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CYP39A1基因在肝癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 龚由之 曾智 江应安 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2016年第8期865-867,共3页
目的检测人肝癌组织中CYP39A1基因的表达,探讨其与人肝癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测32例肝癌组织及其相应的癌旁正常组织中CYP39A1基因的表达。结果 32例肝癌组织中CYP39A1基因阳性及强阳性表达率(25.00%)显著低于... 目的检测人肝癌组织中CYP39A1基因的表达,探讨其与人肝癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测32例肝癌组织及其相应的癌旁正常组织中CYP39A1基因的表达。结果 32例肝癌组织中CYP39A1基因阳性及强阳性表达率(25.00%)显著低于其相应的癌旁正常组织(93.75%),差异具有统计学意义(P<0.01)。32例肝癌组织中,CYP39A1基因表达程度与患者的性别、淋巴结转移、远处转移、T分期(T1期+T2期,T3期+T4期)无关(P>0.05),与患者年龄及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。结论 CYP39A1基因在肝癌的发生、发展中起着重要作用,可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 肝癌 癌旁正常组织 cyp39A1基因 免疫组化
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人CYP39A1基因过表达慢病毒载体构建及其在HepG2中表达
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作者 李丹 余涛 +4 位作者 徐庆雪 封时 张旭 张勇刚 曾智 《生物技术》 CAS 2021年第6期534-539,共6页
[目的]构建人CYP39A1基因过表达慢病毒载体,并建立CYP39A1基因过表达的HepG2细胞株,为研究CYP39A1在肝细胞肝癌中的作用机制奠定基础。[方法]构建具有嘌呤霉素抗性的CYP39A1慢病毒载体,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,包装成重组慢病毒颗粒... [目的]构建人CYP39A1基因过表达慢病毒载体,并建立CYP39A1基因过表达的HepG2细胞株,为研究CYP39A1在肝细胞肝癌中的作用机制奠定基础。[方法]构建具有嘌呤霉素抗性的CYP39A1慢病毒载体,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,包装成重组慢病毒颗粒;用嘌呤霉素筛选获得CYP39A1过表达的HepG2稳转细胞,采用qPCR和Western Blot检测CYP39A1的mRNA和蛋白相对表达量。[结果]成功扩增CYP39A1基因片段,大小为1451 bp。确定嘌呤霉素在HepG2中的最佳筛选浓度为2.0μg/mL,目的基因CYP39A1被慢病毒成功导入HepG2细胞中,荧光显微镜下能直接观察到EGFP。成功构建CYP39A1过表达及其阴性对照病毒,CYP39A1过表达病毒滴度为1.0×10^(9) TU/mL,阴性对照病毒的滴度为3.0×10^(8) TU/mL。转染CYP39A1过表达组和阴性对照组的qPCR实验结果显示:在HepG2细胞中,过表达组的CYP39A1的mRNA表达量为阴性对照组的516.55±85.24倍(P<0.001)。Western Blot也显示有Flag-CYP39A1的蛋白过表达。[结论]成功构建CYP39A1过表达的HepG2稳转细胞株,且CYP39A1的过表达组mRNA和蛋白均有上调。可为进一步探讨CYP39A1基因在肝细胞肝癌发生发展中的作用提供工具。 展开更多
关键词 cyp39A1基因 慢病毒质粒 HEPG2细胞 肝细胞肝癌
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