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Cholecystokinin and cholecystokinin-A receptor: An attractive treatment strategy for biliary dyskinesia?
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作者 Jun Chang Yan Liu +2 位作者 Ting-Can Jiang Lan Zhao Jian-Wei Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2024年第3期283-285,共3页
Biliary dyskinesia is a relatively common gastrointestinal disease that is increas-ing in incidence as living standards improve.However,its underlying pathogenesis remains unclear,hindering the development of therapeu... Biliary dyskinesia is a relatively common gastrointestinal disease that is increas-ing in incidence as living standards improve.However,its underlying pathogenesis remains unclear,hindering the development of therapeutic drugs.Recently,“Expression and functional study of cholecystokinin-A receptors on the interstitial Cajal-like cells of the guinea pig common bile duct”demonstrated that cholecystokinin(CCK)regulates the contractile function of the common bile duct through interaction with the CCK-A receptor in interstitial Cajal-like cells,contributing to improving the academic understanding of biliary tract dynamics and providing emerging directions for the pathogenesis and clinical management of biliary dyskinesia.This letter provides a brief overview of the role of CCK and CCK-A receptors in biliary dyskinesia from the perspective of animal experiments and clinical studies,and discusses prospects and challenges for the clinical application of CCK and CCK-A receptors as potential therapeutic targets. 展开更多
关键词 CHOLECYSTOKININ Cholecystokinin-A receptor Biliary dyskinesia Interstitial cajal-like cell Therapeutic target
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Expression and functional study of cholecystokinin-A receptors on the interstitial Cajal-like cells of the guinea pig common bile duct 被引量:1
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作者 Dan Xu Song-Lin Ma +1 位作者 Man-Lin Huang Heng Zhang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2023年第38期5374-5382,共9页
BACKGROUND Many studies have shown that interstitial Cajal-like cell(ICLC)abnormalities are closely related to a variety of dynamic gastrointestinal disorders.ICLCs are pacemaker cells for gastrointestinal movement an... BACKGROUND Many studies have shown that interstitial Cajal-like cell(ICLC)abnormalities are closely related to a variety of dynamic gastrointestinal disorders.ICLCs are pacemaker cells for gastrointestinal movement and are involved in the transmission of nerve impulses.AIM To elucidate the expression profile and significance of cholecystokinin-A(CCK-A)receptors in ICLCs in the common bile duct(CBD),as well as the role of CCK in regulating CBD motility through CCK-A receptors on CBD ICLCs.METHODS The levels of tyrosine kinase receptor(c-kit)and CCK-A receptors in CBD tissues and isolated CBD cells were quantified using the double immunofluorescence labeling technique.The CCK-mediated enhancement of the movement of CBD muscle strips through CBD ICLCs was observed by a muscle strip contraction test.RESULTS Immunofluorescence showed co-expression of c-kit and CCK-A receptors in the CBD muscularis layer.Observations of isolated CBD cells showed that c-kit was expressed on the surface of ICLCs,the cell body and synapse were colored and polygonal,and some cells presented protrusions and formed networks adjacent to the CBD while others formed filaments at the synaptic terminals of local cells.CCK-A receptors were also expressed on CBD ICLCs.At concentrations ranging from 10^(-6) mol/L to 10^(-10) mol/L,CCK promoted CBD smooth muscle contractility in a dose-dependent manner.In contrast,after ICLC removal,the contractility mediated by CCK in CBD smooth muscle decreased.CONCLUSION CCK-A receptors are highly expressed on CBD ICLCs,and CCK may regulate CBD motility through the CCK-A receptors on ICLCs. 展开更多
关键词 Interstitial cajal-like cells Tyrosine kinase receptor Common bile duct Cholecystokinin-A receptors
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Effect of cholesterol on in vitro cultured interstitial Cajal-like cells isolated from guinea pig gallbladders 被引量:2
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作者 Bei-Bei Fu Jin-Huang Xu +1 位作者 Shuo-Dong Wu Ying Fan 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE CAS 2020年第5期226-235,共10页
BACKGROUND Loss and/or dysfunction of interstitial Cajal-like cells(ICLCs)in the gallbladder may promote cholesterol gallstone formation by decreasing gallbladder motility.AIM To study the effect of cholesterol on the... BACKGROUND Loss and/or dysfunction of interstitial Cajal-like cells(ICLCs)in the gallbladder may promote cholesterol gallstone formation by decreasing gallbladder motility.AIM To study the effect of cholesterol on the proliferation and apoptosis of ICLCs from guinea pig gallbladders.METHODS Guinea pig gallbladder ICLCs were isolated and cultured in vitro.The cells were exposed to cholesterol solutions at different concentrations(0,25,50,and 100 mg/L)for 24 h.Then,cell proliferation was detected by the CCK-8 method and the apoptosis rate was detected by flow cytometry.Further,the expression of the c-Kit protein was detected by Western blot and the expression level of c-Kit m RNA in the cells was detected by real-time quantitative PCR.RESULTS After ICLCs were cultured with cholesterol at concentrations of 25,50,and 100 mg/L,the proliferation rates decreased significantly(P<0.05),whereas the apoptosis rates increased significantly(P<0.05).Moreover,the expression of cKit protein and m RNA decreased significantly(P<0.05).CONCLUSION High cholesterol concentrations can inhibit the proliferation of ICLCs and promote apoptosis.This decrease in the ICLC proliferation rate might be caused by the inhibition of the stem cell factor/c-Kit signaling pathway. 展开更多
关键词 Interstitial cajal-like cells CHOLESTEROL Apoptosis c-Kit
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Cholesterol gallstones:Focusing on the role of interstitial Cajal-like cells 被引量:2
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作者 Bei-Bei Fu Jian-Nan Zhao +1 位作者 Shuo-Dong Wu Ying Fan 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2021年第15期3498-3505,共8页
with a complex and multifactorial etiology.Declined gallbladder motility reportedly contributes to CG pathogenesis.Furthermore,interstitial Cajal-like cells(ICLCs)are reportedly present in human and guinea pig gallbla... with a complex and multifactorial etiology.Declined gallbladder motility reportedly contributes to CG pathogenesis.Furthermore,interstitial Cajal-like cells(ICLCs)are reportedly present in human and guinea pig gallbladder tissue.ICLCs potentially contribute to the regulation of gallbladder motility,and aberrant conditions involving the loss of ICLCs and/or a reduction in its pacing potential and reactivity to cholecystokinin may promote CG pathogenesis.This review discusses the association between ICLCs and CG pathogenesis and provides a basis for further studies on the functions of ICLCs and the etiologies of CG. 展开更多
关键词 Interstitial cajal-like cells Cholesterol gallstones Gallbladder motility Biliary system disease GALLSTONES
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Interstitial Cajal-like cells arrhythmogenic potential substrate of pulmonary veins
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作者 卢少平 《South China Journal of Cardiology》 CAS 2010年第2期129-136,共8页
Interstitial Cajal-like cells(ICLC) have been found in the atrium,ventricle and pulmonary vein in human and anmials.ICLC with very long processes and space structure,Cell processes establish close spatial relationship... Interstitial Cajal-like cells(ICLC) have been found in the atrium,ventricle and pulmonary vein in human and anmials.ICLC with very long processes and space structure,Cell processes establish close spatial relationships between each other, as well as with cardiomyocyte and nerve endings.ICLC appear located among the myocardial cells and particularly at the border between the myocardial sleeve and pulmonary vein wall.ICLC seems to possess automaticity and triggered activity.ICLC is a potential substrate for arrhythmia. 展开更多
关键词 Interstitial cajal-like cells ARRHYTHMIA
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体外Cajal样细胞c-kit基因mRNA在高糖环境下表达变化及意义 被引量:8
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作者 蔡志强 丁国富 +2 位作者 李云飞 范勇洪 王勤章 《农垦医学》 2010年第1期1-4,共4页
目的:观察体外高糖环境下Cajal样细胞(interstitial cells of Cajal-like,ICCs)c-kit mRNA表达变化。方法:胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs,加入含葡萄糖浓度分别为5mmol/L、15mmol/L、30mmol/L培养基培养24h、48h、72h后,应用逆... 目的:观察体外高糖环境下Cajal样细胞(interstitial cells of Cajal-like,ICCs)c-kit mRNA表达变化。方法:胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs,加入含葡萄糖浓度分别为5mmol/L、15mmol/L、30mmol/L培养基培养24h、48h、72h后,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测高糖环境下c-kit基因mRNA表达水平的变化。结果:RT-PCR电泳经分析显示15mmol/L、30mmol/L组ICCs c-kit mRNA表达较5mmol/L组降低(P<0.01),72h组较24h组、48h组表达降低。结论:高糖环境造成ICCs c-kit基因mRNA表达水平降低,可导致ICCs的SCF/c-kit信号通路异常,ICCs功能及结构障碍,可能是糖尿病膀胱病变的发病机制之一。 展开更多
关键词 cajal样细胞 C-KIT基因 高糖 糖尿病
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早期糖尿病膀胱尿动力学及cajal样细胞的变化和意义 被引量:7
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作者 李云飞 王勤章 丁国富 《临床泌尿外科杂志》 北大核心 2009年第9期694-697,共4页
目的:观察早期糖尿病在膀胱尿动力学和cajal样细胞上的病理学改变,探讨其发生机制及病理演绎过程。方法:建立早期糖尿病豚鼠模型40只(病变组),以正常豚鼠20只作对照(对照组),饲养10周后行膀胱最大收缩压、漏尿点压等尿动力学指标测定。... 目的:观察早期糖尿病在膀胱尿动力学和cajal样细胞上的病理学改变,探讨其发生机制及病理演绎过程。方法:建立早期糖尿病豚鼠模型40只(病变组),以正常豚鼠20只作对照(对照组),饲养10周后行膀胱最大收缩压、漏尿点压等尿动力学指标测定。然后将两组豚鼠膀胱制作成冷冻切片行免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察。结果:10周后,与对照组比较,病变组膀胱最大容量(P<0.05)、漏尿点压(P<0.01)、顺应性(P<0.05)、剩余尿量(P<0.01)增加,而膀胱静息压(P<0.01)、最大逼尿肌压(P<0.05)下降,激光共聚焦显微镜下见糖尿病组膀胱逼尿肌中cajal样细胞数量减少(P<0.01),cajal样细胞二聚体消失(P<0.01)。结论:糖尿病膀胱病变豚鼠早期有尿动力学异常,cajal样细胞数量减少并伴有该细胞二聚体结构消失,提示早期糖尿病膀胱病变是高糖环境下发生了具有起博功能的cajal样间质细胞异常,从而使逼尿肌功能障碍及尿动力学发生改变;而真正起逼尿功能的平滑肌细胞失去该细胞起博而处于一种待激发的"休眠状态"。因此,临床上应针对这种情况进行干预,以控制病情的进一步恶化。 展开更多
关键词 糖尿病膀胱病变 cajal样间质细胞 激光共聚焦显微镜 尿动力学
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输尿管梗阻对新生大鼠肾盂功能及起搏细胞的影响
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作者 任川川 程光阳 +5 位作者 李晓洁 王焱 冶卓 张国贤 王庆伟 文建国 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期215-220,共6页
目的探讨新生大鼠单侧输尿管梗阻对肾盂蠕动功能及起搏细胞的影响。方法动物实验研究。2日龄新生SD大鼠36只,根据随机数字表法分为单侧输尿管部分梗阻(PUUO)组、单侧输尿管完全梗阻(CUUO)组和假手术组,每组12只。术后1周进行肾盂穿刺测... 目的探讨新生大鼠单侧输尿管梗阻对肾盂蠕动功能及起搏细胞的影响。方法动物实验研究。2日龄新生SD大鼠36只,根据随机数字表法分为单侧输尿管部分梗阻(PUUO)组、单侧输尿管完全梗阻(CUUO)组和假手术组,每组12只。术后1周进行肾盂穿刺测压,测压后处死幼鼠,取左侧肾盂输尿管固定后用于组织学检测。记录并比较各组幼鼠不同灌注速度时肾盂压力、蠕动波频率、波幅等参数,同时比较各组肾盂起搏细胞(非典型平滑肌细胞和Cajal样间质细胞)的变化情况。2组间比较采用独立样本t检验,3组比较采用单因素方差分析。结果假手术组肾盂压力随灌注速度增加而缓慢增加;蠕动频率随灌注速度增加而快速升高,达最大值后随灌注速度增加而降低。蠕动波振幅随灌注速度增加呈现先升高后降低。PUUO组肾盂压力随灌注速度增加而快速增加,且均高于假手术组;蠕动频率较假手术组高,在40 mL/h之前的蠕动频率较为接近,但灌注速度再增加时,蠕动波频率开始下降。蠕动波振幅随灌注速度增加出现快速升高而后下降,且下降速度较假手术组快。CUUO组肾盂基础压力为12 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa),但在5 mL/h的灌注速度下,肾盂压力逐渐升高,未出现平台期,直至肾盂压力达73 cmH2O时,灌注液自穿刺针旁逆行流出,肾盂压力稍下降后达到平衡,整个过程未出现规律肾盂蠕动波。3组肾盂组织免疫荧光染色分析显示,起搏细胞均位于肾盂壁的平滑肌中,假手术组阳性率最高,PUUO组次之,CUUO组最低。结论输尿管梗阻对肾盂蠕动功能有显著影响,其对蠕动频率、幅度及肾盂压力等产生的影响有一定规律可循;肾盂起搏细胞减少可能参与输尿管梗阻导致的肾盂蠕动功能改变,但起搏细胞如何调节肾盂输尿管蠕动仍需进一步研究。 展开更多
关键词 输尿管梗阻 cajal样间质细胞 大鼠 新生 肾盂蠕动功能
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含人干细胞白血病基因慢病毒载体转染Cajal样间质细胞的效果研究 被引量:6
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作者 于建超 王勤章 +5 位作者 王江平 钱彪 李应龙 王新敏 倪钊 李强 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期1796-1802,共7页
目的:观察携带增强绿色荧光蛋白(GFP)的含人干细胞白血病(SCL)基因慢病毒载体转染体外培养的豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞(ICC)的效果。方法2014年10月—2015年8月,选取普通级成年健康豚鼠16只。构建含人 SCL 基因的慢病毒载体,... 目的:观察携带增强绿色荧光蛋白(GFP)的含人干细胞白血病(SCL)基因慢病毒载体转染体外培养的豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞(ICC)的效果。方法2014年10月—2015年8月,选取普通级成年健康豚鼠16只。构建含人 SCL 基因的慢病毒载体,并标定病毒滴度;采用随机数字表法选取健康豚鼠4只,采用颈椎脱臼方法将其杀死,体外培养豚鼠膀胱 ICC。设置不同感染复数(MOI)(0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0),利用含人 SCL 基因的慢病毒载体转染 ICC,在激光共聚焦显微镜下观察 ICC 生长状态并计算转染效率,确定最佳 MOI。采用随机数字表法将 ICC 分为正常对照组、空白质粒对照组与慢病毒转染组,其中正常对照组加入1%磷酸盐缓冲液(PBS),空白质粒对照组加入空慢病毒,慢病毒转染组按最佳 MOI 加入含人 SCL 基因的慢病毒载体,计算各组转染效率,确定最佳转染时间。采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测 SCL mRNA 表达情况。上述实验均独立重复4次。结果经测定,病毒滴度为5&#215;108 TU/ ml。倒置显微镜下发现一些特征性梭形细胞,其两侧有显著外凸分枝,细胞核较大,其外形规则,有序地实现细胞贴壁,而其他未贴壁细胞则呈现与 ICC 不一样的形态,胞体多为椭圆形,细胞两极无突起,整体形状扁平。激光共聚焦显微镜下可以发现酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)受体成功表达,证实培养的细胞是膀胱 ICC。观察各组 ICC 生长状态,当 MOI 为0.5、1.0、5.0、10.0时,细胞生长状态较好,无细胞死亡,当 MOI为50.0、100.0时,可见部分细胞死亡,细胞活性降低;MOI 为1.0、5.0、10.0、50.0、100.0时的转染效率高于 MOI为0.5时(P <0.05);MOI 为5.0、10.0、50.0、100.0时的转染效率高于 MOI 为1.0时(P <0.05);MOI 为10.0、50.0、100.0时的转染效率高于 MOI 为5 展开更多
关键词 转染 干细胞白血病基因 慢病毒载体 cajal样间质细胞
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人干细胞白血病基因重组慢病毒载体的构建及其在Cajal样间质细胞中的表达 被引量:5
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作者 于建超 王江平 +5 位作者 李应龙 钱彪 倪钊 王新敏 李强 王勤章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期10-16,共7页
目的构建含人干细胞白血病(SCL)基因的重组慢病毒载体,并转染体外培养的Cajal样间质细胞(ICC),为进一步利用慢病毒表达载体行体内实验奠定基础。方法通过聚合酶链反应(PCR)将人SCL基质粒内的遗传物质扩增,与慢病毒载体质粒GV287-EGFP结... 目的构建含人干细胞白血病(SCL)基因的重组慢病毒载体,并转染体外培养的Cajal样间质细胞(ICC),为进一步利用慢病毒表达载体行体内实验奠定基础。方法通过聚合酶链反应(PCR)将人SCL基质粒内的遗传物质扩增,与慢病毒载体质粒GV287-EGFP结合,构建重组质粒GV287-EGFP/SCL,通过Western blot检测及基因测序对阳性克隆进行鉴定,并测定病毒滴度。体外分离、培养及鉴定ICC,重组慢病毒载体以感染复数(MOI)值为0.5、1.0、5.0、10.0、50.0和100.0时,分别转染ICC,通过激光共聚焦显微镜观察,计算不同MOI值的转染效果,确定最佳MOI值。重组慢病毒载体以最佳MOI值感染ICC作为实验组,以空载体转染的ICC(空载体组)及未转染的ICC(空白组)作为对照,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SCL基因在ICC中的表达。结果经Western blot检测及基因测序鉴定SCL重组慢病毒表达载体构建成功,并成功转染ICC,激光共聚焦显微镜下可观察到强绿色荧光。MOI为10时转染效果最佳,转染效率>85%;RT-PCR结果表明,实验组SCL基因的表达量高于空载体组和空白组。结论成功制备人SCL基因重组慢病毒载体,并能高效转染ICC,介导SCL基因在ICC中表达。 展开更多
关键词 干细胞白血病基因 慢病毒载体 转染 cajal样间质细胞
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干细胞因子对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 刘永国 王勤章 +6 位作者 丁国富 刘新军 周建民 李应龙 王江平 钱彪 杨兰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期282-285,共4页
目的观察干细胞因子(stem cell factor,SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白的表达影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,培养24 h后分别加入葡萄糖浓度为5 mmol/L(正常对照组)、15 mmol/L... 目的观察干细胞因子(stem cell factor,SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白的表达影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,培养24 h后分别加入葡萄糖浓度为5 mmol/L(正常对照组)、15 mmol/L(高糖组)培养基培养72 h后,高糖组分为高糖对照组、SCF干预组(50 ng/ml、100 ng/ml),分别继续培养24 h、72 h,应用RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)分别检测膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA和蛋白表达变化。结果高糖对照组较正常对照组c-kit mRNA及蛋白表达均明显下降。24 h组中,SCF50 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P>0.05)和蛋白表达(P>0.05)差异不大,SCF100 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.05)升高;72 h组中,SCF50 ng/ml组、SCF100 ng/ml组较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.01)和蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论高浓度SCF可促进已发生形态、机能变化的离体膀胱Cajal样间质细胞c-kit表达上调。 展开更多
关键词 cajal样间质细胞 c—kit 高糖环境 SCF/c—kit信号通路
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AdMax系统构建腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal样间质细胞及其表达 被引量:4
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作者 周建民 王勤章 +3 位作者 丁国富 屠松 牛世杰 杨发英 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期33-37,共5页
目的构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构... 目的构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-EGFP/SCL,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC315-SCL经HEK293细胞扩增,纯化后测定病毒滴度。通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对Cajal样间质细胞的转染率,RT-PCR法分析转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA的表达。结果 PCR结果和Western blot法检测证实pDC315-SCL重组腺病毒载体构建成功,滴度达到1×1010 PFU/ml,对膀胱Cajal样间质细胞的转染率高达98%,RT-PCR法检测转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA有表达。结论成功构建pDC315-SCL重组腺病毒载体对Cajal样间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal样间质细胞的表达。 展开更多
关键词 干细胞白血病基因 腺病毒载体 转染 cajal样间质细胞
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胆囊Cajal样间质细胞与胆囊胆固醇结石形成关系的研究进展 被引量:3
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作者 赵健楠 范莹 吴硕东 《医学综述》 2019年第21期4180-4184,4190,共6页
胆囊胆固醇结石(CG)是我国胆道系统的常见病和多发病。CG的病因复杂,其中胆囊动力下降在CG形成过程中起着极为重要的作用。人体和豚鼠胆囊组织中的Cajal样间质细胞(ICLC)对胆囊动力的调节具有重要作用。ICLC丢失和(或) ICLC起搏电位减... 胆囊胆固醇结石(CG)是我国胆道系统的常见病和多发病。CG的病因复杂,其中胆囊动力下降在CG形成过程中起着极为重要的作用。人体和豚鼠胆囊组织中的Cajal样间质细胞(ICLC)对胆囊动力的调节具有重要作用。ICLC丢失和(或) ICLC起搏电位减弱以及ICLC对胆囊收缩素反应性降低等功能障碍均可能促进CG的形成,ICLC丢失可能与氧化应激反应、c-kit/干细胞因子通路抑制、胆汁组成成分变化以及炎症反应等有关,但其具体作用机制及相关性仍需进一步研究的确定。 展开更多
关键词 胆囊胆固醇结石 cajal样间质细胞 胆囊动力
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豚鼠膀胱Cajal样细胞在高糖环境中的形态学变化 被引量:3
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作者 蔡志强 王勤章 +2 位作者 丁国富 李云飞 范勇洪 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第22期4248-4250,共3页
目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态学变化。方法:应用酶解法分离培养豚鼠膀胱Cajal样细胞,分为无糖组、正常对照组(葡萄糖浓度5mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度分别为15、30、60mmol/L),通过光学倒置显微镜及c-kit抗体染色后激光... 目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态学变化。方法:应用酶解法分离培养豚鼠膀胱Cajal样细胞,分为无糖组、正常对照组(葡萄糖浓度5mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度分别为15、30、60mmol/L),通过光学倒置显微镜及c-kit抗体染色后激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果:葡萄糖浓度分别为30、60mmol/L组较无糖组、正常对照组(5mmol/L)及15mmol/L组细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),蛋白标记后显示蛋白染色部位减少,有核着色迹象。结论:高糖环境可导致Cajal样细胞的形态异常,数量减少,可能引起其功能学的改变,提示其可能是糖尿病膀胱病变的的影响因素。 展开更多
关键词 高糖环境 cajal样细胞 糖尿病
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高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞内向电流的影响 被引量:4
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作者 徐礼臻 王勤章 +3 位作者 韩涛 丁国富 马克涛 王江平 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第34期25-26,共2页
目的观察高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICCs)内向电流的影响。方法采用胶原酶消化法,得到原代培养的成年豚鼠膀胱ICCs;采用膜片钳技术,在全细胞记录模式下,记录葡萄糖5(对照组)、15(高糖Ⅰ组)3、0 mmol/L(高糖Ⅱ组)下ICCs超极化... 目的观察高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICCs)内向电流的影响。方法采用胶原酶消化法,得到原代培养的成年豚鼠膀胱ICCs;采用膜片钳技术,在全细胞记录模式下,记录葡萄糖5(对照组)、15(高糖Ⅰ组)3、0 mmol/L(高糖Ⅱ组)下ICCs超极化激活时的内向电流值。结果正常对照组膀胱ICCs的内向电流值为(505.75±157.660)pA,高糖Ⅰ组为(349.25±71.087)pA,高糖Ⅱ组为(95.00±33.337)pA。三组间比较,P均<0.01。结论高糖环境可导致豚鼠膀胱ICCs超极化激活的内向电流值降低,这可能是导致糖尿病膀胱病变的原因之一。 展开更多
关键词 膀胱间质细胞 起搏电流 高糖环境 膀胱 糖尿病膀胱病变 豚鼠
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胆道Cajal样间质细胞的研究进展 被引量:2
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作者 王锴 范莹 《中华消化外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期404-406,共3页
Cajal问质细胞是位于胃肠道肌群的一种特殊间质细胞,其与平滑肌细胞,神经元细胞有密切联系,参与胃肠道的蠕动和神经信号传导,是胃肠道慢波的起搏细胞。存在于胆道、尿道、膀胱等胃肠道外器官的Cajal间质细胞被命名为Cajal样间质细胞... Cajal问质细胞是位于胃肠道肌群的一种特殊间质细胞,其与平滑肌细胞,神经元细胞有密切联系,参与胃肠道的蠕动和神经信号传导,是胃肠道慢波的起搏细胞。存在于胆道、尿道、膀胱等胃肠道外器官的Cajal间质细胞被命名为Cajal样间质细胞(ICLC),笔者就ICLC在胆道系统的形态、鉴别、分类、功能、分布及其与胆道系统疾病的关系等方面作一综述。 展开更多
关键词 cajal样间质细胞 胆道 胆道疾病
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含人干细胞白血病基因的重组慢病毒表达载体的构建及鉴定 被引量:2
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作者 于建超 王江平 +6 位作者 李应龙 钱彪 倪钊 王新敏 李强 王文晓 王勤章 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第44期15-17,共3页
目的构建含人干细胞白血病(SCL)基因的重组慢病毒表达载体(GV287-SCL),为糖尿病膀胱异常病症(DCP)的基因治疗奠定基础。方法采用PCR法将人SCL基因质粒内的遗传物质扩增,与慢性病毒穿透质粒结合,构建重组穿梭质粒GV287-EGFP/SCL,共转染2... 目的构建含人干细胞白血病(SCL)基因的重组慢病毒表达载体(GV287-SCL),为糖尿病膀胱异常病症(DCP)的基因治疗奠定基础。方法采用PCR法将人SCL基因质粒内的遗传物质扩增,与慢性病毒穿透质粒结合,构建重组穿梭质粒GV287-EGFP/SCL,共转染293T细胞,通过多次感染、扩增和提纯,得到重组慢病毒GV287-SCL。以不同浓度重组慢病毒原液感染293T细胞,采用Western blotting法检测目的基因,荧光标记法计算病毒滴度。结果人SCL基因扩增产物大小为1 036 bp,与目的基因相关片段中SCL c DNA大小相同。阳性转化子扩展后均形成503 bp条带,其大小与目的片段人SCL c DNA相当。重组质粒GV287-EGFP/SCL阳性克隆的目的基因SCL成功插入到GV287-EGFP,基因排序和Gen Bank信息库里的人SCL基因mRNA基本相同。重组慢病毒滴度为5×108TU/m L。结论成功构建了GV287-SCL,病毒滴度为5×108TU/m L。本研究为继续进行SCL基因体内转染及开展DCP的基因治疗提供了基础。 展开更多
关键词 糖尿病膀胱异常病症 干细胞白血病基因 慢病毒载体 转染 cajal样间质细胞
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豚鼠膀胱Cajal样间质细胞钙震荡特性 被引量:1
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作者 朱国栋 王勤章 《中国医学创新》 CAS 2016年第18期1-4,共4页
目的:探讨正常成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(Cajal-like interstitial cells)是否有自发周期性钙震荡(calcium oscillation),以期为膀胱兴奋性起搏细胞为Cajal样间质细胞这一学说提供实验依据。方法:运用胶原酶V消化法,获得原代豚鼠膀胱... 目的:探讨正常成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(Cajal-like interstitial cells)是否有自发周期性钙震荡(calcium oscillation),以期为膀胱兴奋性起搏细胞为Cajal样间质细胞这一学说提供实验依据。方法:运用胶原酶V消化法,获得原代豚鼠膀胱Cajal样间质细胞进行培养,采用激光共聚焦显微镜成像技术,Fluo-4AM负载后的Cajal样间质细胞内钙离子荧光强度的变化采用激光共聚焦显微镜成像技术进行记录,荧光强度的改变代表细胞内钙离子浓度的变化。结果:培养后的Cajal样间质细胞保持其固有特征,可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起;培养的Cajal样间质细胞有两类不同的钙震荡:一类震幅小而频率不规则,另一类震幅大而频率慢。第二类钙震荡与膀胱逼尿肌细胞的钙震荡显著不同。结论:与消化道起搏细胞Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)自发性钙震荡类似,成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞亦存在自发钙震荡,提示膀胱收缩活动的起搏细胞可能为其中一种类型的膀胱Cajal样间质细胞。 展开更多
关键词 钙震荡 cajal样间质细胞 膀胱 起搏细胞 激光共聚焦显微镜
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胆固醇对体外分离培养的豚鼠胆囊Cajal样间质细胞的影响 被引量:1
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作者 许金煌 范莹 《中国临床研究》 CAS 2019年第11期1457-1461,共5页
目的研究胆固醇对体外分离培养的豚鼠胆囊Cajal样间质细胞(ICLCs)增殖、凋亡的影响。方法体外分离培养豚鼠胆囊ICLCs,用含不同质量浓度[0 mg/L(空白组)及12.5、25、50、100 mg/L(实验组)]的胆固醇培养液作用于细胞24 h后,CCK-8法检测细... 目的研究胆固醇对体外分离培养的豚鼠胆囊Cajal样间质细胞(ICLCs)增殖、凋亡的影响。方法体外分离培养豚鼠胆囊ICLCs,用含不同质量浓度[0 mg/L(空白组)及12.5、25、50、100 mg/L(实验组)]的胆固醇培养液作用于细胞24 h后,CCK-8法检测细胞的增殖率,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot检测细胞受体酪氨酸激酶(c-kit)蛋白的表达量,实时荧光定量PCR检测细胞c-kit mRNA的表达水平。结果用含25、50、100 mg/L质量浓度胆固醇的培养液培养ICLCs后,与空白组相比,实验组ICLCs的增殖率明显下降(P<0.05);ICLCs的凋亡率明显增加(P<0.05);c-kit蛋白表达及c-kit mRNA表达均明显下降(P<0.05)。结论高浓度的胆固醇能够抑制ICLCs的增殖并促进ICLCs的凋亡,ICLCs增殖率下降可能是SCF/c-kit信号通路受阻所致。 展开更多
关键词 cajal样间质细胞 胆固醇 凋亡 增殖 受体酪氨酸激酶基因
原文传递
经尿道联合灌注SCL和Cx43基因慢病毒对糖尿病膀胱功能的影响
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作者 轩留明 马路平 +4 位作者 欧阳松 孙鹏 谭明辉 张永强 王勤章 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第10期1546-1551,共6页
目的探究干细胞白血病基因(SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因(Cx43)重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(DCP)功能的影响。方法90只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲... 目的探究干细胞白血病基因(SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因(Cx43)重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(DCP)功能的影响。方法90只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL组、Cx43组、SCL+Cx43组。糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2 ml不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2 ml,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2 ml。转染14 d后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,并迅速摘取膀胱,进行冰冻膀胱切片及荧光双染。结果与糖尿病组相比,SCL组、Cx43组在尿流动力学检查中差异无统计学意义(P>0.05),SCL+Cx43组尿流动力学检查可见逼尿肌压力、腹压、膀胱压均有改善(P<0.05)。糖尿病组激光共聚焦可见Cajal间质细胞(ICC)的数量减少,梭形结构及细胞突起明显被破坏,出现细胞裂解状态。SCL组、Cx43组可见ICC样细胞的梭形结构和细胞突起有所改善,细胞数量无明显变化。SCL+Cx43组可见ICC样细胞的数量增多,梭形结构及细胞突起有改善,并可形成ICC-二聚体。结论经尿道联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染,可恢复损伤的ICC细胞的数量及结构,并形成ICC二聚体结构,提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,改善排尿无力、腹压排尿等特点,为治疗DCP提供了新的方向。 展开更多
关键词 糖尿病膀胱病变 cajal样间质细胞 干细胞白血病基因 CX43基因
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