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组织蛋白酶G通过增加胶质瘤干细胞表面MHC-Ⅰ表达提高胶质瘤对T细胞治疗的敏感性 被引量：4
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作者 李锡清 赵尊兰 +3 位作者 孔存权 赵黎明 张玉薇 韩双印 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期217-223,共7页
目的探讨组织蛋白酶G(CatG)提高T细胞治疗胶质瘤效果的机制。方法(1)收集胶质瘤数据库中397例胶质瘤患者的临床资料,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Pearson相关性分析胶质瘤组织中CTSG mRNA与β2微球蛋白(β2M)mRNA表达的相关性。(2)... 目的探讨组织蛋白酶G(CatG)提高T细胞治疗胶质瘤效果的机制。方法(1)收集胶质瘤数据库中397例胶质瘤患者的临床资料,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Pearson相关性分析胶质瘤组织中CTSG mRNA与β2微球蛋白(β2M)mRNA表达的相关性。(2)从胶质母细胞瘤中分离培养胶质瘤干细胞(GSC)387和GSC3565,分别分化培养获得胶质瘤分化细胞(DGC)387和DGC3565。取GSC387细胞,分为CatG组、CatG抑制物组,分别用0.1μg/μL重组人类白细胞抗原(HLA)-A^*02:01和HLA-B^*15:01与4 ng/μL CatG、1O μmol/L CatG抑制物共培养10 min,应用托马斯亮蓝染色检测细胞HLA-A^*02:01和HLA-B^*15:01的表达,应用Western blotting检测细胞主要组织相容性复合体(MHC)-I、MHC-DR蛋白的表达。(3)取GSC387、GSC3565细胞和DGC387、DGC3565细胞,分别分为4组(CatG组、CatG抑制组、空白抗体1组,空白抗体2组),分别加人4 ng/μL CatG,10μmol/L CatG抑制物、空白抗体1、空白抗体2处理24 h,采用流式细胞仪检测细胞HLA-ABC的表达。⑷取GSC387、GSC3565细胞和DGC387、DGC3565细胞,分别分为CatG组和CatG抑制组,釆用荧光素酶实验检测CatG对T、自然杀伤细胞杀伤作用的影响。结果(1)CTSG mRNA高表达组患者的生存率高于CTSG mRNA低表达组,β2M mRNA低表达组患者的生存率高于β2M mRNA高表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示胶质瘤组织中CTSG mRNA与β2MmRNA的表达呈负相关关系(r=-9.160,P=0.000),(2)托马斯亮蓝染色检测显示:与CatG抑制物组比较,CatG组细胞HLA-A^*02:01和HLA-B^*15:01的表达增加。Western blotting检测显示:与CatG抑制物组比较,CatG组细胞MHC-I的表达增加,MHC-DR的α和β链降低。(3)流式细胞仪检测显示:CatG组GSC387、GSC3565细胞HLA-ABC的表达高于CatG抑制物组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)荧光素酶实验显示:与CatG抑制物组比较,CatG组T细胞对GSC细胞的杀伤比例增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CatG可� 展开更多
关键词 神经胶质瘤 组织蛋白酶G 免疫治疗 ctsg基因
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