-
题名霍乱弧菌实时荧光PCR方法的建立
被引量：5
- 1
-
-
作者
沈月华
徐德顺
吴晓芳
-
机构
浙江省湖州市疾病预防控制中心
-
出处
《中国卫生检验杂志》
CAS
2009年第1期28-29,55,共3页
-
文摘
目的:利用荧光定量PCR技术,建立霍乱弧菌快速敏感特异的检测方法。方法:以霍乱弧菌CT基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以霍乱弧菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg2+浓度,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性。结果:本方法建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.6μmol/L、0.6μmol/L,Mg2+浓度为3.5 mmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与副溶性血性弧菌等7种相关细菌均无交叉反应。在纯菌条件下,检测灵敏度21 cfu/ml。稳定性分析表明,同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5%。检测水源和海产品结果表明该方法较传统方法敏感、快速、简便。结论:建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,适用于水源、海产品和疫情暴发的霍乱弧菌快速检测。
-
关键词
霍乱弧菌
TAQMAN探针
荧光定量PCR
CT基因
-
Keywords
Vibrio cholerae
TaqMan-based probe
Real-time PCR
CTgene
-
分类号
R378.3
[医药卫生—病原生物学]
-
