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O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXФ的诱导及转染性研究 被引量:5
1
作者 梁未丽 阚飙 +2 位作者 祁国明 刘延清 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期53-56,共4页
目的 探讨新出现的O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXΦ的来源及其是否可产生感染性的噬菌体颗粒 ,从而造成毒素基因的水平转移。方法 用DNA破坏剂丝裂霉素C诱导噬菌体CTXΦ基因组被四环素抗性基因标记的O139菌株BJ30 ,继而体外转染古... 目的 探讨新出现的O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXΦ的来源及其是否可产生感染性的噬菌体颗粒 ,从而造成毒素基因的水平转移。方法 用DNA破坏剂丝裂霉素C诱导噬菌体CTXΦ基因组被四环素抗性基因标记的O139菌株BJ30 ,继而体外转染古典型标准菌株 5 6 9B和O395 ,对获得的四环素抗性的转导菌株进行转染噬菌体基因组的鉴定。结果 序列同源性分析表明 ,BJ30菌株中的rstR基因与O1群ElTor型菌株的rstR基因完全一致 ;丝裂霉素C诱导获得了感染性噬菌体颗粒 (CTX TcΦ) ,并成功感染O1群霍乱弧菌 5 6 9B和O395 ,转染率分别为 1.0 4× 10 - 4 和 3.2 7× 10 - 6 。结论 O139群霍乱弧菌能产生感染性CTXΦ颗粒 ,ElTor型菌株不是产生CTXΦ的唯一来源。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 溶原性噬菌体 ctxφ 转染性
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霍乱弧菌含编码霍乱毒素基因的溶源性噬菌体转染检测 被引量:5
2
作者 毕振强 杨彬 +2 位作者 王国永 王梅 段玉芹 《预防医学文献信息》 2002年第3期257-260,共4页
[目的 ]研究霍乱毒素基因 (ctx)在霍乱弧菌O1 群埃尔托型、古典型菌株和O1 39群菌株之间的传递现象 ,了解含编码霍乱毒素基因的溶源性噬菌体 (CTXΦ)在ctx基因转移中的作用。 [方法 ]从人工构建的供体菌中诱导出带有标记的CTXΦ并转染... [目的 ]研究霍乱毒素基因 (ctx)在霍乱弧菌O1 群埃尔托型、古典型菌株和O1 39群菌株之间的传递现象 ,了解含编码霍乱毒素基因的溶源性噬菌体 (CTXΦ)在ctx基因转移中的作用。 [方法 ]从人工构建的供体菌中诱导出带有标记的CTXΦ并转染至受体菌 ,用PCR扩增和Southern杂交等方法检测受体菌、转染子及其质粒的目的基因片段。 [结果 ]从受体菌O395、569B(古典型 )和 80 0 71 (埃尔托型 )的转染子中均检出带有供体菌标记的质粒 ,PCR和Southern杂交结果表明这些质粒是CTXΦ的复制形式。 [结论 展开更多
关键词 霍乱毒素基因 溶源性噬菌体 霍乱弧菌 ctxφ PCR SOUTHERN杂交 基因转染 编码基因
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编码霍乱毒素的霍乱弧菌溶原性噬菌体CTXΦ研究概况 被引量:2
3
作者 梁未丽 阚飙 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期657-662,共6页
关键词 霍乱毒素 霍乱弧菌 溶原性噬菌体 ctxφ 基因多态性 噬菌体免疫
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El Tor型CTXΦ对O1群不同霍乱弧菌的转染性研究 被引量:1
4
作者 刘广文 闫梅英 +2 位作者 祁国明 高守一 阚飙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期757-762,共6页
研究丝状噬菌体CTXΦ对O1群不同霍乱弧菌的水平转移效率及菌株的噬菌体免疫能力.利用带有氯霉素抗性基因遗传标记的CTXETΦ感染颗粒对O1群的4株不同霍乱弧菌进行体外和体内转染实验,根据氯霉素抗性筛选转染子,通过Southern Blot等方法... 研究丝状噬菌体CTXΦ对O1群不同霍乱弧菌的水平转移效率及菌株的噬菌体免疫能力.利用带有氯霉素抗性基因遗传标记的CTXETΦ感染颗粒对O1群的4株不同霍乱弧菌进行体外和体内转染实验,根据氯霉素抗性筛选转染子,通过Southern Blot等方法进行验证并判断CTXΦ基因组的存在形式,计算比较不同菌株的转染率,分析转染及噬菌体免疫机制.带有遗传标记的CTXETΦ对古典型霍乱弧菌1119的体内转染率高于体外;体内转染实验中,古典菌株1119的转染率远高于其它3株El Tor型霍乱弧菌;在El Tor型霍乱弧菌中,不含rstR基因的IEM101的转染率高于另外两株带有rstR基因的霍乱弧菌2~3个数量级.古典型霍乱弧菌比El Tor型菌株对CTXETΦ噬菌体颗粒更易感,TCP菌毛的表达和rstR基因介导的噬菌体免疫影响CTXΦ在霍乱弧菌中的水平转移. 展开更多
关键词 霍乱弧菌 ctxφ 转染
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CTXΦ在霍乱弧菌两个染色体上的整合分析 被引量:1
5
作者 田德桥 闫梅英 +1 位作者 高守一 阚飙 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期729-733,共5页
目的研究CTXΦ是否可以在没有TLC(toxin-linked cryptic)因子的非产毒霍乱弧菌染色体上整合,以及是否可以在霍乱弧菌小染色体上整合。方法筛选染色体上没有整合CTXΦ及TLC基因组的霍乱菌株(CTX-TLC-),检测这类菌株染色体上是否有类似的... 目的研究CTXΦ是否可以在没有TLC(toxin-linked cryptic)因子的非产毒霍乱弧菌染色体上整合,以及是否可以在霍乱弧菌小染色体上整合。方法筛选染色体上没有整合CTXΦ及TLC基因组的霍乱菌株(CTX-TLC-),检测这类菌株染色体上是否有类似的CTXΦ染色体整合位点attB。以含有CTXΦ的RS区及整合位点的自杀质粒pKRSn与pKRSe结合转移到CTX-TLC-及CTX- TLC+菌株,观察染色体整合情况,并分析整合位置的序列。结果CTX-TLC-菌株存在与CTXΦ染色体整合位点相似的序列。在CTX+TLC-菌株当中,CTXΦ基因组存在于小染色体上。自杀质粒pKRSn与pKRSe可以在TLC+及TLC-菌株的大染色体发生整合,也可以在TLC-菌株的小染色体发生整合。结论CTXΦ可以在霍乱弧菌的两条染色体上通过高度相似或一致的attB位点发生整合,另外也提示TLC在CTXΦ的大染色体整合中可能发挥作用。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 ctxφ 整合
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Survival and proliferation of the lysogenic bacteriophage CTXΦ in Vibrio cholerae
6
作者 Fenxia Fan Biao Kan 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期19-25,共7页
The lysogenic phage CTXΦ of Vibrio cholerae can transfer the cholera toxin gene both horizontally(inter-strain) and vertically(cell proliferation). Due to its diversity in form and species, the complexity of regulato... The lysogenic phage CTXΦ of Vibrio cholerae can transfer the cholera toxin gene both horizontally(inter-strain) and vertically(cell proliferation). Due to its diversity in form and species, the complexity of regulatory mechanisms, and the important role of the infection mechanism in the production of new virulent strains of V.cholerae, the study of the lysogenic phage CTXΦ has attracted much attention. Based on the progress of current research, the genomic features and their arrangement, the host-dependent regulatory mechanisms of CTXΦ phage survival, proliferation and propagation were reviewed to further understand the phage's role in the evolutionary and epidemiological mechanisms of V. cholerae. 展开更多
关键词 VIBRIO CHOLERAE lysogenic BACTERIOPHAGE ctxφ regulation evolution
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霍乱弧菌中存在不含霍乱毒素基因的噬菌体CTXΦ基因组 被引量:26
7
作者 阚飙 祁国明 +2 位作者 刘延清 刘彩莲 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期175-179,共5页
目的近年研究发现产毒霍乱弧菌的毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码,这种丝状噬菌体可携带ctxAB传递给无毒素基因的霍乱菌株。研究认为ctxAB基因与CTXΦ基因组中的其它基因是严格共存的。然而在本实验室研... 目的近年研究发现产毒霍乱弧菌的毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码,这种丝状噬菌体可携带ctxAB传递给无毒素基因的霍乱菌株。研究认为ctxAB基因与CTXΦ基因组中的其它基因是严格共存的。然而在本实验室研究中,于不含ctxAB基因的ElTor型霍乱弧菌(EVC)中发现部分菌株含有RS基因同源序列,为此对这些菌株作CTXΦ基因组的进一步研究。方法以CTXΦ基因组中的ctxA、ctxB、zot、ace、cep和RS1结构基因制备探针,对ctxAB-菌株染色体作Southernblot检测,并用PCR方法检测CTXΦ的感染受体毒素共调菌毛(Tcp)的tcpA基因。结果发现有4株分离自河水的霍乱毒素基因阴性EVC菌株仍含有溶原噬菌体CTXΦ的基因组,为ctxA-ctxB-zot+ace+cep+RS+菌株,另有一株分离自病人的EVC菌株仅表现为RS+。这些菌株均含tcpA基因。结论ctxAB基因并不一定与CTXΦ其它基因共存于一个菌株中。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 霍乱毒素 ctxφ基因组
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霍乱弧菌溶原性噬菌体CTXΦ的氯霉素抗性基因标记及诱导 被引量:14
8
作者 刘广文 闫梅英 +3 位作者 祁国明 刘延清 高守一 阚飙 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期253-257,共5页
目的 对携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌体CTXΦ进行遗传标记 ,以深入研究CTXΦ对霍乱弧菌的转染机制。方法 将CTXΦ基因组中ctxAB的上下游同源序列连接到cat基因的两侧 ,然后通过自杀质粒介导的DNA同源重组技术将霍乱菌株N16 96 1染色... 目的 对携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌体CTXΦ进行遗传标记 ,以深入研究CTXΦ对霍乱弧菌的转染机制。方法 将CTXΦ基因组中ctxAB的上下游同源序列连接到cat基因的两侧 ,然后通过自杀质粒介导的DNA同源重组技术将霍乱菌株N16 96 1染色体上CTXΦ基因组中的ctxAB基因缺失掉 ,替换以氯霉素抗性基因 ,对CTXΦ基因组进行遗传标记 ,然后用丝裂霉素C诱导这种经抗性基因标记的噬菌体 ,再利用它对古典型霍乱弧菌的转染检测活性。结果 获得了ctxAB缺失、带有cat遗传标记的重组菌株N Φc;诱导出的CTXΦc噬菌体颗粒成功感染了霍乱菌株 1119。结论 N Φc中的CTXΦ带有了氯霉素抗性标记 。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 溶原性噬菌体 氯霉素抗性基因 ctxφ基因 DNA同源重组技术
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霍乱弧菌不携带毒素基因的溶原性噬菌体nct-CTXΦ基因组RS区具有复制与整合功能 被引量:3
9
作者 阚飙 刘延清 +2 位作者 祁国明 章丽娟 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期435-438,共4页
目的 研究霍乱弧菌中不携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌CTXΦ基因组 (nct CTXclassΦ)的RS区的复制与整合功能。方法 将这种噬菌体基因组的RS区克隆到不能在霍乱弧菌中复制的自杀质粒载体中 ,经接合转入含CTXΦ的整合位点attRS、但不含... 目的 研究霍乱弧菌中不携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌CTXΦ基因组 (nct CTXclassΦ)的RS区的复制与整合功能。方法 将这种噬菌体基因组的RS区克隆到不能在霍乱弧菌中复制的自杀质粒载体中 ,经接合转入含CTXΦ的整合位点attRS、但不含CTXΦ基因组的O1群ElTor型和O139群菌株中 ,分析含RS的重组自杀质粒在这些被接合菌株中的存在形式。结果 克隆了RS区的重组自杀质粒高频接合入受体菌中 ,在这些被接合菌株中既发生了染色体整合 ,同时又以质粒的形式存在于菌细胞内。结论 霍乱弧菌不携带霍乱毒素基因的CTXΦ基因组的RS区仍具有整合与质粒复制功能 ,可介导该基因组的复制与染色体整合。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 ctxφ基因 溶原性噬菌体 染色体整合 质粒复制 霍乱 发病机制
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临床来源nct-CTXΦ样霍乱弧菌基因的多样性分析 被引量:3
10
作者 濮小英 潘劲草 +2 位作者 孟冬梅 叶榕 黄志成 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期186-191,共6页
目的 了解临床来源霍乱弧菌nct-CTXΦ(不含霍乱毒素基因的CTXΦ)样基因特征。方法 对6株于2000-2004年自杭州散发腹泻患者分离的ctxA^-、tcpA^+ 01群霍乱弧菌核糖体基因分型,PCR检测zot、noe、cep基因及串联CTXΦ基因组拷贝问的相... 目的 了解临床来源霍乱弧菌nct-CTXΦ(不含霍乱毒素基因的CTXΦ)样基因特征。方法 对6株于2000-2004年自杭州散发腹泻患者分离的ctxA^-、tcpA^+ 01群霍乱弧菌核糖体基因分型,PCR检测zot、noe、cep基因及串联CTXΦ基因组拷贝问的相邻片段;以zot、ace、cep基因探针South-ernblot分别检测nct-CTXΦ样基因的PstⅠ、HindⅢ、MluⅠ、BglⅡ酶切及HindⅢ、MluⅠ双酶切的限制性酶切长度多态性,结合拷贝间相邻片段HindⅢ酶切位点分析,构建nct-CTXΦ样基因组物理图谱。结果 6株01群霍乱弧菌中,核糖体基因分型为2种型别;1株无CTXΦ或nct-CTXΦ样基因组,5株存在nct-CTXΦ样基因组,且此5株菌株中存在3种类型nct-CTXΦ样基因组组成,分别为单拷贝长约6kb串联双拷贝、单拷贝长约5.8kb的串联双拷贝和串联4拷贝(2个单拷贝长约6kb,另2个单拷贝长约5.8kb)。结论 nct-CTXΦ霍乱弧菌可能具有引起腹泻的能力;临床和环境来源的霍乱弧菌中存在着一类多样性的nct-CTXΦ样噬菌体家族。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 霍乱毒素 ctxφ基因组
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O139群霍乱弧菌染色体中整合两种CTXΦ前噬菌体基因组的多样性 被引量:3
11
作者 陈爱平 阚飙 +2 位作者 陈拱立 陈亢川 刘延清 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期239-242,共4页
目的 研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法 Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因r... 目的 研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法 Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因rstR基因片段 ,克隆并进行序列测定、分析。结果 此 3株菌染色体zot杂交条带多于ctxAB 2~ 5条 ,提示 1个菌株染色体上有编码ctxAB的CTXΦ以及不编码ctxAB的CTXΦ两种基因组。以保守区设计的引物扩增此 3株菌的rstR区 ,均得到 2条大小不同的条带 ,分别克隆后进行测序 ,经GenBank同源性检索 ,发现在此 3个菌株染色体中分别有来自ElTor型的CTXETΦ与不编码ctxAB的nct CTXO13 9Φ、来自加尔各答型的CTXcalcΦ与nct CTXO13 9Φ、以及CTXETΦ与新报道的一种具有独特rstR序列的CTXΦ类基因组两两共存于 1个菌株染色体上。这 3个菌株还具有不同的 16S核糖体基因杂交图谱。结论 不同rstR序列的CTXΦ基因组可以共存于 1个菌株染色体中 ,提示CTXΦ家族进化过程中的复杂分化 ,CTXΦ家族在不同霍乱菌株间的出现及传递。 展开更多
关键词 噬菌体 ctxφ基因组 基因多态性 O139群霍乱弧菌 染色体
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El Tor型霍乱弧菌疫苗候选株IEM108抗CTXΦ转染的生物安全性试验 被引量:2
12
作者 梁未丽 阚飙 +2 位作者 祁国明 刘延清 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期534-535,共2页
关键词 霍乱弧菌 疫苗 IEM108 ctxφ基因 生物安全性
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不携带霍乱毒素基因的CTXΦ类前噬菌体基因组克隆与分析 被引量:2
13
作者 阚飙 刘延清 +2 位作者 祁国明 章丽娟 高守一 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期573-581,共9页
霍乱弧菌的霍乱毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码 ,由此携带毒素基因在产毒株与非产毒株间水平转移。从无ctxAB的ElTor型菌株中 ,发现不同时间、地点来源的部分菌株仍带有CTXΦ基因组的其它基因 ,在研究菌株染色体上呈双拷贝串... 霍乱弧菌的霍乱毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码 ,由此携带毒素基因在产毒株与非产毒株间水平转移。从无ctxAB的ElTor型菌株中 ,发现不同时间、地点来源的部分菌株仍带有CTXΦ基因组的其它基因 ,在研究菌株染色体上呈双拷贝串联排列。克隆后测序发现基因组全长 5 70 8bp ,其抑制基因rstR却与古典型菌株来源CTXΦ的相同 ,因此从E1Tor菌株中发现整合有古典型来源的这类噬菌体。其它各基因与CTXΦ序列基本一致 ,但nct CTXΦ的zot基因末端及下游间隔区与CTXΦ的相差很大 ,进一步的序列测定与比较表明nct CTXΦ中无ctxAB应是其固有结构 ,而不是ctxAB丢失所形成的。将这种独特的前噬菌体命名为nct CTXclassΦ。研究菌株染色体上nct CTXΦ基因组上下游也各存在TLC因子和RTX毒力基因簇的同源序列 ,揭示它们与nct CTXΦ基因组有与CTXΦ相同的联系。从序列分析上认为nct CTXΦ与CTXΦ在遗传分化上有不同 ,可能是CTXΦ的前体形式 ,这对CTXΦ的来源。 展开更多
关键词 霍乱毒素基因 ctxφ类前噬菌体 基因组克隆 溶原性噬菌体
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霍乱弧菌新类型溶源性噬菌体nct-CTX^(O139)ф基因组RS区及rstR-ig2基因的功能研究 被引量:1
14
作者 芮勇宇 阚飙 +3 位作者 刘忠华 高守一 刘延清 祁国明 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期159-161,共3页
霍乱弧菌CTXφ基因组RS区的间隔区ig2包括rstR启动子区和rstA操纵区,rstR基因编码产物RstR可以和rstA操纵区结合,抑制rstA基因表达,RS区负责噬菌体的复制、整合和解离等功能[1].我们克隆并测序了nct-CTXO139φ基因组,RS区的rstR和ig2为... 霍乱弧菌CTXφ基因组RS区的间隔区ig2包括rstR启动子区和rstA操纵区,rstR基因编码产物RstR可以和rstA操纵区结合,抑制rstA基因表达,RS区负责噬菌体的复制、整合和解离等功能[1].我们克隆并测序了nct-CTXO139φ基因组,RS区的rstR和ig2为首次发现的新类型,故进行上述功能研究. 展开更多
关键词 ctxφ基因组 溶源性噬菌体 功能研究 霍乱弧菌 新类型 S区 G2基因 基因编码产物 启动子区 基因表达
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pre-CTX_(φ)噬菌体在霍乱弧菌基因组中的遗传多样性研究 被引量:2
15
作者 郝彤宇 马嘉嘉 +3 位作者 武雅蓉 钱修伟 张湘莉兰 崔玉军 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1403-1407,共5页
溶原性噬菌体CTX_(φ)携带的ctxAB基因是霍乱弧菌产毒株最主要的毒力基因,而pre-CTX_(φ)作为CTX_(φ)的前体,缺失ctxAB基因编码序列。基因组中整合了pre-CTX_(φ)噬菌体的霍乱弧菌非产毒株,可通过其携带的zot和ace基因,引起患者轻度至... 溶原性噬菌体CTX_(φ)携带的ctxAB基因是霍乱弧菌产毒株最主要的毒力基因,而pre-CTX_(φ)作为CTX_(φ)的前体,缺失ctxAB基因编码序列。基因组中整合了pre-CTX_(φ)噬菌体的霍乱弧菌非产毒株,可通过其携带的zot和ace基因,引起患者轻度至中度的霍乱样腹泻症状,存在公共卫生风险。本研究收集了公开发表的1649株霍乱弧菌草图序列和43株完成图序列,使用比较基因组学和群体遗传学方法,对上述霍乱弧菌数据集进行综合分析,结果表明:不同谱系霍乱弧菌基因组中pre-CTX_(φ)的拷贝数存在差异;其中L3b.4菌株中pre-CTX_(φ)拷贝数呈现随分离年份增加的趋势。L2、L4、L7和L3b谱系存在pre-CTX_(φ)与CTX_(φ)共整合的现象,并发现pre-CTX_(φ)位于pre-CTX_(φ)/CTX_(φ)噬菌体家族系统发育树的祖先位置。这些发现进一步丰富了对霍乱弧菌基因组中pre-CTX_(φ)/CTX_(φ)噬菌体家族遗传多样性的认识,为阐明其整合机制和进化规律提供了必要基础,并为携带此类噬菌体霍乱弧菌的检测及防控提供借鉴。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 pre-ctx_(φ) 拷贝数变异 细菌基因组 噬菌体 毒力因子
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霍乱弧菌的一种新的不含毒素基因CTXΦ基因组的复制功能研究
16
作者 刘忠华 芮勇宇 +3 位作者 祁国明 刘延清 高守一 阚飙 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期149-149,共1页
关键词 ctxφ基因组 霍乱弧菌 功能研究 毒素基因 复制 O139群 ctxAB 霍乱毒素 霍乱流行 同源性
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