ的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响 被引量：4

12

作者 徐陵琦 陈慧娟 《中国临床研究》 CAS 2018年第2期158-162,共5页

目的探讨急、慢性抑制钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响。方法选择24只C57BL6小鼠,随机分为假手术组、心衰模型组、CaMKⅡ急性抑制组及CaMKⅡ慢性抑制组,每组6只。假手术组只行开胸术,不行升主... 目的探讨急、慢性抑制钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响。方法选择24只C57BL6小鼠,随机分为假手术组、心衰模型组、CaMKⅡ急性抑制组及CaMKⅡ慢性抑制组,每组6只。假手术组只行开胸术,不行升主动脉缩窄术;其余三组均采用升主动脉缩窄术建立心衰模型。术后15 d,假手术组与心衰模型组小鼠腹腔注射0.1ml生理盐水一次,CaMKⅡ急性抑制组与CaMKⅡ慢性抑制组小鼠分别腹腔注射同样剂量的KN93(CaMKⅡ抑制剂)一次及连续1周。采用小动物超声心动图仪和左心室压力-容积导管分别测量各组小鼠基础状态下和异丙肾上腺素(ISO)后心功能和心力储备,包括左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、纵向应变(LS)、纵向应变率(LSR)、收缩末期压力容积关系(ESPVR)、左室内压最大上升速度-舒张末期左室容积关系(dp/dtmax-EDV)、每搏功-舒张末期容积关系即前负荷可补充的心室搏出功(PRSW)、左室内压最大下降速度(dp/dtmin)、左心室松弛时间常数(Tau)、舒张末期压力容积关系(EDPVR)等指标。结果与假手术组相比,心衰模型组小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV、PRSW和dp/dtmin均显著降低(P<0.05),而Tau和EDPVR显著升高(P均<0.05)。急性抑制CaMKⅡ的活性对心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW无显著影响,但能显著降低dp/dtmin(P<0.05),增大Tau和EDPVR(P均<0.05)。同时,急性抑制CaMKⅡ的活性也不能增加ISO作用后心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值。慢性抑制CaMKⅡ的活性能显著增加心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值(P均<0.05),但对dp/dtmin、Tau和EDPVR无显著影响。同时,慢性抑制CaMKⅡ的活性可显著增加ISO作用后心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值(P均<0.05)。结论急性抑制CaMKⅡ的活性非但� 展开更多

关键词 钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ Β1肾上腺素受体 心力衰竭 心功能 心力储备 超声心动图

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钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ RNA干扰载体构建及对破骨细胞分化和骨吸收的影响 被引量：3

13

作者 王艺睿 王会 +3 位作者 戚孟春 董伟 冯晓洁 孙红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期557-561,共5页

目的研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)RNA干扰对破骨细胞分化和骨吸收的影响。方法构建3个CaMKⅡγ RNA慢病毒重组干扰载体;阴性载体转染RAW264.7细胞,确定最适转染滴度值(MOI)和转染效率。用重组载体转染细胞,确定干扰效果最佳的... 目的研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)RNA干扰对破骨细胞分化和骨吸收的影响。方法构建3个CaMKⅡγ RNA慢病毒重组干扰载体;阴性载体转染RAW264.7细胞,确定最适转染滴度值(MOI)和转染效率。用重组载体转染细胞,确定干扰效果最佳的重组载体用于后续实验。细胞分为对照组、阴性载体组、干扰载体组;病毒转染5 d后通过TRAP染色及牙本质磨片骨吸收陷窝检测3组破骨细胞生成及骨吸收情况。结果成功构建了3个CaMKⅡγ重组干扰载体;最适MOI值为30,转染效率>80%。#3重组载体干扰效果最佳,干扰效率在mRNA及蛋白水平分别为78.16%和67.02%(P <0.01)。3组细胞中,干扰载体组多核破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数和面积较对照组分别下降了59.99%、54.19%和57.94%(P <0.01),而阴性载体组和对照组比较差异无显著性(P> 0.05)。结论 CaMKⅡγ RNA干扰可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收功能。 展开更多

关键词 钙调蛋白依赖性激酶iiγ 破骨细胞 RNA干扰 慢病毒

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淫羊藿苷联合糖皮质激素对激素抵抗型肾病综合征模型大鼠的干预作用

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作者 刘灿 戴恩来 +1 位作者 丁照然 段淑文 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1913-1917,共5页

目的探讨淫羊藿苷(ICA)联合醋酸泼尼松片(PAT)对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)模型大鼠的干预作用。方法雄性SD大鼠用2次注射阿霉素(ADR)法构建SRNS模型。待建模成功后,随机分为模型组、PAT组、ICA组、联合组,每组10只;另取10只大鼠为空... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)联合醋酸泼尼松片(PAT)对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)模型大鼠的干预作用。方法雄性SD大鼠用2次注射阿霉素(ADR)法构建SRNS模型。待建模成功后,随机分为模型组、PAT组、ICA组、联合组,每组10只;另取10只大鼠为空白组。空白组和模型组均给予0.9%NaCl;PAT组给予6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)PAT;ICA组给予50 mg·kg^(-1)·d^(-1)ICA;联合组给予6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)PAT+50 mg·kg^(-1)·d^(-1)ICA。5组大鼠灌胃体积均为1 mL·100 g^(-1),每天给药1次,共给药6周。比较各组大鼠的肾功能、血脂水平,用蛋白质印迹法检测钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱα(CaMKⅡα)、丝切蛋白-1(Cofilin-1)和F-肌动蛋白(F-actin)的表达情况。结果空白组、模型组、PAT组、ICA组和联合组的第8周末尿蛋白定量分别为(6.66±1.48)、(178.38±8.96)、(161.56±5.49)、(157.13±8.32)和(96.90±5.05)mg·24 h^(-1),血清肌酸酐分别为(30.90±1.79)、(41.10±2.77)、(34.90±2.03)、(35.10±2.18)和(31.90±2.47)μmol·L^(-1),三酰甘油分别为(0.87±0.14)、(2.30±0.41)、(1.94±0.44)、(1.17±0.59)和(0.89±0.30)mmol·L^(-1),总胆固醇分别为(1.54±0.08)、(2.53±0.22)、(2.14±0.59)、(2.27±0.31)和(1.93±0.32)mmol·L^(-1),CaMKⅡα蛋白相对表达水平分别为0.88±0.09、0.65±0.06、0.71±0.08、0.76±0.07和0.88±0.08,p-Cofilin-1/Cofilin-1比值分别为0.56±0.27、2.52±0.04、0.75±0.02、0.91±0.20和0.53±0.05,F-actin蛋白相对表达水平分别为0.93±0.01、0.64±0.01、0.75±0.02、0.80±0.01和0.85±0.00。模型组的上述指标与空白组和联合组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ICA联合PAT可通过调控CaMKⅡα/Cofilin-1/F-actin通路改善SRNS大鼠的肾功能、血脂水平,改善肾组织病理结构,促进骨架蛋白重构。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 糖皮质激素 激素抵抗型肾病综合征 大鼠 钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱα/丝切蛋白-1/F-肌动蛋白

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丹参酮ⅡA对心肌梗死模型大鼠心肌钙调蛋白及心功能的影响 被引量：2

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作者 李小燕 黄萍 +1 位作者 陈少秀 彭吉霞 《国际中医中药杂志》 2016年第8期728-732,共5页

目的：观察丹参酮ⅡA对心肌梗死模型大鼠心肌钙调蛋白（cardiac muscle, CaM）及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependentproteinkinase-Ⅱ, CaMKⅡ）mRNA 表达和心功能的影响。方法100只大鼠按随机数字表法分为假手术... 目的：观察丹参酮ⅡA对心肌梗死模型大鼠心肌钙调蛋白（cardiac muscle, CaM）及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependentproteinkinase-Ⅱ, CaMKⅡ）mRNA 表达和心功能的影响。方法100只大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA组。模型组、丹参酮ⅡA组采用结扎左侧冠状动脉前降支45 min再灌注45 min，并反复3次阻断与再灌注的方法建立大鼠心肌梗死模型。丹参酮ⅡA组尾静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液10 mg/kg，假手术组、模型组尾静脉注射等体积生理盐水。连续给药7 d后断头处死，取心脏用Langendorff离体心脏灌流器灌流离体心脏，测定各组大鼠给药前后离体心脏左室最大上升/下降速率（±LVdp/dtmax）、心肌收缩张力、心率等心功能指标；TTC染色观察心肌梗死面积；检测缺血区心肌组织CaM及CaMKII mRNA表达。结果与模型组比较，丹参酮ⅡA 组 CaM mRNA[（1.29±0.19）比（2.31±0.21）]及 CaMKⅡ mRNA[（1.10±0.07）比（2.13±0.18）]表达下调（P＜0.05），心肌梗死范围[（25.12±0.43）%比（35.15±0.64）%]缩小（P＜0.05），心肌收缩张力[（2.03±0.14）g比（1.06±0.12）g]及±LVdp/dtmax[（4701.2±135.3）mmHg/s比（3214.7±110.2）mmHg/s；（2518.7±65.4）mmHg/s比（1960.3±62.5）mmHg/s]增高（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA可下调急性心肌梗死模型大鼠心肌细胞CaM、CaMKⅡ mRNA表达，对心肌缺血有保护作用。 展开更多

关键词 心肌梗塞 钙调蛋白 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 大鼠

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鞘内注射KN93或艾芬地尔对瑞芬太尼致痛觉过敏的镇痛作用 被引量：2

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作者 张兢 顾小萍 +1 位作者 程崇学 马正良 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2014年第2期134-137,144,共5页

目的观察分别鞘内注射钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca2＋/calmodulindependentproteinkinaselI．CaMKlI）高效特异性抑制剂KN93或艾芬地尔（Ifenprodil）对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的镇痛作用。方法sD雄性大鼠30只，按随机数字... 目的观察分别鞘内注射钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca2＋/calmodulindependentproteinkinaselI．CaMKlI）高效特异性抑制剂KN93或艾芬地尔（Ifenprodil）对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的镇痛作用。方法sD雄性大鼠30只，按随机数字表法分为5组（每组6只）：空白对照组（C组）、切口痛（I组）、瑞芬太尼组（R组）、KN93组（K组）及Ifenprodil组（F组）。除C组外均做切口痛模型，R组、K组及F组制作模型的同时经皮下泵注瑞芬太尼（O．04mg／kg）30min注完。R组、K组及F组术前30min分别鞘内给予10％二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）20μl、KN9320μl（50μg／10μl）和20仙μl fenprodil（10μg／20μl）。各组分别在术前24h及术后2、6、24、48h检测术侧热缩足潜伏期（pawwithdrawalthermallatencv，PWTL）及机械缩足阈值（pawwithdrawalmechanicalthreshold，PMWT）。结果与c组比较，I组术后手术侧PWTL及PMWT明显降低；与I组比较，R组术后手术侧PWTL及PMWT明显降低；与R组比较，K组术后各时间点PWTL（15．32±0．73）、（15．79±0．32）、（14．86±0．98）、（14．76±0．82）s及PMWT（31．8±1．4）、（29．3±1．2）、（30．8±1．0）、（30．5±1．2）g均明显升高（P〈0．05），F组术后各时间点PWTL（14．24±0．79）、（15．33±0．29）、（15．29±0．74）、（15．21±0．45）S及PMWT（29．3±1．8）、（30．2±2．1）、（29．5±1．5）、（30．2±1．0）g均明显升高（P〈0．05）。结论鞘内注射KN93或Ifenprodil均能够有效缓解瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。 展开更多

关键词 钙钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚型 瑞芬太尼 痛觉过敏 切口痛

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CaMKⅡδ慢病毒过表达载体构建及其对破骨细胞分化的影响 被引量：1

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作者 张艳波 戚孟春 +4 位作者 董伟 张广峰 冯晓洁 温黎明 孙红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第13期2123-2127,共5页

目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKⅡδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKⅡδ表达情况;并在分化诱导5 d后... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKⅡδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKⅡδ表达情况;并在分化诱导5 d后检测破骨细胞生成及骨吸收情况。结果 CaMKⅡδ转录本2和3在破骨细胞分化中高表达;用转录本2构建了过表达载体,建立了稳定转染株。过表达组CaMKⅡδ mRNA水平较对照组、空载体组分别上升107.8%和85.7%(P<0.05),蛋白水平分别上升37.2%和37.1%(P<0.05),证实重组CaMKⅡδ在细胞中得到有效表达。CaMKⅡδ过表达组破骨细胞数目、牙本质吸收陷窝数和面积与对照组和空载体组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CaMKⅡδ过表达对破骨细胞分化和骨吸收无明显影响。 展开更多

关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶iiδ 基因重组 破骨细胞 慢病毒 核因子ΚB受体活化因子配体

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黄连总生物碱通过调控CaMKII减轻局灶性脑缺血(MCAO)大鼠神经功能损伤的研究

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作者 李向阳 张晓敏 +3 位作者 梁广霞 王琳 付卫旭 牛宪立 《中国民族民间医药》 2023年第22期10-14,共5页

目的:研究黄连总生物碱调节钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)对局灶性脑缺血(MCAO)大鼠神经功能损伤后的影响。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为假手术组、对照组、黄连总生物碱(高浓度、中浓度和低浓度)治疗组,采用线栓法建立大鼠局灶性... 目的:研究黄连总生物碱调节钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)对局灶性脑缺血(MCAO)大鼠神经功能损伤后的影响。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为假手术组、对照组、黄连总生物碱(高浓度、中浓度和低浓度)治疗组,采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,假手术组不给予线栓处理,术后对大鼠进行神经功能评分。各治疗组给予黄连总生物碱灌胃治疗,按照人与大鼠等效剂量关系折算,假手术组用等量生理盐水灌胃;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠脑组织中CaMKII的含量;采用BCA法和WST-1法分别测超氧化物歧化酶(SOD)的活力和丙二醛(MDA)的含量;制备脑组织病理切片,HE染色观察脑组织形态学变化。结果:与假手组相比,模型组评分和脑梗死体积明显升高,各个实验组经过黄连治疗后神经功能评分和脑梗死体积都有明显降低(P<0.05)。模型组与假手术组的CaMKII的含量相比明显升高(P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠脑组织损伤程度加重,外周血氧化因子SOD活性降低,MDA含量升高;黄连治疗后,低、中、高剂量组SOD水平升高,MDA水平降低。HE染色观察脑组织病变程度,给药组大鼠的病变程度较模型组有明显改善。结论:黄连总生物碱通过调节脑缺血大鼠模型中CaMKII活性的影响,对海马细胞的神经损伤有一定的恢复和治疗作用。 展开更多

关键词 黄连总生物碱 脑缺血再灌注 钙/钙调素依赖性蛋白激酶ii

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CaMKⅡγ在破骨细胞分化中的表达规律 被引量：1

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作者 李瑛 戚孟春 +4 位作者 董伟 王会 冯晓洁 温黎明 孙红 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期240-245,共6页

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(T... 目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评价破骨细胞生成情况,并用RT-PCR、Western印迹、免疫荧光细胞化学法检测CaMKⅡγm RNA和蛋白表达。结果:多核破骨细胞在诱导后第3天开始出现,第5天达到最多。分化第0,1,3,5天,CaMKⅡγm RNA相对表达水平分别为(1.067±0.179),(1.840±0.070),(9.493±0.453)和(30.767±0.573);蛋白相对表达水平分别为(0.454±0.065),(0.613±0.021),(0.858±0.019)和(0.980±0.023);除第1天的蛋白相对水平外,其他时间点CaMKⅡγm RNA和蛋白表达差异均有统计学意义,且呈时间依赖性增强(P<0.01)。免疫荧光细胞化学法检测也显示CaMKⅡγ蛋白表达在破骨细胞分化过程中逐步增加。结论:CaMKⅡγ表达随破骨细胞分化呈时间依赖性增加,提示其在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。 展开更多

关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ 破骨细胞 受体活化核因子-κB配体 抗酒石酸酸性磷酸酶染色

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CaMKⅡ表达调控对大鼠肝移植术后肝功能的影响 被引量：1

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作者 冉江华 郑克谱 +3 位作者 李望 张熙冰 刘驳强 李温凯 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2017年第4期438-442,共5页

目的探讨钙调素依赖蛋白激酶家族(calmodulin-dependent kinases casades,CaMK)Ⅱ表达调控对大鼠肝移植术后肝功能的影响。方法采用经典二袖套法建立SD至SD大鼠同种异体原位肝移植模型,并构建CaMKⅡγ蛋白和CaMKⅡγsh RNA的慢病毒表达... 目的探讨钙调素依赖蛋白激酶家族(calmodulin-dependent kinases casades,CaMK)Ⅱ表达调控对大鼠肝移植术后肝功能的影响。方法采用经典二袖套法建立SD至SD大鼠同种异体原位肝移植模型,并构建CaMKⅡγ蛋白和CaMKⅡγsh RNA的慢病毒表达体系。分别将表达CaMKⅡγsh RNA的慢病毒载体及表达CaMKⅡγ蛋白的慢病毒载体灌注至肝移植术后大鼠体内,同时予以灌注相应的空载体及生理盐水形成对照,分别于术后不同时间点取大鼠下腔静脉血测定其血清ALT及AST水平。结果灌注表达CaMKⅡγsh RNA的慢病毒载体的移植术后大鼠血清ALT及AST降低(P<0.05);灌注表达CaMKⅡγ蛋白的慢病毒载体的移植术后大鼠血清ALT及AST升高(P<0.05);灌注空白载体及生理盐水的移植术后大鼠血清ALT及AST均无明显差异(P>0.05)。结论特异性阻断CaMKⅡ信号通路可有效降低大鼠肝移植术后的血清ALT及AST水平;而增强的CaMKⅡ信号通路则升高大鼠肝移植术后的血清ALT和AST水平。 展开更多

关键词 钙调素依赖蛋白激酶家族 肝移植 肝功能 大鼠

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