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急、慢性抑制CaMKⅡ的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响 被引量:4
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作者 徐陵琦 陈慧娟 《中国临床研究》 CAS 2018年第2期158-162,共5页
目的探讨急、慢性抑制钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响。方法选择24只C57BL6小鼠,随机分为假手术组、心衰模型组、CaMKⅡ急性抑制组及CaMKⅡ慢性抑制组,每组6只。假手术组只行开胸术,不行升主... 目的探讨急、慢性抑制钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的活性对心衰小鼠心功能和心力储备的影响。方法选择24只C57BL6小鼠,随机分为假手术组、心衰模型组、CaMKⅡ急性抑制组及CaMKⅡ慢性抑制组,每组6只。假手术组只行开胸术,不行升主动脉缩窄术;其余三组均采用升主动脉缩窄术建立心衰模型。术后15 d,假手术组与心衰模型组小鼠腹腔注射0.1ml生理盐水一次,CaMKⅡ急性抑制组与CaMKⅡ慢性抑制组小鼠分别腹腔注射同样剂量的KN93(CaMKⅡ抑制剂)一次及连续1周。采用小动物超声心动图仪和左心室压力-容积导管分别测量各组小鼠基础状态下和异丙肾上腺素(ISO)后心功能和心力储备,包括左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、纵向应变(LS)、纵向应变率(LSR)、收缩末期压力容积关系(ESPVR)、左室内压最大上升速度-舒张末期左室容积关系(dp/dtmax-EDV)、每搏功-舒张末期容积关系即前负荷可补充的心室搏出功(PRSW)、左室内压最大下降速度(dp/dtmin)、左心室松弛时间常数(Tau)、舒张末期压力容积关系(EDPVR)等指标。结果与假手术组相比,心衰模型组小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV、PRSW和dp/dtmin均显著降低(P<0.05),而Tau和EDPVR显著升高(P均<0.05)。急性抑制CaMKⅡ的活性对心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW无显著影响,但能显著降低dp/dtmin(P<0.05),增大Tau和EDPVR(P均<0.05)。同时,急性抑制CaMKⅡ的活性也不能增加ISO作用后心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值。慢性抑制CaMKⅡ的活性能显著增加心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值(P均<0.05),但对dp/dtmin、Tau和EDPVR无显著影响。同时,慢性抑制CaMKⅡ的活性可显著增加ISO作用后心衰小鼠的LVEF、LVFS、LS、LSR、ESPVR、dp/dtmax-EDV和PRSW值(P均<0.05)。结论急性抑制CaMKⅡ的活性非但� 展开更多
关键词 钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ Β1肾上腺素受体 心力衰竭 心功能 心力储备 超声心动图
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CaMKⅡγ在破骨细胞分化中的表达规律 被引量:1
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作者 李瑛 戚孟春 +4 位作者 董伟 王会 冯晓洁 温黎明 孙红 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期240-245,共6页
目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(T... 目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评价破骨细胞生成情况,并用RT-PCR、Western印迹、免疫荧光细胞化学法检测CaMKⅡγm RNA和蛋白表达。结果:多核破骨细胞在诱导后第3天开始出现,第5天达到最多。分化第0,1,3,5天,CaMKⅡγm RNA相对表达水平分别为(1.067±0.179),(1.840±0.070),(9.493±0.453)和(30.767±0.573);蛋白相对表达水平分别为(0.454±0.065),(0.613±0.021),(0.858±0.019)和(0.980±0.023);除第1天的蛋白相对水平外,其他时间点CaMKⅡγm RNA和蛋白表达差异均有统计学意义,且呈时间依赖性增强(P<0.01)。免疫荧光细胞化学法检测也显示CaMKⅡγ蛋白表达在破骨细胞分化过程中逐步增加。结论:CaMKⅡγ表达随破骨细胞分化呈时间依赖性增加,提示其在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ 破骨细胞 受体活化核因子-κB配体 抗酒石酸酸性磷酸酶染色
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CaMKⅡ_γ通过上调NFκB信号通路促进结直肠癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 徐菲 齐海燕 +1 位作者 于晓方 徐荣臻 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期649-653,共5页
目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平。用慢病毒载体pLenti6.3-M... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平。用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ。测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力。Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、P-IκB和IκB表达水平。免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况。检测裸鼠移植瘤的瘤体积。结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高。慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P<0.05)。CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB信号通路,促进NF-κ3 p65进核。CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P<0.05)。结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ_γ 结直肠癌 核转当因子κB 细胞增殖
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CaMKⅡδ慢病毒过表达载体构建及其对破骨细胞分化的影响 被引量:1
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作者 张艳波 戚孟春 +4 位作者 董伟 张广峰 冯晓洁 温黎明 孙红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第13期2123-2127,共5页
目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKⅡδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKⅡδ表达情况;并在分化诱导5 d后... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKⅡδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKⅡδ表达情况;并在分化诱导5 d后检测破骨细胞生成及骨吸收情况。结果 CaMKⅡδ转录本2和3在破骨细胞分化中高表达;用转录本2构建了过表达载体,建立了稳定转染株。过表达组CaMKⅡδ mRNA水平较对照组、空载体组分别上升107.8%和85.7%(P<0.05),蛋白水平分别上升37.2%和37.1%(P<0.05),证实重组CaMKⅡδ在细胞中得到有效表达。CaMKⅡδ过表达组破骨细胞数目、牙本质吸收陷窝数和面积与对照组和空载体组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CaMKⅡδ过表达对破骨细胞分化和骨吸收无明显影响。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶iiδ 基因重组 破骨细胞 慢病毒 核因子ΚB受体活化因子配体
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Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II regulates colon cancer proliferation and migration via ERK1/2 and p38 pathways 被引量:8
5
作者 Wei Chen Ping An +4 位作者 Xiao-Jing Quan Jun Zhang Zhong-Yin Zhou Li-Ping Zou He-Sheng Luo 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第33期6111-6118,共8页
AIM To investigate the role of calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ(Ca MKⅡ) in colon cancer growth,migration and invasion.METHODS Ca MKⅡ expression in colon cancer and paracancerous tissues was evaluated via immun... AIM To investigate the role of calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ(Ca MKⅡ) in colon cancer growth,migration and invasion.METHODS Ca MKⅡ expression in colon cancer and paracancerous tissues was evaluated via immunochemistry. Transcriptional and posttranscriptional levels of Ca MKⅡin tissue samples and MMP2,MMP9 and TIMP-1 expression in the human colon cancer cell line HCT116 were assessed by q RTPCR and western blot. Cell proliferation was detected with the MTT assay. Cancer cell migration and invasion were investigated with the Transwell culture system and woundhealing assay.RESULTS We first demonstrated that CaMK Ⅱ was ove rexpressed in human colon cancers and was associated with cancer differentiation. In the human colon cancer cell line HCT116,the Ca MKII-specific inhibitor KN93,but not its inactive analogue KN92,decreased cancer cell proliferation. Furthermore,KN93 also significantly prohibited HCT116 cell migration and invasion. The specific inhibition of ERK1/2 or p38 decreased the proliferation and migration of colon cancer cells.CONCLUSION Our findings highlight Ca MKⅡ as a potential critical mediator in human colon tumor development and metastasis. 展开更多
关键词 ca2+/calmodulin-dependent protein kinase ii Colon cancer PROLIFERATION MIGRATION
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鞘内注射KN93或艾芬地尔对瑞芬太尼致痛觉过敏的镇痛作用 被引量:2
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作者 张兢 顾小萍 +1 位作者 程崇学 马正良 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2014年第2期134-137,144,共5页
目的观察分别鞘内注射钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulindependentproteinkinaselI.CaMKlI)高效特异性抑制剂KN93或艾芬地尔(Ifenprodil)对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的镇痛作用。方法sD雄性大鼠30只,按随机数字... 目的观察分别鞘内注射钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulindependentproteinkinaselI.CaMKlI)高效特异性抑制剂KN93或艾芬地尔(Ifenprodil)对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的镇痛作用。方法sD雄性大鼠30只,按随机数字表法分为5组(每组6只):空白对照组(C组)、切口痛(I组)、瑞芬太尼组(R组)、KN93组(K组)及Ifenprodil组(F组)。除C组外均做切口痛模型,R组、K组及F组制作模型的同时经皮下泵注瑞芬太尼(O.04mg/kg)30min注完。R组、K组及F组术前30min分别鞘内给予10%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)20μl、KN9320μl(50μg/10μl)和20仙μl fenprodil(10μg/20μl)。各组分别在术前24h及术后2、6、24、48h检测术侧热缩足潜伏期(pawwithdrawalthermallatencv,PWTL)及机械缩足阈值(pawwithdrawalmechanicalthreshold,PMWT)。结果与c组比较,I组术后手术侧PWTL及PMWT明显降低;与I组比较,R组术后手术侧PWTL及PMWT明显降低;与R组比较,K组术后各时间点PWTL(15.32±0.73)、(15.79±0.32)、(14.86±0.98)、(14.76±0.82)s及PMWT(31.8±1.4)、(29.3±1.2)、(30.8±1.0)、(30.5±1.2)g均明显升高(P〈0.05),F组术后各时间点PWTL(14.24±0.79)、(15.33±0.29)、(15.29±0.74)、(15.21±0.45)S及PMWT(29.3±1.8)、(30.2±2.1)、(29.5±1.5)、(30.2±1.0)g均明显升高(P〈0.05)。结论鞘内注射KN93或Ifenprodil均能够有效缓解瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。 展开更多
关键词 钙钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚型 瑞芬太尼 痛觉过敏 切口痛
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