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电刺激对过氧化氢诱导衰老肌管细胞能量代谢的影响
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作者 苏艳红 毕亮 +3 位作者 龚文翰 宋涛 李婷婷 张世超 《体育科研》 2024年第2期67-72,96,共7页
目的:运用电刺激肌管细胞收缩模拟骨骼肌收缩,并观察其对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的C2C12细胞衰老模型能量代谢相关指标表达的影响,以此研究体外肌管收缩对衰老骨骼肌细胞能量代谢影响的分子机制。方法:使用不同浓度的H_(2)O_(2)诱导... 目的:运用电刺激肌管细胞收缩模拟骨骼肌收缩,并观察其对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的C2C12细胞衰老模型能量代谢相关指标表达的影响,以此研究体外肌管收缩对衰老骨骼肌细胞能量代谢影响的分子机制。方法:使用不同浓度的H_(2)O_(2)诱导肌管细胞建立衰老模型,并用β-半乳糖苷酶染色检测衰老水平;电刺激干预培育成功的衰老肌细胞,并分为对照组(C组)、H_(2)O_(2)诱导衰老组(H组)、对照+电刺激组(CE组)、H_(2)O_(2)诱导衰老+电刺激组(HE组)。各组细胞通过Western blot法对PGC-1α蛋白表达进行检测,ATP水平测试盒测量ATP水平。结果:经过浓度为100μmol/L H_(2)O_(2)诱导肌管细胞24 h后成功构建骨骼肌细胞衰老模型。与C组比较,H组的ATP水平表达呈非常显著性的下降(P<0.01);CE组的ATP水平较C组呈非常显著性升高(P<0.01);HE组的ATP水平虽低于C组,但高于H组,且呈非常显著性差异(P<0.01);与C组相比,H组PGC-1α蛋白表达下降,呈非常显著性差异(P<0.01);HE组PGC-1α蛋白表达虽低于C组,但较H组呈非常显著性升高(P<0.01)。结论:H_(2)O_(2)是诱导骨骼肌肌管细胞衰老的一种有效方式,衰老肌管细胞的ATP和PGC-1α蛋白表达水平显著下降,进行电刺激干预后可以有效提高衰老肌管细胞ATP水平和PGC-1α蛋白表达。 展开更多
关键词 电刺激 衰老肌管细胞 过氧化氢 能量代谢
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电刺激对C2C12肌管自由基代谢及Nrf2/ARE信号通路的影响 被引量:2
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作者 董云峰 赵秀峰 徐晓阳 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1066-1071,共6页
目的:探讨电刺激模拟运动对小鼠骨骼肌肌母细胞(C2C12)肌管自由基及Nrf2信号通路的影响。方法:C2C12细胞分化6天后分为对照组和电刺激组,对照组不进行电刺激,电刺激组采用45V、20ms、5 Hz的刺激强度对C2C12肌管进行电刺激,根据刺激时间... 目的:探讨电刺激模拟运动对小鼠骨骼肌肌母细胞(C2C12)肌管自由基及Nrf2信号通路的影响。方法:C2C12细胞分化6天后分为对照组和电刺激组,对照组不进行电刺激,电刺激组采用45V、20ms、5 Hz的刺激强度对C2C12肌管进行电刺激,根据刺激时间为分为30 min、45 min、60 min、75 min、90 min、120 min和150 min组。测定不同刺激时间C2C12肌管内活性氧自由基(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及核因子E2相关因子2(Nrf2)核蛋白含量的变化。结果:(1)与对照组相比,C2C12肌管内ROS生成的量除30 min和150 min组外,其余各刺激时间组都明显增加(P<0.05),其中60 min和120min组极显著增加(P<0.01)。(2)与对照组相比,C2C12肌管中GSH-Px活性在60 min、90 min、120 min组有显著性增加(P<0.05),75 min和150 min组时有极显著增加(P<0.01)。(3)与对照组相比,C2C12肌管Nrf2核蛋白表达在60 min、90 min、120 min组有显著性增加(P<0.05),75 min和150 min组时有极显著增加(P<0.01)。结论:在45V、20 ms、5 Hz的强度下,电刺激C2C12肌管会使肌管发生氧化应激,结合ROS产生量随电刺激时间的变化规律,发现ROS只有达到一定的量才能激活Nrf2信号系统,同时启动相关基因,使GSH-Px发挥抗氧化作用,而且随着刺激时间的增加,肌管内抗氧化能力略有降低,随后则继续保持着较高的活性。 展开更多
关键词 电刺激 c2c12肌管 活性氧 Nrf2信号通路
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谷氨酰胺补充和电刺激对C2C12肌管蛋白合成通路的影响
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作者 董合玲 徐晓阳 赵军 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2017年第1期104-110,共7页
目的:C2C12肌管为细胞模型,探讨电刺激模拟运动与谷氨酰胺补充对C2C12肌管蛋白质含量及mTOR通路的影响,进一步探明谷氨酰胺补充与蛋白质代谢之间的关系。方法:谷氨酰胺孵育分化5天的肌管48h后,给予一次电刺激(15 V,30ms,3Hz,90min)。分... 目的:C2C12肌管为细胞模型,探讨电刺激模拟运动与谷氨酰胺补充对C2C12肌管蛋白质含量及mTOR通路的影响,进一步探明谷氨酰胺补充与蛋白质代谢之间的关系。方法:谷氨酰胺孵育分化5天的肌管48h后,给予一次电刺激(15 V,30ms,3Hz,90min)。分别在电刺激后0h、6h、18 h和24 h收样。实验共10组,单独对照组(Con);单独谷氨酰胺组(Gln);单独电刺激后不同时间点取样组(Es0、Es6、Es18、Es24);谷氨酰胺孵育加电刺激后不同时间点取样组(Gln+Es0、Gln+Es6、Gln+Es18、Gln+Es24)。BCA法测定各组肌管蛋白含量;RT-PCR法测定各组mTOR mRNA表达量及其下游因子S6K1 mRNA表达量。结果:1)与Con相比,Gln组的蛋白含量、mTOR及S6K1 mRNA均显著升高(P<0.05)。2)单独电刺激(Es)后,随收样时间延长,肌管蛋白含量呈现先下降后上升趋势。Es6极显著下降(P<0.01),Es18极显著上升(P<0.01)。而mTOR和S6K1 mRNA的表达没有下降,呈现先上升后恢复正常的趋势。3)谷氨酰胺和电刺激(Gln+Es)联合作用后,无论是蛋白含量,还是mTOR及S6K1 mRNA表达,具有与单独电刺激相似的作用趋势,且Gln+Es各组数值均高于Es各组(P<0.05)。此外,Es组mTOR表达在电刺激后18h达高峰,而Gln+Es组在6h达高峰。结论:1)单独电刺激、单独补充谷氨酰胺、两者的联合作用,均可通过mTOR通路中mTOR mRNA和S6K1 mRNA表达上升,增加蛋白合成,促进蛋白含量上升及肌管恢复。2)谷氨酰胺使电刺激后C2C12肌管mTOR mRNA表达提前,S6K1mRNA表达稳定处于高水平。 展开更多
关键词 谷氨酰胺补充 MTOR 电刺激 c2c12肌管
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